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毛囊真皮鞘细胞在皮肤创伤愈合中作用的实验研究
目的:通过体外培养毛囊真皮鞘细胞移植于大鼠皮肤创面的实验研究,探讨真皮鞘细胞在皮肤创伤愈合中的作用.方法:组织块法原代培养Wistar大鼠触须毛囊真皮鞘细胞,5-溴脱氧尿苷(BrdU)标记.Wistar大鼠22只,采用背部皮肤缺损模型,分细胞移植组和生理盐水对照组.术后3 d、7 d、14 d、1个月和2个月取材,图像分析计算创面收缩率,免疫组化观察植入细胞在体内的转归,光镜和扫描电镜观察创面愈合病理过程. 结果:术后各时间点细胞移植组创面收缩率均大于对照组(P<0.01);术后7 d移植组新生肉芽组织中见不均匀分布的标记细胞,14 d标记细胞减少并出现凋亡;移植组愈合过程中肉芽组织形成、表皮再生、胶原增生和组织改建均较对照组有所提前. 结论:毛囊真皮鞘细胞在皮肤创伤修复过程中参与肉芽组织形成,具有加速创面收缩和促进愈合进程的作用.
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体外培养大鼠触须毛囊真皮鞘细胞的生物学特性及其超微结构
目的:探讨大鼠触须毛囊真皮鞘细胞体外培养生长特性和电镜下超微结构特征.方法:显微分离大鼠触须毛囊真皮鞘,组织块法原代培养获得真皮鞘细胞,免疫组化和免疫荧光染色进行细胞鉴定,MTT法测定细胞生长曲线,并通过扫描电镜和透射电镜观察其超微结构.结果:真皮鞘细胞原代培养5～7 d仅有少量细胞由组织块中长出,培养14 d方可传代.传代后细胞呈克隆样丛状生长,细胞丛相互连接呈网状,3～5 d传一代,可连续传10代以上.扫描电镜见毛囊真皮鞘内有许多散在的纺锤形细胞,胞体丰满,表面不光滑,有较长的细胞突起.透射电镜下见细胞核大,富含常染色质,核仁明显,胞浆中细胞器少,胞膜下可见由细丝样结构组成的致密斑.结论:大鼠触须毛囊真皮鞘细胞原代生长迟缓,传代后细胞增殖旺盛,其超微结构特点提示该细胞分化程度较低,属于成体中较为幼稚的间充质细胞.
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损伤皮肤修复和伤口愈合过程中的干细胞：问题与前景
背景：当前皮肤慢性伤口的治疗方法是有限的，成体干细胞具有治疗许多皮肤疾病潜在功能。
目的：综述干细胞在损伤皮肤修复和伤口愈合方面的作用。
方法：第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI：2000至2010年)和Medline数据库(2000至2010年)，检索词分别为“表皮干细胞；毛囊干细胞；干细胞；移植；表皮干细胞；真皮干细胞；”和“Epidermal stem cels；hair folicle stem cells；stem cels；Transplantation； Epidermal stem cels；Dermal stem cels”，共计489篇论文，语言分别设定为中文和英文。终纳入30篇文献。
结果与结论：表皮干细胞和其他成体干细胞作为细胞治疗应用于治愈伤口和其他皮肤疾病。表皮干细胞是皮肤发生、修复、重塑的关键性源泉，机体内表皮干细胞多处于静息状态，只有当皮肤受损或在体外培养的情况下，该细胞分裂、增殖才明显加快。表皮干细胞主要通过不对称分裂来维持表皮的稳定，具体表现为1个亚细胞群的不对称分裂，其每次分裂产生的2个子细胞，其中1个具有干细胞自身的特性，而另1个子细胞分化为短暂扩充细胞，后者经过3-5次分裂后形成有丝分裂后细胞，其不断变迁为基底层上的终末分化细胞，后以皮屑的形式从表皮脱落。此外，在创伤修复的过程中甚至在生理条件下，是否由于表皮因素的影响而发生细胞凋亡、迁移和分化，目前仍未知。因此，干细胞在损伤皮肤修复和伤口愈合方面的作用仍有很多问题尚待解决。 -
人毛乳头细胞增殖和胶原合成测定
目的:观察毛乳头细胞、真皮鞘细胞与成纤维细胞的增殖和胶原合成情况.方法:采用3H-胸腺嘧啶摄入、3H-脯氨酸摄入方法,观察体外培养的人毛乳头细胞、真皮鞘细胞、成纤维细胞的增殖活性和胶原合成情况.结果:3H-胸腺嘧啶掺入结果表明,细胞繁殖具有明显的活跃高峰,3种细胞在基础培养基中第11天达掺入高峰,而在常规培养基中有两个掺入高峰,即第5天和第11天.3H-脯氨酸摄入结果表明,细胞内摄入无明显差异,而递质中的胶原含量有明显差异,成纤维细胞显著高于毛乳头细胞和真皮鞘细胞,表明两者的功能有一定的差异.结论:常规培养基是这3种真皮细胞很好的培养基,能够明显促进它们的生长和繁殖,而毛乳头细胞和真皮鞘细胞分泌胶原的能力低于成纤维细胞,说明它们在合成胶原的功能方面有一定的差异.
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体外培养毛囊真皮鞘细胞与皮肤成纤维细胞形态结构和bFGF、EGFR表达差异
Gharzi等[1]初步证实毛囊真皮鞘细胞参与皮肤损伤修复,但相关作用机制研究报道不多.成纤维细胞是皮肤创伤愈合主要效应细胞,毛囊真皮鞘细胞与皮肤成纤维细胞一样均属于间充质细胞.本研究旨在通过两种细胞形态结构及部分愈合相关蛋白表达差异研究,初步探讨毛囊真皮细胞在创伤愈合中的作用.
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阿霉素对体外培养的猪毛囊真皮鞘细胞增殖和凋亡的影响
目的探讨阿霉素对体外培养的猪毛囊真皮鞘细胞增殖和凋亡的影响.方法用MTT法通过比色分析测定吸光度值,检测不同浓液(0、5、10、20mg/L)阿霉素作用24h和10 mg/L阿霉素作用不同时间(4、8、12、24、48h)对猪毛囊真皮鞘细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测不同剂量的阿霉素作用24h后猪毛囊真皮鞘细胞的凋亡率.结果阿霉素抑制了体外培养的猪毛囊真皮鞘细胞的增殖,其抑制效应随阿霉素浓度的增大和作用时间的延长而增强;细胞凋亡率随阿霉素浓度增大而升高,阿霉素浓度为10 mg/L时细胞凋亡率高.结论阿霉素抑制体外培养的猪毛囊真皮鞘细胞增殖,诱导细胞凋亡,其效应与阿霉素的浓度和作用时间相关.
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某些中药煎剂对阿霉素抑制的猪毛囊真皮鞘细胞增殖的影响
目的:探讨何首乌、女贞子等中药煎剂对阿霉素抑制的猪毛囊真皮鞘细胞增殖的影响.方法:用MTT法通过比色分析测定吸光度值(OD),检测不同剂量(0、5、10、20)mg/L阿霉素作用24h和10mg/L阿霉素作用不同时间(4、8、12、24、48h)对猪毛囊真皮鞘细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测不同剂量的阿霉素作用24h后猪毛囊真皮鞘细胞的凋亡率,从而找出用于以下研究中阿霉素的适浓度.用MTT法检测不同剂量中药煎剂和10mg/L阿霉素同时给药共同作用24h以及先给予不同剂量中药煎剂作用24h,然后给予10mg/L阿霉素作用24h两种条件下对猪毛囊真皮鞘细胞增殖的影响.结果:阿霉素抑制体外培养的猪毛囊真皮鞘细胞增殖,其抑制效应随阿霉素浓度的增大和作用时间的延长而增强;细胞凋亡率以阿霉素浓度为10mg/L时高.中药煎剂和阿霉素10mg/L同时给药条件下,前者不能有效升高OD值(P＞0.05);如果先给予中药煎剂处理,后给10mg/L阿霉素,则中等剂量的中药煎剂即能有效升高OD值(P＜0.001).结论:阿霉素抑制体外培养的猪毛囊真皮鞘细胞增殖,先给予适当剂量的中药煎剂处理细胞,能在一定程度上减轻阿霉素对细胞的损伤.
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正常人毛乳头细胞和真皮鞘细胞的生长特性观察
目的观察毛乳头细胞和真皮鞘细胞在体外培养条件下的生长特性.方法采用胶原酶消化法培养正常人头皮毛囊的毛乳头细胞和真皮鞘细胞,在体外进行传代培养,测定毛乳头细胞不同时相点的细胞数,并观察表皮细胞生长因子、氢化可的松+胰岛素、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子对毛乳头细胞和真皮鞘细胞增殖的影响.结果毛乳头细胞、真皮鞘成纤维细胞和真皮成纤维细胞的生长呈现3个时相,即停滞期、指数生长期和缓慢生长期.3种细胞都有4 d的停滞期,5～11 d为指数生长期,之后呈现出缓慢生长.EGF对3种细胞都有明显的促进作用(P<0.001),尤其是对真皮鞘成纤维细胞的作用更强.氢化可的松和胰岛素、GM-CSF对3种细胞的作用不明显.毛乳头细胞、真皮鞘细胞和成纤维细胞的倍增时间分别为60、59.2、76.8 h.结论 EGF对毛乳头细胞、真皮鞘细胞和成纤维细胞具有显著促生长作用,可能与它们存在着EGF的受体有关.
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人毛囊细胞来源双层皮肤替代物的构建和组织学特征
目的 探索人毛囊细胞构建的双层皮肤替代物的组织学特征.方法 用毛乳头细胞、真皮鞘细胞分别与外根鞘细胞构建复合壳多糖双层皮肤替代物,分析其体外和移植至大白鼠后的组织学特征.结果 毛囊来源细胞构建的皮肤替代物中表皮细胞排列更紧密、角化突出,真皮内可见与表皮相连的上皮细胞柱及球形膨大细胞团形成.结论 毛囊细胞是构建皮肤替代物的良好细胞来源.
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小鼠触须毛囊外根鞘细胞的体外培养及uPA和uPAR表达研究
目的建立小鼠毛囊外根鞘细胞的体外培养方法及研究尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体(uPA/uPAR)的表达.方法建立以毛囊真皮鞘细胞为滋养层,培养外根鞘细胞并对uPA/uPAR的表达进行免疫细胞化学鉴定.结果外根鞘细胞在此滋养层上生长较好,并有uPA/uPAR的表达.结论毛囊真皮鞘细胞是外根鞘细胞较好的滋养层,毛囊外根鞘细胞具有迁移增殖能力.
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毛囊真皮鞘细胞的生物学特性研究进展
真皮鞘包绕于毛囊外周,是维持和再生毛乳头的重要物质基础,是毛囊再生的必要条件.近年研究表明,毛囊真皮鞘细胞不但参与皮肤创伤修复,而且具有成体干细胞特性,有望为皮肤创伤愈合研究和组织工程学研究提供新的思路.本文就毛囊真皮鞘细胞生物学特性研究进展作一综述.
