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一种适用于短肽制备抗体的亲和纯化方法
在免疫组织化学检测过程中,抗体的纯度对于减少检测背景和假阳性起着关键作用.为了获得高纯度的抗体,亲和纯化的方法被广泛应用[1-3].为了研究某种特定基因编码产物的时空表达模式,可将基因的序列克隆到原核表达载体上,获得目的基因的原核表达蛋白,用于制备抗体进行免疫组化研究.
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非小细胞肺癌组织中Midkine蛋白表达上调
Midkine(MK)表达与癌发牛和生长有密切关系[1].然而,目前国内外关于MK与非小细胞肺癌(non-small cell lungcancer,NSCLC)发生与发展的研究报道极少,且结果也不尽一致.目前,新鲜冷冻切片已广泛应用于免疫组化研究,且丙酮或甲醛固定的冷冻切片已成为评价抗原修复在甲醛固定、石蜡包埋组织切片中免疫组化染色效果的标准.
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垂体巨细胞肉芽肿1例报道
垂体巨细胞肉芽肿(giant cell granuloma of the pituitary)是发生于垂体的罕见的自身免疫性内分泌系统良性病变.1969年Kiaer等[1]首次报道巨细胞肉芽肿性垂体炎,通过光盘检索1969-2000年的文献,迄今已有132篇报道.近我们在临床活检中遇到1例垂体巨细胞肉芽肿病例并进行了免疫组化研究,报告如下.
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滤泡型乳头状癌中细胞角蛋白的不同表达-一项免疫组化研究及其诊断用途
乳头状癌是高分化甲状腺癌为常见的一种,滤泡型乳头状癌(FVPTC)是乳头状癌中常见的一个亚型,以滤泡的生长方式作为乳头状癌的核特征,可局灶或多灶出现,并不一定为弥漫分布,因而有可能误诊为良性滤泡结节.有报道认为细胞角蛋白,尤其是CK19有助于鉴别良性或恶性的滤泡成分.作者使用CK5/6/18,CK18,CK10/13,CK20,CK17及CK19对常规处理的组织进行染色,包括26例多灶分布有乳头状癌核的FVPTC,10例乳头状癌的通常亚型,1例Warthin肿瘤样乳头状癌及2例柱状细胞癌.CK19普遍强阳性,且呈弥漫分布;FVPTC的乳头状癌核区域为强阳性,在没有乳头状癌核特征的区域有强至中等的阳性;多数病例瘤结节周围的正常甲状腺组织有局灶阳性,而远离瘤结节的区域则不着色.10例乳头状癌通常亚型,1例Warthin肿瘤样乳头状癌及2例柱状细胞癌CK19均为普遍阳性,而周围正常甲状腺均不着色.CK17及CK20也一样,但染色较弱一些.对照组为滤泡性腺瘤、滤泡癌及增生结节,CK19阴性. 作者认为在诊断多灶分布有乳头状癌核特征的FVPTC时,CK17、CK19及CK20可作为一组检测性单抗有助于诊断,并设想临近非肿瘤性组织CK19阳性,有可能预示着由FVPTC分泌或产生的一些因子导致了周围滤泡上皮细胞角蛋白的表达.
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免疫组化技术(一)
1 引言新引进的有关预测预后方面的免疫组化标记物在患者的治疗和处理上产生了巨大的影响.过去的60年中,关于免疫组化方法的理论在逐步发展,方法学上实现了在甲醛固定和石蜡处理的组织上使用抗体和适当的标记系统来鉴别特异性或高选择性的细胞表位.当前诊断实验室的趋势是尝试着尽量在甲醛固定石蜡包埋的组织上进行免疫组化研究,避免使用冷冻切片.
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C-erbB-2和细胞角蛋白在Paget病及外阴癌中的表达及其意义
C-erbB-2主要用于诊断腺癌及判断肿瘤的预后.Paget病是一种少见的恶性肿瘤,又称为湿疹样癌,分乳房Paget病(mammary Paget disease,MPD)和乳房外Paget病(extramammary Paget disease,EPD)两型.免疫组化研究表明Paget细胞表达癌胚抗原(CEA)[1]、癌基因蛋白(c-erbB-2)[1-3]和低分子细胞角蛋白(CK7)[4],而不表达高分子角蛋白(34beta E12)和黑色素瘤特异性抗体(HMB45)[1].为了探讨C-erbB-2和CK在Paget病和外阴癌发病中的相互关系,笔者对Paget病和外阴鳞癌等几种皮肤病组织进行免疫组化研究,结果报告如下.
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老年原发性肺癌患者血浆中血管内皮生长因子测定的临床意义
免疫组化研究表明,肺癌组织中存在血管内皮细胞生长因子(VEGF)的过度表达,VEGF能促进血管的生长及增加血管的通透性,在癌细胞培养液中可检测到VEGF的存在[1].我们于1999年2月至2002年6月测定老年人各期原发性肺癌患者血浆中VEGF水平及其治疗前后的变化,并与老年健康人及肺良性疾病患者进行比较,旨在探讨其在老年人原发性肺癌诊断、监测预后中的意义.
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应用T11~L1神经根修复S2、S3神经根的可行性
目的:研究T11到S3神经根的直径和神经纤维数,探讨胸-骶神经根吻合恢复膀胱功能的可行性.方法:24具成人脊柱标本,暴露T11平面以下脊髓神经根.测量T11到S3各神经前后根直径.取3具新鲜尸体脊神经根标本,切取T11到S3脊神经前后根各一段,进行免疫组化研究,统计比较骶神经根神经纤维数与胸或腰神经根的差别.结果:S3前根比任一神经根都细(P<0.05),S2前根与L2前根相近(P>0.05),比T11、T12、L1粗(P<0.05).S3前根的神经纤维数比任一神经根都少(P<0.05),S2前根与T12、L1、L2神经根的神经纤维数相近(P>0.05),比T11神经根多(P<0.05).神经根的神经纤维数与其直径呈正相关(rs=0.797).结论:功能相对次要的T11、T12、L1神经根的神经纤维从数量上为修复S2、S3神经根提供了可行性.
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慢性肝病和肝癌上皮钙粘合素系统的表达及意义
应用ABC免疫组化研究慢性肝病(CLDs)和肝癌(PHC)组织中上皮钙粘合素(E-cadherin,E-cd)、α-连环素(α-catenin,α-C)和β-连环素(β-C)表达及其意义.
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胰腺癌组织中TS、stat3表达特征及其意义
国外学者发现胸腺嘧啶合成酶(thymidylate synthase,TS)表达与一些恶性肿瘤生物科学行为、预后及耐药性有密切关系[1,2].信号传导和转录激活子类(signal transducers and activators of transcription,STATs)具有传导信号和激活转录的功能,且与恶性肿瘤的发生及其瘤细胞增殖活性有关[3,4].作者应用免疫组化研究胰腺癌和慢性胰腺炎组织中TS、stat3表达及其意义.
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小肠粘膜下膀胱尿路上皮和平滑肌细胞联合培养:组织工程学技术的 应用
小肠粘膜下层本身含有生长因子,能够在体内促 进膀 胱的再生。用标准酶消化或外植技术建立人膀胱上皮细胞和平滑肌细胞的原代培养,将培养 的细胞以1×105/cm2的密度点状种植于小肠粘膜下层,孵育3、7、14和28 d分别收获标 本。有5种不同的培养方法:将膀胱上皮细胞单独种植于小肠粘膜下层的粘膜表面、将平滑 肌细胞单独种植于粘膜表面、将平滑肌细胞种植于粘膜表面后1 h再将膀胱上皮种植进行分 层的联合培养、将平滑肌细胞种植于浆膜表面24 h后将膀胱上皮细胞种植于粘膜表面进行三 明治样培养、将膀胱上皮和平滑肌细胞混合后种植于粘膜表面联合培养。在指定时间收获标 本后用福尔马林固定,进行常规组织学分析,包括masson染色。研究特殊的细胞生长机制, 尤其注意细胞形态、细胞增殖和分层、细胞排列、假覆层尿路上皮的存在和基质的穿透。为 区分联合培养中的平滑肌细胞和 尿路上皮细胞,应用α-平滑肌肌动蛋白抗体和细胞角蛋白AE1/AE3进行了免疫组织化学分 析。体外培养结果在小肠粘膜下层尿路上皮细胞和平滑肌细胞三维空间生长。单独尿路上皮 和平滑肌细胞培养,细胞可以生长并分层,但没有或很少基质穿透。与此相比,分层培养、 混合培养和三明治样培养中平滑肌细胞的膜穿透明显增加,分层的和三明治样培养技术导致 有序的细胞排列、有规律的假覆层尿路上皮的形成和多层的平滑肌基质穿透增加。混合细胞 培养技术虽然使平滑肌细胞基质穿透作用明显,但没有使细胞有序排列。免疫组化研究证实 尿路上皮和平滑肌细胞维持表型标记物的表达。因此小肠粘膜下层在体外支持人膀胱尿路上 皮细胞的三维空间生长,采用不同的细胞种植技术进行联合培养,对将来在组织工程学中的 应用非常重要。
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脑膜瘤相关蛋白的表达及其意义
随着免疫组化技术在肿瘤中的应用,许多学者对脑膜瘤进行了大量的免疫组化研究,但目前尚未发现特异的免疫组化标记蛋白.本文对41例脑膜瘤标本应用免疫组化方法检测细胞周期蛋白A(Cyclin A)、组织蛋白酶D(Cathepsin D)和Ki-67的表达情况及分析他们与肿瘤组织学分级的关系.
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106 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在鼻息肉组织中的免疫组化研究和定量分析
关键词: 碱性成纤维细胞生长因子 鼻息肉 组织 免疫组化研究 -
005头颈部肿瘤患者常规组织学检查中假阴性淋巴结
头颈部肿瘤患者中常规临床和组织学检查中颈淋巴结阴性者,经淋巴结连续切片、免疫组化研究或分子生物学研究可发现常规检查无法发现的微灶转移.
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儿童颌骨嗜酸性肉芽肿
骨嗜酸性肉芽肿(Eosinophilic granuloma of bone,EGB)以前认为是组织细胞增生症X其中的一型.近年,通过电镜及免疫组化研究认为其组织细胞实际上是变异的郎格汉斯细胞(Langerhans cell).故现又称为郎格汉斯细胞病或郎格汉斯肉芽肿.是发生在骨组织的反应性、非肿瘤性、增殖性疾病.
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免疫金银法在小鼠牙胚细胞外基质免疫组化研究中的应用
细胞与细胞间质之间相互作用在组织的发生、发育中的重要性已众所周知.胞外基质(ECM)在牙胚的形态发生和细胞分化方面起着重要作用.纤维粘连蛋白(Fibronectin,FN)是牙胚组织中的重要间质成分.为了观察FN在牙胚发育中的分布特征和变化,分析FN等间质与牙乳头细胞分化的关系,更好地进行胞外基质的观察,作者利用免疫组化技术,将免疫金银法(Immunogold silver staining,IGSS)和微波结合,用于小鼠牙胚FN的染色观察中,取得了较好的效果,现将方法介绍如下:
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血管周上皮样细胞及其相关病变--血管周上皮样细胞的新概念
根据Masson 1970年的报道,Apitz于1914年首先注意并描述了肾血管平滑肌脂肪瘤中血管周上皮样细胞(Perivascular epithelioid cells,PECs)的特征,当时这些细胞被解释为异常的肌母细胞,这一观察在后来的几十年里一直被忽略,肾血管平滑肌脂肪瘤被认为是三种成分参与的错构瘤.Boetti等1992年应用免疫组化研究该类细胞的特点,发现它们特征性地双重表达肌源性及黑色素生成标记,于是又重新激发了对该类细胞及其相关病变研究的兴趣.近年研究表明,血管周上皮样细胞是一独立的、特征性的细胞类型,由它参与构成的病变形成一大家族,由于它们均含有这一独特的细胞类型,免疫组化的表型相同,电镜观察有其特征,在临床上均与结节性硬化综合征(TSC)密切相关,多数病例在遗传学上有一致的基因异常,目前文献中建议用PECs这一病变家族来认识这些疾病.
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胃癌组织中VEGF、bFGF表达及与微血管计数的关系
肿瘤的生长和转移均需血管生成,血管生成与促血管生成因子有关.主要促血管生成因子有:血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factorVEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factorbFGF)和血小板衍生生长因子(platelet derived growth factorPDGF).近年研究发现VEGF、bFGF和PDGF表达与恶性肿瘤血管生成、生物学行为及预后有关.作者应用免疫组化研究胃癌组织中VEGF、bFGF表达及与微血管计数(microvessel countMVC)的关系.
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盆腔子宫内膜异位症化生的组织学及免疫组织化学研究
子宫内膜异位症是育龄妇女的常见病,发病率高达25%,其组织学发生机制至今尚未完全阐明.传统有三种学说,即种植、化生、转移学说.本文通过对盆腹膜子宫内膜异位灶的光镜组织学和免疫组化研究,探讨盆腔子宫内膜异位症的组织学发生及发病机制.
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单抗SC12对大肠癌和腺瘤的免疫组化检测
大肠癌和腺瘤是肠道常见的肿瘤,两者有密切关系.近几年来,用不同的大肠癌单抗进行免疫组化研究的较多,但对其意义的解释尚存在意见分歧.本组用大肠癌单克隆抗体 SC12对大肠癌和腺瘤做免疫组化检测,现将结果分析如下.