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检验仪器与实验结果的关系
目前先进的医疗仪器日趋增多,与其相关的检验仪器也在不断地更新和完善,正在逐步取代半自动仪器和繁琐的手工操作.根据我们在工作中观察和体会到的,尽管仪器的自动化程度越来越高,但若使用、维护、保养不当,同样也可使检验结果受到一定的影响,甚至不能很好地反映出检验结果的"真值".毕竟仪器是由人来控制和操作的,影响实验结果准确性的因素也是有的.正因为这样,不要一味地将与临床不符地异常结果一概地归咎于仪器上,也就是说在工作中不要忽略人为因素和技术问题.
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实验动物寄生虫学等级控制及效果观察
普通实验动物可携带多种寄生虫,且有各自不同的易感寄生虫.寄生虫感染不仅危害实验动物的健康,也可影响实验结果,甚至引起人兽共患性疾病的传播.因此,实验动物的寄生虫学等级是实验动物质量标准化的重要内容[1].由于驱虫药物的不良作用和对实验的干扰作用,不允许使用药物防治实验动物的寄生虫,综合防治措施是控制实验动物寄生虫感染的有效方法.本中心自2002年4月开始饲养清洁级实验大、小鼠,综合性防治措施保证了实验动物质量.结果报道如下.
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物联网冷链技术在病理实验室涉温设备管理中的应用
随着分子病理学技术的迅速发展,临床病理工作迎来了发展机遇,加强病理科实验室标准化管理和规范化检测,对实验的每一环节实现可控记录、痕迹管理,提高制片质量与结果可信度,是目前病理技术实验室的重要工作之一[1-2]。免疫组织化学与分子病理学检测的特异性与敏感性直接影响实验结果的准确性,必须保证生物试剂储存在严格的温度可监测的设备内。因此,探讨病理技术实验室涉温设备的管理问题尤为重要[3],目前大多数医院在病理科冷链管理中一般使用温度计,存在无连续性温度记录数据、人工抄写温度数据的精准度与可追溯性不足、遗漏或假报数据等问题。使用物联网冷链技术,可全程自动地记录涉温设备的温度变化情况,并可实现不开箱读取温度数据,温度记录连续、可追溯、可报警,实时准确地上传至系统的数据中心。
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利用激光显微切割技术提取高质量RNA
RNA的提取是许多实验研究的第一步,也是一个非常重要的环节.而获得高质量的RNA,又是后续实验进展顺利及结果可靠的有力保障.在以往对肿瘤的研究中我们大多以整块组织为研究对象,但众所周知肿瘤组织中不仅含有肿瘤成分还有间质细胞、炎细胞等成分;有些肿瘤组织还具有异质性的特点,即包含了肿瘤进展不同阶段的病变.这些都造成提取出的RNA不"纯",从而导致研究结果出现一定的偏差.还有些研究以培养的肿瘤细胞为实验材料,虽然部分地解决了细胞单一性的问题,但是细胞在培养过程中是否存在某些附加的突变从而影响实验结果却是值得考虑的.因此如何获取纯净的、高质量的RNA成为亟待解决的问题.1996年美国国立癌症研究所开发出了激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)技术[1].这是一项在显微镜下从组织切片中分离单一类型细胞群或单个细胞的技术.该技术成功地解决了组织中的细胞异质性问题,是肿瘤学及分子病理学研究的一项革命性技术.
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护理实验研究中常见误差的控制方法
护理实验的具体实施过程是科研数据的收集过程,有效地控制外部干扰因素,以科学的态度真实、完整、准确地收集数据,是对抽样样本以至所代表的总体进行描述、推理、统计分析、从而得出科学结论的基础.在护理实验研究中抓住影响实验结果的关键环节,有效地控制误差,对提高科研水平有重要意义.现将护理实验研究中常见的误差控制方法介绍如下.
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小儿凝血与止血障碍的检测及其临床意义
人体的正常止血功能主要取决于血管、血小板的质和量、血液凝固过程这三个因素,其中任一因素发生缺陷都将引起机体止、凝血机制障碍,导致出血性疾病.而许多出血性疾病的确诊,终有赖于相关实验室检查.然而,小儿凝血与止血障碍涉及内容较多,相对而言,实验检查也较为复杂,而且影响实验结果的因素也较多.因此,现仅就儿科临床较为常用的临床检测指标进行讨论.
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获得适龄小鼠胎鼠的方法
小鼠是小的哺乳动物,繁殖力强,寿命短、世代交替快[1],便于育种并在遗传、生理等方面和人类相似,病理学研究所得模式成果可运用在人类身上,因此小鼠已成为使用多的实验动物.胚胎发生基因的调控、胚胎神经的发生等实验都需小鼠胎鼠作为实验动物模型,小鼠内耳在不同胎龄具有特殊的发育特性,耳科研究中对胎鼠的胎龄要求十分严格,如在敲基因动物听囊发育的研究中,在与正常动物做比较时,取材时间不准将直接影响实验结果的可靠性.目前的实验动物中心一般不提供时间准确的孕鼠,因此给实验研究带来了诸多难题[2].
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2000年版中国药典中糊精溶液配制的讨论
在银量法中,常采用吸附指示剂法,用硝酸银为标准液,以吸附指示剂指示终点,测定卤化物的含量。为了使终点颜色变化明显,应尽可能使卤化银沉淀呈胶体状态,且有较大的表面。为此,在滴定前应将溶液稀释并加入糊精、淀粉等亲水性高分子化合物以形成保护胶体。而按《中国药典》2000年版糊精溶液(1→50)配制发现,每当室温下降至15℃以下时,糊精溶液的上清液便有乳浊现象,从而影响实验结果。
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条件性位置实验方法及非倾向性实验设计在药物依赖研究中的应用
在过去的二十余年,条件性位置研究(place-conditioning studies)被广泛用于研究阿片类成瘾药物的犒赏与厌恶效应[1].目前常用于药物成瘾的条件性位置研究包括条件性位置偏爱(conditionedplace preference,CPP)和条件性位置厌恶(conditionedplace aversion,CPA).与同时作为精神依赖性实验模型的自身给药(self administration,SA)、药物辨别实验等操作式强化模型(operant reinforcementparadigm)相比,条件性位置研究具有独特的优点:设备简单,实验周期短,动物不受操作式运动方式的影响,能测出药物的犒赏或厌恶效应,也不因受试药是否妨碍运动机能而影响实验结果,无药状态的测验能排除药物对测验成绩的干扰等.对成瘾背景下的CPP,CPA的深入研究,特别是实验方法和影响因素的研究,将对我们深入了解成瘾的机制有重要意义.本文就阿片成瘾背景下的条件性位置实验的原理及其装置、实验步骤及其倾向性的新进展作一简介.
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细菌内毒素检查法常见问题
细菌内毒素检查法是近二十年来发展起来的用于检测药品及其中间品中内毒素污染的一种方法.与家兔热原检查法比较,有劳动强度低、快捷、经济、灵敏和易于标准化等优点,作为家兔热原检查法的一种替代方法,已经十分成熟,美国药典迄今已收载680余种药品,<中国药典>自1990年版开始收载以来,每版药典运用细菌内毒素检查法品种也逐步增多.2005年版<中国药典>在2000年版基础上,参照美、欧、日三方关于细菌内毒素检查法协调案的格式,并结合国内实际情况,对其方法学进行了修订,使其更加规范、合理.并且将采用该方法的品种增加到100多种.由于细菌内毒素检查法是一复杂的酶促反应过程,影响实验的因素比较多,如:受试品种的限值制定、标准品、鲎试剂、检查用水以及受试品对凝胶化反应的干扰等,均会对实验结果造成不同程度的影响.现就笔者近年来在药品检验及新药复核过程中发现的较为常见问题进行总结,以资参考.
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离体灌注溶液快速置换法及其在细胞内记录中的应用
应用离体制备进行科学研究,是神经生理学、药理学等学科中常用的方法之一.药物的加入及溶液的置换是离体实验的一个重要环节.原有的置换方法一般存在置换时间偏长(几分钟或更长),直接向灌注槽内压力注药易造成浓度不均及液面波动,从而影响实验结果等不足.这些不足,在细胞内记录中显得尤为突出.国外在膜片钳技术中采用了药物快速供给方法并取得满意实验结果[1] .但国内尚未见到有关报道.
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佳冲洗条件的选择
中国药典2000年版(二部)收载的无菌检查法中采用全封闭薄膜过滤系统,与1995年版中国药典半封闭薄膜过滤相比,有操作简单,降低染菌率等优点. 在实验中,对薄膜过滤后的残留抗生素需要用冲洗液进行冲洗,冲洗干净与否是影响实验结果准确性的关键环节,在2000年版中国药典中对冲洗液的种类数量,冲洗方法等都未做具体规定,给操作带来不便.
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寻常型天疱疮抗原表位重组、致病性与临床应用研究
天疱疮是一危及人类生命的自身免疫性大疱性皮肤和粘膜疾病,其中的寻常型天疱疮(pemphigus vulgaris,PV)在所有类型的天疱疮中具有多见、病情重、死亡率高的特点.寻常型天庖疮患者的角质形成细胞间粘附能力丧失,其原因是患者血清中存在针对寻常型天疱疮抗原(pemhpigis vugarisantigen,PVA)即角质形成细胞的桥粒芯糖蛋白-3(desmoglein3,Dsg-3)的IgG型抗体.为了确定PVA中的致病性表位,美、日学者采用的是将寻常型天疱疮患者血清中的不同抗PVA表位抗体转移至新生鼠,通过观察新生鼠的病理改变的方法进行.此方法的缺点是需要较大量的寻常型天疱疮患者血清和由于血清取自不同的个体从而影响实验结果.
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ELISA自动化检验影响因素探讨
进入21世纪以后,我国血液ELISA检验逐步由手工操作过渡为更方便、准确的自动化仪器检测.但在血液ELISA自动化检测过程中,如果一些细微之处注意不到就可能造成假阳性、假阴性的产生,影响实验结果的准确性.作者根据实际工作经验就ELISA试验检测结果出现偏差的常见原因进行总结分析,以确保结果的准确,提高血液检测质量.
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全自动酶免分析仪FAME的保养及常见故障排除
Microlab FAME全自动酶免分析仪是瑞士HAMILTON公司生产的一套完全自动化的酶标处理系统.由于其操作过程标准化,各实验环节受到严格控制,不仅大大提高实验的精密度和特异性,还避免了人为因素造成的偶然误差而被广泛应用[1].由于FAME仪器的精密度较高,模块零件较复杂,在频繁使用过程中容易出现各种故障,其设备程序紧凑、连贯性强,每一过程的失败,均影响下一步操作,若处理不当,则会造成“吐板”而影响实验的连续性和准确性.因此,FAME的维护保养和常见故障的及时解决,对于一线检验人员显得尤为重要.本站于2001年正式引进FAME,经过10a的应用,现将其日常保养和常见故障及排除方法进行介绍.
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膀胱插管简易固定器的研制与应用
1研制简易固定器的目的在医学生理学"尿生成影响因素"的实验中,腹部膀胱插管手术完成后,膀胱插管与受滴棒要求固定在同一垂直线上,才可能形成有尿滴接触.由于受滴棒的两极固定于铁支架上,但因膀胱插管是一段游离于膀胱处的胶性管道,在无固定器时,很难将其固定于铁支架上,要达到与受滴棒垂直的要求就更困难了.过去采用胶布固定法,是将膀胱插管用胶布固定于桌边,再让受滴棒去对准膀胱插管.该固定法的大缺点是膀胱插管与受滴棒错位,从而达不到实验的要求.因此,要反复不停地纠正错位,不仅浪费时间,又因为受滴棒接受不到尿滴即使有尿量产生也没有数值显示,影响实验结果.为解决这一问题,我们研制了简易固定器,经过几年使用,效果不错.
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新式动脉插管的研制与应用
在生理实验教学中,动脉插管是进行机能实验时所必需的一种器械.使用什么样的动脉插管,直接影响着实验的成败.长期以来,一直沿用的旧式动脉插管是由玻璃吹制的动脉插管和乳胶管组成.它有3个开口和膨大的腹壶,老师、同学在使用时常感到有许多不便.如排空气费事,使用抗凝剂多,膨大的腹壶,占手术位置大,操作碍事.因回血易形成血栓阻塞影响实验记录,同时清洗也困难.锐利的插管尖易损伤动脉,造成插管后动脉出血,影响实验结果.为克服上述缺点,我们研制了这一新式动脉插管.
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PH值对葡萄糖注射液稳定性的影响
葡萄糖注射液经热压灭菌后易分解,其分解产物5-羟甲基糠醛是一种对人体有害的物质,其葡萄糖含量较灭菌前有降低,主要受温度、受热时间、PH值等诸多因素的影响.<中国药典>规定葡萄糖注射液的PH值范围为3.2~5.5.有报道葡萄糖注射液的PH值在3.0~4.0时稳定.本文通过PH值对葡萄糖注射液稳定性的影响实验如下.
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影响消炎利胆片含量测定的因素
消炎利胆片收载于1995年版<中国药典>1997年增补本[1],其含量测定采用分光光度法的比色法测定总内酯(规定每比含总内酯以穿心莲内酯计,不得小于16 mg).在实验过程中,我们发现温度和显色时间对测定结果影响很大,对影响实验因素进行观察,结果如下.
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衰老动物模型的研究进展及评价
近年来各国学者在抗衰老的研究中,相继提出了200余种衰老学说,其中公认的学说有遗传学说、自由基学说、神经内分泌学说、交联学说、代谢学说、中医脾肾学说等.在衰老与抗衰老实验研究中,若以自然老化动物为模型,其缺点有饲养时间长、价格昂贵,而且通常也未必是同批动物,参差不齐,从而影响实验结果的可靠性.因此依据某一公认的衰老学说,制成接近临床衰老症状的动物模型,有较高的实用价值.