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ELISA测定中常见问题及原因分析
ELISA(酶联免疫吸附试验)是医院检验科用于监测感染性标志物的主要方法.对多年从事感染性标志物监测中出现的常见问题及原因分析归纳总结如下.常见问题弱阳性质控样本检测不出:温育时间或温度不够,显色时间太短.
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三种尿吗啡检测产品的比较分析
1对象与方法1.1研究目的本文对海洛因等阿片类药物依赖者的同一尿液样品进行三种四个规格产品的有效率、准确性、操作方法、显色时间和灵敏度等方面的观察、比较与分析,旨在筛选不同尿吗啡检测盒(条)所得出的定性结果,为基层有关部门确认吸毒者和开展尿吗啡检测工作,寻找出一种准确、方便与经济的尿吗啡检测盒(条)产品.
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氢氧化钠分离,纳氏试剂比色法测定氮的改进和应用
对氢氧化钠分离,不蒸馏比色法做进一步实验研究.试样溶解后,滴加过氧化氢,经硫酸冒烟处理.优化了纳氏试剂配制方法,确定了显色时间和显色剂的佳用量.
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影响消炎利胆片含量测定的因素
消炎利胆片收载于1995年版<中国药典>1997年增补本[1],其含量测定采用分光光度法的比色法测定总内酯(规定每比含总内酯以穿心莲内酯计,不得小于16 mg).在实验过程中,我们发现温度和显色时间对测定结果影响很大,对影响实验因素进行观察,结果如下.
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食品中磷的钼锑抗法测定
磷的测定多为钼蓝分光光度法[1],还有离子色谱法、流动注射法、等离子体发射光谱法、气相色谱法等,但仍以钼蓝分光光度法应用多.实际工作中发现,GB/T5009.87-2003[2]中所规定的方法,其中第一法分光光度法存在显色时间长、所用试剂不够稳定、方法不够灵敏等因素.本实验通过改变还原剂,选择大吸收波长,提高了测定灵敏度,扩大了方法的线性范围.减少取样量,易于样品的消解.缩短了显色反应时间,提高了测定速度.
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酚试剂分光光度法测定水中微量戊二醛
[目的]建立一种快速有效地检测水中微量戊二醛的酚试剂分光光度法. [方法]采用戊二醛与酚试剂(3-甲基-苯并噻唑腙,MBTH)反应生成嗪,嗪在酸性溶液中能够被高铁离子氧化生成蓝绿色化合物,利用产生的颜色与戊二醛含量成正比的原理,采用酚试剂分光光度法对水中微量戊二醛含量进行测定,分析入射波长、酚试剂浓度、显色剂酸溶解条件、显色温度和显色时间等因素对实验结果的影响并确定佳条件. [结果]确定了604 nm处为佳吸收波长;MBTH和硫酸高铁铵的佳用量分别为200 mg/L和1 800 mg/L;在30℃下放置15 min后MBTH与戊二醛能够充分反应生成嗪;其次研究了显色剂酸溶解条件,其佳盐酸溶解用量为0.2mol/L;后研究得出佳显色温度和显色时间为40℃下静置40 min.在佳测试条件下,吸光度与戊二醛浓度在0.005~1.00 mg/L范围内呈现良好线性关系,检测限为0.005mg/L,相对标准偏差为0.34%,平均加标回收率为98.13%. [结论]该方法检测限低、灵敏度高、线性范围宽,能够快速有效地检测水中微量戊二醛.
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献血现场HBsAg金标法检测适时间的探讨
我国是乙型肝炎的高度流行区,人群中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)携带者接近10%[1],而HBsAg阳性是造成血液检验不合格的主要原因之一.随着献血模式的转变,街头(流动献血车或献血屋)无偿献血已占相当份额.为减少因HBsAg阳性导致的血液报废,胶体金免疫结合试验(简称金标)已被广泛用于献血前HBsAg检测.由于街头采血工作的特殊性,应尽可能缩短献血者等候时间,为此笔者以100例HBsAg酶标试剂(ELISA)检测阳性标本作参照,测定不同时间段金标试剂HBsAg阳性检出率,以确定HBsAg金标法检测的适显色时间.
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含氯消毒液中铁测定方法的改进
铁作为以次氯酸钠为主原料的含氯消毒液中必测项目指标之一,其检测意义在于当含量超过50mg/L时[1],易形成氧化铁和氢氧化铁悬浮物或沉淀,影响消毒液中游离碱浓度,降低消毒液稳定性.国标方法测定铁采用经典的邻菲罗啉分光比色法.此法要求测定的pH值条件严格,显色时间短.对于批量样品的测定,显得操作繁琐、测定速度慢.为此我们改用火焰原子吸收法的测定,结果表明此法操作简便、快速,灵敏度和准确度高,精密度好,完全能满足大批样品的分析.
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不同反应条件的半乳甘露聚糖检测的研究
目的:半乳甘露聚糖(GM)试验是一种诊断侵袭性曲霉菌感染(IA)的早期抗原指标,本实验旨在探索孵育方式与显色时间对GM试验结果的影响.方法:采集武汉市第一医院137例住院患者的血清或肺泡灌洗液样本进行实验,按不同的孵育方式和显色时间分别将实验进行分组,计算不同组的阳性率,再用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果:取待测样本与标准血清的吸收度的比值(I值)≥0.5为阳性,不同实验组的阳性率均差异有统计学意义(P<0.05).结论:孵育方式和显色时间对GM试验的结果有显著影响.
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自制免疫组化显色平板技术
免疫组化技术是病理诊断的重要辅助手段,其实验步骤复杂,任何一个步骤操作上的不当都可能影响到染色的终结果.而在诸多步骤中,有关时间方面,若要求得不严格或可以用定时器按照操作规程中所要求的时间执行操作,唯有显色这一环节需实验者光镜下控制显色效果,故能否制作出良好的免疫组化染色切片,恰到好处地控制显色时间就显得比较重要.笔者在实践中探索并制作出一种免疫组化显色平板,制作方便,价格低廉,对免疫组化显色有较大的帮助,现介绍如下.
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品红亚硫酸法测定甲醇影响因素的研究
目的 研究品红亚硫酸法测定甲醇的影响因素,方法 往不同体积的甲醇标准使用注中依次加入各种试剂,静置显色后,生成蓝紫色化合物,以0管调零测定其吸先度,分别研究显色时间、乙醇浓度和显色温度对甲醇测定的影响.结果 保持乙醇浓度6.0 ml/dl,显色温度30℃不变.各管吸光度随显色时间的增加而增加;保持显色时间30 min,显色温度30℃不变,各管吸光度随乙醇浓度的增加而战小;保持乙醇浓度6.0 ml/dl和显色时间30 min不变,各管吸光度随显色温度的增加而增加.结论 当乙醇浓度为6.0 ml/dl,在30℃下显色30 min可以得到好的吸光度值(0.2~0.5),为佳显色条件.
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氟试剂分光光度法测定水中氟化物时显色时间的探讨
目的 探讨用氟试剂分光光度法测定水中氟化物,显色时间对准确度的影响.方法 氟试剂分光光度法测定水中氟化物.结果 用氟试剂分光光度法测定水中氟化物,显色时间为120~180 min时,测定合成水样(该合成水样氟化物浓度(以F--计)为1.25 mg/L)氟化物的浓度在1.428~1.452 mg/L.结论 用氟试剂分光光度法测定水中氟化物浓度,显色时间为120~180min时,水中氟化物浓度的测定值与真实值更接近.