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穿心莲总内酯的NO抑制活性研究＊
目的：考察穿心莲总内酯对巨噬细胞释放一氧化氮的抑制作用。方法：以脂多糖（LPS）刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7建立体外炎症模型，采用Griess Reagent法检测细胞培养上清一氧化氮（NO）含量并计算抑制率，通过MTT法评价细胞毒性。结果：穿心莲总内酯在5-50μmol·L-1浓度范围内对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7释放的NO具有明显的抑制作用，并呈现良好的剂量依赖关系，IC50分别为8.58μmol·L-1，11.52μmol·L-1，8.94μmol·L-1；其主要活性成分穿心莲内酯（5-60μmol·L-1）、脱水穿心莲内酯（5-100μmol·L-1）、新穿心莲内酯（5-100μmol·L-1）对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW 264.7释放的NO亦表现出抑制作用，并呈现良好的剂量依赖关系，其IC50分别为17.54μmol·L-1，49.54μmol·L-1，41.80μmol·L-1。结论：穿心莲总内酯的NO抑制作用优于三个单体，以上结果可为穿心莲总内酯的制剂开发及临床应用提供一定的理论基础及科学依据。
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安徽省不同产区不同栽培品种银杏叶总内酯含量的研究
目的:研究安徽省不同产区和不同栽培品种银杏叶总内酯的含量.方法:采集安徽省6个产区不同品种银杏叶,分别测定其中总内酯的含量.结果:不同产区不同栽培品种银杏叶总内酯的含量差别较大.结论:可为安徽不同地区合理栽培银杏提供参考.
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4种药用真菌发酵对番荔枝种子总内酯成分的影响
目的:观察4种药用真菌发酵番荔枝种子后,番荔枝总内酯含量的变化.方法:将番荔枝种子作为“药性基质”,在一定的条件控制下,使其被灵芝菌等4种药用真菌发酵,产生不同的“药性菌质”,采用反相高效液相色谱法对各组的总内酯成分变化进行比较,用紫外-可见分光光度法对种子发酵前后的总内酯含量进行检测.结果:在一定的时间范围内,D,V,F菌在番荔枝种子基质上的适应性良好,菌丝体生长旺盛.4种菌发酵之后的菌质中总内酯含量与生药材、发酵空白组比较均有明显的升高,同时伴随峰的消失和相对峰值的变化,各菌发酵品中12,15-cis-squamostatin-A及布拉他辛(bullatacin)的含量较发酵空白组显示不同程度地变化.结论:发酵后,4种“药性菌质”中总内酯含量明显升高,内酯的相对含量发生变化,间双四氢呋喃(THF)及邻双THF内酯含量有不同程度地改变,提示真菌发酵可能利于某种类型番荔枝内酯的富集.
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穿心莲注射液质量标准研究
穿心莲注射液为<中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂>第19册收载的品种,原标准中仅有理化鉴别及比色法测定总内酯的含量,方法专属性差;作者增订了薄层色谱鉴别、高效液相色谱法测定穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的总量,增强了专属性,提高了质量标准,并对收集到的3个厂家12批样品、6批药材进行了薄层色谱鉴别及穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量测定,为该制剂及药材的质量控制提供依据.
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穿心莲总内酯亲水凝胶骨架片的制备及体外释药机制研究
该实验研究了穿心莲总内酯骨架片的处方工艺及其体外释药行为.通过单因素试验,以不同型号及用量的羟丙甲基纤维素(HPMC)为主要考察因素,以3种内酯成分累积释放度为评价指标,优选出佳处方,所制缓释片无突释现象,缓释周期14 h.采用零级、一级、Higuchi及Peppas方程判断穿心莲3种内酯类成分的释药机制,结果表明总内酯释放行为符合Higuchi模型,释放机制为骨架溶蚀机制.该法制备的穿心莲总内酯骨架片制备工艺简单易行,具有良好的释放性能.
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雷公藤提取物中的内酯类成分分析
目的 比较不同来源的雷公藤提取物中内酯类成分的组成和含量.方法 采用比色法测定总内酯含量;HPLC法测定雷公藤内酯醇含量;用薄层色谱进行样品定性鉴别.结果 测定了总内酯和雷公藤内酯醇含量,总内酯含量分别为1.2%、0.56%、1.4%;雷公藤内酯醇含量分别为0.060%、0.012%、0.42%.样品的薄层色谱可检出分别与雷公藤内酯醇、雷公藤内酯酮、雷酚内酯对照品对应的斑点,但斑点大小差异较大.结论 不同来源的雷公藤提取物中内酯类成分的组成及含量存在较大差异.
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均匀设计法优选川木香提取物提取工艺
目的 筛选优化川木香提取物的提取工艺.方法 以总内酯含量为指标,采用均匀设计法对川木香提取物的提取工艺进行优选.结果 佳提取工艺条件为:采用90%乙醇为提取溶媒,回流提取2次,溶媒用量为10倍量.结论 建立的川木香提取物提取工艺稳定、可行.
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HPLC-ELSD法测定银杏叶茶中总内酯的含量
目的:采用RP-HPLC法测定低酚酸银杏叶保健茶中总内酯的含量.方法:采用Agilent C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-四氢呋喃-水(25:10:65)为流动相,柱温为30%,蒸发光散射检测器检测.结果:银杏叶保健茶中银杏内酯A、银杏内酯B、银叶内酯C和白果内酯的进样量的对数与峰面积的对数线性关系较好,线性范围分别为0.485～9.701 μg.0.460～9.204μg、0.501～11.899μg、0～935～18.703μg;银杏内酯A、银杏内酯B、银叶内酯C和白果内酯加样回收率分别为100.45%(RSD为2.79%)、98.29%(RSD为2.90%)、98.22%(RSD为2.53%)、101.32%(RSD为1.81%).结论:本方法简便、准确、分离效果好,适合于银杏叶茶总内酯的含量测定.
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不同树龄的银杏叶在不同生长季节中银杏总黄酮和总内酯的含量变化
银杏叶为银杏科植物银杏 Gonkgo biloba L. 的干燥绿叶.银杏叶主要含黄酮和内酯类有效成分.前人研究[1～10]结果表明,银杏叶有效成分的含量与不同生长季节的树龄紧密相关.为了弄清本地产银杏叶有效成分含量与季节变化的关系,我们用高效液相色谱法做了不同树龄的银杏叶在不同月份的总黄酮和总内酯的含量测定,结果4月分总黄酮含量高,9月份后总黄酮含量有所降低,11月份黄酮含量低.总内脂含量以5月份为高,8月份开始含量显著下降,11月份含量低.此结果为适时采收银杏叶合理开发利用,提供依据.
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比色法测定阿诺宁脂肪乳注射剂中总内酯
阿诺宁是我园从国产番荔枝科植物番荔枝Annona squamosa种子中发现的一个具有高抗癌活性的番荔枝内酯有效部位药物.该药是由质量分数大于90%的5～6个番荔枝内酯化合物和质量分数小于10%的未知成分组成[1].阿诺宁的活性部位为番荔枝内酯,含有一个不饱和五元内酯环,在碱性溶液中,双键转位形成活性次甲基,从而能够与Kedde试剂反应而显色[2],在534 nm波长下有大吸收值,可用于总内酯的测定[3].
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Kedde比色法测定复方雷公藤片中总内酯
复方雷公藤片是由雷公藤提取物和蒿甲醚加入适宜的辅料制成的制剂,临床上主要用于治疗类风湿性关节炎等自身免疫性疾病.其主要药效成分为环氧二萜内酯类、三萜内酯类等总内酯成分[1].该内酯成分大多含有α,β-不饱和内酯环结构,而Kedde反应常用于含有这一结构物质的定性鉴别.其反应原理是在碱性溶液中,内酯环上的不饱和双键转位能形成活性次甲基,形成的次甲基非常活泼,可以和3,5-二硝基苯甲酸等试剂进行缩和反应,氧化生成具有醌式结构的物质而呈紫红色,并在可见光区有特征吸收峰[2].
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不同树龄银杏叶在不同季节中总黄酮和总内酯的含量变化
目的确定银杏叶适宜采收季节.方法采用HPLC法(二级管阵列检测器DAD和蒸发光散射检测器ELSD)分别测定银杏叶中总黄酮和总内酯的含量.结果不同树龄、不同季节的银杏叶总黄酮、总内酯含量不同.结论银杏叶的总黄酮、总内酯以二、三年生的为高;总黄酮在5月份、总内酯在9月份含量为高.
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树龄、采收期和干燥方法对银杏叶中总内酯的影响
目的 对银杏叶中总内酯进行研究,为银杏叶资源的合理利用提供科学依据.方法 采用HPLC-ELSD法测定不同树龄、采收季节和干燥方法的银杏叶中总内酯.结果 树龄小于10年,5～7月采收,干燥方法为晒干的银杏叶中总内酯含量较高.结论 银杏叶中总内酯的含量受树龄、采收季节和干燥方法的影响,应合理采收银杏叶,保护银杏叶资源.
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影响消炎利胆片含量测定的因素
消炎利胆片收载于1995年版<中国药典>1997年增补本[1],其含量测定采用分光光度法的比色法测定总内酯(规定每比含总内酯以穿心莲内酯计,不得小于16 mg).在实验过程中,我们发现温度和显色时间对测定结果影响很大,对影响实验因素进行观察,结果如下.
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紫外可见分光光度法测定蒙药复方述达格-4中总内酯的含量
目的:建立蒙药复方述达格-4中总内酯的含量测定方法.方法:以异土木香内酯为对照品,以盐酸、三氯化铁为显色剂,采用紫外可见分光光度法测定述达格-4中总内酯的含量.结果:异土木香内酯在0.842~5.052mg范围内与吸光度呈良好的线性关系Y=0.1493X+0.1399(r=0.9995),平均加样回收率为98.43%,RSD=1.69%(n=6).结论:该方法简便、灵敏、准确,可用于述达格-4中总内酯含量的测定.
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复合酶预处理法对银杏叶总黄酮和总内酯提取率的影响
目的 研究复合酶预处理法对银杏叶总黄酮和总内酯提取率的影响.方法 采用单因素试验对银杏叶酶解预处理过程中的酶种类、酶用量、酶解时间、酶解温度、酶解pH进行优化.酶解后,20％乙醇回流提取酶解液,LX-5型大孔吸附树脂纯化,浓缩干燥得提取物,按照《中国药典》方法对其中总黄酮和总内酯的提取率、含有量进行检测.结果 佳条件为酶种类复合酶(纤维素酶∶果胶酶=1∶1),酶用量银杏叶的1/300,酶解时间3.0h,酶解温度40℃,酶解pH4.0,总黄酮和总内酯的提取率分别为1.96％和0.55％,含有量分别为33.24％和8.96％.结论 复合酶预处理有利于银杏叶有效成分的溶出,该方法可为生产高质量的银杏叶提取物提供理论依据.
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雷公藤口服液质量控制方法的研究
目的:建立雷公藤口服液的质量控制方法,研究制剂质量及其稳定性.方法:用TLC法测定雷公藤口服液中总生物碱,采用醇提-氧化铝柱层析净化-紫外分光光度法,以雷公藤甲素为对照,测定雷公藤提取液中总内酯的含量.用控制口服液的pH值和相对密度来达到制剂的稳定性.结果:分析6批口服液的含量,表明该口服液质量稳定,其中总内酯的含量低于市售的该类制剂.产生毒性低,服用安全有效,便于患者长期用药.结论:该方法可靠、操作简便,无需贵重仪器,适用于医院中药制剂质量控制.
关键词： 雷公藤口服液 总内酯 雷公藤甲素 薄层色谱法 柱层析-紫外分光光度法 -
UV-Vis测定芎姜复方CO2超临界提取物中总内酯和总萜类的含量
目的 建立测定芎姜复方CO2超临界提取物中总内酯和总萜类含量的方法.方法 以洋川芎内酯A为对照,30 mg·mL-的氢氧化钠溶液,30℃恒温反应30 min,于305 nm波长处测定吸光度,测定总内酯含量；以6-姜酚为对照,5％香草醛-冰乙酸溶液、高氯酸显色,于560 nm波长处测定吸收度,测定总萜类含量.结果 洋川芎内酯A在0.062 5～1.0 mg·mL-1与吸收度呈良好线性关系(r=0.999 9),平均回收率为97.9％,RSD为2.7％;6-姜酚在0.03～0.4 mg·mL-1与吸收度呈良好线性关系(r=0,9999),平均回收率为97.6％,RSD为3.6％.结论 本方法简便,准确,可用于芎姜CO2超临界提取物及其制剂中总内酯和总萜类含量的快速测定.
关键词： 紫外-可见分光光度法 芎姜复方 CO2超临界提取物 总内酯 总萜类 -
一测多评法测定银杏叶中总内酯含量
目的 建立测定银杏叶中总内酯含量的一测多评的方法.方法 以白果内酯为指标,建立银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C与白果内酯之间的相对校正因子,以样品中测出的白果内酯含量为参照,分别计算出银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C的含量,进而得出总内酯的含量,从而建立起仅以白果内酯为对照品的一测多评法,并通过与外标法实测值比较验证.结果 建立了银杏叶中总内酯的一测多评法,10批样品的计算结果与外标法的测定值之间没有显著差异.结论 同时测定银杏叶中白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C等4种成分的一测多评法是准确可靠的,该方法可以用与银杏叶总内酯成分的定量分析.
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紫外分光光度法测定川芎油中的总内酯
目的 采用紫外分光光度测定川芎油中的总内酯.方法 以藁本内酯作对照品,样品和对照品中加入4 ml 30 mg·ml-1的NaOH溶液,30℃保温反应30 min后,于305 nm测定吸光度.结果 藁本内酯2.95～23.6 μg·ml-1与吸光度呈良好的线性关系,其同归方程为:Y=36.8X+0.009(r=0.9998),总内酯的平均回收率为98.1%,RSD=1.1%.3批川芎油含量测定的结果分别为51.3%、53.0%、57.5%.结论 所建方法可以作为川芎油中总内酯的含量测定方法.
