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现代检验医学杂志
Journal of Modern Laboratory Medicine 현대검험의학잡지
- 主管单位： 陕西省卫生厅
- 主办单位： 陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
- 影响因子： 0.71
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1671-7414
- 国内刊号： 61-1398/R
- 发行周期： 双月刊
- 邮发： 52-116
- 曾用名： 医学检验杂志;陕西医学检验
- 创刊时间： 1986
- 语言： 英文
- 编辑单位： 《现代检验医学杂志》编辑部
- 出版地区： 陕西
- 主编： 陈学文
- 类 别： 医学教育与医学边缘学科
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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中国人群miR-449a单核苷酸多态性与胃癌易感性的相关性研究
目的 探讨miR-449a rs112310158基因多态性与胃癌易感性的关系.方法 共纳入448例胃癌患者和452例健康对照者.miR-449a rs112310158基因型检测采用聚合酶链反应结合直接测序方法.miR-449a表达水平检测采用荧光定量PCR方法.此单核苷酸多态性位点功能由RT-PCR和免疫组化试验验证.结果 相对于对照组,胃癌病例组在吸烟者(OR=1.345,95 ％CI=1.028～1.761)、饮酒者(OR=1.910,95％CI=1.465～2.490)、有肿瘤家族史者(OR=4.178,95％CI=1.554～11.231)、幽门螺杆菌感染率较高者(OR=1.428,95％CI=1.098～1.857),差异均具有统计学意义.相较AA基因型,GG基因型显著增加胃癌的发病风险(OR=2.542,95％CI:1.304～4.954,P=0.005).相较于A等位基因,携带G等位基因的个体罹患胃癌的风险升高(OR=1.279,95％CI:1.012～1.617,P=0.043).GG型患者比AA型患者miR-449a表达水平下降.与AA基因型相比,miR-449a靶基因PRKCE在GG基因型胃癌患者中有更高的表达.结论 该研究发现miR-449a rs112310158是胃癌的遗传易感因素之一.
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联合检测Ficolin-3,TRF及hs-CRP对2型糖尿病早期诊断价值
目的 探讨联合检测血清纤维凝胶蛋白-3(Ficolin-3)、转铁蛋白(TRF)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)对2型糖尿病(T2DM)的早期诊断价值.方法 选取深圳福田人民医院2013年10月～2015年10月收治的T2DM前期患者80例[空腹血糖受损(IFG)35例,糖耐量减低(IGT)45例]为A组,另外选取健康体检人群55例为B组,测定研究对象血清Ficolin-3,TRF及hs-CRP水平,评估其对于T2DM的早期诊断价值.结果 A组患者Ficolin-3,TRF及hs-CRP水平明显高于B组(27.4±2.5 μg/ml vs 18.9±2.3 μg/ml,277±12.7 mg/dl vs 219±9.8 mg/dl,3.68±0.74mg/ml vs 1.23±0.83 mg/ml),差异具有统计学意义(P＜0.05);单独检测,对早期T2DM诊断的特异度和阳性预测值由高到低依次为TRF＞ Fico-lin-3 ＞hs-CRP(63.7％＞54.5％＞36.4％,72.2％＞70.5％＞50.7％),敏感度和阴性预测值由高到低为Ficolin-3＞ TRF＞hs-CRP(70.0％＞65.0％＞45.0％,60.0％＞55.6％＞31.3％);以串联方式检测,检测Ficolin-3,TRF及hs-CRP对早期T2DM的诊断特异性显著提高(89.5％),以并联方式检测,检测Ficolin-3,TRF及hs-CRP对早期T2DM的诊断敏感性显著提高(94.2％).结论 联合检测血清Ficolin-3,TRF及hs-CRP对T2DM早期诊断具有重要价值,可有效提高早期T2DM诊断的特异度和灵敏度,值得临床推广.
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多发性骨髓瘤患者血清中IL-6与IL-27水平监测的临床应用
目的 通过检测多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者血清中IL-6与IL-27表达水平,探讨其在MM病情进展程度及疗效评价中的意义.方法 按照修订的R-ISS国际预后分期诊断标准,选择MM患者52例,其中Ⅰ期16例,Ⅱ期18例,Ⅲ期18例,选择同期正常对照组20例.用ELISA法检测各组血清中IL-6与IL-27表达水平,并随访观察其预后.结果 Ⅰ期、Ⅱ期与Ⅲ期MM患者血清中IL-6表达水平均明显高于对照组,且差异有统计学意义(t=4.012,5.134,6.161,均P＜0.01),Ⅲ期血清中IL-6的表达水平高于Ⅰ期,且差异有统计学意义(t=2.132,P＜0.05).而Ⅲ期IL-27表达水平显著低于对照组,且差异有统计学意义(t=3.831,P＜0.01),Ⅰ期、Ⅱ期血清中IL-27表达水平也低于对照组,且差异有统计学意义(t=2.012,2.198,均P＜0.05).MM患者血清中IL-6表达水平与IL-27表达水平为负相关关系(r=-0.510,P＜0.05).MM患者初治组与复发组血清中IL-6的表达水平均明显高于对照组,且差异有统计学意义(t=4.331,5.221,均P＜0.01),而缓解组IL-6表达水平显著低于初治组,且差异有统计学意义(t=4.101,P＜0.01).初治组与复发组血清中IL-27的表达水平均明显低于对照组,且差异有统计学意义(t=2.133,2.521,均P＜0.05),而缓解组IL-6表达水平高于初治组,且差异有统计学意义(t=2.001,P＜0.05).结论 多发性骨髓瘤的病情进展与患者血清中IL-6升高或IL-27降低有关,检测相关细胞因子IL-6和IL-27水平变化有助于判断病情严重程度及评估预后.
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梅里埃API20NE生化鉴定系统在布鲁氏菌鉴定中的局限性
目的 对梅里埃API 20NE生化鉴定系统在布鲁氏菌鉴定中出现的错误结果进行总结分析,并探索相应的改正措施,提醒微生物实验室工作人员不能过分依赖生化鉴定结果.方法 对2011年1月～2016年3月陕西省人民医院门诊及住院病人血液、脓液、关节腔积液分离的33株氧化酶阳性、泥沙样、疑似布鲁氏菌的G细小杆菌,采用梅里埃API 20NE快速生化鉴定板条进行鉴定,对得到的错误结果进行分析,并结合布鲁氏菌的生物学特征进行补充试验,以得到正确的鉴定结果.结果 API 20NE生化鉴定板条,误将上述33株菌,2株鉴定为人苍白杆菌,其余31株均鉴定为苯丙酮酸嗜冷杆菌,且ID值=91.5％,T值=1.对这种看似可信度很高的鉴定结果,结合菌落细小、48 h后产生橘红色色素、菌体为G-泥沙样、快速脲酶试验阳性特征,和病人临床症状、接触史及血清学鉴定也证实,上述33株菌均为布鲁氏菌.结论 API20NE生化鉴定系统,不适合对布鲁氏菌进行鉴定,对疑似错误的鉴定结果,要结合菌落、菌体特点及其它生物学特征和病人的临床表现、接触史及一些辅助实验来确定细菌,过分依赖生化鉴定,会得出错误结果.另外,商家也应补充和完善该鉴定系统,进一步提高API快速鉴定系统的临床应用价值.
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九项呼吸道病原体IgM抗体联合检测对儿童呼吸道感染的临床意义
目的 探讨九项呼吸道病原体IgM抗体联合检测对治疗儿童呼吸道感染的指导意义.方法 采用间接免疫荧光法检测2014年7月～2015年1月1 104例0～14周岁住院呼吸道感染患儿血清中九种病原体IgM,其中包括嗜肺军团菌-IgM(LP-IgM)、肺炎支原体-IgM (MP-IgM)、Q热立克次体-IgM(COX-IgM)、肺炎衣原体-IgM (CP-IgM)、腺病毒-IgM(ADV-IgM)、呼吸道合胞病毒-IgM(RSV-IgM)、甲型流感病毒-IgM(IFA-IgM)、乙型流感病毒-IgM(IFB-IgM)、副流感病毒1,2-IgM和3型(PIVS-IgM),记录患儿信息和检测结果,用统计学软件SPSS进行卡方检验.结果 1 104例患儿中病原体新近感染率为38.32％(423/1 104),其中CP-IgM阳性率高为28.44％,其次乙型流感病毒-IgM为9.51％,混合感染率为26.24％,以肺炎支原体并发乙型流感病毒感染为主.总阳性感染人数中男性阳性率为36.40％(218/599),女性阳性率为40.60％(205/505),性别间差异无统计学意义(x2=2.05,P=0.15).结论 九项呼吸道病原体IgM抗体联合检测具有操作简便,费用低,检测迅速和被检范围广等优点,对儿童呼吸道感染病原菌具有早发现、早诊断及早治疗的临床应用价值.
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血浆相关基因甲基化在食管癌复发中的临床价值
目的 评估血浆相关基因甲基化在食管癌复发中的临床价值.方法 收集81例食管癌(ESCC)患者及60例健康体检者血浆.采用甲基化特异性PCR技术分析了81例食管癌患者及60例健康体检者血浆中四个基因SFRP-1,WIF-1,DKK-3和RUNX3启动子区域的甲基化.结果 这四种基因在食管癌血浆甲基化频率均超过25％,其中:SFRP-1为29.6％,WIF-1 35.8％,DKK-3 37.4％,RUNX-3 35.8％;健康体检者血浆中均未检测到相关基因的甲基化.食管癌患者血浆中SFRP-1(x2=14.16,P＜0.01),DKK-3(x2=6.21,P＜0.05)和RUNX3(x2=11.75,P＜0.01)基因甲基化明显与食管癌的复发有关,未发现WIF-1基因甲基化与食管癌复发有关(x2=3.39,P＞0.05).结论 食管癌血浆相关基因甲基化可能与食管癌复发相关.
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γ-干扰素体外释放试验在艾滋病并发结核感染诊断中的应用价值探讨
目的 探讨艾滋病病毒(HIV)感染者γ-干扰素体外释放试验(TB-IGRA)对于并发结核分枝杆菌感染诊断的应用价值.方法 选取2015年1月～2016年2月期间确诊艾滋病病毒感染者共387例(其中男性320例,女性67例;年龄15～81岁);根据外周血CD4+T淋巴细胞计数分为三期四组:HIV感染Ⅰ期组(58例,CD4+细胞计数≥500 cell/μl);HIV感染Ⅱ期组(54例,CD4+细胞计数200～500 cell/μl);艾滋病期A组(108例,CD4+细胞计数50～199 cell/μl);艾滋病期B组(167例,CD4+细胞计数≤50 cell/μl).按照《临床诊疗指南/结核病分册》标准,各组确诊并发结核分枝杆菌感染数分别为14,15,26和39例.采用TB-IGRA检测各组外周血结核分枝杆菌特异性γ-干扰素体外释放水平,判断试验的阴阳性结果.计数资料采用卡方检验,对TB-IGRA在艾滋病病毒并发结核分枝杆菌感染者中的诊断价值进行评价.结果 HIV感染者中确诊的结核感染率平均为24.29％,各期之间差异无统计学意义(x2=0.440,P=0.932,95％可信区间0.928～0.938).HIV感染四组的TB-IGRA试验阳性率分别为25.86％,27.78％,25.00％和14.37％,其中艾滋病期B组阳性率(14.37％)显著低于确诊感染率(23.35％),差异有统计学意义(x2 =4.402,P=0.036);艾滋病期B组TB-IGRA试验阳性率低于其余三组,差异有统计学意义(x2=3.967～5.047;P值均＜0.05).TB-IGRA试验对艾滋病并发结核感染的诊断灵敏度四组分别为92.86％,86.67％,88.46％和53.85％,前三组显著高于艾滋病期B组,差异有统计学意义(x2=5.004～8.547;P值均＜0.05);特异度分别为95.45％,94.87％,95.12％和97.66％;诊断效率分别为94.83％,92.59％,93.52％和87.43％,TB-IGRA试验诊断特异度和诊断效率四组差异无统计学意义(x2=1.271,4.626;P=0.736,0.201).结论 TB-IGRA对艾滋病感染者并发结核分枝杆菌的诊断具有较高灵敏度和特异度,但对于外周血CD4+T淋巴细胞计数≤50 cell/μl的患者诊断灵敏度相对较差.
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XRCC2基因R188H位点多态性与大肠癌易感性的Meta分析
目的 通过系统性回顾性分析评价X射线交错互补修复基因2(XRCC2)基因多态性与大肠癌易感性的相关性,以期为大肠癌的临床诊断提供相应参考.方法 计算机检索知网、万方、PubMed,Embase,WebofScience和CNKI数据库,2000年1月～2015年12月XRCC2基因R188H多态性与大肠癌的病例对照研究,应用RevMan5.3及Stata软件进行定量分析.结果 共纳入5篇病例-对照研究:大肠癌病例组2 106例,正常对照组2 607例.Meta分析结果显示,XRCC2R188H基因多态性与大肠癌发病风险的差异无统计学意义.GAvs GG基因型[OR=1.08,95％CI(0.92～1.27),P=0.36].AA vs GG基因型[OR=1.26,95％ CI(0.81～1.97),P=0.31].GA+ AA vs GG基因型[OR=1.04,95％ CI(0.87～1,23),P=0.69].AA vs GG+GA基因型[OR=1.26,95％CI(0.81～1.96),P=0.31].结论 XRCC2 R188H基因多态性与大肠癌易感性无关,而进一步的验证则仍需要更大样本的多中心随机化对照试验进行研究.
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深圳2580例高危男性人乳头瘤状病毒基因型分析
目的 探讨深圳门诊高危男性患者人乳头瘤状病毒(HPV)感染的分布状况及基因型特点,为男性HPV感染的干预提供理论依据.方法 采用多重PCR结合反向斑点膜杂交的基因芯片技术对2012年3月～2014年6月在北京大学深圳医院收集的2 580例门诊疑似HPV感染的高危男性患者的生殖道脱落细胞进行23种HPV基因分型检测.结果 2580例样本中HPV阳性1 164例,阳性率为45.12％,其中低危型、高危型及高低危混合型感染的阳性率分别为51.03％(594/1 164),24.74％(288/1 164),24.23％(282/1 164).低危型以HPV6 (46.29％),HPV11 (25.31％),HPV43(18.77％)和HPV42(9.62％)为常见亚型;高危型以HPV16 (16.58％),HPV52 (12.59％),HPV33 (10.60％),HPV58(7.98％)和HPV56 (7.73％)为常见亚型.HPV感染以单一型感染为主(63.23％),二重及多重感染分别为10.48％和26.29％.年龄分层结果显示,不同年龄组HPV阳性率差异无统计学意义(x2=6.98,P＞0.05).结论 深圳市高危男性HPV感染率较高,HPV6,11,43,42为主要的低危亚型,HPV16,52,33,58,56为主要的高危亚型,感染以单一亚型为主.
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Titin抗体检测在重症肌无力并发胸腺瘤诊断中的价值
目的 探讨连结素(Titin)抗体检测在重症肌无力(MG)并发胸腺瘤患者诊断中的价值.方法 选取2013年1月～2014年11月石家庄市第一人民医院收治的MG患者56例,其中并发胸腺瘤患者(MGT) 36例,不伴胸腺瘤MG组(NTMG) 56例,其他疾病患者(OND)30例,健康对照组(HC)50例.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对重症肌无力患者、其他疾病患者和健康对照组进行Titin抗体检测并进行比较.结果 Titin抗体在MGT组、NTMG组、OND组和HC组的阳性率分别为88.9％,10.7％,6.7％和2.0％.MGT组的Titin抗体阳性率较NTMG组、OND组和HC组均显著升高(x2 =52.1,41.1,63.2,均P=0.000),而NTMG组、OND组和HC组间比较差异无统计学意义(x2 =0.051,P=0.821,x2=1.993,P=0.158).Titin抗体诊断MG并发胸腺瘤患者的敏感度为88.9％,特异度为89.3％.按照Osserman临床分型,Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ及Ⅳ型MG患者的Titin抗体阳性率分别为11.8％,47.6％,83.3％和100％.Titin抗体阳性率与MG患者临床分型具有统计学意义(x2=9.09,P=0.028).结论 Titin抗体是MG并发胸腺瘤特异和敏感的血清学诊断指标.Titin抗体阳性率越高,可提示重症肌无力患者病情越严重.
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HIV-1Tat对人脑内皮细胞MMP-9蛋白的影响及作用机制
目的 探讨HIV-1 Tat对人脑内皮细胞基质金属蛋白-9(MMP-9)的影响及作用机制.方法 按照Weksler's方法分离和处理人脑血管内皮细胞.小分子干扰RNA(siRNA)沉寂MMP-9,根据报告的序列设计MMP-9的特异性siRNA和Scramble Ⅱ对照,MMP-9的活性采用明胶酶谱法检测,进行内皮细胞渗透性检测.结果 实验结果显示,Tat增强MMP-9的表达和活性,siRNA靶向作用于MMP-9以减少可溶性闭锁蛋白的浓度,Tat可以使HBMECs渗透性显著增强.MMP-9干扰可以恢复Tat处理后细胞的完整性.结论 Tat可以抑制闭锁蛋白的表达,并通过增强MMP的表达和激活而间接破坏闭锁蛋白,使血脑屏障(BBB)渗透性增强.
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DNA微阵列芯片法检测遗传性耳聋基因
目的 应用基因芯片技术对临床散发性耳聋患者进行基因检测,评价在临床检测中的应用价值.方法 抽取患者静脉血,EDTA抗凝,在万级洁净间内进行DNA提取和PCR扩增杂交,对中国人常见的4个耳聋基因的9个突变位点进行检测.结果 24例患者中,共检出突变7例,阳性率为29.17％,检出GJB2基因突变4例(16.67％),其中176 del 16位点杂合突变型1例,235 del C位点纯合突变型1例,299 del AT位点杂合突变型2例.1例(4.17 ％)SLC26A4基因IVS7-2A＞G位点杂合突变型;2例(8.33％)线粒体12SrRNA基因1555A＞G位点均质突变型,未检出GJB3基因突变.结论 遗传性耳聋基因芯片技术可快速、高通量检出耳聋相关突变位点,满足临床耳聋基因检测需求.
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琼西地区精神分裂症患者血浆MiR-137,MiR-181b及MiR-132表达及其相关性研究
目的 探讨microRNA-137 (MiR-137),microRNA-181b (MiR-181b)及microRNA-132(MiR-132)表达水平在琼西地区精神分裂症患者抗精神病药物治疗过程的变化及相关性.方法 选取琼西地区386例精神分裂症患者(病例组)和106例健康体检者(对照组),采用实时荧光定量PCR检测两组血浆MiR-137,MiR-181b及MiR-132表达水平.在病例组中选阳性与阴性症状量表(PANSS)分＞70分的104例患者(观察组),于治疗前、治疗14天、治疗30天、治疗50天分别检测MiR-137,MiR-181b及MiR-132表达水平,并采用PANSS,大体评定量表(GAS)和病情严重程度量表(SI)对不同治疗阶段的临床症状及疗效进行评估.结果 与对照组比较,病例组MiR-181b及MiR-132表达水平显著上调(Z=-3.315,P=0.001;Z=-2.036,P=0.038).观察组治疗30天和50天血浆MiR-181b及MiR-132表达水平较治疗前及治疗14天显著下调(t=8.382～12.651,P＜0.05),且观察组治疗50天血浆MiR-181b及MiR-132表达水平较治疗30天显著下调(t-7.695～12.824,P＜0.05).随着治疗时间延长观察组患者PANSS评分及SI评分显著降低(t=8.711～10.273,P＜0.01),而随着治疗时间延长观察组患者GAS评分显著增高(t=7.523～12.861,P＜0.01).相关分析显示,与治疗30天比较,治疗50天病例组MiR-181b及MiR-132表达水平下调与GAS评分呈明显正相关(r=0.537,P＜0.05;r=0.492,P＜0.05);治疗50d与治疗前比较,病例组MiR-181b及MiR-132表达水平的下调与PANSS评分呈明显负相关(r=-0.503,P＜0.05;r=-0.516,P＜0.05).ROC曲线显示,MiR-181b的AUC是0.694(95％CI:0.527～0.875),敏感度和特异度为56.8％和78.3％;MiR-132的AUC是0.627(95％CI:0.474～0.788),敏感度和特异度分别为52.4％和71.9％.Logistic回归分析显示,MiR-181b具有显著相对危险度(OR=2.346,95％CI:1.363～4.145,P=0.026).结论 MiR-181b及MiR-132表达水平与精神分裂症发生和病情转归有一定的相关性,MiR-181b可作为预测精神分裂症发生的危险因素.
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PNPLA3基因多态性与非酒精性脂肪性肝病关系的初步探讨
目的 分析PNPLA3基因多态性与非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的关系,探讨PNPLA3 rs738409G突变基因携带者NAFLD发生的危险因素,为预防NAFLD的发生提供理论依据.方法 收集航天中心医院2012年～2013年体检者共617例,包括324例健康者和293例NAFLD患者.采用实时荧光定量PCR法检测所有研究对象的rs738409分型,并采用Oneway ANOVA比较不同基因型组之间年龄,性别,BMI,TG,CHOL,hs-CRP,ALT,AST,FPG,HbA1c,CEA,AFP和CA19-9差异有无统计学意义.采用单因素方差分析比较健康组和NAFLD组之间部分生化检测指标和肿瘤标志物的表达水平差异有无统计学意义.Logistic回归分析用于评估rs738409G携带者NAFLD发生的危险因素.结果 ALT (U/L)在CC,CG和GG基因型中的血清水平分别是17.8(12.9,25.3),20.00(14.40,27.65)和20.2(14.85,38.8),表达水平逐渐增高,差异均具有统计学意义(P值均＜0.05).AST(U/L)在CC,CG和GG基因型中的血清水平分别是20.3(17.6,24.5),20.70(17.95,25.20)和22.3(18.60,29.65),仅在CC组和GG组(P=0.000)、CG和GG组(P=0.004)之间的差异具有统计学意义(P值均＜0.05).年龄,性别,BMI,TG,CHOL,hs-CRP,FPG,HbA1c,CEA,AFP和CA19-9在不同基因型的表达差异无统计学意义(P值均＞0.05).BMI(Kg/m2),ALT (U/L),AST(U/L),TG(mmol/L),hs-CRP(mg/ml),FPG(mmo1/L)和HbA1c(％)在NAFLD患者组与健康对照组中的表达水平分别是[22.97±2.58 vs 26.74±2.35],[15.65(11.97,21.3) vs 24(17.55,35.4)],[19.8(17.3,23.5) vs 22(18.9,,27.35)],[0.99(0.75,1.40) vs 1.77(1.23,2.54)],[0.89(0.64,1.41) vs 1.43(0.96,2.51)],[4.88(4.61,5.21) vs 5.14(4.82,5.62)]和[5.50(5.3,5.7) vs 5.70(5.45,6.00)],差异均具有统计学意义(P值均＜0.05).Logistic回归分析结论显示,BMI,TG,ALT和HbA1c是rs738409G突变基因携带者NAFLD的危险因素,回归系数分别是0.707,2.968,2.765和21.301.结论 对于rs738409G突变基因健康携带者应该定期监测BMI,TG,ALT和HbA1c,预防NAFLD的发生.
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21株快速生长分枝杆菌的鉴定与特征
目的 对临床分离的21株快速生长分枝杆菌进行种型鉴定和特征分析.方法 对广东省中医院2010～2015年收集的21株快速生长分枝杆菌进行传统的表型形态学鉴定,16SrRNA基因和ropB基因测序鉴定和微量肉汤稀释法的药敏试验,结合光滑/粗糙型变异分析其菌型特征和耐药性.结果 21株分离株均为血平板上7天内生长良好的抗酸阳性菌,经16S rRNA基因和ropB基因测序鉴定均为分枝杆菌.根据生长的菌落特性,12株为光滑型,7株为粗糙型,2株为中间型.涂制湿片显示,12株光滑型分枝杆菌和2株中间型分枝杆菌均能在生理盐水表面形成一层漂浮的油脂(可能为分枝菌酸).药敏试验显示,快速生长分枝杆菌对阿米卡星、头孢西丁、克拉霉素的敏感性较好.统计学分析显示,粗糙型具有比光滑型菌株更高的耐药性.结论 快速生长分枝杆菌可分为光滑型、粗糙型和中间型3种菌落表型,其中油脂飘浮现象能用于中间型和光滑型分枝杆菌的快速鉴定.
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血清NGAL与Cr,BUN,RBP,Cys-C联合检测在糖尿病肾病早期诊断中的应用
目的 探讨血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)与肌酐(Cr)、尿素(BUN)、视黄醇结合蛋白(RBP)、胱抑素C(Cys-C)联合检测在糖尿病早期肾脏损害中的临床应用价值.方法 选择116例经临床确诊的糖尿病患者,将其分为单纯糖尿病组、糖尿病并发肾病组和糖尿病并发肾衰组,同时选择100例健康查体者作为对照组.采用日立7170A全自动生化分析仪对各组血清NGAL与Cr,BUN,RBP和Cys-C进行检测,其检测数据经统计学分析处理.结果 各组NGAL,Cr,BUN,RBP和Cys-C水平检测结果中,单纯糖尿病组与正常对照组之间差异无统计学意义(t=0.812～1.402,均P＞0.05);糖尿病并发肾病组NGAL,Cr,BUN,RBP和Cys-C水平均高于正常对照组、单纯糖尿病组,差异具有统计学意义(t=2.131～2.326,均P＜0.05);糖尿病并发肾病组和糖尿病并发肾衰组血清NGAL水平明显高于正常对照组、单纯糖尿病组,差异具有统计学意义(t=2.913～3.011,均P＜0.01).各组Cr,BUN,RBP和Cys-C检测异常率方面,糖尿病并发肾病组异常率分别为53.1％,62.5％,71.8％ 和81.3％,均显著高于正常对照组和单纯糖尿病组,差异有统计学意义(x2 =9.682～13.625,P＜0.01),但其幅度低于糖尿病并发肾病组的NGAL异常率(87.5％),特别是糖尿病并发肾病组Cr,BUN的异常率远低于NGAL的异常率(x2=12.322～13.253,均P＜0.01);糖尿病并发肾衰组的NGAL,Cr,BUN,RBP和Cys-C异常率略有差异,无统计学意义(P＞0.05).结论 血清NGAL的检测在糖尿病肾病早期诊断中具有重要的意义,特别是联合肾功其它指标的检测为临床诊断糖尿病早期肾脏损害以及损害的程度提供重要依据.
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围产期胎膜早破与生殖道病原菌感染的分析
目的 分析国产期发生胎膜早破与生殖道病原菌感染的关系.方法 依照病例定义选择2011年6月～2012年5月陕西省人民医院产科的正常孕妇112例和胎膜早破的孕妇108例,采集孕妇的阴道分泌物和宫颈分泌物用定量PCR检测解脲支原体(ureaplasma urealyticum,UU)、沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)、B族链球菌(group B streptococcus,GBS)、白色念珠菌(candida albicans,C.albicans)、淋病奈瑟菌(neisseria gonorrhoeae,NG)、单疱病毒Ⅰ(herps simple virus Ⅰ,HSV-Ⅰ)和单疱病毒Ⅱ(herps simple virusⅡ,HSV-Ⅱ)共7种病原菌,对研究数据用卡方检验和Fisher判别分析病原菌感染与胎膜早破的关系.结果 7种病原菌中UU,GBS和CT的感染在正常孕产妇组和胎膜早破孕产妇组之间的差异有统计学意义(x2 =3.644～6.093,P＜0.05),而C.albicans,NG,HSV-Ⅰ,HSV-Ⅱ的感染在二组间差异无统计学意义(x2=0.000～0.046,P＞ 0.05).同时阴道分泌物病原菌定量检测:UU≥105 copy/ml,CT≥103 copy/ml和GBS≥l0s copy/ml的含量在正常孕产妇和胎膜早破孕产妇之间的差异有统计学意义(x2 =0.278～7.015,P＜0.05).采用Fisher判别分析病原菌的分类正确性,对UU按照＜103 copy/ml,103～104 copy/ml,≥105 copy/ml分为三段;GBS按照＜10s copy/ml和≥103 copy/ml分为两段;CT按照＜103 copy/ml和≥103 copy/ml分为两段作散点图,投影显示UU,GBS和CT感染分类区分明显,说明病原菌感染的数量与胎膜早破的发生是密切相关的,为临床提供了判断感染的依据.结论 围产期发生胎膜早破与生殖道病原菌感染的数量有关,临床应结合病原菌的感染数量来评估其与胎膜早破发生的相关性.
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血浆和肽素水平与脑外伤患者病情严重程度相关性研究
目的 探讨血浆和肽素水平与脑外伤患者病情严重程度相关性及临床意义.方法 研究对象选取2010年4月～2014年10月收治脑外伤患者共81例,其中入院格拉斯哥昏迷评分(GCS)3～5分共27例,6～8分共29例,9～12分共25例,另选同期体检健康者30例,均行血浆和肽素水平检测;分析血浆和肽素水平与脑外伤患者GCS评分、预后关系,采用ROC曲线评估血浆和肽素水平对临床预后预测价值.结果 健康组血浆和肽素水平(0.94±0.17 ng/ml)均显著低于其他组(3.80±0.62 ng/ml,6.37±1.18 ng/ml,14.44±2.87 ng/ml),差异有统计学显著性意义(t=6.24,5.10,3.81,P＜0.05);根据相关性分析显示,脑外伤患者血浆和肽素水平与入院GCS评分呈负相关(r=-0.82,P＜0.05);植物人或死亡组患者和肽素水平(18.75±2.66 ng/ml)均显著高于其他组(9.34±1.51 ng/ml,7.23±1.18 ng/ml),差异有统计学显著性意义(t=6.13,5.25,P＜0.05);植物人或死亡组患者入院GCS评分(5.37±1.08)均显著低于其他组(7.62±1.53,9.43±1.85),差异有统计学显著性意义(t=2.56,2.31,P＜0.05);以30天内死亡作为研究重点,血浆和肽素水平AUC值为0.815(95％CI为0.723～0.902);分界值为8.3 ng/ml,预测敏感度为83.7％,预测特异度为67.2％.结论 血浆和肽素水平与脑外伤患者病情严重程度具有相关性,可用于临床预后检测.
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哮喘患儿外周血单个核细胞瘦素及Foxp3的表达
目的 探讨哮喘患儿瘦素及CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)特异性转录因子叉头状转录因子P3(Foxp3)在外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及意义.方法 选取2013年8月～2015年5月在沭阳县人民医院门诊及住院的28例哮喘患儿发作期(发作组),26例哮喘患儿缓解期(缓解组)及25例健康体检儿童(对照组),采用ELISA法检测各组血浆及PBMC培养上清液中的瘦素浓度,实时荧光定量PCR法测定PBMC中Foxp3的相对表达量,进行统计学分析.结果 发作组、缓解组和对照组三组血浆浓度(19.98±5.40 ng/ml,13.73±2.28 ng/ml,12.17±3.95 ng/ml)及PBMC培养上清液瘦素浓度(55.94±11.09 pg/ml,31.97±7.71 pg/ml,27.85±7.67 pg/ml)差异均有统计学意义(F=27.07,75.96,P均＜0.01);组间两两比较,发作组均高于缓解组与对照组(P均＜0.01),而缓解组与对照组差异无统计学意义(P＞0.05).发作组、缓解组和对照组三组PBMC Foxp3相对表达量(2.70±0.48,3.84±0.45,3.77±0.38)差异有统计学意义(F=57.35,P＜0.01);组间两两比较,发作组低于缓解组与对照组(P＜0.01),而缓解组与对照组差异无统计学意义(P＞0.05).发作组患儿PBMC培养上清液瘦素浓度与PBMC Foxp3相对表达量呈负相关(R=-0.730,P＜0.01),而血浆瘦素浓度与PBMC Foxp3相对表达量无明显相关性(R=-0.367,P=0.550).结论 哮喘患儿PBMC分泌瘦素增加,且分泌的瘦素抑制了Foxp3的表达.
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增强型Trop2-CD40L病毒样颗粒疫苗的制备、纯化及活性研究
目的 获得嵌合免疫增强佐剂CD40配体(CD40L)的Trop2-CD40L病毒样颗粒(VLPs)疫苗,为后续探究VLPs在肿瘤治疗中的免疫原性及免疫保护作用奠定基础.方法 通过重叠延伸PCR方法扩增以Trop2为靶点、嵌合免疫佐剂CD40L的Trop2-CD40L融合基因,构建杆状病毒表达载体pFastbaTM/Trop2-CD40L,并转化大肠埃希菌E.coli DH10bac,提取杆粒并经PCR鉴定成功命名为Trop2-CD40L Bacmid,后者转染Tn5昆虫细胞获得重组病毒Trop2-CD40L rBV,与Gag rBV共感染昆虫细胞制备重组病毒样颗粒,透析浓缩后蔗糖密度梯度离心纯化,Western Blot鉴定VLPs目的蛋白表达、电镜观察所制备VLPs形态,Cytokine ELISA方法检测Trop2-CD40L VLPs体外生物学活性.结果 成功扩增了Trop2-CD40L融合基因,通过杆状病毒表达系统、借助SIV Gag衣壳蛋白装配特点成功制备了增强型Trop2-CD40L病毒样颗粒,与Trop2 VLPs比较具有更好的生物学活性,差异具有统计学意义(t=7.266,,P＜0.05).结论 制备出具有一定生物学活性的增强型Trop2-CD40L病毒样颗粒,证实了CD40L作为免疫佐剂使用有免疫增强效应.
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双管单色荧光PCR法与基因芯片法检测CYP2C19基因多态性的比较研究
目的 建立快速检测CYP2C19*2和CYP2C19*3基因多态性的实验方法.方法 从样本库中选取100例血液样本.设计针对CYP2C19*2和CYP2C19*3基因多态性位点的特异性引物和taqman荧光探针,通过双管单色荧光PCR法检测基因型,与基因芯片法进行比较验证.结果 双管单色荧光PCR法能很好地鉴别CYP2C19*2和CYP2C19*3基因型,与基因芯片结果一致率为100％.结论 双管单色荧光PCR法能快速有效地进行CYP2C19*2和CYP2C19*3基因多态性分型,该方法期待用于临床实验室以指导个体化用药.
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血清NGAL与肾功其它指标联合检测在原发性高血压肾病早期诊断中的应用
目的 检测血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)浓度,探讨其与胱抑素C(Cys-C)、视黄醇结合蛋白(RBP)、尿素(BUN)和肌酐(Cr)联合测定在原发性高血压早期肾脏损害中的应用价值.方法 选择2014年8月～2016年3月于陕西省人民医院就诊并经确诊的128例原发性高血压患者,将其分为单纯原发性高血压组、原发性高血压并发肾病组和原发性高血压并发肾衰组,同时选择100例健康体检者作为对照组.采用日立7170A全自动生化分析仪对各组血清NGAL与Cys-C,RBP,BUN和Cr水平进行检测,其结果进行统计学分析.结果 各组血清NGAL,Cys-C,RBP,BUN和Cr的检测结果中,单纯原发性高血压组与正常对照组之间差异均无统计学意义(P均＞0.05);原发性高血压并发肾病组与正常对照组、单纯原发性高血压组比较差异均有统计学意义(P均＜0.05);原发性高血压并发肾病组和原发性高血压并发肾衰组血清NGAL与正常对照组、单纯原发性高血压组差异均有统计学意义(P均＜0.01);而原发性高血压并发肾病组NGAL与Cys-C之间差异无统计学意义(P＞0.05).各组NGAL,Cys-C,RBP,BUN和Cr检测异常率方面,原发性高血压并发肾病组均显著高于正常对照组和单纯原发性高血压组,差异有统计学意义(P均＜0.01),但BUN,Cr远低于原发性高血压并发肾病组NGAL的异常率(P＜0.01).而原发性高血压并发肾衰组的NGAL,Cys-C,RBP,BUN和Cr异常率略有差异,但差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 血清NGAL的检测在原发性高血压肾病早期诊断中具有重要的意义,如果联合肾功其它指标的检测可为临床诊断和评估原发性高血压早期肾脏损害以及损害的程度提供重要依据.
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miRNA-125a Taqman实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用
目的 建立一种用于肝癌早期诊断和监测的血清miRNA-125a Taqman实时荧光定量PCR检测方法.方法 采用Trizol法提取肝癌患者血清中总RNA,以肝癌发生具有代表性的miRNA-125a基因为检测序列,分别设计逆转录引物、扩增引物和Taqman探针;构建和制备miRNA-125a重组质粒标准品,建立血清miRNA-125a Taqman实时荧光定量PCR检测方法.结果 成功构建了miRNA-125a重组质粒载体,制备了miRNA-125a重组质粒标准品,建立了血清miRNA-125a Taqman实时荧光定量PCR扩增体系.经实验验证,所设计引物具有较好的特异性,引物的低检测限为78.125copies/μl;对17例肝癌患者血清miRNA-125a的检测结果在(1.45×102～3.52×105) copies/μl之间.结论 血清miRNA-125a Taqman实时荧光定量PCR检测方法的建立,为原发性肝癌早期诊断和监测提供一种新的分子诊断定量方法.
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紧密连接蛋白Claudin-4在子宫内膜异位症组织中的表达
目的 探讨紧密连接蛋白Claudin-4在子宫内膜异位症(内异症)在位、异位内膜与正常内膜中的表达,及其在内异症发病中的作用.方法 采用RT-PCR的方法检测35例卵巢子宫内膜异位囊肿患者的在位、异位内膜组织中紧密连接蛋白Claudin-4 mRNA的表达,并与30例正常对照子宫内膜比较.结果 ①Claudin-4 mRNA在在位、异位及对照组织中表达量分别为12.38±6.12,4.59±1.35和13.05±6.48.异位内膜组织中Claudin-4 mRNA的表达量低于在位和对照组内膜组织,差异有统计学意义(P＜0.01).在位与对照内膜组织比较,Claudin-4mRNA的表达量差异无统计学意义(P＞0.05).②在异位内膜组织中,Ⅰ,Ⅱ期患者的Claudin-4 mRNA的表达量(6.74±1.92)较Ⅲ,Ⅳ期患者(3.82±1.01)明显升高,差异也有统计学意义(P＜0.01).③在位与对照内膜组织中,增生期Claudin-4 mRNA的表达量(14.01±7.02)较分泌期(11.14±5.48)明显升高,差异也有统计学意义(P＜0.05);异位组内膜组织中,增生期与分泌期Claudin-4 mRNA的表达量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Claudin-4在异位内膜中低表达可能与子宫内膜异位症的发生发展有关.
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盐酸克伦特罗生物素化单链抗体在大肠埃希氏菌中的表达
目的 提取盐酸克伦特罗(CLB)生物素化抗体片段蛋白进行表达,为下一步纯化及农兽药品快速检测奠定基础.方法 确定一株生物素化CLB噬菌体抗体“pHEN1-BHNS-CLB1”对其进行蛋白表达,即从噬菌粒“PHEN1-BHNS-CLB1”切下seFv基因片段,亚克隆至能引导可溶性表达的载体pCANTAB5E上,完成了重组质粒的构建,将所构质粒转化大肠埃希氏菌感受态细胞BL21.命名“5E-BHNS-CLB1”,并对“5E-BHNS-CLB1”进行PCR及酶切鉴定后,测序分析.结果 ELISA结果证明其具有较好的亲和性,竞争抑制ELISA、与gp120蛋白及三聚氰胺的交叉反应ELISA结果均证明其具有很好的特异性,片段大小与预想目的片段大小一致,SDS-PAGE及Western blotting的结果显示,其分子量大小与目的一致,并能与抗E-tag标签抗体结合显色.结论 说明表达的蛋白能与表达载体5E后带有E-Tag标签的短肽作用,含有E-Tag标签,是我们要表达的目的蛋白,为下一步纯化蛋白创造了条件.
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胱抑素C及其eGFR方程在诊断肝硬化患者肾损害中的应用
目的 探讨血清胱抑素C(cystatin C,CysC)及其估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)方程在肝硬化患者肾功能损害中的诊断价值.方法 随机抽取2012年8月～2014年12月间来绵阳市中心医院就诊的肝硬化患者465例,检测其血清肌酐(serum creatinine,SCr)和CysC水平,并采用适用于中国人群的方程计算其相应的eGFR,即eGFRSCr和eGFRCysC.继而用ROC曲线分析此四个标志物对肝硬化患者继发肾功能损害的诊断性能,并与SCr和CysC参考值上限(upper reference limit,UPL)及eGFR医学决定水平(medicine decide level,MDL)作为判断界点进行比较.结果 SCr(男/女),CysC,eGFRSCr和eGFRCysC对肝硬化患者肾功能损害的佳判断线分别是76.8 μmol/L(男),62.6 μmol/L(女),1.24 mg/L,109.9 ml/min/1.73m2和63.4 ml/min/1.73 m2;ROC曲线分析显示,CysC及其eGFRCysC的AUC均高于SCr及其eGFRSCr的AUC(z=3.660～5.387,P＜0.001);比较四者在佳判断线和UPL/MDL两个判断界点间的诊断性能,在肝硬化及其Child-Pugh分级患者各组中,仅eGFRCysC的敏感度、误诊率和临床诊断一致性均相接近(除误诊率外,P＞0.05).结论 eGFRCysC对肝硬化患者继发肾功能损害的诊断性能优于CysC,SCr和eGFRSCr.但因其并非实测,故各实验室应建立自己的佳判断线.临床医生应用eGFR评价受试者肾功能,而非局限于其分析物浓度.
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噬血细胞综合征(HPS)的早期鉴别诊断和实验室结果分析
目的 分析儿童骨髓噬血细胞现象的病因和临床特点,为噬血细胞综合征(HPS)的早期诊断和鉴别诊断提供依据.方法 收集73例骨髓片存在噬血现象患儿的临床资料,根据是否达到噬血细胞综合征的诊断标准进一步分为HPS组和非HPS组,分析两组患儿的病因、诊断、临床特点、血常规、生化、血脂、凝血、铁蛋白及NK细胞,并进行统计学分析.结果 ①所有HPS患儿起病时均有发热,占100％;28例非HPS患儿存在发热,占所有非HPS患儿的71.79％;两组患儿发热率比较,差异具有统计学意义(x2 =4.62,P＜0.05).②HPS组患儿二系减少,高三酰甘油、低纤维蛋白原、高铁蛋白和低NK细胞发生率显著高于非HPS组,差异具有统计学意义(x2=3.51～6.36,P＜0.05).③HPS组白细胞总数、中性粒细胞、红细胞、血红蛋白和血小板均显著低于非HPS组,差异具有统计学意义(t值=3.01～5.62,P＜0.05).④在病因分析上,HPS和非HPS均以感染性疾病居多,非HPS还可见川崎病、全身性幼年类风湿关节炎等疾病.结论 儿童骨髓中出现噬血现象,并非仅见于HPS,需根据临床症状和检验结果综合评价.
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IL-18基因启动子区-137G/C,-607G/T2个位点基因多态性与女性乳腺癌易感性Meta分析
目的 用Meta分析的方法综合评价IL-18基因启动子区-137G/C,-607G/T 2个位点基因多态性与女性散发性乳腺癌易感性间的关联性.方法 检索万方数据库Wanfang Data,中国学术期刊数据库CNKI,美国国立医学图书馆PUBMED及荷兰医学文摘EMBASE数据库,搜索有关IL-18基因启动子区多态性与乳腺癌易感性的所有中文或英文期刊文献,并检索纳入文献的参考文献以防漏检,各数据库检索时限均为自建库始至2015年1月1日止.采用RevMan5.1软件进行不同文献间比值比OR值的合并分析,SAS9.4软件进行Kruskal-Wallis检验,对研究间各研究组组内数据进行纵向分析.结果 初检获得相关文献共计91篇,英文74篇,中文17篇.经筛选终仅有3篇研究符合要求,共涉及6个研究组893人,包括乳腺癌组476例,健康对照组417例,各研究组人群均符合Hardy-Weinberg遗传平衡.Meta分析结果显示:①-607位点的基因型CC会降低乳腺癌的发病风险,合并后的OR值及95 ％CI分别为0.75和(0.56,1.00),总体效应量检验Z=1.97 (P=0.05);Kruskal-Wallis检验显示-607位点和-137位点的乳腺癌组组间比较的检验结果和健康对照组组间比较的检验结果卡方值及P值分别为x2=11.809 2,P=0.002 7;x2=2.589 3,P=0.274 0和x2=7.293 6,P=0.006 9;x2 =0.005 8,P=0.939 5.结论 ①-607位点仅基因型CC与乳腺癌易感性相关联,是乳腺癌发生的保护因素,但等位基因与乳腺癌无关.②研究间结果的异质性主要来源于乳腺癌组.
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冠心病并发恶性肿瘤患者Ghrelin/obestatin比值变化及意义
目的 探讨冠心病并发恶性肿瘤患者胃饥饿素(Ghrelin)/肥胖抑制素(obestatin)比值变化及临床意义.方法 收集冠心病患者114例作为研究对象,根据是否并发恶性肿瘤分为冠心病肿瘤组(n=45)和单纯冠心病组(n=69),选择同期健康志愿者50例作为对照组.采用ELISA法测定血清Ghrelin,obestatin水平.根据冠脉造影结果采用Gensini积分评估冠脉病变程度.结果 冠心病肿瘤组、单纯冠心病组患者的Ghrelin/obestatin比值(15.1±4.8,28.3±5.4)显著低于对照组(53.4±9.3),差异均有统计学意义(t=8.537,5.736,P＜0.01).冠心病肿瘤组患者的Ghrelin/obestatin比值与Gensini积分呈负相关(r=-0.61,P＜0.01).结论 冠心病并发恶性肿瘤患者的Ghrelin/obestatin比值与冠状动脉病变程度密切相关.Ghrelin/obestatin比值在预测冠心病并发恶性肿瘤中有一定的辅助参考价值.
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联合检测三种生化指标对糖尿病肾病早期诊断的临床价值分析
目的 探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)、胱抑素C(CysC)和尿微量清蛋白(U-mALB)三种生化指标联合检测在糖尿病肾病(DN)早期诊断中的临床价值.方法 根据24 h尿微量清蛋白的定量检测结果将198例2型糖尿病患者分为三组:A组为单纯糖尿病组(n=65),B组为早期糖尿病肾病组(n=68),C组为临床糖尿病肾病组(n=65),分别对这三组患者进行血清Hcy,CysC和24 h U-mALB含量检测,并与50例健康对照组结果进行比较.结果 B组Hcy,CysC和U-mALB水平分别为18.62±3.63 μmol/L,2.89±0.54 mg/L和198.33±52.69 mg/24 h;C组分别为23.15±4.16 μmol/L,5.23±1.35 mg/L和383.23±109.52mg/24 h,均高于对照组和A组,差异有统计学意义(P＜0.05);C组Hcy,CysC和U-mALB水平均高于B组,差异有统计学意义(P＜0.05);C组和B组的异常率明显高于A组和对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),且异常率随患者肾损害程度的加重而升高.以单一指标异常作为诊断标准,Hcy,CysC和U-mALB对糖尿病肾损害的异常率分别为72.06％,76.47％和80.88％,三种指标联合检测异常率为95.64％,明显高于单项检测(P＜0.05).结论 联合检测CysC,Hcy和U-mALB三种生化指标对于糖尿病肾病早期诊断、治疗及预后监测具有重要的临床价值.
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原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞中Tim-1表达增高及其意义
目的 检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血Tim-1,IFN-γ和IL-4的表达水平,分析其相关性,初步探讨Tim-1在PBC诊治中的临床意义.方法 收集2013年6月～2015年11月来长海医院就诊的32例PBC患者和32例同期就诊的健康成人的外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)法检测PBMC中Tim-1 mRNA,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血浆中Tim-1蛋白表达量,对Tim-1和IFN-γ,IL-4之间的关系进行Pearson相关性分析.结果 患者组和对照组Tim-1 mRNA分别为0.63±0.40和0.36±0.32,差异具有统计学意义(t=3.005,P=0.003,P＜0.01).患者组与对照组Tim-1蛋白表达水平分别为62.72±38.60和35.66±30.55 pg/ml(t=3.11,P=0.002 8),IFN-γ表达水平分别为200.81±18.06和79.23±20.02 pg/ml(t=25.51,P＜0.000 1),IL-4表达水平分别为99.22±14.67和30.18±20.56 pg/ml,差异均具有统计学意义(t=15.46,P＜0.000 1).Pearson相关分析结果提示Tim-1与IFN-γ呈负相关(r=-0.552,P=0.001 1),与IL-4呈正相关(r=0.652,P＜0.000 1).结论 Tim-1可能参与了PBC的发病机制,是该病潜在的标志物和治疗靶点.
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乙肝病毒血清标志物、外周血T淋巴细胞HBV-DNA的相关性分析
目的 探讨乙肝病毒血清标志物、外周血T淋巴细胞与HBV-DNA的相关性.方法 273例乙肝患者采用ELISA法测定乙肝血清标志物HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb和HBcAb,采用流式细胞术测定T淋巴细胞亚群CD3+,CD4+和CD8+,并采用荧光定量PCR法测定HBV-DNA,比较不同血清标志物模式间HBV-DNA阳性表达情况,并分析其相关性.结果 HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)组的HBV-DNA阳性率高,为88.9％,HBV-DNA高浓度组CD3+ CD4+细胞百分比及CD3+ CD4+/CD3+ CD8+比值低于HBV-DNA阴性组(P＜0.05),CD3+ CD8+细胞百分比高于HBV-DNA阴性组(P＜0.05);HBV-DNA拷贝数与CD3+ CD8+细胞百分比及HBeAg(r2=0.550,0.657,P＜0.01)呈正相关,与CD3+ CD4+细胞百分比(r2=-0.602,P＜0.05),HBeAb(r2=-0.473,P＜0.01),HBcAb(r2=-0.151,P＜0.05)呈负相关.结论 HBV-DNA与T淋巴细胞及HBeAg检测相关性较好,联合检测乙肝血清标志物、外周血T淋巴细胞及HBV-DNA能提高乙肝的检出率,有助于全面监测乙肝病情及评价药物疗效.
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乙型肝炎病毒逆转录酶基因突变的临床意义
目的 分析服用核苷酸类似物的乙肝患者逆转录酶(RT)基因突变模式及其与生化指标的相关性,探讨该基因突变的临床意义.方法 采用半巢式PCR对634例来自武汉地区的乙肝病毒感染者血浆HBV进行扩增后,Sanger测序法进行基因序列分析;将RT基因突变组与野生组和各表型突变组中患者的谷氨酸氨基转移酶(ALT)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)和HBV DNA阳性率作比较.结果 在测序成功的622例患者中,144例(23.15％)发生RT基因突变.他们在11个位点(rtM204,rtL180,rtA181,rtN236,rtV173,rtL80,rtM250,rtS202,rtV207,rtV214和rtV84)出现碱基突变.在突变组中,患者的ALT,HBeAg和HBV DNA阳性率显著高于非突变组(P＜0.05).表型分析显示:拉米夫定(LAM)耐药常检测到,占52.78％,其次为阿德福伟(ADV)耐药占27.78％和恩替卡韦(ETV)耐药占6.94％,多重耐药LAM+ ADV于18例患者中检出12.5％.多重耐药组患者ALT,HBeAg和HBV DNA阳性率高于其他耐药组(P＜0.05);ADV耐药组患者ALT,HBeAg和HBV DNA阳性率高于LAM,ETV耐药组.结论 HBV RT区域的突变形式与血清学指标ALT,HBeAg和HBV DNA阳性状态有显著关联,该基因的突变形式可用作患者临床表现的指示指标.
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用BacLink2给Whonet转化导入细菌检测数据
BacLink2是微生物实验室常用于细菌数据转化导入的专用工具,它可把不同品牌微生物鉴定药敏仪传到LIS中的不同数据格式的细菌检测数据转化导入到Whonet中生成dBASE格式的数据文件,便于微生物实验室细菌检测数据在Whonet中统一管理使用.在国外,微生物实验室一般都使用BacLink2给Whonet转化导入细菌检测数据,而目前国内的微生物实验室因对BacLink2使用不熟练或不会使用,许多微生物实验室多采用纯手工输入的方法给Whonet输入细菌检测数据,该文介绍并推广BacLink2在微生物实验室的使用方法,可帮助微生物实验室工作人员把细菌检测数据自动、快速、准确、完整地导入到Whonet中,可显著提高细菌检测数据的收集、整理、汇总、统计、分析工作效率和准确性.
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选择性5-羟色胺再摄取抑制剂艾司西肽普兰对血小板功能的影响
目的 观察选择性5-羟色胺再摄取抑制剂艾司西肽普兰对血小板功能的影响.方法 选取抑郁症患者61例,随机分为治疗组(艾司西酞普兰10 mg/日)和安慰剂对照组,测定治疗前后的血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、血小板聚集率(PAR)、血小板膜糖蛋白CD62P和CD63表达.结果 治疗组在治疗前后的PLT(109/L),MPV(fl),PDW(fl),PAR(％),CD62P(％)和CD63(％)分别为175.8±59.1 vs 169.1±60.5,11.8±1.2 vs 10.3±0.9,15.6±2.1 vs 16.7±1.9,60.1±11.5vs59.3±14.9,23.8±5.6 vs 25.1±3.7,20.6±7.2 vs 22.4±4.7,对照组在治疗前后的PLT(109/L),MPV(fl),PDW(fl),PAR(％),CD62P(％)和CD63(％)分别为198.6±76.5 vs 203.2±49.8,9.4±1.1 vs 10.2±0.8,12.5±1.8 vs 13.3±2.9,62.7±13.6 vs 66.4±10.7,27.9±7.1 vs24.8±4.9,26.9±8.1 vs 24.1±6.4,差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 艾司西肽普兰对血小板功能无明显影响.
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不同预处理方法对提取尿液脱落细胞mRNA质量的影响
目的 探索合适的处理尿标本的方法获得尿脱落细胞mRNA.方法 比较尿液容量、尿液标本冻存时间、处理方式对提取尿液脱落细胞RNA的产量与质量的影响,并进行qPCR的试验.结果40 ml尿液标本组及10 ml尿液标本组RNA总量均值分别为886.94±222.93 ng及211.22±62.01 ng,两组A2s0nm/A280nm比值分别为1.80±0.10和1.77±0.09;尿液标本量与RNA总量相关(f=3.604,P=0.002),不同尿液标本量RNA质量差异无统计学意义(t=0.708,P值＞0.05).实时离心提取及冰冻保存尿液7天后提取两种预处理方法RNA总量分别为886.94±945.84 ng及881.50±829.02 ng,A260nm/A280nm比值分别为1.80±0.10及1.80±0.87;RNA总量与A260nm/A280nm.比值差异无统计学意义(t=-0.221～0.085,P值均＞0.05).直接冰冻尿液标本与TRIzol保存沉渣细胞两种预处理方法RNA总量分别为637.81±525.24 ng及639.86±535.42 ng,A260nm/A280nm比值分别为1.84±0.13及1.83±0.96;RNA总量与A260nm/A280nm=比值差异无统计学意义(t=-0.47～0.293,P值均＞0.05).尿脱落细胞mRNA中可以检测到足细胞的标记蛋白WT-1,podocin和synaptopodin的基因表达.结论 尿液标本量是提取脱落细胞RNA量的关键因素,-80℃低温冻存尿标本7天或Trizol预处理冻存均对提取尿液沉渣细胞RNA数量和质量无影响.
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孕妇血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C参考范围的研究
目的 建立孕妇妊娠早、中、晚期的血清半胱氨酸蛋白酶抑制物C(Cys C)参考范围.方法 采用免疫浊度法分析测定200例对照组女性(20～35岁),249例正常孕妇(20～35岁)妊娠早、中、晚期血清Cys C水平,并对数据进行统计学分析.结果 对照组、妊娠早期、中期、晚期四组Cys C参考范围分别为0.46～0.95,0.45～0.85,0.52～0.90和0.75～1.48mg/L,各组中位水平分别为0.56,0.58,0.62和0.9 mg/L,早期组、中期组与对照组中位水平,差异无统计学显著性意义(q=2.565,2.246,均P＞0.05),对照组、早期、中期与晚期差异具有统计学显著性意义(q=5.346,6.070,5.766,均P＜0.05).结论 妊娠晚期血清Cys C水平升高,孕妇血清Cys C参考范围应按照妊娠时间划分,有利于提高其临床价值和诊断的正确性.
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VITEK2 Compact全自动微生物分析仪对黏液型和非黏液型铜绿假单胞菌药敏检测评价
目的 评价VITEK2 Compact全自动微生物分析仪对黏液型和非黏液型铜绿假单胞菌药敏检测结果的准确性.方法 对某院分离的29株黏液型铜绿假单胞菌和30株非黏液型铜绿假单胞菌同时以VITEK2 Compact分析仪法及琼脂稀释法进行药物敏感性试验,以琼脂稀释法为参考方法进行统计学分析.结果 黏液型铜绿假单胞菌VITEK2 Compact分析仪法药敏结果的标准符合率(CA)为84.69％,严重错误率(VME)为3.20％,重大错误率(ME)为2.13％,一般错误率(MIE)为9.96％;非黏液型铜绿假单胞菌VITEK2 Compact分析仪法药敏结果的标准符合率(CA)为94.33％,严重错误率(VME)为0.67％,重大错误率(ME)为1.67％,一般错误率(MIE)为3.33％.两种铜绿假单胞菌VITEK2 Compact分析仪法药敏结果的VME,MIE,CA相比较,差异有统计学意义(x2=5.02,10.44,14.55,P＜0.05).黏液型铜绿假单胞菌VITEK2 Compact分析仪法药敏结果的CA比非黏液型铜绿假单胞菌低,且＜90％,而VME,MIE均比非黏液型铜绿假单胞菌高.结论 VITEK2 Compact全自动微生物分析仪对非黏液型铜绿假单胞菌药敏检测结果准确可靠,对黏液型铜绿假单胞菌药敏检测结果准确性较低,黏液型铜绿假单胞菌建议用其它方法做药物敏感性试验.
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腰围与体重指数对无偿献血者脂肪血的预测价值
目的 通过研究脂肪血与腰围、体重指数的关联,探索减少脂肪血采集的方法.方法 召回献血者249人,其中不同程度的脂肪血献血者161人作为观察组,随机抽取非脂肪血的献血者88人作为对照组.测量献血者身高、腰围、餐后血脂的浓度,让献血者填写问卷.结果 男性,有吸烟、喝酒习惯及药物史的献血者更倾向于出现脂肪血;观察组中,献血者的体重指数(BMI)和腰围(WC)大于对照组,总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);BMI、腰围与餐后TG呈正相关(r=0.471,P＜0.05;r=0.273,P＜0.05);经ROC曲线分析,BMI预测脂肪血的佳截点为25.92,ROC曲线下面积为0.769(95％CI:0.709～0.830,P＜0.05),WC在预测脂肪血的佳截点为91.50cm,ROC曲线下面积为0.811(95％CI:0.756～0.867,P＜0.05).结论 BMI,WC在无偿献血初筛中的应用能减少脂肪血的采集.
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昆明地区儿童脑脊液细菌培养阳性结果分析
目的 监测近年来昆明地区儿童细菌性脑膜炎(BM)病原菌分布特点.方法 对在2012年7月～2015年6月间,昆明医科大学附属儿童医院脑脊液细菌培养阳性结果进行统计,并结合患者的出院诊断及其它实验室相关检测资料进行回顾性分析.结果 4 627例合格的脑脊液培养标本中,阳性标本共计97例,阳性率为2.1％(97/4 627),其中首次检出细菌为91株(含污染菌17株).前三位的病原菌依次为大肠埃希菌23株(31.1％)、肺炎链球菌15株(20.3％)和无乳链球菌7株(9.5％),三者共占检出病原菌的60.8％(45/74).结论 大肠埃希菌、肺炎链球菌是主要病原菌.实验室应加强污染菌的鉴别以提高临床微生物学实验室服务质量.
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血清25-(OH)D3与尿微量蛋白系列在糖尿病肾病中的联合应用
目的 探讨血清25-羟维生素D3[25-(OH)D3]与尿微量蛋白系列的联合应用对糖尿病肾病(DN)早期诊断的价值.方法 选取271例2型糖尿病患者,按照尿微量清蛋白(MA1b)/肌酐(Cr)比值进行分组,另选取60例对照,比较各组25-(OH)D3与尿微量蛋白系列的差异,对不同检测指标单独及联合应用检测糖尿病肾病进行ROC曲线分析.结果 在糖尿病肾病患者中,25-羟维生素D3及尿微量蛋白系列与对照组比较差异有统计学意义(F=22.04,x2=71.54～202.21,P＜0.05).联合血清25-(OH)D3及尿微量蛋白三项指标与单一使用尿MA1b相比可以显著提高糖尿病肾病早期检测敏感度(x2 =3.892,P=0.049),敏感度高速94.2％.结论 血清25-(OH)D3及尿微量蛋白系列的联合应用可以显著提高糖尿病肾病早期检测的敏感度.
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慢性乙型肝炎患者血清胱抑素C水平与其肝损伤程度的关系
目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清胱抑素C(CysC)水平与其肝损伤程度的关系.方法 选择2014年1月～12月间铜陵市立医院收治的CHB患者65例,依据CHB临床分度标准将其分为重度组22例、中度组19例、轻度组24例,另选择同期体检健康者26例作为健康对照组,采用免疫比浊法检测血清CysC,同时检测尿素(Urea)、血肌酐(SCr)、总胆红素(TBil)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和γ谷氨酰转肽酶(γ-GT),并根据性别、年龄、SCr按公式计算肾小球滤过率(eGFR),比较各组CysC,Urea,SCr和eGFR,并分析CHB患者血清CysC与TBil,ALT,AST和γ-GT的相关性.结果 CHB重度组、CHB中度组、CHB轻度组及健康对照组血清CysC水平依次为1.35±0.23,1.18±0.24,1.02±0.20和0.75±0.18 mg/L;CHB各临床分度组血清CysC水平均高于健康对照组,差异均有统计学意义(t=5.587～10.852,均P＜0.01);血清CysC水平CHB重度组高于CHB中度组,CHB中度组又高于CHB轻度组,差异均有统计学意义(t分别为2.331,2.323,均P＜0.05);组间Urea,SCr,eGFR差异均无统计学意义(F=0.288～0.383,均P＞0.05).CHB患者血清CysC与TBil,ALT,AST,γ-GT均呈正相关(r=0.246～0.293,均P＜0.05).结论 血清CysC水平与CHB肝损伤程度有关,其可作为观察CHB患者肝损伤程度的指标.
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NLR与缺血性脑卒中患者预后关系研究
目的 探讨缺血性脑卒中患者中性粒细胞与淋巴细胞比例(NLR)与脑卒中的发生及预后的相关性.方法 选取2012年1月～2014年8月在长海医院住院就诊并首次确诊为缺血性脑卒中的患者208例,通过出院mRS评分标准将其分为:0～2分组179例,3～6分组29例.测定患者血清中血常规、尿酸、凝血等指标,研究这些指标与卒中预后的相关性.结果 mRS分型中NLR在3～6分组(3.69±3.02)中明显高于0～2分组(2.42±1.21),差异均有统计学意义(P=0.037);不同脑卒中分型OCSP分型之间NLR存在差异(P=0.02),而TOAST各分型之间NLR的值无差异(P=0.489);NLR与mRS分型之间存在正相关,差异具有统计学意义(P＜0.01);ROC曲线:NLR曲线下面积大为0.690,cut-off值为2.384,灵敏度76％,特异度57％.结论 NLR可以区分OCSP分型中后循环性梗死与其他梗死类型,是一种缺血性脑卒中预后的预测因子.
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心功能不全透析患者检测纤维蛋白单体的临床意义
目的 探讨血液透析患者检测纤维蛋白单体的临床意义.方法 血液透析患者按活动性分级为Ⅰ～Ⅱ级22例,Ⅲ～Ⅳ级38例.对不同心功能级的血液透析患者及正常对照组进行血浆凝血酶原时间(PT),活化的部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fg)、D-二聚体(D-dimer)和纤维蛋白单体(FM)定量检测并进行统计学分析.结果 血液透析患者心功能Ⅰ～Ⅱ级组和Ⅲ～Ⅳ级组分别与对照组比较TT,PT,APTT和Fg水平差异无统计学意义(t=0.33～0.58,均P＞0.05),D-二聚体和FM水平差异有统计学意义(t=6.15～7.45,t=8.41～11.65,均P＜0.05).心功能Ⅲ～Ⅳ级组D-二-聚体水平比心功能Ⅰ～Ⅱ级组高,但两组差异无统计学意义(t=0.38,P＞0.05).FM水平差异有统计学意义(t=12.35,P＜0.05).结论 FM是透析患者心功能不全早期诊疗的敏感指标.
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基于西格玛度量优化临床检验风险分析质量控制计划
六西格玛(6σ)是一种允许对过程性能进行客观评估的技术,可用d度量量化分析检测过程的性能和风险.EP23A为实验室提供了可选择的多种风险评估技术,以设计个性化的质量控制计划.方法决定图是区分σ性能的工具,使用方法性能数据产生可接受性的直观评估,而操作规范图是基于d性能确定试验所要求质量控制的直观工具.故障模式和效应分析(FMEA)是风险评估中常用的一种技术,可用于观察医疗实施过程中的关键弱点.合理使用6σ质量控制设计工具能促进FMEA,风险评估过程和QC计划的设计.
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2014版欧洲梅毒管理指南(实验室诊断部分)
2014版欧洲梅毒管理指南是对2008版指南的更新.与其他指南相比,欧洲指南对实验室检测做出了详细且独到的解释,值得国内临床实验室在进行梅毒螺旋体检测和诊断时进行借鉴和参考.
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西格玛性能验证图在常规化学检测项目性能评价中的应用
目的 用西格玛性能验证图评价某实验室常规化学检测项目的性能.方法 选择某一家既参加了全国常规生化室间质量评价计划又上报了常规生化室内质量控制数据的实验室,将实验室的常规化学检测项目的室内质控累积变异系数作为不精密度的估计值,将该实验室在室间质评计划中的百分差值作为该实验室的偏倚估计,采用国家标准GB/T20470-2006和卫生行业标准WS/T 403-2012的允许总误差作为质量规范,用专业软件绘制该实验室常规化学所有项目的西格玛性能验证图.结果 当使用国家标准时,只有钾、钠、血糖、尿素和三酰甘油5个项目σ＜3,钙、磷、清蛋白、总蛋白、丙氨酸氨基转移酶和铁6个项目3≤σ＜4,氯和肌酐4≤σ＜5,总胆固醇、天门冬氨酸氨基转移酶、肌酸激酶和镁5≤σ＜6,σ≥6的项目有尿酸、总胆红素、碱性磷酸酶、淀粉酶、乳酸脱氢酶和γ-谷氨酰基转移酶6项;当使用卫生行业标准时,有钾、钠、钙、磷、血糖、尿素、总蛋白、清蛋白、三酰甘油、丙氨酸氨基转移酶、肌酸激酶、乳酸脱氢酶和铁13项的σ＜3,σ≥6的项目仅有淀粉酶.该实验室常规化学项目的检测性能有待提高.结论 西格玛性能验证图可以直观地展示允许总误差不相同的多个不同检测项目的检测性能水平.
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ceRNA与肿瘤
长链非编码RNA(LncRNA)、微小RNA(miRNA)、mRNA及假基因是竞争性内源RNA(ceRNA)理论的重要组成部分.LncRNA和miRNA都属于非编码RNA的范畴,不具备蛋白编码能力,不能翻译为蛋白质.LncRNA是一类转录本长度＞200个核苷酸的RNA分子,可在表现遗传、转录或转录后调控等多种方式在生物体内发挥重要作用.MicroRNA长约22个核苷酸,可与靶mRNA3UTR区互补结合,抑制靶mRNA的翻译或降解mRNA.mRNA具有蛋白编码能力,且大多数mRNA中分布大量的microRNA反应元件(MRE).假基因拥有与编码基因高度同源的基因序列,与亲代编码基因相同或相似的MREs,但失去了编码蛋白质的能力.LncRNA,mRNA,假基因及miRNA可通过MREs进行相互作用,各类型RNA之间通过竞争MREs构成一个庞大的ceRNA调控网络,在肿瘤的发生发展中发挥重要作用.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
