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人骨髓间充质干细胞分化神经元样细胞转录GABA受体mRNA
近年来,在干细胞向神经细胞分化的研究中,关于分化神经细胞的递质及受体的报道很少.γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyrie acid,GABA)是脑内一种重要的抑制性氨基酸类神经递质.本实验用二甲亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)和3,4一二羟基苯甲醚(butylated hydroxylanisole,BHA)诱导人骨髓间充质干细胞(human mesenehymal stem cells,hMSCs)分化并检测诱导前后hMSCs上GABA受体mRNA的表达情况,以进一步探讨hMSCs体外分化为神经细胞的机制和基本功能.
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胚胎干细胞向神经细胞定向诱导分化的研究
目的探讨由胚胎干细胞向神经细胞方向分化的佳条件.方法从小鼠胚泡内细胞团中获取胚胎干细胞进行体外培养,向培养液中分别加入维甲酸、大脑皮层细胞条件培养液+维甲酸、β-巯基乙醇+维甲酸+大脑皮层细胞条件培养液,通过形态学观察和神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫细胞化学染色对分化细胞进行鉴定.结果用维甲酸、β-巯基乙醇和大脑皮层细胞条件培养液联合诱导胚胎干细胞,可使70%以上的胚胎干细胞分化为NSE免疫阳性的神经细胞.结论维甲酸、β-巯基乙醇和大脑皮层细胞条件培养液联合应用对胚胎干细胞的诱导分化有明显的互补和协同作用.
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小鼠诱导性多能干细胞的神经细胞分化与突触连接的建立及其功能分析
目的 探讨小鼠诱导性多能干细胞(iPSCs)在体外某些因素的诱导下能否分化成功能性的神经细胞,以及神经细胞之间突触的发生与建立.方法 首先将iPSCs悬浮培养形成拟胚体,利用维甲酸(RA)将其诱导分化成神经前体细胞,后撤去RA贴壁培养,利用免疫荧光染色技术观察小鼠iPSCs在体外分化成神经细胞以及神经细胞之间突触发生的形态特征,利用FM1-43染色技术分析突触末端的功能活性.结果 小鼠iPSCs能够在RA的诱导下向神经细胞分化,这些神经细胞可以被成熟神经元与胶质细胞标记物标记,新分化的神经元还可以观察到树突棘及突触连接的形成,在去极化刺激下突触活动增强,表现为轴突末端大量FM1-43阳性内吞颗粒.结论 由小鼠iPSCs分化而来的神经细胞在体外形成突触连接的过程,提示其可以进一步分化为功能性的神经元和神经胶质细胞.
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脂肪组织来源的基质细胞向神经细胞分化及其在脑缺血疾病治疗中的应用进展
近年来,细胞移植治疗脑缺血疾病已成为研究热点,多种细胞已被用于基础研究及临床治疗中.目前常用的种子细胞是骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs),它在一定的条件下可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌母细胞和神经细胞[1-5].
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骨髓基质细胞向神经细胞分化和脑内移植研究
骨髓基质细胞(BMSCs)在一定的条件下可诱导分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和肌母细胞[1].研究表明,BMSCs在体内和体外都可以表达神经元的标志物,提示BMSCs有分化为神经细胞的潜能[2-4]. BMSCs对自体神经移植有潜在的应用前景,我们对其进行体内和体外研究.
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动眼神经损伤后中脑动眼神经核新生神经细胞分化的实验研究
长期以来,人们认为动眼神经损伤后不能再生,功能不能恢复~([1]).随着神经放射学、显微外科技术和神经组织学检查技术的进步,已有临床上成功修复动眼神经损伤的报道~([2-5]).本实验通过对动眼神经损伤后新生神经细胞分化的组织学研究,来进一步探索动眼神经再生规律,为提高临床神经修复技术提供实验依据.
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睫状神经营养因子对视网膜保护作用的研究进展
睫状神经营养因子(CNTF)可诱导视网膜神经细胞分化,减少神经细胞凋亡和促进细胞再生。CNTF能促进轴突切断和视网膜缺血后RGCs的存活和轴突生长,减少视网膜色素变性动物模型的光感受器存活,为治疗视网膜缺血性损伤、神经退行性病变等视网膜疾病提供了可能。本文就CNTF及其受体的分子结构、组织分布、基因结构及其表达调控和CNTF对视网膜作用的研究进展作一综述。
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脑源性神经营养因子基因转导对骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的影响
动物实验表明骨髓间充质干细胞(MSC)移植到脑组织中可长期存活,并可向包括神经元在内的神经细胞分化[1,2].但MSC移植也面临一个问题:移植细胞多分化为胶质细胞,分化为神经元的数量较少.本研究旨在观察外源基因转入MSC后,持续稳定高表达的脑源性神经营养因子(BDNF)对MSC向神经细胞分化的作用.
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溶血磷脂酸检测异常者对缺血性脑血管病危险因素的认知及其护理干预
溶血磷脂酸(LPA)是修复及组织再生中的重要介质,具有促进血小板凝集、刺激成纤维细胞生长、参与神经系统功能及诱导神经细胞分化等功能[1,2],有致血栓形成和动脉粥样硬化的活性[3].2006年2月7日卫生部发布面向农村和基层推广适宜技术"十年百项计划",其中包含有缺血性脑血管病的预警因子--溶血磷脂酸的临床应用.我院引进了该项目并在临床推广,为缺血性脑血管病的早期预警诊断提供了科学依据[4].2006年10月-2007年10月,对我院缺血性脑血管病预警检测中心的456名LPA异常(++以上)者进行问卷调查,了解其对缺血性脑血管病危险因素LPA认知情况及相关知识的掌握情况,并根据调查情况及时采取护理干预.现报道如下.
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成年神经发生对大鼠海马齿状回长时程增强的年龄相关性研究
海马位于内侧颞叶,参与了学习和记忆的形成.齿状回是海马的一个亚区,具有成年神经发生(adult neurogenesis,AN)的能力[1,2].在齿状回,AN是一个多阶段的过程,包括在齿状回颗粒细胞下层(subgranular zone,SGZ)神经干细胞或前体细胞增殖、分裂形成新的神经细胞,新生神经细胞分化,分化后的神经元在颗粒细胞层(granule cell layer,GCL)迁移和成熟,后参与整合到神经环路中发挥生理功能[3].已经发现啮齿类动物和灵长类动物(包括人)都具有AN的能力,并且AN可以贯穿整个生命过程[4-6].随着年龄的增长,AN逐渐降低,Mcdonald等[3]报道1年龄的试验大鼠海马齿状回AN形成的新生神经元比6月龄大鼠大约降低了90%左右.但是,对于不同年龄的动物,AN形成的新生神经元在参与到神经环路以及对突触可塑性等方面的作用是否有差别,尚未见报道.本实验拟分析不同年龄组的大鼠海马齿状回AN和新生神经元对长时程增强(long-term potentiation,LTP)的作用,以期探讨AN对学习和记忆的影响.
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体外骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的实验研究
近年来研究结果表明骨髓间充质干细胞(BMSCs)可以分化成神经细胞,以及其来源丰富、取材时组织创伤性较小、低免疫排斥反应、不存在伦理道德以及法律上的限制等优势.BMSCs有望成为神经细胞移植的种子细胞来治疗神经系统疾病.音猬因子(SHH)参与调控神经系统的发育、分化过程.维甲酸(RAs) 是维生素A在体内的代谢产物, 在脊椎动物胚胎和神经系统发育、细胞分化中发挥广泛的生理学效应.Forskolin(FN)是一种腺苷酸环化酶的激活剂,它可以升高细胞间的cAMP水平,可以促进轴突的生长延长,促进胚胎大鼠运动性神经元的活性[1].研究表明以上的几种因子组合对BMSCs向神经细胞分化具有协同促进作用,协同作用产生的信号传导通路对BMSCs向神经细胞分化的机制具有至关重要的作用.本文旨在研究诱导后上清液对BMSCs向神经细胞分化中的作用.
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骨髓间充质干细胞向神经细胞分化及移植研究进展
骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)又称骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs),是干细胞研究的又一新的发现,是目前干细胞研究的热点和前沿.MSCs具有方便获取、易于分离培养和扩增纯化,在体外培养条件下多代扩增后仍保持多向分化潜能的特点,且遗传背景稳定,体内植入免疫排斥反应弱,体外基因转染率高并能稳定高效表达外源基因.近年研究发现MSCs具有跨系统、跨胚层分化的潜能,即不仅具有向中胚层分化的能力,而且具有向内胚层和神经外胚层来源的组织细胞分化的能力[1].MSCs在体外适宜的条件下可分化为神经细胞[2],在体内神经系统MSCs移植可通过多种途径进行,移植的MSCs,可存活并分化为神经细胞,改善、修复神经系统功能,在神经移植应用方面展现了诱人的前景,成为神经细胞移植的理想组织工程种子细胞.本文就MSCs向神经细胞方向分化和细胞移植做一综述.
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下丘脑视前两性异形区的性别差异性与细胞凋亡
下丘脑视前两性异形区,包括视前室周核与视前内侧核存在明显的性别差异性,属下丘脑小细胞神经分泌系统,其神经细胞分化与凋亡具有性别差异性,可受性腺类固醇激素调控,与某些细胞凋亡相关基因激活有关.
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大鼠Fyn缺损对神经发生和精子形成的共同点
以往认为:脑和睾丸之间的胚胎发生、发育几乎没有共同点,神经发生和精子形成是毫无关系的两个系统.近在帕金森氏病的研究中发现,神经元和睾丸支持细胞之间有许多共同之处,幼稚的神经元和放射状的神经胶质细胞的关系与生精细胞和支持细胞之间的关系非常相似.酪氨酸激酶Fyn属于Src家族成员,早期发现该基因fyn存在于鼠胚胎期中枢神经系统内,与神经细胞的发生、分化有关.近年来发现fyn也存在鼠的睾丸中.研究证明:Fyn蛋白存在于支持细胞的细胞骨架,Fyn缺损可导致生精小管形成延缓,并出现细胞变性.另外,在生精小管中也发现了,维持神经细胞分化、生长、生存的神经营养因子的受体.
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骨髓基质干细胞体外诱导分化为施旺细胞的研究进展
骨髓基质干细胞是一种具有多向分化潜能的细胞,除了分化为间充质细胞谱系外,还具有向非间充质细胞谱系如神经细胞分化的潜能,在体外适宜的条件下可以诱导分化为施旺细胞.多种抗氧化剂可以诱导骨髓基质干细胞分化为施旺细胞,分化所需时间较短;多种生长因子亦有同样的作用,诱导的施旺细胞传代时寿命延长;抗氧化剂和生长因子合用,分化施旺细胞的数量更多,传代时寿命更长.
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鹿茸在神经性疾病治疗中的作用
鹿茸是我国传统的名贵药材,是唯一能连续再生的哺乳动物器官,中药鹿茸在神经性疾病治疗中的作用,包括对神经细胞生长分化的促进,对相关疾病如帕金森、轻度认知障碍、阿尔兹海默、脑缺血引起神经功能损伤的减轻.鹿茸肽可以促进神经细胞的生长发育,诱导神经干细胞分化为神经元,并能抑制神经元凋亡,对神经细胞损伤的修复也有很好的效果,鹿茸蛋白可以不同程度的使神经递质的含量及其代谢水平得到恢复.
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胚胎干细胞向神经细胞分化的研究进展
胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)是由早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外分离、抑制分化培养获得的多潜能细胞,具有发育分化的多潜能性和无限的自我更新能力,在一定条件下可定向诱导分化为某种类型细胞.ESC在体外培养扩增6个月以上仍能保持其多能性,可诱导分化为神经元和星形胶质细胞,可做为细胞移植治疗的良好的细胞来源[1].本文对近年来ESC向神经细胞分化的研究进展综述如下.
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miRNA与神经细胞
miRNA是一组非常特别的小RNA分子,几乎存在于所有的细胞中,它具有非常广的调控范围.包括对RNA的修饰作用和对蛋白质合成的调控作用,在哺乳动物的神经细胞中也存在一些miRNAs,它们对于神经分化具有相当重要的作用,而对于学习与记忆也很有可能起着同样重要的作用.在这篇文章中,我们分析了miRNA与神经细胞的作用,尤其是在树突、轴突和神经可塑性上起着关键的作用.
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Complexin蛋白对神经母瘤细胞分化的影响及机制研究
目的:探讨Complexin蛋白对神经母瘤细胞分化的影响及机制.方法:采用神经母瘤细胞(N2a)作为实验材料,在其中过表达Complexin蛋白以及其突变体后,利用激光共聚焦显微镜拍照并利用Image J软件对N2a细胞的分化比率、突起数量以及突起生长长度进行统计学分析.结果:在N2a细胞中过表达Cpx蛋白后,细胞分化率比对照组(即转染空白对照质粒)增加约2倍.Cpx1-86和Cpxpooclamp突变体可促进N2a细胞的分化,而Cpx27-134突变体对N2a细胞分化无明显影响.随着时间的延长,过表达野生型Cpx蛋白和其N端缺失突变体都不能显著增加细胞突起的数量;但在转染4天后,过表达野生型Cpx蛋白能显著增加分化细胞的突起长度,而其N端缺失突变体不能引起突起长度的增加.结论:Complexin蛋白主要通过其N端序列促进神经母瘤细胞(N2a)的分化,增加分化后突起的长度,但对突起数量没有明显影响.
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脑蛋白水解物治疗中毒性脑病38例临床疗效观察
脑蛋白水解物是幼小动物大脑组织的提取物,主要含神经多肽基因、核苷酸、神经介质和神经营养因子等生物活性成分,是调控神经发育,决定神经细胞分化及轴索伸展方向的物质.我科应用脑蛋白水解物治疗38例因职业性急性化学物中毒所致的中毒性脑病患者,用药后对患者智力障碍等症状均有明显改善,现报告如下.