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骨髓间充质干细胞诱导分化为肝样细胞的研究进展
owen[1]首先将其命名为间充质干细胞(BM-MSCs),初认为它只能分化为同胚层的细胞,后来研究证实其分化潜能是超越胚层界限的.BM-MSCs属于多能干细胞,来源于中胚层,具有很强的多向分化潜能,具有干细胞的共性[2-3].对BM-MSCs分化潜能的研究已成为国内外研究机构的热点.目前BM-MSCs向肝细胞的分化已有研究,但仍处于初步阶段.本文就BM-MSCs体外诱导分化为肝细胞的研究进展作一综述.
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小鼠骨髓基质干细胞体外诱导分化为NF-200和神经胶质酸性纤维蛋白免疫阳性细胞
文献报道,存在于成年动物骨髓中的骨髓基质干细胞能横向分化成身体绝大多数组织的细胞,包括神经元和神经胶质细胞,其中,微环境因素的影响起决定性作用.我们应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),维甲酸(all-trans-retinoic acid,RA),神经生长因子(NGF)等后,观察成年小鼠骨髓基质干细胞在离体被诱导分化成NF-200和神经胶质酸性纤维蛋白(glial acidic fibrillary protein,GFAP)阳性细胞的可能性,为进一步了解成年动物骨髓基质干细胞在体内被诱导分化成有功能的神经元的可能性奠定实验基础.
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血管平滑肌细胞培养液和膀胱匀浆上清对大鼠骨髓间充质干细胞的诱导分化
我们利用已经分化成熟的血管平滑肌细胞(VSMC)培养液和膀胱组织匀浆上清对骨髓间充质干细胞(MSC)体外诱导分化进行了研究,现报告如下.
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脂肪干细胞原代培养及其向表皮细胞诱导分化的研究
目的 探讨人脂肪干细胞(adipose-derivedstem cells,ADSCs)体外原代培养方法及诱导分化为表皮细胞的可能性.方法 利用酶消化法原代培养ADSCs,免疫细胞化学检测其相关表面抗原CD29、CD34、CD44、CD49d、CD80、CD106的表达;用表皮细胞诱导培养基对ADSCs进行体外诱导,观察细胞的生长情况及形态变化;对诱导前后两种细胞行细胞增殖活性及细胞角蛋白表达检测.结果 利用脂肪抽吸液成功培养出ADSCs,且能稳定传代;免疫组织化学染色证实有特定的干细胞表面标记物表达;对ADSCs成功进行了体外诱导培养,其细胞形态及蛋白表达均有向表皮细胞分化的倾向,并且仍具较高增殖活性.结论 利用酶消化法可在体外成功培养ADSCs,并能持续传代;ADSCs表达特定的干细胞表面抗原;ADSCs可成功进行体外诱导,有向上皮细胞分化的倾向.
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胚胎干细胞体外诱导分化为胰岛素分泌细胞的研究进展
1型糖尿病是一种具有多因素遗传背景的自身免疫性疾病,胰岛朗格汉斯细胞遭受不可逆性损害,在葡萄糖刺激下不能正常分泌胰岛素,使血糖不能正常利用,导致机体处于高血糖的病理生理状态.
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胚胎干细胞体外诱导分化的研究进展
自1981年英国的Evans等[1]和美国的Martin[2]相继从小鼠囊胚的内细胞团分离建立胚胎干细胞系以来,胚胎干细胞体外诱导分化的研究就一直是各国学者感兴趣的课题.目前,已从胚胎干细胞体外诱导出卵黄囊、血岛、神经细胞、心肌细胞、血管和内皮等结构及细胞.
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人胚胎干细胞建系、培养及体外诱导分化研究现状
胚胎干细胞具有体外无限增殖和分化成三胚层细胞的潜能,它已被视为治疗多种疾病的一种新兴策略.目前胚胎干细胞常规的建系和培养技术已很成熟,并有一套国际公认的鉴定标准.但常规方法存在异源病原体污染的可能,急需研究适于标准化、无动物源性污染及可大量培养胚胎干细胞的培养体系.在现阶段,通过不同的体外诱导途径可将胚胎干细胞诱导成为胚外和三胚层来源的各种细胞,但定向分化的问题仍亟需解决.
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增强型绿色荧光蛋白标记骨髓间充质干细胞体外诱导分化成心肌样细胞研究
急性心肌梗死后心肌细胞的数量减少,致使其向心力衰竭发展.但是现有的治疗手段并不能很好地解决心力衰竭问题,细胞替代治疗和基因治疗为心力衰竭的治疗带来了新的希望[1].而替代治疗的关键问题是种子细胞的选择.间充质干细胞(MSC)具有高度的自我更新和多向分化的潜能,被认为是理想的种子细胞和基因转移的载体细胞,但其在体内的转归是研究的难点[2].近期,我们采用不同浓度的转染液转染.
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骨髓基质干细胞体外诱导分化为施旺细胞的研究进展
骨髓基质干细胞是一种具有多向分化潜能的细胞,除了分化为间充质细胞谱系外,还具有向非间充质细胞谱系如神经细胞分化的潜能,在体外适宜的条件下可以诱导分化为施旺细胞.多种抗氧化剂可以诱导骨髓基质干细胞分化为施旺细胞,分化所需时间较短;多种生长因子亦有同样的作用,诱导的施旺细胞传代时寿命延长;抗氧化剂和生长因子合用,分化施旺细胞的数量更多,传代时寿命更长.
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山羊神经干细胞的分离培养及体外诱导分化
背景:文献报道不同种类的神经调控因子及神经胶质细胞对神经干细胞分化成熟具有不同的作用,但大动物的神经干细胞培养报道则相对较少。目的:探究山羊神经干细胞的培养条件及体外诱导分化结果。方法:取幼羊脑组织分离神经干细胞后于神经干细胞全培养液中悬浮培养,后期行抗-巢蛋白一抗免疫组织化学染色鉴定,同时取坐骨神经分离培养许旺细胞;以血清诱导干细胞体外诱导分化后行抗-S100一抗、抗-胶质纤维酸性蛋白一抗、抗-MAP2一抗染色分别标记许旺细胞及神经胶质细胞,以未添加一抗做对照,计算图像灰度值与对照组进行统计学比较。结果与结论:成功分离培养抗-巢蛋白染色阳性神经球及抗-S100染色阳性许旺细胞,后期神经干细胞体外诱导分化得抗-胶质纤维酸性蛋白、抗-MAP2染色阳性细胞,其免疫组织化学染色灰度值显著高于对照组;分化产物抗-S100染色为阴性,其免疫组织化学染色灰度值显著低于对照组。结果表明山羊神经干细胞可经体外诱导分化为神经元及星形胶质细胞,未发现神经干细胞诱导分化为许旺细胞。
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胚胎干细胞体外诱导分化为黑色素细胞的研究进展
胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ESs)是从早期胚胎内细胞团(Inner cell mass,ICM)或桑椹胚中分离出的高度未分化的全能细胞.ES细胞体外诱导分化为黑色素细胞的过程能更明确皮肤黑色素细胞和视网膜黑色素上皮细胞(Retinal pigreented epithelium,RPE)的基因选择性表达程序.
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骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌细胞的研究进展
骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有多重分化能力、体外扩增容易、自体移植不产生伦理问题等优点,理论上比其他干细胞更适合于移植治疗心肌梗死及梗死后心力衰竭.虽然很多实验研究证实其在体外一定条件下可诱导分化为心肌细胞,但是其在体外诱导分化为心肌细胞的效率仍有待提高.另外,MSCs分化为心肌细胞过程中的佳诱导药物以及佳体外微环境也在不断探索中.现将MSCs体外诱导分化为心肌细胞的研究进展作如下综述.
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成人骨髓间充质干细胞体外向视网膜细胞的诱导分化
目的:研究取材于成人骨髓的间充质干细胞在一定诱导条件下向视网膜神经细胞的分化。方法成人骨髓经密度梯度离心得到的细胞,根据其高黏附特性体外培养获得间充质干细胞。利用流式细胞仪分析其细胞表型,在体外诱导使其向视网膜神经细胞分化并用免疫荧光法进行鉴定。结果从骨髓中分离培养的细胞具有成纤维细胞样形态,贴壁生长,表型相对均一,表面标志为CD90、CD44、CD147阳性;而CD34、CD38、CD45、CD14、HLA-DR阴性。体外诱导后可以得到表达nestin(神经干细胞标志物)、GFAP(神经胶质细胞标志物)和Rhodopsin(视网膜光感受器细胞标志物)阳性的细胞。结论从人骨髓中分离培养得到的间充质干细胞具有向视网膜神经细胞分化的潜能。
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骨髓间充质干细胞的生物学特性
干细胞是近年来研究的热点,以干细胞工程为代表的现代组织工程学则为组织器官的修复与替代提供了一个崭新的领域.组织工程学将体外分离、培养的高浓度的功能相关的活细胞种植于天然的人工合成的支架上,使之植入人体后能够形成新的有功能的组织,来制造、保存或修复失去的组织功能.其中种子细胞的体外培养扩增成为组织工程学中的重要环节.理想的种子细胞应具有容易获得、容易体外培养增殖、长期传代不改变生物学特征、抗原性小、组织修复能力强等特征.骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)正好具备上述条件,而被人们认为是理想的种子细胞.
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干细胞移植治疗甲状腺功能减退症的研究进展
目前,甲状腺功能减退症(甲减)的主要治疗方法是甲状腺激素替代治疗、异体或异位成体甲状腺移植、胎儿甲状腺供体移植和甲状腺细胞替代治疗等,但均有局限性.近年研究发现,胚胎干细胞(ESCs)经胚胎体发育阶段,在特定条件下可定向分化为甲状腺细胞[1],为ESCs源性甲状腺细胞替代治疗甲减提供依据.现结合文献就干细胞(SC)移植治疗甲减的研究进展综述如下.
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新生大鼠胰腺来源干细胞的分离培养与鉴定
目的 从新生大鼠胰腺分离出一种胰腺干细胞,并对其进行初步鉴定.方法 采集大鼠胰腺,5.5 mg/mlⅣ型胶原酶消化,用含10%胎牛血清(FBS)的RPMI1640培养基培养,首次传代时利用差速贴壁分离上皮样细胞和成纤维样细胞.多次纯化上皮细胞,细胞密度为80%进行传代.对第4代的细胞进行免疫荧光染色,诱导向β胰岛细胞分化并利用高糖刺激胰岛素释放.结果 新生大鼠胰腺中的胰腺干细胞具有较强的增殖能力,可连续传代.第4代细胞经免疫荧光染色,显示胰十二指肠同源框因子l(PDX-1)、巢蛋白(Nestin)、神经元素3(NGN3)、波形蛋白(Vimentin)、胰岛素(Insulin)和C肽(C-peptide)阳性;经诱导分化后,经双硫腙(DTZ)染色为阳性,同时免疫组织化学显示PDX-1和C-peptide阳性;在糖刺激实验中,当无糖刺激时,细胞组胰岛素释放量为(5.3±1.5) pIU/ml,而诱导后的细胞组胰岛素释放量为(30.0±11.5) pIU/ml,两者比较差异有统计学意义(P =0.035).结论 分离的胰腺细胞是胰腺干细胞.
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人胚胎骨髓间充质干细胞大鼠脾脏移植后向肝脏的迁移与分化的研究
骨髓让间充质干细胞(MSC)具有多向分化能力,可直接来源于成人的骨髓或外周血,采集方便且不存在伦理学上的争议,具有干细胞的生物学特性及优势[1].通过MSC体外诱导分化获得肝细胞已经通过实验证实[2].我们在肝损伤大鼠脾脏内移植人胚胎MSC,移植后分时段取大鼠肝脏,观察移植细胞是否能够迁移到肝脏,并且分化为肝细胞.
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骨髓间充质干细胞可分化为搏动的心肌细胞研究
骨髓间充质干细胞(MSCs)是一种具有多向分化潜能的多能干细胞,在特定的条件下可向成骨细胞、软骨细胞、肌腱、肌细胞、脂肪细胞、骨髓基质细胞、心肌细胞、血管内皮细胞及神经星状细胞分化[1-3].为此,我们进行了MSCs向心肌细胞的体外诱导分化的研究,为临床应用提供理论依据和技术支持.
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成体干细胞移植对缺血性心脏疾病心功能的治疗进展
心肌梗死是发达国家冠心病导致心衰和死亡的原因之一.虽然近年来因治疗方法的改进(包括介入,药物)心梗存活率明显提高,但由于心肌细胞丧失疤痕形成而导致心功能减退仍是一个主要问题,因为心脏本身缺少干细胞没有再生能力[1].目前,缺血性心脏疾病治疗包括:内科药物治疗,介入治疗和手术治疗,它们虽然够改善心肌缺血和心衰症状,使闭塞血管再通,挽救缺血心肌,但对已坏死心肌或无功能心肌无作用.而心脏移植虽能取代受损心肌,但供体缺乏,费用高,排斥反应严重使之在临床难以推广,这使得致力于寻找恰当的心肌源性干祖细胞的研究大大增加[1].目前于细胞体外诱导分化为具有收缩功能的心肌细胞已获成功,动物体内诱导干细胞分化心肌组织也取得重大突破[2],使得应用干细胞植入心脏,诱导分化为有功能的心肌细织并取代坏死及无功能的心肌成为治疗缺血性心脏病的新希望.
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体外诱导骨髓间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞的方法学研究进展
骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)由于取材容易,增殖能力强,具有多向分化潜能,且免疫原性弱,移植后无致瘤性,有望成为体外诱导分化成胰岛细胞的首选种子细胞,为细胞移植治疗糖尿病提供较好的干细胞来源.近年来,国内外对于体外诱导BMSCs分化为胰岛素分泌细胞(insulin-producing cells,IPCs)治疗糖尿病的研究已取得一定进展.许多研究者尝试利用各种不同的方法,使BMSCs定向分化为IPCs.目前,体外诱导BMSCs分化为IPCs趋于寻找快速、高效的方法以获取足够量的胰岛素.本文就体外诱导BMSCs分化为IPCs的方法学研究进展作一综述.