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胸液蛋白电泳及腺苷脱氨酶在结核性与恶性胸腔积液鉴别诊断中的应用
目的 对结核性及恶性胸腔积液患者的胸液蛋白电泳进行分析及ADA检测,探讨二者在结核性胸腔积液与恶性胸腔积液诊断中的应用价值.方法 对36例结核性胸腔积液患者及38例恶性胸腔积液患者的胸液标本行琼脂糖凝胶蛋白电泳并应用比色法检测腺苷脱氨酶(ADA)浓度.结果 结核性胸腔积液组与恶性胸腔积液组的胸液α1球蛋白分别为4.32±1.35和3.41±0.97(P＜0.05),α2球蛋白分别为8.98±1.50和6.01±1.53(P＜0.000),α2球蛋白/白蛋白的比值分别为0.15±0.03和0.09±0.03(P＜0.000),ADA分别为71.35±24.00和31.21±11.90(P＜0.000).根据ROC曲线结果判断分别取0.13及45为界值,计算α2球蛋白/白蛋白对诊断结核性胸腔积液的敏感性、特异性及准确性分别为76%、89%、83%;ADA的敏感性、特异性及准确性分别为82%、78%、80%.采用平行试验方法,联合α2球蛋白/白蛋白和ADA指标,其敏感性、特异性和准确性分别达到88%,100%和94%.结论 (1)结核性胸腔积液患者的胸液α1球蛋白、α2球蛋白、α2球蛋白/白蛋白的比值及ADA均高于肿瘤组,差异有显著性(P＜0.05).(2)联合检测α2球蛋白/白蛋白和ADA可以提高结核性胸腔积液诊断的敏感性、特异性和准确性.
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精浆蛋白电泳带谱分析对梗阻性无精子症的定位诊断价值研究
目的 探讨梗阻性无精子症患者经SDS-聚丙烯胺平板凝胶电泳精浆蛋白定位诊断价值.方法 32例梗阻性无精子症患者于31例正常生育男子分别进行不连续SDS-PAGE分析精浆蛋白带谱,比较两组精浆总蛋白质含量.结果 经比较两组精浆总蛋白质含量分别为22.17±5.4g/L,29.11±6.1g/L,p＜0.05,相较具有显著性差异,观察两组蛋白带谱分析无显著差别,正常组男子可见易辨认蛋白带分子量分别为33、35、40、45、65、75、80另有大于97KD三条等10条蛋白带,梗阻性无精子症组与正常组可见蛋白带相同.结果 经SDS聚丙烯胺平板凝胶电泳精浆蛋白后两组总蛋白质含量具有显著差异单对梗阻性无精症患者定位及这段尚未发现临床意义.
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太空环境对甘草生理生化的影响
目的:探讨太空环境对甘草生理生化诱变作用分析.方法:利用返回式卫星搭载甘草,18 d后返回地球(飞行回收舱平均辐射剂量为0.102 m·d~(-1),飞行远地点距地球350 km,重力为1×10~(-6)m·s~(-2)),搭载种子返回地面后与对照组同时种植于实验田中,对太空搭载后甘草的过氧化氢酶(CAT),超氧化物歧化酶(SOD)的活性,甘草的蛋白含量以及蛋白电泳进行了考察.结果:甘草经过卫星搭载后,甘草CAT,SOD酶活性均有不同程度提高,差异明显(P<0.05),而且鄂托克前旗比杭锦旗酶活性均高.甘草经过卫星搭载后,甘草蛋白含量有一定程度提高,差异明显(P<0.05),同时甘草蛋白电泳也产生了差异,产生了微弱的新的条带.结论:太空环境对甘草蛋白类产生一定影响,这些变化对于后期选育甘草优良种质奠定基础.
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蛋白电泳凝胶放置时间对蛋白丰度的影响分析
目的 利用高分辨力的双向电泳技术检测蛋白电泳后凝胶中的蛋白含量随时间推移的损失情况. 方法 用双向电泳蛋白裂解液提取鼠疫EV菌株(无毒疫苗株)全菌蛋白并定量.取800 μg EV蛋白,平行进行两块双向电泳凝胶电泳,电泳结束后一块凝胶立刻固定并染色,另一块凝胶4℃放置8h后固定并染色,使用ImageMaster 2D Elite软件比较分析两块凝胶蛋白点数量及蛋白丰度. 结果 相比直接固定染色的凝胶,8h后固定染色的凝胶中蛋白点扩散丢失严重,比电泳后直接固定凝胶少346个蛋白点,且部分相邻蛋白点发生融合,含量在20～350 ng的低丰度蛋白65.9％因蛋白扩散丢失. 结论 蛋白凝胶放置8h后大量低丰度蛋白由于扩散会丢失,并直接影响后续免疫印迹、质谱鉴定等实验结果的可靠性.
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多发性骨髓瘤1例
1 病例简介患者,男,40岁,持续低热、骨骼及关节疼痛来我院就诊.化验检查:WBC 5.2×109/L,Hb 108g/L,PLT 183×1012/L,蛋白电泳可见一条清晰的M带.本周蛋白:阳性,TP 102g/L,Alb 46异/L,尿常规正常,血凝正常.X线片见骨质疏松.血片镜检:成熟红细胞呈"缗钱"状排列.
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全自动多通道毛细管区带电泳法在血清蛋白分析中的临床应用
目的用毛细管区带电泳(CE)技术进行血清蛋白检测结果与琼脂糖凝胶电泳(AGE)技术的检测结果进行比较分析以探讨CE的临床应用.方法使用全自动毛细管电泳仪(法国Sebia公司的4.51版本Capillarys(R)电泳仪)及相应试剂,在7 kV电压、35.5℃、pH 10的缓冲液条件下,在15.5 cm×25.0 μm硅毛细管内进行血清蛋白电泳,用200 nm波长检测各种蛋白质的百分比浓度.结果与AGE的结果比较相关性,进行CE的精密度、线性检测及干扰实验.CE和AGE比较,白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白及γ-球蛋白的相关系数分别为0.929、0.924、0.841、0.789和0.926,P＜0.001相关性好,无统计学意义.蛋白质含量3个水平不同标本的批内、批间结果,白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β1-球蛋白、β2-球蛋白和γ-球蛋白的变异系数(CV)值均小于10.08%精密度好.血清总蛋白浓度在71.10～11.16 g/L范围内各种蛋白线性关系良好,白蛋白低检出量为6.87 g/L,γ-球蛋白为1.78 g/L.血清总胆红素含量≤144.7 mmol/L、甘油三酯含量≤8.18 mmol/L时对CE结果无干扰,纤维蛋白原和血红蛋白对CE结果有干扰.结论CE技术是一种灵敏度高、精确度好的血清蛋白检测技术,随着设备自动化的实现,分析操作将更简便、快速,适于临床化学实验室使用.
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对一例5岁患儿M蛋白的血清免疫学分析
患儿男,5岁.于1997年因关节疼痛伴全身淋巴结肿大,病理诊断为恶性淋巴瘤.2000年8月,因关节疼痛伴发热,作淋巴结活检为反应性增生,骨髓涂片检查(BM)提示:见异常淋巴细胞.患儿于2001年2月到本院门诊就诊.膝关节片显示:右胫骨上段溶骨性破坏.BM提示:增生性骨髓象.血象:WBC 4.1×109/L,HB 107 g/L,PLT 219×109/L.生化:血清球蛋白58 g/L,经琼脂糖凝胶蛋白电泳(法国HYDRASYS Sebia)可见γ 34.6%,并且呈现单株峰.继续进行免疫固定电泳,出现双M蛋白: IgM伴λ轻链型和IgG伴λ轻链型.免疫球蛋白定量(Behring BN100 散射比浊法) IgG 8.7 g/L、IgA 1.2 g/L、IgM 37.7 g/L、κ 1.1 g/L、λ 9.2 g/L.显示M蛋白所属Ig部分显著增高,非M蛋白所属Ig部分并无显著降低,再经流式细胞仪作白细胞分化抗原(CD)分型,结果为CD19(-)、CD20(-),进一步提示了此阶段B细胞已成熟至浆细胞.
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大鼠非酒精性脂肪肝中L-FABP的动态表达
目的:研究L-FABP(liver fatty acid binding protein)在大鼠非酒精性脂肪肝形成中的作用.方法:建立高脂饮食脂肪肝模型,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)与聚丙烯凝胶蛋白电泳(Western Blot)方法测定脂肪肝肝组织中L-FABP表达变化.结果:高脂饮食脂肪肝大鼠肝脏中L-FABP于2 wk时其mRNA及蛋白表达增强,于12 wk时表达为明显,与正常组比较相差显著(1.42±0.034vs0.90±0.04;13 372.00±23.86vs6857.33±32.9 6637;P＜0.05).结论:高脂饮食引起L-FABP表达增强,初是一种适应性反应,随着L-FABP表达进一步增强,导致脂肪酸代谢失衡,引起脂肪肝的发生.
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系统性红斑狼疮合并选择性IgA缺乏症一例
患者女，41岁。因反复关节痛1年、间断发热4年于2000年11月入院。患者于1996年4月起出现双手非对称性关节疼痛，在当地拟诊类风湿关节炎（RA），治疗无效。病程中伴口腔溃疡。1997年3月就医，查WBC 3.7×109/L，抗核抗体（ANA） 1∶640，总补体<50 U。查IgG、IgM正常，IgA 0.07 g/L。诊断为系统性红斑狼疮(SLE)，开始给予泼尼松 40 mg/d，环磷酰胺 400 mg/周，静滴。但患者仍有间断低热，咳嗽。发热期间补体及血常规检查正常，无蛋白尿。ANA滴度渐次升高，斑点型，1∶1 280，高1∶2 560。每次查IgA皆低于0.07 g/L，IgG、IgM正常，诊断为选择性IgA缺乏症。平素易患“感冒”。饮食不适易致腹泻。1998年患糖尿病，经药物控制血糖平稳。体检：T 37.6 ℃，BP 115/80 mm Hg(1 mm Hg = 0.133 kPa)，库欣面容，脸部无红斑。无口腔溃疡。双肺呼吸音粗，偶及散在干性音。化验检查：IgG 8.87 g/L，IgA <0.07 g/L，IgM 0.48 g/L。蛋白电泳：Alb 58.5 %，α1 2.9 %，α2 13.5 %，β 9.6 %，γ 15.5 %。WBC 10.7×109/L， RBC 3.45×1012/L，血小板133×109/L。肝、肾功能正常。维持泼尼松10 mg/d治疗，加用口服抗生素控制感染，体温逐渐下降。
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多中心网状组织细胞增多症一例
患者男,74岁.四肢关节游走性疼痛4个月,双手指皮肤结节,伴麻木刺痛2个月.既往有2型糖尿病及高血压、冠心病史.体检:系统检查无异常.皮肤科情况:(1)双手指关节周围可见散在或聚集状绿豆至黄豆大小(直径0.5～0.6 cm)结节,呈浅棕黄色、半球状,质硬,有光泽,主要分布于指侧面或伸面.(2)左手背腕关节处见一玻璃球大小的腱鞘囊肿.骨科情况:各关节外观无红肿、无压痛,手指关节活动受限伴疼痛.实验室检查:血、尿、大便常规和肝肾功能、血脂、血沉、C反应蛋白、血尿酸浓度均正常.类风湿因子(RF)、抗"O"均阴性.蛋白电泳:白蛋白(A)/球蛋白(G)比值略低.
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不明原因发热患者血清蛋白变化及其蛋白电泳分析
目的 探讨血清前清蛋白(PA)、清蛋白(ALB)及其蛋白电泳检测在不明原因发热患者病因判断和治疗中的应用价值.方法 收集26例健康体检者和86例不明原因发热患者血清,测定其血清前清蛋白、清蛋白并进行蛋白电泳分析.结果 不明原因发热患者组血清PA、ALB降低,与对照组相比差异均有显著性(P<0.01),肿瘤性疾病与感染性疾病和血管结缔组织病相比PA降低较显著(P<0.05).蛋白电泳图谱分析显示患者组ALB与正常组比较显著性降低(P<0.01);感染性疾病多表现为ALB降低、α2、β球蛋白升高(P<0.01);肿瘤性疾病多表现为ALB降低、α1球蛋白升高(P<0.01)和γ球蛋白升高(P<0 05);血管结缔组织病多表现为ALB降低、α2球蛋白升高(P<0.01)和α1、β球蛋白升高(P<0.05).肿瘤性疾病与感染性疾病和血管结缔组织病相比α2球蛋白显著降低(P<0.05).结论 通过测定不明原因发热患者的蛋白变化,可对患者有针对性地进行进一步的检查,从而尽快地确定不明原因发热的病因,给临床治疗提供一定的帮助.
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骨硬化性骨髓瘤一例
患者男，60岁。因四肢肌肉酸胀伴末端乏力3年，加重3月入院。3年前突感双下肢肌肉酸胀、麻木，不能站立，休息后症状缓解，以后上述症状不断反复且加重。血IgG>30 g/L, IgA<0.670 g/L, IgM 1.240 g/L； 肌电图右屈拇短肌募集形成减弱，疑为“肌膜炎”，予强的松治疗症状稍缓解。1年前血IgG 32.1 g/L, IgA 0.27 g/L,IgM 0.14 g/L,IgE 10 IU/mL；蛋白电泳:白蛋白0.339,α1 -球蛋白0.25,α2 -球蛋白0.06,β-球蛋白0.125,γ-球蛋白0.452。骨盆X线片：骨盆及左股骨上端散在斑片状密度增高影、骨小梁结构不清。磁共振平扫前列腺示前列腺增生，排除前列腺癌骨转移。肌电图：神经源性损害，右正中神经及右腓总神经传导速率减慢。骨穿浆细胞增多，占0.064。诊断为“高球蛋白血症”，予对症处理。2000年3月血IgG 70.4 g/L, IgA 0.1 g/L, IgM 0.11 g/L, 蛋白电泳见M蛋白；骨穿浆细胞占12.2%； 骨髓活检示广泛骨纤；T3 0.86 nmol/l, T4 21.3 nmol/l, 游离（F）T3 0.67 pmol/l, FT4 1.60 pmol/l, 甲状腺刺激激素 3.69 μIU/ml, 诊断为“多发性骨髓瘤”，予VAD方案治疗1个疗程，因四肢酸胀频繁，走路不稳，手无力加重转我院。体格检查：轻度贫血貌，脾肋下刚及，双上肢肌力4级+,下肢肌力5级－ 。B超脾大，卵泡刺激激素15.19 mIU/ml, 黄体生成激素 7.10 mIU/ml, T 8.17 nmol/L。血IgG 26.2 g/L, IgA 0.430 g/L, IgM 0.3 g/L, Κ 0.77 g/L, λ 43.2 g/L； 蛋白电泳:白蛋白0. 407,α1-球蛋白0.044,α2- 球蛋白0.046,β-球蛋白0.079,γ球蛋白0.424,可见M蛋白，固定电泳IgG、λ出现于快γ区并有异常浓集区带，与蛋白电泳M峰位置一致，提示IgG-λ轻链型单株峰。尿本周蛋白(-)。 骨髓穿刺：骨髓增生减低， 浆细胞占0.05。骨髓活检Gomori(+++)，刚果红染色（-）。骨盆X线片：示两侧髂骨密度不均匀，见散在斑片状密度增高影，骶骨两侧的耳状面密度增高。CT片：整个骨盆密度不均匀，骨皮质增厚并密度增高，髓腔中见斑点状及纤维条索状高密度影。予血浆置换及MP方案化疗。 讨论 本例患者除诊断为骨硬化性骨髓瘤(IgG-λ轻链型)外， 因有周围型多发性神经病变，脾肿大，内分泌受累及M蛋白的出现，考虑伴不完全型POEMS综合征（因缺乏皮肤改变）。
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人精子顶体膜蛋白的纯化及性质的研究
目的:提取和纯化与人卵透明带(HZP)作用更为密切的人精子膜蛋白,为改进精子包被抗原的制备方法和筛选避孕疫苗抗原提供科学依据.方法:将人精子膜蛋白混合液进行SDS-PAGE电泳,然后全胶电洗脱分别收集蛋白溶液30管,以阳性管内的HZP特异精子蛋白溶液包被抗原进行AsAb检测.结果:与HZP结合的人精子膜蛋白有多种成分;全胶电洗脱后以第 14管内成分之特异强,其分子量范围为48～53KD.结论:以电洗脱转移法纯化筛选的人精子膜蛋白是特异的,与HZP具极强相关性,可以用该精子膜蛋白包被抗原进行AsAb研究.
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恶性组织细胞病误诊为骨髓转移瘤1例
患者, 男, 30岁, 主因右下胸痛3个月, 关节疼痛伴发热1个月入院. 患者3个月前无明显诱因出现右下胸痛, 呈持续性, 与呼吸无关, 且不向它处放射, 并伴有局部压痛, 1个月前又出现全身多关节痛, 伴发热, 体温37～38.5 ℃, 以解热镇痛药治疗无效. 查体: 体温37.5 ℃, 脉搏96次/min, 血压13.3/10.7 kPa(100/80 mmHg), 营养中等, 全身皮肤无黄染及出血点, 双侧腹股沟淋巴结肿大, 约1 cm×2 cm, 界清无压痛, 质中等, 右腋前线与第6肋交界处稍隆起, 压痛(+), 心肺听诊未见异常, 肝肋下可及、叩痛(+), 脾肋下2 cm, 周身关节、四肢肌力未见异常. 实验室检查: 白细胞5.3×109L-1, 分类正常, 红细胞4.01×1012L-1, 血红蛋白94 g/L, 血小板276×109L-1, 尿常规、便常规均正常, 血浆蛋白电泳、肝肾功能、电解质均正常, C反应蛋白(CRP)(+), 碱性磷酸酶352 U/L, 血沉129 mm/h, 胸部X线片见右第6肋骨局限性骨质破坏.
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慢性肝病患者血清蛋白电泳检测的临床应用
目的探讨慢性肝病患者血清白蛋白,α1、α2和β球蛋白(非γ球蛋白)与γ球蛋白比值的临床应用.方法采用血清蛋白电泳方法,分离出300例样品的白蛋白,α1、α2、β和γ球蛋白,计算出非γ球蛋白与γ球蛋白比值,并同血清白蛋白与球蛋白比值(A/G)进行比较.结果两种比值间有非常显著性差异(P＜0.01),在202例A/G正常样品中,有53.5%的样品非γ球蛋白与γ球蛋白比值降低,显示其灵敏度大于高于A/G.结论非γ球蛋白与γ球蛋白比值比A/G更能反映慢性肝病肝损害程度,具有重要的临床意义.
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溴甲酚绿法检测血清白蛋白应注意的问题
目的探讨溴甲酚绿(BCG)法检测血清白蛋白时出现的问题,提高白蛋白检测的准确性.方法采用BCG法和电泳法分别测定急性炎症组、非急性炎症组、正常对照组血清白蛋白,计算出相差数值进行比较.结果在对照组和非急性炎症组患者样品中,两种方法测出的血清白蛋白差异无显著性,而在急性炎症组患者样品中,BCG法测定值比电泳法测出的数值明显偏高(P＜0.01).并且随α-球蛋白升高而增高(P＜0.01).结论BCG法检测急性炎症患者样品血清白蛋白,有明显误差,应采用血清蛋白电泳法测定,以提高检测准确性.
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肝病患者血清蛋白电泳的临床意义探讨
血清中含有的蛋白质不下300种[1],这些蛋白质执行着许多功能.在各种疾病期间总血清蛋白质和各个组分的比例可发生改变,因此总血清蛋白质和各个组分的定量在临床诊断与治疗上有重要的价值[2].本文通过对160例肝病患者血清蛋白电泳的检测,探讨它们在慢性肝病中的诊断意义,结果报告如下.
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肝硬化需要做那些化验检查
◆血清酶学检查重要的有谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、γ一谷氨酸转肽酶.◆血清胆红素代谢肝细胞性黄疸时,血中直接胆红素和间接胆红素均增高,以间胆增高为主.◆血清蛋白测定有血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、白蛋白/球蛋白比值.蛋白代谢是肝脏代谢能力的重要表现,是肝脏慢性疾病损害后的反映.肝硬化时往往白蛋白合成减少,血中白蛋白/球蛋白比值降低甚至倒置,比值越低,说明肝脏代偿能力越差.◆蛋白电泳蛋白电泳出现,γ一球蛋白比例增加,揭示慢性肝病.肝炎后肝硬化失代偿时,γ-球蛋白增高为显著.
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单纯双足跖趾关节受累的疑似类风湿关节炎一例
患者女,21岁.3年前无明显诱因反复出现双足多个跖趾关节肿胀、疼痛,晨起时明显,负重时疼痛加重,徒步活动受限.无双手及任何其他关节受累.多次查类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体、抗角蛋白抗体(AKA)及抗核周因子(APF)均为阴性.3年来间断给予非甾体抗炎药(NSAIDs)治疗,病情无明显缓解.既往体健,无相关遗传性疾病家族史.查体:无皮疹,心肺无异常.脊柱无畸形,各棘突无压痛.双足多个跖趾关节明显肿胀、压痛,其余关节未见异常.辅助检查:血、尿、粪便常规无异常,血生化、免疫球蛋白、补体、蛋白电泳、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)等正常,但抗突变型波形蛋白(抗MCV)290 U/L(正常值范围＜25 U/L),双足X线片示多个跖趾关节虫蚀状或囊性改变.
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联合检测血清蛋白和免疫球蛋白及蛋白电泳在多发性骨髓瘤诊断中的临床意义
多发性骨髓瘤(MM)发病率占血液系统肿瘤的10%,占全身恶性肿瘤的1%.本病多见于中老年人,男性多于女性,起病缓慢,其骨髓瘤细胞浸润骨骼和软组织,产生M蛋白,引起骨骼破坏、贫血、肾功能损害、反复感染等,临床症状复杂,许多病例首发症状往往不会让临床医生直接考虑到本病,往往容易引起误诊,据有关资料表明误诊率可达50%,因此早期诊断非常重要.在多年临床工作中发现联合检测血清蛋白和免疫球蛋白及蛋白电泳在MM诊断中有重要的临床价值,可及时纠正临床的误诊与漏诊.现将我院近期遇到的4例MM报告如下.
