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亡羊补牢的佳工具——胰岛素
糖尿病来势猛如虎在1985年,全球估计仅有3千万人患有糖尿病.然而,仅仅过了十多年,据国际糖尿病联盟(IDF)的数据,全世界糖尿病患病人数已超过2.5亿,如不采取有效的防治,糖尿病大军到2025年将扩增至3.8亿.更值得我们关注的是,作为世界第一人口大国,中国很有可能会超越印度登上世界第一糖尿病大国的位子,但这并不是一件值得高兴的事情.
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干细胞在心脏疾病中的临床应用
对患病心脏进行修复是医生的梦想.研究显示移植干细胞对受损心脏具有有益的作用.为达到更好的效果,通过细胞融合或转分化成心肌细胞,或者将血管细胞株进行扩增.
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GIRK4基因多态性与新疆南疆地区维吾尔族原发性高血压的关联研究
目的:研究GIRK4基因多态性与新疆南疆地区维吾尔族人群原发性高血压的相关性。
方法:采取病例-对照研究方法,筛选1194例BMI>18.5 kg/m2的人群,按高血压诊断标准,将收缩压≥140 mmHg和或舒张压≥90 mmHg作为高血压组(482例),收缩压≤140 mmHg和或舒张压≤90 mmHg为正常组(712例),其中男性461例,女性733例。提取两组血样的基因组DNA,PCR扩增GIRK4基因并测序。 -
蛋白S基因突变导致肺栓塞1例
目的:对1个新的遗传性蛋白S基因缺陷症家系进行基因突变检测。
方法:筛查导致患者肺栓塞的诱因,在未服用抗凝药华法林的情况下检测血浆蛋白S活性(ProteinS凝固法法国STAGO)、血浆蛋白C活性(ProteinC发色底物法法国STAGO )、抗凝血酶Ⅲ活性(ATⅢ发色底物法法国STAGO)、血浆游离蛋白S抗原(Liatest Free PS免疫比浊法法国STAGO)作实验诊断;用PCR法对先证者蛋白S基因的15的外显子及其侧翼内含子序列进行扩增,PCR产物纯化后直接测序,作基因诊断;进行家系调查,并比对相关人员进行基因诊断;对所发现的点突变采用在正常人群中进行相应区域PCR扩增结合测序的方法进行多态性筛查。 -
CD+34细胞在致敏小鼠气道浸润的研究
过敏性哮喘是由多种炎性细胞和炎性介质参与的慢性气道炎症,近研究发现,抗原刺激气道后可引起骨髓中祖细胞(CD+34细胞)扩增、分化,形成成熟的炎性细胞,这些成熟炎性细胞从骨髓池释放到外周并募集到气道局部,介导了速发性和迟发性哮喘反应,由抗原引起骨髓发生的上述变化称为骨髓反应.
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定量聚合酶链反应技术研究进展
自Mullis等于1985年创建了聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术以来,该技术经过十几年的发展与完善,已在基础研究领域得到了广泛的应用,并在临床疾病的诊断方面进行了一些探索性研究。根据PCR扩增策略和检测产物手段的不同,可分为定性PCR(qualitative PCR,以下简称PCR)和定量PCR(quantitative PCR,Q-PCR)。 一、PCR在结核分支杆菌检测中的研究现状 1989年Hance等[1]将PCR用于结核分支杆菌的检测,1990年我国引进该项技术,从而在我国开辟了以PCR为代表的分子生物学技术检测结核分支杆菌阶段。该方法的敏感性和特异性与扩增系统中的引物、模板DNA的提取及纯化等多种因素有关,其中很大程度上决定于扩增的引物,因此,检测结核分支杆菌时各家采用过多种不同引物。PCR具有很高的敏感性,一般可检测出1~100 fg纯化结核分支杆菌DNA[2,3],相当于1~20个结核分支杆菌。随着研究技术的不断深入,为了进一步提高PCR的敏感性,有些学者对PCR技术进行了发展,如将Southern blot与PCR结合起来的PCR-Southern blot、巢式PCR(nested PCR)技术等。
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智能扩增检测法检测非小细胞肺癌患者血浆及肿瘤组织中表皮生长因子受体突变的研究
近年来,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的发病率逐年增高,严重威胁着人类的健康.表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)改变了NSCLC患者的治疗策略.EGFR突变是该类药物的预测因子,在NSCLC的治疗决策中起重要作用[1].对晚期患者而言,获取肿瘤组织检测EGFR突变存在困难,有学者曾尝试在NSCLC患者体液中检测EGFR突变,但标本中肿瘤细胞DNA含量少且不稳定,对检测技术要求高.因此,本研究设计了相应的智能扩增检测(smart amplification process,SMAP)体系,检测晚期NSCLC患者肿瘤组织及外周血浆中EGFR突变,以传统测序及扩增阻滞突变富集技术(amplification refractory mutation system,ARMS)作为对照,并用克隆测序进一步验证结果,探讨SMAP法检测EGFR突变的稳定性和可靠性.
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骨髓干细胞再生心肌研究进展
干细胞是具有潜在分化能力的细胞,根据干细胞的来源可分为两类 ,胚胎干细胞(embryonic stemcells,ES)和成体干细胞(adult stem cells, AS).机体内几乎所有的组织都包含有干细胞,其中骨髓干细胞以其取材方便、体外易培养扩增成为具临床应用前景的干细胞之一[1].已有的研究证实,将骨髓干细胞移植到受损心肌,可以增强心肌收缩力,改善心脏功能.其作用机制不明,存在横向分化(transdifferation)或细胞融合(cell fusion)[2]等多种争论.现就骨髓干细胞再生心肌的研究进展作一综述.
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骨髓增生异常综合征发病机制及诊断研究进展
骨髓增生异常综合征( MDS)是一类恶性造血克隆逐渐扩增导致正常造血衰竭的髓系肿瘤性疾病,表现为骨髓病态造血、细胞分化异常,外周血一系或多系细胞减少,具有转化为急性髓性白血病(AML)的高风险.
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血管舒缓素基因D19S246区域微卫星与新疆哈萨克族人高血压的研究
本研究应用PCR扩增、毛细管电泳和Genetic Profiler自动分析软件进行微卫星基因组扫描分析,观察血管舒缓素(kallikrein,KLK)基因D19S246区域微卫星多态性在新疆哈萨克族人中的分布,探讨该微卫星与新疆哈萨克族原发性高血压(essential hypertension,EH)的关系.
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《中华心血管病杂志》2003年起扩增版面
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脂肪源性干细胞的研究进展
2001年Zuk和Zhu[1]首次从人抽脂术中抽取的脂肪组织悬液中分离获得了多向分化干细胞,自此,众多学者致力于脂肪源性干细胞(Adipose-derived stem cells)的研究并取得了重大进展.脂肪源性干细胞不仅与骨髓间充质干细胞形态相似,而且和骨髓间充质干细胞同样具有强大的体外增殖力和多向分化潜能.尤其令人鼓舞的是脂肪组织容易获得,对供区的损伤也小,抽取后残留于供区的脂肪组织仍可扩增.这些特点使脂肪源性干细胞从众多种子细胞中脱颖而出,有望成为理想的种子细胞来源.
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microRNAs对调控胚胎干细胞自我更新与分化的影响
胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESCs)是指存在于胚泡内细胞群中、具有高度自我更新和多向分化潜能的细胞。ESCs可以在体外无限扩增并保持未分化状态,具有分化为胚胎或成体的各种细胞类型的潜能。因此,研究 ESCs 增殖与分化机制,可以更好地了解其生物学特性,对实现ESCs的定向分化和组织工程产品的研制具有推动作用。尽管目前ESCs自我更新与分化过程中的分子机制是研究热点,但距离全面厘清此问题仍相去甚远。
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人脐带间充质干细胞的生物学特性及应用前景
问充质干细胞(mesenchymal stem cels,MSCs)是来源于发育早期中胚层的具有高度自我更新能力和多向分化潜能的多能干细胞,可在体外培养扩增,并能在特定条件下分化为神经细胞、成骨细胞、软骨细胞、肌肉细胞、脂肪细胞等,在细胞替代治疗及组织工程等方面具有极大的应用价值.骨髓、胎儿、外周血及脐带血来源的MSCs都有其自身的劣势,而人脐带来源的MSCs有着无法比拟的优势:来源广泛、采集方便、无伦理法律限制、扩增迅速、免疫原性低、支持造血、多向分化等,在细胞治疗、基因治疗、组织工程等方面有着广阔的应用前景.
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基因芯片技术在骨肉瘤研究中的进展
肿瘤的发生发展是一个复杂过程,往往涉及多个基因的改变,包括正常基因的突变或缺失、癌基因的异常扩增和表达以及多个基因的协同作用,加之基因本身多效性和机体免疫因素,终决定肿瘤表型的表达与否[1].
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《现代基因治疗分子生物学(第二版)》和《现代肿瘤基因分子生物学(第二版)》已出版
由成军教授主编的《现代基因治疗分子生物学(第二版)》和《现代肿瘤基因分子生物学(第二版)》于2014年9月由科学出版社正式出版发行。
《现代基因治疗分子生物学(第二版)》简介:本书共37章,详细介绍了基因治疗的基础理论与临床应用,内容包括基因治疗概论、基因克隆、基因的人工合成、基因的PCR扩增、基因转移的靶细胞、干细胞与基因治疗、基因的转移方法;基因治疗的各种载体;基因治疗的基因调控、RNA干扰与基因治疗、DNA疫苗、基因治疗的管理;以及各种疾病的基因治疗等。 -
不同分化胆管癌差异表达基因的分离、克隆和功能研究
从分子水平研究胆管癌发病机理及病理过程,对认识及防治胆管癌都具有重要的理论和实际意义.基于临床研究的结果[1],我们采用Liang 1992年建立的差异显示法(DDRT-PCR)[2],来寻找高、低分化胆管癌间差异表达基因的cDNA.1.材料和方法:(1)采用TRIzol总RNA提取试剂盒,分别提取高分化、低分化胆管癌新鲜组织总RNA,逆转录合成单链cDNA.(2)DDRT-PCR:在20 μL体系中对2 μL逆转录产物进行扩增,加入2 μmol/L 4dNTPs, 5 μmol/L 锚定引物T15M, 1 μmol/L随机引物, 37Bqα-32P-dCTP,1.5UTaq酶.(3)DD-PCR产物取6 μL上样于6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,恒定功率50W,电泳约3 h,滤纸揭胶,覆保鲜膜后压X光片,-70 ℃曝光14 h,显影.确定感兴趣的差异片段的位置并切胶,将切下的凝胶常规方法提纯并进行再扩增.(4)反向Northernblot鉴定:点样后,用化学变性及热变性法交联,标记探针基本上按照文献[3]进行.常规方法68℃杂交12 h,中等强度洗膜后放射自显影,-80 ℃压片22 h,显影.(5)PCR产物经纯化后可以直接用来测序,测序引物用T15N,PCR产物的核苷酸序列分析采用全自动DNA序列分析仪及配套的ABI试剂.
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肿瘤表达谱基因芯片筛选胆囊癌肿瘤相关基因的初步研究
我们利用表达谱芯片筛选胆囊癌相关基因组,并将筛选出的部分相关基因进行分类和生物信息学分析,选其外显子区进行PCR扩增、测序明确突变情况.
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HER2基因阳性乳腺癌的处理
Slamon等在1987年通过人乳腺癌的研究,首先报道了原癌基因HER2的扩增,并提示其与肿瘤易复发和预后较差有关.这类肿瘤往往体积较大,患者腋淋巴结常呈阳性,无病生存期较短,对CMF(环磷酰胺、甲氨蝶呤、氟尿嘧啶)化疗可能耐药,对蒽环类药物敏感,其中约50%雌激素受体(ER)阴性.
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毛发移植及相关体外培养的研究进展
健康秀丽的头发是人类美貌和青春的象征,它的社会心理意义远远超过其本身的生理意义.临床上秃发患者非常多见,造成了心理上的压力和生活上的不便,患者迫切需要恢复其毛发.近年来国内外专家学者在秃发的病因、治疗及组织工程方面进行了大量的研究,取得了很大的进展.目前毛发移植多为自体移植,因人体本身的毛发数量有限,影响了移植的效果,故目前毛囊细胞的体外培养扩增的研究较多.本文就秃发的发病机制、毛发移植及相关的毛囊体外培养的研究进展综述如下.