首页 > 文献资料
-
IL-1β诱导的NO产生没有参与其细胞毒性作用
目的:研究白细胞介素-1 β(IL-1β)对原代培养大鼠肝细胞的作用并进一步观察IL-1 β是否通过诱导N0产生发挥作用的.方法:所有实验使用雄性Wistar大鼠(5-7周龄,体重170-230g),无菌条件下原位胶原酶灌注肝脏分离肝细胞.观察IL-1 β的细胞毒性作用(对肝细胞LDH释放的影响),以及IL-1β诱导产生的NO是否参与了这一作用.结果:IL-1β显著促进了原代培养大鼠肝细胞LDH的释放,这种作用是剂量和时间依赖的;IL-1β剂量和时间依赖地诱导iNOS的表达和NO的产生,L-Arginine(NO合成底物)显著促进了IL-1β刺激的NO产生,L-NMMA和L-NAME(iNOS抑制剂)完全抑制了IL-1β刺激的NO产生;IL-1β诱导的N0产生不影响IL-1β对肝细胞LDH释放的促进作用.结论:IL-1β对于原代培养大鼠肝细胞具有细胞毒性作用,而其诱导产生的NO没有参与这一作用.
-
抗肿瘤药物肾损害
抗肿瘤药物对肾及膀胱的损害直接性损害抗肿瘤药物通过其原形或代谢产物的直接细胞毒性作用杀伤泌尿系统细胞,通过该机制引起泌尿系统不良反应.
-
沙樱桃黄酮对人肝癌细胞毒性作用研究
目的:探索沙樱桃黄酮对人肝癌细胞的毒性作用.方法:给予体外培养人肝癌细胞沙樱桃黄酮,用台盼蓝法和流式细胞仪检测其毒性作用.结果:台盼蓝法测定结果显示,给药后培养6小时,沙樱桃黄酮(0.1mg/L,0.5mg/L,5mg/L)组和5-氟尿嘧啶(5-FU)组活细胞数比对照组分别减少了34.3%、43.9%、66.8%和51.2%,到18小时减少了36.4%、52.4%、85.3%和58.2%,差异有显著性(P<0.01).流式细胞仪检测结果显示,细胞周期中G0G1、S期DNA含量明显增加,G2M期显著减少,细胞凋亡率分别为15.4%、23.4%、26.6%.结论:沙樱桃黄酮对人肝癌细胞具有明显的毒性作用,其作用与抑制细胞分裂,促进细胞凋亡有关.
-
冬季保健防"三害"
冬季如何保健呢?本文要提醒你的是:当心三大"杀手".一害:雾邪现代医学证实,雾中含有多种有害物,如硫化物、氮化物、氟离子、有机酸、有机醛、苯、胺等.它们具有相当强的细胞毒性作用,随人的呼吸而侵入呼吸系统,对气管、支气管、肺组织等直接造成损害.健康人吸入雾气后,这些有害物可使大小气道的功能受损.而病人吸入后,有害成分粘附于各级支气管及肺泡等处,引起反射性痉挛,加重慢性支气管炎、肺气肿和哮喘的病情.
-
人sTNFR1真核表达载体构建及体外抑制TNF-α细胞毒效应
目的 构建人可溶性肿瘤坏死因子受体1基因(sTNFR1)的真核表达载体,研究sTNFR1对TNF-α细胞毒效应的抑制作用.方法 以HeLa细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增人sTNFR1全编码区基因片段,构建含有目的片段的T载体克隆及真核表达载体pcDNA3.1(-)重组质粒亚克隆,用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1(-).sTNFR1瞬时转染QSG7701细胞,半定量PT-PCR法检测sTNFR1 mRNA的表达,MTT法检测sTNFR1对TNF-α细胞毒效应的抑制作用.结果 人sTNFR1基因被正确克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-);通过与3-磷酸甘油醛(GAPDH)比较,pcDNA3.1(-)-sTNFR1转染的QSG7701细胞中sTNFR1 mRNA表达量明显高于空载体对照组和空细胞对照组(P<0.05);pcDNA3.1(-)-sTNFR1瞬时转染QSG7701细胞,TNF-α对其细胞毒性作用受到抑制,当TNF-α浓度为100μg/L时pcDNA3.1(-)-sTNFR1/QSG7701的细胞毒性较QSG7701下降64.8%.结论 成功地构建真核表达质pcDNA3.1(-)-sTNFR1,TNF-α对瞬时转染pcDNA3.1(-)-sTNFR1/QSG7701的细胞株细胞毒性作用受到抑制.
关键词: 人可溶性肿瘤坏死因子受体1 真核表达 瞬时转染 细胞毒性作用 -
棘阿米巴滋养体致黑色素瘤细胞损伤的初步研究
为研究处于分类地位不同的5种棘阿米巴滋养体对黑色素瘤细胞B16的细胞毒性作用的方式、以及细胞毒性作用差异与其致病性的关系.将5种不同种类的棘阿米巴滋养体分别与体外培养的黑色素瘤细胞B16混合,利用细胞免疫荧光技术和透射电子显微镜观察棘阿米巴滋养体对黑色素瘤细胞B16的影响,并运用MTT法检测、比较不同棘阿米巴对肿瘤细胞作用的差异.结果显示:这5种棘阿米巴滋养体对黑色素瘤细胞B16均有不同程度的细胞毒性作用,其机制是诱导肿瘤细胞发生细胞凋亡,但与其致病性的强弱无关.
-
基于Cole-Cole模型评价纳米二氧化钛的细胞毒性作用
利用Cole-Cole模型评价不同剂量纳米二氧化钛(Nano-TiO2)的细胞毒性作用,并探讨电生理机制.150和300 mg/L的Nano-TiO2悬液作用人胃癌MGC803细胞24 h后,制备成细胞悬浮液.在l kHz ~ 100 MHz范围,采用Agilent 4294A精密阻抗分析仪测量了人胃癌MGC803细胞悬浮液电阻抗的幅值和相位角,经电阻抗频谱和Nyquist图的曲线拟合的残差分析,建立Cole-Cole模型参数,评估Nano-TiO2对MGC803细胞导电性能的影响.结果表明,150和300 mg/L的Nano-TiO2引起第一电阻抗增量(△Z1)分别减少18.18% (P <0.001)和39.39%(P<0.001),第二电阻抗增量(△Z2)分别减少6.56% (P <0.001)、8.2% (P <0.001),降低了MGC803细胞膜及其核膜的电阻,增加了其导电性能;第一特征频率(fc1)分别增加19.74%(P<0.001)和29.67%(P <0.001),第二特征频率(fc2)分别增加6.28% (P <0.001)、23.43% (P<0.001);第一散射角(β1)分别降低1.35% (P >0.05)和2.70%(P<0.05).Cole-Cole模型可评价Nano-TiO2的细胞毒性作用并解释其电生理机制,为纳米颗粒的细胞毒理研究提供一种电特性方法.
关键词: 纳米二氧化钛 胃癌 电阻抗谱 Cole-Cole模型 细胞毒性作用 -
颗粒酶B在病毒性心肌炎发病机制中作用的研究
细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte, CTL)介导的细胞毒性作用被认为是病毒性心肌炎(viral myocarditis, VMC)中心肌细胞损伤的主要机制之一.
-
冷冻干燥法制备载紫杉醇脂质微泡的实验研究
目的 探讨冷冻干燥法制备载紫杉醇脂质微泡的可行性,并对其质量和安全性进行评价.方法 采用冷冻干燥法制备携带紫杉醇的脂质微泡,在光学显微镜和荧光显微镜下观察其形态、大小以及紫杉醇在微泡上的定位,用血球计数板、激光粒度分析仪和pH计测定其浓度、粒径及分布、表面电位、pH值,通过反相高效液相色谱法检测包封率,锥虫蓝排斥试验观察载紫杉醇脂质微泡对血管平滑肌细胞的毒性作用.结果 载紫杉醇脂质微泡的粒径为2~10μm,平均粒径(2.79±0.14)μm,浓度为(7~8)×109/mL,表面电位为(-5.9±0.21)mV,pH值为5.54±0.18,包封率为(36.1±4.74)%,对血管平滑肌细胞无毒性作用.结论 采用冷冻干燥法可成功制备携带紫杉醇的脂质微泡,其粒径大小符合静脉注射要求,体外细胞毒性试验证实该载药脂质微泡的安全性.
-
检测Th1/Th2亚群的临床意义
辅助T细胞(Th)1/Th2亚群的区分大大提高了人们对细胞因子网络的认识,以表达白细胞介素(IL)-2和γ干扰素(IFNγ)为主的Th1群细胞,可以增强杀伤细胞的细胞毒性作用,激发迟发型超敏反应,介导细胞免疫应答;以表达IL-4、IL-6、IL-10为主的Th2型细胞,促进抗体的产生,介导体液免疫应答.机体Th1/Th2平衡状态失调后,与肿瘤免疫逃逸,细菌、病毒等微生物感染有一定关系,并参与变态反应性疾病、自身免疫性疾病和移植排斥反应的发生.与传统的临床检验项目不同,检测Th1/Th2相关细胞因子的意义,并不着重于辅助疾病的诊断,而更注重分析疾病发生发展的状况,为临床调整Th1/Th2失衡,提供正确的治疗措施.
-
人可溶性肿瘤坏死因子受体1基因原核表达及活性鉴定
目的:构建人可溶性肿瘤坏死因子受体1基因的原核表达质粒,诱导sTNFR1-MBP融合蛋白表达,观察表达产物的生物学活性.方法:以HeLa细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增sTNFR1全编码区基因片段,构建含有目的片段的T载体克隆及原核表达载体pMAL-c2x重组质粒亚克隆,经异丙基-β-D半乳糖苷酶(IPTG)诱导重组质粒菌表达sTNFR1,以淀粉树脂亲和层析法纯化重组蛋白,并对重组蛋白进行序列分析和Western blot鉴定.MTT法测定重组蛋白的生物学活性的测定.结果:经DNA序列分析和Western blot鉴定,成功构建了人sTNFR1重组质粒基因工程菌;在IPTG的诱导下,重组质粒菌能表达sTNFR1-MBP融合蛋白,SDS-PAGE显示在66 kDa处有一特异性表达条带;纯化的sTNFR1-MBP融合蛋白经Western blot证实具有生物学活性;生物活性实验(MTT法)显示可有效地封闭TNF-α对QSG7701的细胞毒性作用,随着重组蛋白浓度的增高(0.2,2,20,40,80 mg/L),对TNF-α细胞毒效应的抑制作用增强,细胞死亡率依次为69.98%±1.52%,60.05%±2.18%,46.27%±2.48%,37.02%±3.17%,1.83%±0.59%,1.71%±0.61%.结论:成功获得了具有生物学活性的人sTNFR1-MBP融合蛋白,为进一步研究奠定了基础.
关键词: 人可溶性肿瘤病坏死因子受体1 原核表达 免疫印迹 细胞毒性作用 -
复方肝癌宁抗乙型肝炎病毒的体外实验研究
目的:探讨复方肝癌宁体外抗乙肝病毒(HBV)作用.方法:通过复方肝癌宁作用于体外培养的2.2.15细胞,观察复方肝癌宁对2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的影响及药物的细胞毒性作用.结果:复方肝癌宁作用于2.2.15细胞8 d后,对细胞的半数毒性浓度(TCso)为大于10 g/L,对HBsAg和HBeAg抑制的半数有效浓度(IC50)分别为0.67 g/L和0.13 g/L,复方肝癌宁对HBsAg和HBeAg的治疗指数(TI)分别为14.93和76.92.结论:复方肝癌宁在体外细胞培养中对HBsAg和HBeAg的分泌有较好的抑制作用,有显著的抗HBV作用.
-
全反式维甲酸联合奥曲肽对肝癌细胞-HepG2增生和凋亡的影响
目的:探讨全反式维甲酸联合奥曲肽对肝癌细胞HepG2增生和凋亡的作用.方法:将不同剂量的全反式维甲酸和奥曲肽(1 mg/L)直接作用于体外培养的人肝母细胞瘤株HepG2,用MTT比色法分析两种药物联合作用对肝癌细胞生长的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率,细胞周期分布,免疫细胞化学方法检测抑癌基因P21WAF1/CIP1的表达,台盼兰染色观察药物对细胞毒性作用.结果:小剂量全反式维甲酸(10-6mmol/L)和奥曲肽(1 mg/L)连用后,对细胞具有增生抑制作用,与无增生抑制的奥曲肽作用组和对照组相比有显著性差异(P=0.0 087 P<0.01).细胞免疫化学:全反式维甲酸和奥曲肽药物联合作用48 h后,细胞中目的基因p21WAF1/CIP1由胞膜,胞质微弱表达转为核强烈表达.于作用48 h后药物合用组对细胞各周期均有影响,奥曲肽作用组可使肝癌细胞HepG2阻滞于S期,且药物合用组于作用72 h后,凋亡率为17%,明显高于奥曲肽作用组与对照组.台盼兰染色未发现大片死亡细胞.结论:小剂量全反式维甲酸(10-6mmol/L)联合生长抑素类似物奥曲肽(1 mg/L)对肝癌细胞HepG2具有增生抑制和诱导凋亡作用.抑癌基因表达增强说明二者的诱导凋亡和增生抑制作用可能是通过增强抑癌基因p21WAF1/CIP1的表达实现的.从而为在临床上治疗肝癌提供了新的思路.
-
HAb18G/CD147拮抗肽抗肝癌转移作用的体外实验
目的:筛选获得HAbl8G/CDl47高亲和性拮抗肽中具有体外抗肝癌细胞转移作用的拮抗肽.方法:对于采用HAbl8G/CDl47纯抗原筛选噬菌体随机12肽库所获得的9条高亲和性的12肽(AP-l-AP-9).分别采用:MTT法测定AP-l-Ap-9的对肝癌细胞(HHCC)的直接毒性;明胶酶谱法分析APl-AP-9对基质金属蛋白酶(MMP s)产生及其激活过程的影响;重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭抑制实验测定AP-l-9对肝癌细胞(HHCC)侵袭力的的影响;观察AP-1-AP-9对HHCC与细胞外基质蛋白(Matrigel,FN,LN,CollogenⅣ)、HHCC与间质细胞(成纤维细胞fb)黏附能力;以及APl-9对HHCC运动能力的影响.结果:拮抗肽AP-1-AP-9对HHCC无明显细胞毒性作用;Ap-1,6,9对HHCC刺激fb细胞产生MMP-2其激活过程具有明显的抑制作用;AP-1,3,6,7,8,9对HHCC侵袭力有明显的抑制作用(P<0.05),抑制率分别为78.22%,90.1%,62.83%,56.44%,68.32%和81.19%;9条拮抗肽对HHCC与细胞外基质蛋白Matrigel,FN无明显的抑制作用,但AP-3,9对HHCC与CollogenⅣ,LN的黏附有抑制作用;AP-1,6,9对HHCC与fb细胞之间的黏附有抑制作用;AP-6可抑制HHCC的运动能力,抑制率54%,但统计学上差异无显著性(P>0.05).结论:HAbl8G/CDl47拮抗肽(AP-l-AP-9)对肝癌的侵袭转移相关的多个环节有明显的抑制作用,为研究开发新的抗肿瘤转移多肽药物开辟了新途径.
-
奥曲肽抑制重症急性胰腺炎大鼠诱生型一氧化氮合酶
一般认为奥曲肽(善宁)治疗急性胰腺炎的显著疗效常与抑制胰酶、消化液分泌有关〔1〕,重症急性胰腺炎(SAP)急性期常伴有急剧的全身病理生理改变,细胞因子和炎症介质的过度表达可引起急性胰腺炎组织损伤〔2,3〕,诱生型一氧化氮的过量产生可明显引起细胞毒性作用以及脏器血供的低灌注〔4〕。本研究探讨奥曲肽缓解急性胰腺炎的病情,是否还通过抑制过量产生的一氧化氮(NO)。 材料和方法 1.实验动物:雄性SD大鼠200~250 g128只,清洁级,购自中国科学院上海实验动物中心。随机分为假手术组8只,SAP组60只,治疗组60只,其中SAP组和治疗组各观察20只动物死亡率。 2.大鼠重症急性胰腺炎模型制作:参照Schmidt等〔5〕方法并加以改进 氯胺酮(50 mg/kg)和3%苯比妥钠(30 mg/kg)腹腔麻醉经右颈外静脉行右心房插管,无菌条件下,手术显微镜下,十二指肠降部的肠壁处逆行穿刺胆胰管,微量药液注射泵注射5%牛磺胆酸钠(Sigma公司)1.0 ml/kg,注射速度0.2 ml/min,注射持续10 min。肉眼下,大鼠胰腺组织出现充血、水肿后方开始后续实验。假手术组仅翻动胰腺后关腹,治疗组于诱发SAP后皮下注射奥曲肽(诺华公司),每次14 μg/kg q8 h×2 d。
-
GnRH-a对化疗药物所致卵巢功能下降的保护作用
随着化疗后恶性肿瘤患者存活率不断提高,如何改善女性患者的生存质量,尤其是预防和保护化疗所致生育功能损害已成为临床关注的热点.一、化疗药物对卵巢功能的影响化疗药物对性腺功能的影响不尽相同,烷化剂(包括环磷酰胺、白消安、美法仑和氮芥)对卵巢毒性作用大,其次为顺铂、阿霉素;对卵巢毒性小的化疗药物为氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、放线菌素D、博来霉素、长春新碱和巯嘌呤.化疗药物对女性患者的卵巢具有细胞毒性作用.细胞毒性药物主要影响卵泡的生长和成熟过程,导致卵泡的破坏和卵巢的纤维化.从而引起月经不规律、不育、过早绝经或合并潮热、盗汗、骨质疏松及泌尿、心血管系统症状等.即使所用化疗药物剂量较小,未引起不孕,其妊娠时出现流产、早产、低体质量儿的危险性也增大.
-
依达拉奉对新生鼠缺氧缺血性脑损伤后自由基和神经细胞凋亡的影响
新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)是新生儿期常见的中枢神经系统疾病,D'Arceuil 等[1]认为缺氧缺血后迟发性细胞死亡是脑瘫形成的主要原因,及时阻断凋亡对减轻缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)有重要意义.HIBD的发病机制比较复杂,氧自由基的细胞毒性作用越来越受到重视.近年来研究发现,氧自由基在神经细胞凋亡过程中起到了重要作用[2].本实验研究自由基清除剂--依达拉奉(Edaravone)对新生大鼠HIBD后氧自由基和神经细胞凋亡的影响,探讨其神经保护的可能机制,为其在临床治疗中的运用提供实验理论依据.
-
神经系统疾病患儿脑脊液NSE、NO和NOS改变的临床意义
神经元特异性烯醇化酶(NSE)是神经元损伤的敏感性标志,且具有高度特异性,在各种神经系统疾病时升高的程度与脑损伤程度及预后有密切关系[1].而一氧化氮(NO)是兼有细胞内和细胞间的信使和神经递质作用的气体物质,它既具有通过多种途径传递神经元信息,调节脑血流,保护神经元的功能,在过量的情况下又有广泛的细胞毒性作用;而一氧化氮合成酶(NOS)是NO合成的关键因素[2].本研究目的在于探讨NSE、NO和NOS在神经系统疾病中变化规律、相互关系,对疾病发生、发展、转归的影响及其临床意义.
-
氟脲苷腹腔灌注治疗晚期消化道恶性肿瘤临床疗效分析
近10年来,腹腔化疗作为一种抗肿瘤治疗方法得到广泛的临床应用,其目的是增加肿瘤局部药物浓度和药物总量,即提高药物的细胞毒性作用,同时减少到达血浆中的药物量,减少药物的全身毒副作用,有效杀灭腹腔内播散的肿瘤病灶,提高患者的生存质量.我们应用浙江海正药业生产的氟脲苷腹腔灌注治疗晚期消化道恶性肿瘤,取得了较好疗效,现报告如下.
-
脑源性神经营养因子抗体对海马一氧化氮合酶阳性神经元的影响
一氧化氮(NO)是一种神经递质,与学习和记忆有着密切联系.正常浓度的NO起着生理性的信息传递作用,而高浓度的NO主要表现为细胞毒性作用,导致神经细胞坏死.由于NO在体内存在时间极短,因此人们对其合成酶一氧化氮合酶(NOS)进行了更多的研究.本文通过脑室内注射脑源性神经营养因子(BDNF)抗体阻断内源性BDNF的营养作用,探讨BDNF抗体对大鼠海马NOS阳性神经元的影响.