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全反式维甲酸联合奥曲肽对肝癌细胞-HepG2增生和凋亡的影响
目的:探讨全反式维甲酸联合奥曲肽对肝癌细胞HepG2增生和凋亡的作用.方法:将不同剂量的全反式维甲酸和奥曲肽(1 mg/L)直接作用于体外培养的人肝母细胞瘤株HepG2,用MTT比色法分析两种药物联合作用对肝癌细胞生长的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率,细胞周期分布,免疫细胞化学方法检测抑癌基因P21WAF1/CIP1的表达,台盼兰染色观察药物对细胞毒性作用.结果:小剂量全反式维甲酸(10-6mmol/L)和奥曲肽(1 mg/L)连用后,对细胞具有增生抑制作用,与无增生抑制的奥曲肽作用组和对照组相比有显著性差异(P=0.0 087 P<0.01).细胞免疫化学:全反式维甲酸和奥曲肽药物联合作用48 h后,细胞中目的基因p21WAF1/CIP1由胞膜,胞质微弱表达转为核强烈表达.于作用48 h后药物合用组对细胞各周期均有影响,奥曲肽作用组可使肝癌细胞HepG2阻滞于S期,且药物合用组于作用72 h后,凋亡率为17%,明显高于奥曲肽作用组与对照组.台盼兰染色未发现大片死亡细胞.结论:小剂量全反式维甲酸(10-6mmol/L)联合生长抑素类似物奥曲肽(1 mg/L)对肝癌细胞HepG2具有增生抑制和诱导凋亡作用.抑癌基因表达增强说明二者的诱导凋亡和增生抑制作用可能是通过增强抑癌基因p21WAF1/CIP1的表达实现的.从而为在临床上治疗肝癌提供了新的思路.
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台盼兰染色小鼠胚泡着床点的观察研究
本实验探讨用硫堇和台盼兰染料对妊娠4~5d小鼠进行活体染色以显示胚泡着床位点的可能性.研究结果:1.台盼兰可用作胚泡着床点的染色反应,具体方法是:尾静脉注射0.5%台盼兰0.3ml,10min后观察,而硫堇则无效;2.着床点数目在两侧子宫角内的分布有显著差别,左右子宫角内分别为6.40±1.64和4.80±2.40个;3.着床点的间距为2.25±0.87mm.
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研究细胞凋亡的几种光镜形态学检测方法比较
细胞凋亡是目前细胞生物学的研究热点之一.其研究方法有形态学,生物化学,酶联免疫分析以及分子生物学等等不胜枚举.本文着重对形态学方法中的姬姆萨(Miasma's)染色,荧光(Hoechest 33342)加碘化丙啶(PI)排斥分析法以及台盼兰排染法等加以分析比较,找出以上各方法之特点,以便在凋亡细胞的光镜分析中择其所长,避开局限,灵活进行联合或选择性运用.
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一项制作巨噬细胞标本的技术改良
传统显示巨噬细胞的方法有几种,主要是台盼兰活体染色,取肝脏切片或疏松结缔组织铺片,然后再进行HE染色,这样制作出来的标本,不易辨认,影响实验课质量.为此,我们特采用台盼兰或涕注射染色,取材部位选择睾丸,经过常规石蜡包埋切片后,仅进行伊红染色,取得较满意效果,现将这项新方法介绍如下.