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115 糖苷酶处理后药用植物提取物的雌激素活性
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免疫组织化学标准化(二)
1.3 免疫组化染色1.3.1内源性过氧化物酶的灭活在免疫组化染色中若采用过氧化物酶检测系统,必须进行内源性过氧化物酶处理,如果不进行处理,组织中的红细胞、粒细胞着色可能会干扰染色结果的判断.
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微波快速原位杂交技术检测基因表达
核酸原位杂交技术目前已广泛应用于组织及细胞的基因表达定位和定量分析以及病毒基因组及表达的检测。常规的原位杂交技术主要强调组织细胞切片的前处理以提高其渗透性。常用的方法为蛋白酶酶解处理,但其作用的浓度和时间具有很大的范围,常难以准确把握。另外,杂交常需要16~24 h,检测周期长。近来,为了以稳定的、易控制的方法取代蛋白酶处理和缩短杂交的时间,我们应用微波处理技术,对以上两个步骤进行改良取得了很好的效果。
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凝血酶处理PCI术后穿刺部位血管缝合器止血后再渗血的效果评价
目的:探讨凝血酶处理经皮冠状动脉介入术(PCI)后病人股动脉穿刺部位应用血管缝合器止血后再渗血的有效性和安全性。
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凝血酶封堵带膜支架处理失败的冠状动脉穿孔一例
本文报告1例支架术中高压后扩张所致冠状动脉穿孔,在采用带膜支架处理失败后,经球囊导管冠状动脉内注射凝血酶处理成功,避免了急诊冠状动脉旁路移植术,术后未发生不良事件.
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两种碘化丙啶染色 DNA 定量方法检测 HL-60细胞凋亡结果的比较
碘化丙啶(propidium iodide,PI)是插入性核酸染料,直接插入双链核酸的2个碱基对之间,每5个碱基插入1个荧光分子,与核酸的结合均匀、稳定。细胞经过 RNA 酶处理后,PI 可以与细胞内 DNA 特异性结合,在流式细胞仪上经488 nm 激光激发,发出峰值610~620 nm 的荧光,可以准确的反映细胞群体中DNA 含量的分布情况,适用于 DNA 定量检测。根据细胞周期中不同时项 DNA 的变化来检测细胞周期中DNA 合成前期( G0/ G1期)、 DNA 合成期( S 期)与DNA 合成后期(G2期)各时项的细胞比例。因为 PI是适用于所有流式细胞仪的染料,这一染色技术在临床肿瘤诊断和医学科研中被普遍的采用,常规使用的染色方法是包括固定、RNA 酶处理、PI 饱和染色3个关键步骤的3步法 PI 染色技术[1]。在一些研究中,当细胞在生理或病理条件下发生了凋亡,DNA 损伤,细胞内 DNA 降低,也可以采用3步法 PI 染色检测亚 G1峰(也称作凋亡峰),用于凋亡细胞比例和特征的分析[2]。但是在实际应用中,由于凋亡时相的不同,当凋亡细胞中 DNA 损伤部分没有完全脱出细胞时,往往检测不到明确可辨的亚 G1峰,敏感度较低。作为细胞凋亡检测的经典方法之一的彗星检测[3],以细胞在电泳移动中 DNA 的迁移形态作为凋亡的特征指标,此技术中比较关键的一步即采用碱性高渗试剂使凋亡细胞中断裂的 DNA 碎片脱出细胞,从而在电泳迁移中呈现出彗星尾样的拖痕,本课题组利用类似方法,用高渗缓冲液作用于固定后的悬浮细胞,使凋亡细胞内断裂 DNA 较彻底的脱出细胞外,再进行 DNA定量检测,提高对细胞凋亡的识别度和敏感性[4]。
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酶处理红细胞检测白血病致抗体减弱血型定型1例报告
患者男,35岁,临床诊断为T细胞性淋巴母细胞白血病,无输血史.因鉴定ABO血型时发现正反定型不符,送我室进行血型鉴定.正反定型:采用试管法做ABO血型正反定型,菠萝酶处理试剂红细胞[1]前后患者ABO正反定型结果见表1.
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乳腺癌化疗后肝衰竭1例
患者,女性,54 岁,因"左乳癌术后近4 月拟行第3 次化疗"入胸外科.入院主要表现为乏力、腹胀、尿黄、纳差,无皮肤瘙痒,无肝区疼痛等.4 月前行左侧乳腺癌改良根治术,术后病理检查:左乳浸润性导管癌,术后1 月、2 月曾行EC 方案化疗2 周期.既往乙型肝炎携带病史10 年,两次化疗前后查肝功能均轻度异常,予保肝、降酶处理,未抗病毒治疗.入院查体:皮肤、巩膜无黄染,肝掌阳性,无蜘蛛痣,左侧乳房缺如,腹肌软,无压痛、反跳痛,莫非氏征阴性,肝脾肋下未触及,肝脾区无叩击痛,肝浊音界正常.
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E花环法测定转移因子活性的研究
人类外周血淋巴细胞和猪脾TF细胞的表面具有绵羊红细胞(SRBC)受体,简称为E受体,使TF细胞可与SRBC形成玫瑰花结.这是成熟TF细胞的特征之一.细胞经45℃加热1h或用胰酶处理可脱去E受体.转移因子可以促进脱E受体的TF细胞重新合成E受体.因此可用脱E受体的E花环实验来测定转移因子的活性.使用该法测定时,我们发现转移因子浓度与结花率具有相关性[1].结果报告如下.
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91、同种红细胞凝集素
红细胞表面带有阴电荷,相互排斥而不凝集.因为A型和B型血型抗原密度高,其抗体主要为IgM类,在生理盐水中能出现凝集,称为完全抗体.然而,Rb型血型抗原密度低,其抗体主要为IgG类,在生理盐水中不出现凝集,称为不完全抗体.如在溶液中加入白蛋白或者将红细胞用神经氨酸酶处理后,消除阴电荷,即或是不完全抗体也能引起凝集.
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金银花绿原酸酶法提取新工艺研究
目的:优化金银花中绿原酸的提取工艺.方法:将金银花乙醇回流前,用纤维素酶和果胶酶分别或联合处理,探讨酶的用量、处理时间、处理温度及酶的联合作用对金银花提取物得率和绿原酸得率的影响.结果:纤维素酶处理能显著提高金银花提取物得率和绿原酸得率(8.15g/100g),酶处理适温度为40℃~50℃.纤维素酶和果胶酶的联合处理对绿原酸得率影响不明显,但能显著提高提取物得率.采用该工艺绿原酸得率高可达到8.32%.结论:酶法提取新工艺能显著提高绿原酸得率.
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差异显示PCR分析高脂饮食诱导的肥胖大鼠脂肪组织的基因表达谱
本实验采用高脂饮食饲养SD大鼠,建立肥胖大鼠模型,用差异显示PCR(DD-PCR)方法比较高脂饲料组大鼠与普通饲料组大鼠脂肪组织中基因表达的差异,力求发现受饮食调控的基因,探讨高脂饮食致肥胖的分子机制.一、材料和方法1.动物模型与标本采集:20只SD大鼠分为高脂饲料组和普通饲料组.动物饲养16周.2.脂肪组织总RNA的抽提及处理:(1)脂肪组织总RNA的抽提:取1 g大网膜脂肪组织按照Trizol总RNA抽提试剂盒说明书进行.(2)总RNA的处理:用不含RNA酶的DNA酶处理抽提的总RNA以去除含有的少量基因组DNA.
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乌龙茶多糖的酶法提取及降血糖活性初步研究
目的 用纤维素酶辅助提取、膜过滤法纯化乌龙茶多糖,并研究其降糖活性.方法 比较酶处理与否两种条件下的提取量及微滤前后多糖的纯度,选择合适的提取分离路线;注射四氧嘧啶制造高血糖模型,灌胃给药(IG)28 d,观察比较茶多糖的降糖效果.结果 增加酶处理过程后提取率提高31.91%,膜过滤使得粗茶多糖纯度由纯化前的28.7%提高到45.3%;乌龙茶多糖(IG)为200 mg·kg-1 降糖效果较好(P<0.05),结论乌龙茶多糖对四氧嘧啶糖尿病小鼠有一定的治疗效果.
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唯酶抗体干扰交叉配血1例
血清中存在能凝集木瓜酶、菠萝酶处理过的红细胞抗体,可凝集自身及同型人的红细胞,干扰酶介质配血.笔者在采用木瓜酶常规配血时,发现1例患者血清与多名ABO、Rh同型供者红细胞交叉配血不合.经反复检查,发现患者血清中存在"唯酶”抗体,报告如下.临床资料患者,女,58岁,血型为B型.一年前行子宫癌手术.1998年8月1日因腹胀、乏力、浮肿、腰痛来院就诊.化验结果:WBC 3.4×109/L,Hb 68 g/L,PLT 89×109/L.
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红细胞血型抗体检测技术进展
本文通过综述盐水介质凝集试验、胶体介质凝集试验、酶处理红细胞凝集试验、抗球蛋白试验、低离子凝聚胺试验和微管凝胶检测试验等检测红细胞血型抗体的技术方法,认为微管凝胶检测试验技术将成为检测红细胞血型抗体的主流方法.
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纤维素酶法提取知母甾体总皂苷元工艺研究
目的:优化知母甾体总皂苷的提取工艺.方法:以甾体菝葜皂苷元的提取率为指标,应用L9(34)正交试验设计优化了知母中甾体皂苷的纤维素酶法提取工艺.结果:影响酶法提取甾体皂苷的主次因素为:酶用量>提取温度>固液比>水解时间.纤维素酶处理能显著提高甾体皂苷的提取率,加酶后甾体菝葜皂苷元提取率的平均值为84.6%,而未加酶的结果则为58.1%.结论:酶法提取新工艺能显著提高知母甾体皂苷的提取率.
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定期尿激酶处理对长期颈内静脉留置导管透析功能的影响
导管功能不良是中心静脉留置导管的主要并发症之一.我中心对长期颈内静脉留置导管透析的患者,采用定期尿激酶处理取得了较好的效果,报告如下.
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免疫血液学新进展
前言免疫血液学领域的重要的目的是保证给病人提供成功的血液输注.对于红细胞输注而言,这主要包括血红蛋白水平的预期提高和避免发生速发或迟发输血副作用.上个世纪,大量重要的发现使该领域有了显著的发展,血液供者和受者之间的血型相容性有了显著提高.很明显其中突出的部分包括ABO血型分型、交叉配血、抗人球蛋白试验及后来与输血前检测相关的ABO之外多种其它的血型抗原和抗体的阐明.在20世纪后期,血清学方法学上发生了一些有意义的进展,如低离子强度溶液、蛋白酶处理、自动化装置、增强剂、单克隆抗体和新的检测系统如凝胶和固相方法.另外二十世纪八十年代末和九十年代兴起的分子生物学革命开始影响免疫血液学,从而给这个经典的学科开拓了崭新的时代.
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18例木瓜酶主侧配血凝集的临床分析
在配血试验中,因菠萝酶凝集素引起交叉配血不合已有报道,而木瓜酶凝集素报道较少见.近五年来,我们对28560例患者配血试验中发现有18例木瓜酶主侧配血凝集,经检测发现患者血清中存在经酶处理后抗红细胞的凝集素.
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Ⅸ型胶原的研究进展
Ⅸ型胶原是一种由a1、a2和a3 3个不同的链通过链间的二硫键连接而成的三聚体形式的胶原蛋白分子.对经胃蛋白酶处理过的组织的提取物和小的蛋白聚糖进行的蛋白研究表明在软骨中存在特殊的胶原成分.通过分离Ⅸ型胶原多肽链及其编码的cDNA序列[1],构建了Ⅸ型胶原的结构模型,并且表明Ⅸ型胶原不同于经典的纤维性胶原(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原).Ⅸ型胶原主要存在于透明软骨、玻璃体、腰椎间盘中,与腰椎间盘疾病、多发性骨骺发育不良及周围神经系统发育有相关性,而其与口腔颌面部软骨疾病的关系至今未见报道.本文就其研究进展作一综述.