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细胞因子和系统性红斑狼疮(续上期)
细胞因子能改变抗-ds-DNA抗体的产生吗?SLE病人在疾病活动期间抗-ds-DNA抗体的产生与T细胞活动成比例的增加.这种增加是相对于SLE静止期而言,在静止期里IgG的产生与B细胞活性有关而与T细胞活性无关 .因此,在疾病的活动期T细胞因子可能对抗-dsDNA抗体的产生起重要作用.SLE病人的CRP水平是正常的,除非病人患有滑膜炎,浆膜炎或并存的感染,而IL6和TNFα水平的增加可引起疾病突发.SLE活动期病人的TNFα和IL6水平是升高的,但当与RA病人相比TN Fα与其可溶性受体的比率是显著减少的.这种发现表明SLE病人的TNFα活性是相对不足的. 也有可能是较低水平的TNFα就能引起抗-ds-DNA产生,当RA亚型病人在接受了抗-TNF α治疗后就产生了ds-DNA抗体.
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HIV相关脑病患者中枢神经系统来源的HIV-1 Tat蛋白对HUVECs活性的影响
目的 在原核细胞中表达并纯化HIV相关脑病(HIV-associated dementia,HAD)患者基底核(basal ganglia,BG)来源HIV-1 Tat蛋白,研究其对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)活性的影响.方法 以本室保存的重组质粒pGEX-KG-tat为模板扩增tat,构建重组表达载体pET-32a-tat.转化BL21(DE3)并用IPTG诱导表达Tat蛋白.Tat蛋白经镍亲和层析柱和凝胶过滤预装柱纯化、SDS-PAGE和Western blot(WB)鉴定后浓缩,测定BCA蛋白浓度,cck-8检测不同浓度Tat对HUVECs活性的影响.结果 在BL21大肠杆菌中表达、纯化得到了纯度较高的Tat蛋白,BCA测定浓度为0.47 mg/ml.随着Tat浓度的增加,HUVECs活性逐渐降低,与阴性对照组相比,100 ng/ml、200 ng/ml两组细胞活性差异均无统计学意义(P>0.05),300 ng/ml、400 ng/ml、500 ng/ml、1000 ng/ml四组细胞活性差异均有统计学意义(P<0.05),但四组组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 在原核细胞中高效表达了具有生物学活性的HIV-1 Tat蛋白,浓度达到300 ng/ml可显著降低HUVECs的活性.
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小柴胡汤分解剂抑制CVB3m作用及对细胞活性影响
目的探讨小柴胡汤(XCT)分解剂在体外抗CoxB3病毒(CVB3m)及保护细胞的作用.方法采用微量细胞培养技术和中性红摄入法,以细胞病变及细胞活性为判定药物细胞毒性及病毒增殖的指标,观察不同浓度的XCT及分解1、2号抗CVB3m的作用及对细胞活性的影响.结果低于大无毒剂量浓度的XCT和分解1号、2号对细胞活性未见明显影响,并在一定浓度范围内有促细胞生长、增强细胞活性的作用.治疗组,XCT及其分解1、2号对CVB3m增殖均有明显抑制作用,尤以分解1号作用明显,抑制率为107.6%;同等浓度下,预防治疗组药物抑病毒率明显高于治疗组,高可达128.1%;抑病毒吸附组也有明显抑病毒作用.结论通过比较XCT及其分解1、2号作用细胞与病毒的不同环节,提示XCT具有保护细胞减轻病毒感染功能及直接杀伤CVB3m的作用.
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三氧化二砷对H22肝癌小鼠免疫功能的影响
三氧化二砷治疗急性粒细胞性白血病在临床上已取得了一定的功效,大量研究表明AS2O3对肿瘤细胞具有促进凋亡作用.目前有学者推测,AS2O3可能是通过增强机体免疫功能达到抗肿瘤效应.我们通过研究AS2O3对H22肝癌小鼠外周血的T细胞亚群及NK细胞活性的影响来探讨AS2O3的抗肿瘤作用.
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B超监测自体脾组织移植及临床意义
目的:研究自体脾组织移植超声监测的临床意义.方法:超声随访自体脾组织移植患者26例,同步测定免疫因子Tuftsin、Ig及NK细胞活性.结果:26例中,观察到阳性结节18例,免疫学指标测值均在正常范围;阴性结节8例,免疫学指标测值正常范围3例.结论:超声检查直观、准确、重复性好,超声发现阳性结节,即可认为自体移植脾存活.
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老年细菌性肺炎免疫功能的研究
目的 了解老年细菌性肺炎T淋巴细胞亚群、NK细胸比例及免疫球蛋白变化及临床意义.方法 测定56例老年细菌性肺炎外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞活性及免疫球蛋白,并与42例健康老年体检者作对照.结果 老年细菌性肺炎CD3、CD4、CD4/CD8比值明显低于对照组(P<0.01),CD8明显高于对照组(P<0.01).结论 老年细菌性肺炎患者存在免疫功能障碍,测定T淋巴细胞亚群、NK细胞比例及免疫球蛋白对了解老年细菌性肺炎患者免疫力,指导治疗有一定的临床意义.
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消化道肿瘤-T-术后早期肠内营养疗效研究
目的评价消化道肿瘤手术后早期肠内营养的安全性,比较手术后短期应用要素制剂爱伦多的肠内营养与标准肠外营养支持的疗效.方法62例消化道恶性肿瘤手术患者,随机分为对照组、肠外营养组和肠内营养组.手术后第一天开始等热卡、等氮量的肠外或肠内营养支持一周.检测体重、机体测量指标、血浆各内脏蛋白浓度及氮平衡等营养指标,外周血T细胞亚群、NK细胞和NK细胞活性等免疫指标及血清氨基酸谱.结果三组病人术后体重下降分别为4.26±1.03ks、2.04±0.65ke和2.12±o.72kg,对照组与肠外营养组、肠内营养组之间差异有显著性(P<0.05),后两组之间无差异.术后各内脏蛋白浓度均低于术前,对照组降低明显,与肠外或肠内营养组之间差异有显著性(P<0.05),而后两组之间无差异.三组病人平均氮平衡为-8.6±3.12g/d,-4.22±2.02g/d及-3.88±2.35g/d,对照组与肠外或肠内营养组之间差异有显著性(P<0.05),而后两组之间无差异.手术后各组病人外周血T细胞亚群、NK细胞和NK细胞活性均不同程度下降,但三组之间差异无显著性意义.三组病人血清谷氨酰胺水平明显下降,术后1周对照组和肠外营养组血清谷氨酰胺水平仍处于低水平,而肠内营养组却有一定程度恢复.结论消化道肿瘤手术后早期肠内营养支持是安全、有效的方法,短期肠内营养和肠外营养支持的临床效果基本相同.
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Parthenolide对结肠癌细胞增殖、迁移、凋亡和 VEGF-C表达的影响
目的::小白菊内酯( Parthenolide)可通过不同的途径影响肿瘤的进展,但有关其对结肠癌细胞的生物学行为的影响报道较少。本研究的目的就是探讨Parthenolide干预在结肠癌细胞生长、迁移和凋亡中的生物学作用,以及其对结肠癌细胞分泌VEGF- C的影响。应用QRT-PCR、Wstern Blot、免疫组织化学、细胞增殖、迁移及凋亡实验检测Parthenolide干预后结肠癌细胞生物学行为的变化。结果:parthenolide干预后48 h开始抑制细胞活性( P<0.05);单独应用parthenolide不能影响结肠癌细胞的迁移和凋亡;parthenolide处理后可抑制结肠癌细胞分泌VEGF-C。尾静脉注射Parthenolide可抑制移植瘤生长、淋巴管生成。结论:这些研究表明parthenolide能有效抑制结肠癌细胞及移植瘤的生长,其可能成为潜在的抗癌药物。
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血红素对人肾小管上皮HK-2细胞的损伤作用研究
目的 观察血红素对人肾小管上皮细胞HK-2的损伤作用.方法 体外培养人肾小管上皮HK-2细胞,经50、100、150、200μmol/L血红素处理3、6、12 h后,MTT法检测细胞活性,光镜、电镜观察细胞病理形态改变.结果 与对照组比较,50μmol/L血红素组细胞活性未见明显变化,100、150、200μmol/L血红素明显降低HK-2细胞活性;光镜下可见细胞皱缩、变圆;超微结构改变主要为微绒毛数量减少、内质网扩张和空化等.结论 一定浓度的血红素降低HK-2细胞活性,引起其形态学改变.
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纯镁超声微弧氧化-植酸-葛根素涂层的细胞相容性
目的 为了弥补微弧氧化缺陷以及提高其生物活性,在镁超声微弧氧化(UMAO)表面制备一层植酸掺杂葛根素粒子的植酸复合涂层.方法 UMAO,植酸(phytic acid,PA)作为对照组,PA-10 μg/mL葛根素为实验组,通过带能谱SEM观察表面涂层的形貌以及进行元素分析,以小鼠成骨细胞(MC3T3-E1)为实验细胞,并通过CCK-8试剂盒检测试件表面细胞增殖和黏附能力,并采用激光共聚焦显微镜观察成骨细胞在涂层表面的铺展情况.结果 在黏附和增殖实验中,PA涂层的吸光度大于MAO涂层,PA-10 μg/mL涂层吸光度值均大于对照组,且实验结果具有统计学意义.相对于MAO涂层,PA涂层,细胞在PA-10 μg/mL涂层上充分铺展,细胞核数量多.结论 纯镁超声微弧氧化植酸-10 μg/mL葛根素复合膜层的生物活性提高了,具有佳的生物相容性.
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白细胞介素-18与肿瘤相关性研究
白细胞介素-18(IL-18)是一种重要的炎症和免疫调节因子,具有诱导IFN-γ生成、促进T细胞增殖活化,增强NK和CTL细胞活性、增强Fas介导的细胞毒作用等多种生物学功能,具有促进和抑制肿瘤的双重作用。本文将从IL-18的生物学特性、促肿瘤和抗肿瘤三方面进行综述,以期为肿瘤的治疗寻找新的靶点。
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肝癌患者外周血淋巴细胞亚群、白细胞介素2和自然杀伤细胞活性的研究
肝细胞癌(HCC)患者的免疫功能,尤其是细胞免疫功能与肿瘤的发生密切相关.淋巴细胞亚群的变化与严重感染性疾病和肿瘤的发生发展相关;自然杀伤(NK)细胞可直接杀伤肿瘤和病毒感染的细胞[1],也可分泌细胞因子调节其他免疫细胞功能.本研究检测HCC患者外周血淋巴细胞亚群及白细胞介素2(IL-2)、NK细胞活性,以了解患者体内免疫功能状态,为临床诊断和治疗提供依据.
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类风湿关节炎患者淋巴细胞协同刺激分子和活化标志的表达及意义
类风湿关节炎(RA)是以多关节滑膜慢性炎症导致滑膜成纤维母细胞增生、大量淋巴细胞、巨噬细胞、浆细胞浸润为特征的一种常见自身免疫性疾病.研究发现,淋巴细胞活性及其信息传递异常[1]与RA的发生密切相关.我们采用流式细胞仪分析RA患者外周血和关节滑膜液淋巴细胞协同刺激分子CD28/B7(CD80或CD86)、CD154(CD40L)/ CD40和淋巴细胞活化标志CD25、人白细胞DR抗原(HLA-DR)的表达,以探讨这些指标在RA诊断和治疗中的应用价值.
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丙型肝炎肝硬化CD56+T细胞和NK细胞数量及抗肿瘤活性
目的:研究CD56+T细胞和NK细胞在丙型肝炎肝硬化时的数量及抗肿瘤细胞活性变化.方法:丙型肝炎肝硬化患者18例,快速肝穿获得肝组织,分离肝脏单个核细胞(MNC),流式细胞仪分析CD56+T细胞及NK细胞数量,肝脏MNC和外周血单个核细胞(PBMC)分别与IL-2混合培养,检测IFN-γ含量及抗肿瘤细胞活性.结果:健康志愿者、慢性丙型肝炎患者、丙型肝炎肝硬化患者肝脏MNC中CD56+T细胞数量百分比分别是20.4%±6.2%,11.2%±3.1%和5.0%±1.6%;NK细胞比例分别是31.1%±9.7%,31.6%±8.3%和18.3%±5.4%;肝脏MNC的IFN-γ产量分别是7.4±2.4,3.2±1.8和1.9±0.5μg/L;抗肿瘤细胞的细胞毒性分别是61.1%±17.1%,59.2%±14.6%,26.7%±8.5%.以上四组数据均以肝炎肝硬化患者变化为显著(P<0.05).结论:丙型肝炎肝硬化时肝脏CD56+T细胞和NK细胞数量及抗肿瘤细胞活性分别下降.
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肝细胞与骨髓间质干细胞共同培养时的肝细胞功能
目的:利用原代培养的大鼠肝细胞与骨髓间质干细胞共同培养,研究骨髓间质干细胞对肝细胞功能的影响,以便更好用于肝细胞移植及生物人工肝.方法:采用低浓度胶原酶原位循环灌流法分离大鼠旰细胞,获得有活性生的肝细胞进行原代培养.台盼蓝排斥法计算细胞产量和细胞活性;光镜下动态观察细胞形态学改变,并收集不同时期培养上清检测其细胞分泌等功能.比较肝细胞单纯培养及其与骨髓间质干细胞共同培养时细胞的功能.结果:培养7 d时两组均仍然维持白蛋白分泌及尿素合成功能;共同培养组与单纯肝细胞培养组在白蛋白分泌(13.75>2.179,P<0.05)及尿素合成功能(7.27>2.179,P<0.05)存在显著性差异,共同培养组明显高于单纯培养组.结论:肝细胞与骨髓间质干细胞共同培养,可以使肝细胞维持特异性功能,提高肝细胞活性.
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TGFβ1基因转录调控研究
转化生长因子β1是一种多功能的细胞活性调节因子,TGF-β1失调在多种疾病的形成中发挥重要作用,在不同的组织器官和不同的疾病进程中其作用不同,调节不同组织中TGF-β1蛋白的表达对于疾病的治疗有重要意义,TGF-β1基因启动子序列的成功克隆为在分子水平了解这种蛋白的调节机制提供了基础.现就TGF-β1基因启动子的结构、顺反式作用因子、细胞因子反应元件以及其基因多态性对其活性影响的相关研究进展进行了阐述.
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大鼠骨髓间充质干细胞原代培养换液频度与细胞增生的关系
目的:探索成体大鼠的骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离、体外培养方法,观察采用不同的换液频度与细胞增生和生长的关系,为其应用提供实验依据.方法:从大鼠股骨获取骨髓,采用梯度离心的方法进行分离,在含10 mL/L胎牛血清的DMEM中常规培养,以MTT法检测不同的时间换液时细胞的生长曲线,并用碱性磷酸酶(AKP)检测的方法对分离的细胞进行鉴定.结果:采用梯度离心方法分离的骨髓间质干细胞的纯度较高,细胞活性佳,AKP染色为强阴性.首次换液后,每天更换培养液比每隔3-4 d换液一次更有利于MSCs的增生,原代长满培养瓶底比每隔2-3 d换液一次平均提前2 d.结论采用梯度离心的方法分离可获得纯度较高的骨髓间质干细胞,是简单易行的分离方法,每天更换培养液比每隔3-4 d换液一次更有利于MSCs的增生和形成形态均一的细胞集落.
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慢性乙型肝炎的免疫治疗
0引言慢性乙型肝炎患者均存在免疫功能紊乱,如其外周血的CD3+、CD4+、CD4+/CD 8+、NK与LAK细胞活性均明显下降等.针对HBV抗原的特异性CD8+T细胞免疫功能低下是造成乙肝慢性化的主要原因[1].国内多数患者在幼年时感染HBV,处于对HBsAg的免疫耐受状态.肾上腺皮质激素曾被应用于慢性活动性乙型肝炎的治疗,但是激素可抑制抗体的产生,且长期应用易继发感染.所以近年来乙肝免疫学治疗的关键在于如何打破免疫耐受状态,诱导有效的机体免疫,抑制并清除HBV.近期国内外的研究,均侧重于免疫调节剂和乙肝治疗性疫苗的研究.
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IL-4增强IL-2活化的A-NK细胞对人直肠癌CC95的抗肿瘤作用
目的:用IL-4联合IL-2共同诱导A-NK细胞,研究A-NK细胞体外细胞毒性及对直肠肿瘤生长的抑制作用.方法:用基因重组的IL-2和IL-4联合活化A-NK细胞,用LDH-L释放法测定效应细胞的细胞活性,同时观察A-NK细胞对人直肠癌细胞在裸鼠体内的生长抑制作用.结果:IL-2单独或IL-2联合IL-4均可以诱导A-NK细胞,但二者联合效果更好,通过LDH-L测定活化的A-NK细胞可在体外杀伤K562,Anip973和CC95细胞(39.000±9.16vs77.68±12.80,43.10±10.05 vs 80.02±13.74,42.14±9.72vs79.10±2.65,P<0.01),抑制人直肠癌肿瘤在裸鼠体内的生长(1.04±0.15 vs 0.62±0.16,P<0.01),提示A-NK细胞膜表面存在IL-4受体的表达.结论:IL-4能够增强IL-2诱发的A-NK细胞抗肿瘤活性,此方法在将来肿瘤临床治疗中具有潜在的应用价值.
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棕色脂肪与减肥
棕色脂肪细胞和广为人知的白色脂肪细胞在能量代谢中发挥着截然相反的作用.现已明确,动物和人类新生儿的棕色脂肪组织(BAT),对于维持正常体温有着重要的作用,它的这种作用,是通过其线粒体中的解偶联蛋白1(UCP1)来完成的,这种物质使得葡萄糖和脂肪酸分解产生的能量不能转化为三磷酸腺苷(ATP,为生物体直接供能的物质),而只能转化为热能.之前的观点认为,BAT在人类生长发育早期较活跃,至成年后似乎没有什么可用之处.然而,近的证据表明,成年人体内BAT的表达远高于之前以为的水平,例如,妇女和偏瘦成年人的BAT表达较高.因此,我们是否可以推测,BAT的活性增加可使肥胖风险降低?然而,目前尚不清楚利用BAT减肥的有效性;即使在动物模型,产热机制仍不能完全被人们所了解.即使这样,内分泌学家对BAT仍有很大的兴趣,其中包括激素影响脂肪细胞活性的能力4BAT不仅在正常的生理状态时产热,而且在激素过多或不足的病理状态时也可发挥产热效应.另外,BAT的产热模式具有性别差异,可能是由于男女不同的性激素导致的.以上研究结果一致认为,BAT的活性对内分泌系统有重要作用,是治疗肥胖的一个潜在新目标.