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静压力对脂肪干细胞与静电纺丝纳米纤维细胞相容性的影响
背景：静电纺丝聚乳酸/聚己内酯纳米纤维是课题组自行合成的生物可降解材料，前期研究表明该材料生物相容性优越，但缺乏对该材料力学方面的研究。
目的：研究静压力对脂肪干细胞与静电纺丝聚乳酸/聚己内酯纳米纤维支架细胞相容性的影响。
方法：将脂肪干细胞接种到由聚乳酸和聚己内酯合成的静电纺丝纳米纤维支架上，置于含体积分数为10%胎牛血清的DMEM低糖培养基中培养。利用静压力装置分别对培养板持续加载0，15，30，45 kPa的静压力，加载时间为4 h。采用MTT法、活死细胞染色检测脂肪干细胞在静电纺丝纳米纤维支架上的增殖、黏附和活性，评价脂肪干细胞与静电纺丝纳米纤维的细胞相容性。
结果与结论：①在体外培养条件下，经不同静压力持续加载4 h后，MTT法增殖检测得出的各组吸光度值经单因素方差分析差异存在显著性意义。在0-30 kPa压力范围内，吸光度值随静压力的增加而增加，到45 kPa时，吸光度值反而下降。各组间多重比较显示差异均有显著性意义；②用MTT法进一步检测细胞黏附百分率，各组间差异亦有显著性意义；③活死细胞染色结果印证了上述结果，统计分析表明，无论是单因素方差分析还是各组间配对t检验，4组间活细胞百分率的差异均有非常显著性意义；④适当大小的静压力可促进脂肪干细胞与静电纺丝纳米纤维的生物相容性，细胞增殖、黏附及活性有所提高，但过高的静压力会抑制细胞的生物学行为，从而影响脂肪干细胞与静电纺丝纳米纤维的相容性。 -
改良细胞灌流分离装置提高心肌细胞分离效率
背景:成熟心肌细胞分离过程复杂,获得数量稳定、高质量的心肌细胞迄今仍无统一、高效、活性好、简便的方法可循.目的:通过改良Langendorff细胞灌流分离装置,探讨一种更高效的成熟心肌细胞分离方法.方法:采用细胞灌流分离装置,用Ⅱ型胶原酶经主动脉逆行灌流法分离成年SD大鼠心肌细胞.对照组采用传统Langendorff细胞灌流分离装置;实验组采用改良Langendorff细胞灌流分离装置.消化结束即刻在显微镜下观察细胞形态、杆状细胞比率并计算活细胞产量;通过锥虫蓝染色评价心肌细胞活性.结果与结论:实验组活细胞产量为(3.7±0.5)×10 7,显著高于对照组(2.1±0.4)×1 07,差异有显著性意义(P＜0.05).实验组锥虫蓝染色阴性的杆状细胞比率(85.6±5.5)％,显著高于对照组(71.8±5.7)％,差异有显著性意义(P＜0.05).提示采用改良Langendorff离体心脏灌流系统可获得高产量、高活性的心肌细胞,提高了成熟心肌细胞的分离效率,为成熟心肌细胞培养及研究奠定了基础.
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CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞活性与多药耐药的相关性
背景：肿瘤干细胞与肿瘤的复发、转移以及耐药等之间存在十分密切的联系。
目的：探讨CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞活性与多药耐药的相关性。
方法：运用免疫磁珠法从多药耐药乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中分选出CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞。流式细胞仪测定分选后CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞亚群比例和细胞膜P-gp荧光强度，RT-PCR法检测多药耐药基因MDR mRNA表达水平。
结果与结论：①获得的CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞比例在90%以上；②CD44+CD24-/low细胞亚群成球比例明显强于 non-CD44+CD24-/low细胞亚群；③CD44+CD24-/low细胞亚群的细胞膜 P-gp 荧光强度显著高于MFC-7/ADR细胞株(P <0.05)；④CD44+CD24-/low细胞亚群的MDR mRNA表达水平显著高于MFC-7/ADR细胞株(P <0.05)；⑤结果表明，分选得到的CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞具有很强的体外成球能力，高表达P-gp蛋白和MDR mRNA可能是导致多药耐药的原因之一。 -
不同保存介质对脐带间充质干细胞活性的影响
背景:脐带间充质干细胞的临床应用面临移植前保存的问题,而临床保存介质对移植前细胞活性的影响直接关乎移植后疗效,目前却缺乏对临床介质保存效果的系统性研究.目的:评价临床常用保存介质对脐带间充质干细胞活性的影响.方法:在4℃与室温(25℃)条件下,将脐带间充质干细胞在临床常用保存液(0.9％氯化钠注射液,5％葡萄糖注射液和1％人血白蛋白溶液)中保存2,4,6h,观察上述保存介质对脐带间充质干细胞活性、凋亡/死亡率、多向分化能力及DNA损伤的影响.结果与结论:无论在4℃还是室温条件下,细胞在临床常用保存介质中的活性均在短期内呈时间依赖性下降.此外,不同保存介质引起细胞死亡而非凋亡,且死亡率呈时间依赖性增加;经不同介质保存后,细胞出现DNA损伤,但其增殖与多向分化能力未受明显影响,提示细胞核DNA损伤为细胞活性下降的关键因素.
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重组血管抑制剂Ad-METH1对培养内皮细胞生物学的影响
目的 研究重组血管抑制剂Ad-METH1对内皮细胞生物学的影响.方法 将Ad-METH1作用于培养的人脐静脉内皮细胞,通过MTT比色实验、细胞周期分析等方法,研究Ad-METH1对内皮细胞增殖的影响,探讨血管抑制剂抑制增生性瘢痕的可能机制.结果 Ad-METH1对培养的人脐静脉内皮细胞增殖活性,产生了明确的抑制作用.结论 Ad-METH1对内皮细胞增殖活性的抑制,是血管抑制剂抑制增生性瘢痕的可能机制之一.
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体外纯化方法对脂肪颗粒细胞活性的影响
目的 探讨纯化方法对自体脂肪移植存活率的影响.方法抽取10例腹部吸脂患者的脂肪颗粒,按不同离心速度和时间分组纯化,通过组织形态学观察、葡萄糖转移实验等对比脂肪颗粒细胞活性的体外差异,并通过动物实验观察植入后脂肪组织体积、质量的变化.结果在离体情况下,离心对脂肪细胞的活性有影响;而实验动物各组在移植物残留体积和质量上的差异并无统计学意义.结论离心纯化方法在降低纯化脂肪的时间、提高纯化效率方面优于静置纯化方法,且对体内存活率无明显影响,临床上值得推广.
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离心法与过滤吸附法处理脂肪组织对脂肪细胞活性影响的比较
目的：比较低速离心法（800 r/min）与过滤吸附法处理脂肪组织对移植脂肪细胞活性的影响。方法从16例健康女性腹部或大腿部获取脂肪后，对脂肪组织分别进行离心（离心组）和过滤吸附（过滤吸附组）处理，应用葡萄糖转运法和锥虫蓝染色法检测细胞活性，并行常规HE染色观察脂肪细胞组织学变化。结果过滤吸附组和离心组葡萄糖转运量分别为（2.00±0.36）mmol/L和（1.50±0.25）mmol/L，差异具有统计学意义（P<0.05）。过滤吸附组和离心组脂肪细胞存活率分别为（91.0±3.0）%和（85.5±3.2）%，差异无统计学意义（P=0.417）。组织学观察显示离心组有少量脂肪细胞存在损伤，细胞膜破裂不完整；过滤吸附组脂肪细胞分布均匀，形态保持完整，基本没有损伤。结论过滤吸附法处理脂肪颗粒与离心法相比，脂肪细胞活性较高，是一种有效且可行的脂肪处理方法。
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眼睑皮肤淋巴组织增生性病变1例
患者朱××男50岁住院号42936因发现右上睑皮肤肿块生长一个半月入院.患者一个半月前发现右眼上睑有新生物生长,开始生长较快,至近半个月来生长速度减慢.无疼痛不适.全身检查无异常发现.血尿、胸片及心电图等检查未见异常.右跟上睑皮肤可见一圆形淡红色肿块,约1.0×1.0×0.2cm大小,略高于皮面,表面无色素溃疡,活动度较大.跟睑闭合不受影响.眼球及眼眶无异常.于2000年8月1 6日在局麻下行右眼上睑皮肤肿块切除术.术中完整切除肿块,可见肿块侵及皮肤全层,与皮下组织无粘连.本院病理组织学检查报告;倾向非何杰金氏淋巴瘤.肿块标本经二军大长海医院免疫组化标记检查,报告如下:LAC(+)CD3(+)CD20(部分+)CD68(-)OPD4(部分+)Ki-67(+-++)CD79(-)诊断:右上睑淋巴组织增生性病变,增殖细胞活性为低至中度.
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纯钛表面含锌活性涂层对成骨细胞生物学活性影响的研究
目的 采用微弧氧化(micro-arc oxidation,MAO)技术,在纯钛表面制备含锌(Zn)活性涂层,并评价其对成骨细胞活性的影响.方法 本实验于2009年10月至2010年10月在中国医科大学附属口腔医院中心实验室进行.以机械抛光纯钛试样作为对照组(CP组)；经MAO技术处理的纯钛涂层试样根据钙(Ca)含量不同分为高钙组(H-Ca组)、低钙组(L-Ca组),以及在低钙组的涂层中加入锌元素的低钙加锌组(L-Ca-Zn组).每组32个试件.将4组试样材料与MG63细胞复合培养,利用扫描电子显微镜(SEM)观察、噻唑蓝(MTT)比色试验、碱性磷酸酶(ALP)活性测定及酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法,评价材料对成骨细胞黏附、增殖、分化及矿化的影响.所得数据采用SPSS13.0软件进行单因素方差分析(α=0.05).结果 在实验检测期间,H-Ca组试样对成骨细胞的生长增殖、分化、矿化作用均优于L-Ca组,差异有统计学意义(P＜0.05).比较L-Ca-Zn组与H-Ca组可以看出,在实验检测初期H-Ca组试样对成骨细胞的生长增殖、分化、矿化作用优于L-Ca-Zn组；随着观察时间的延长,L-Ca-Zn组试样细胞的增殖水平和ALP活性与H-Ca组间差异无统计学意义(P＞0.05).比较L-Ca-Zn组和L-Ca组可以看出,在实验检测初期L-Ca-Zn组试样对成骨细胞的作用与L-Ca组差异无统计学意义(P＞ 0.05)；随着观察时间的延长,L-Ca-Zn组试样显示出较L-Ca组试样具有更好的提高成骨细胞活性的作用(P＜0.05).结论 采用MAO技术制备的含锌活性涂层纯钛可在一定程度上促进成骨细胞黏附、增殖、分化及矿化,具有良好的生物相容性.
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100.营养和免疫
营养素不足已成为免疫低下的原因,蛋白能量-营养障碍尤其会影响到细胞免疫,造成胸腺萎缩、CD4+ T细胞减少,使麻疹、结核重症化.虽然血清免疫球蛋白值并未降低,但可见分泌型IgA产生减少,部分抗体产生减少,虽中性粒细胞的游走功能、吞噬功能无变化,但杀菌能力亦降低.在补体系统中以C3、B因子为主的C2、C5、C6、C9也有所降低.锌缺乏可造成严重免疫低下,使T细胞减少、功能降低、T细胞依赖性抗体的产生出现障碍、血清中免疫球蛋白值降低.除此之外,还可引起NK细胞活性减弱,中性粒细胞及单核细胞的游走能力减弱.锌对DNA、RNA的增幅、转录因子、蛋白激酶的功能也产生重要影响.
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孩子生病有时也是件好事情
说起孩子的生病,估计不少家长的脑海中会涌出不少负面词汇:紧张、担心、烦恼、焦虑、烦躁等等.孩子生病如同一个梦魇,让家长们恐慌.我想对有孩子的家长说,你们尝试过用快乐的心情面对疾病吗?你们知道疾病的发生有时候对孩子也有好处吗?你们知道好心情能帮助孩子更快地恢复吗?生病对人类来说首先是件好事情.生病时,例如发热,是机体免疫系统为了抵御感染而产生的一种免疫保护性反应.发烧时机体内的各种免疫功能都优于体温正常时,包括新陈代谢增快、抗体合成增加和吞噬细胞活性增强.这些免疫功能能够抑制病原体的生长、繁殖,有利于病人恢复.通俗地讲,发烧是人体面对病菌使出的一招“杀手锏”,发烧是为了“烧死”体内的病菌.
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持续负压封闭引流（VSD）在手足外伤创面应用中的护理体会
Fleischman ［1］等于1992年首次将持续负压封闭引流（vacuum sealing drainage ，VSD）术应用于开放性骨折合并软组织缺损，取得了很好的疗效。近年来随着对该技术原理不断认识，其在感染或非感染伤口、溃疡、软组织损伤的治疗中得到了广泛的应用［2］。持续负压吸引具有高效性引流特点，可随时排除创面处积液实现引流区域“零聚集”。李金清［3］等发现持续性负担呀吸引能增强白细胞活性，增强其吞噬作用，减少创面细菌，加速肉芽增生从而促进组织修复。我院烧伤整形外科自2010年引进VSD技术将其应用于皮肤软组织缺损，难愈性溃疡，手足外伤等疾病，取得了可喜的疗效。现将2012年1月至2012年6月我院应用VSD技术治疗39例严重手足外伤创面愈合情况及护理体会报道如下。
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多疗程化疗肿瘤患者免疫功能变化的研究
本文研究了住院肿瘤患者化疗前后T细胞表型及NK细胞活性,探索多疗程化疗肿瘤患者细胞免疫功能的变化规律,以期为临床肿瘤化疗病人择期应用生物反应调节剂提供临床免疫学依据.
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Notch信号通路对周围T淋巴细胞活性及分化的调控作用
Notch是一种物种间表达高度保守的跨膜蛋白受体,其在胚胎及出生后个体的生长发育中起重要的调节作用.Notch首次在果蝇中被发现,因其功能缺失后果蝇翅膀产生缺口而得名.在哺乳动物中,Notch受体有4种:Notch1-Notch4,其配体分为Deltalike与Jagged两类,前者包括Delta1、Delta3、Delta4或DLL1、DLL3、DLL4,后者包括Jagged1和Jagged2.当配体与Notch受体结合而将其激活后,Notch活性片段进入细胞核,调控Notch靶基因HES家族或HEY家族的表达.
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细胞毒性T淋巴细胞活性检测方法进展
细胞毒性T 淋巴细胞（ Cytotoxic T lymphocyte， CTL）活性的测定是了解机体细胞免疫功能的重要方法。肿瘤免疫治疗中使用肿瘤表位分子使特异性的CTL激活并扩增，达到清除肿瘤细胞的目的［1］，抗病毒多表位DNA 疫苗也在快速发展［2］，这些研究中CTL的定性和定量检测非常重要，因此如何更好地检测CTL活性成为一个关键的问题。近年来，许多新的评估CTL活性的方法得到发展，本文就此做以综述。
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体外血液实验创新：用系统模式研究红细胞多种调节功能的进展
系统血液生物学有关理论认为血液系统是由分系统和子系统组成。各分系统和子系统生物功能有不同分功，但它们之间还有协作调控关系。红细胞血红蛋白参与氧和CO2呼吸功能调控，红细胞膜有多种受体，如补体受体、趋化因子受体参与补体活化，细胞因子浓度调控，红细胞胰岛素受体参与胰岛素和血糖浓度调控［1-7］。当异抗原（如艾滋病毒）进入血液后，首先激活补体系统，艾滋病毒颗粒黏附上补体C3b，被红细胞CD35分子作用后，降解为C3 d和C3 dg ，将这种艾滋病毒交给B淋巴细胞CR2分子处理，终通过有关机制递交给CD4阳性淋巴细胞而发病。有关研究还发现红细胞可释放NK细胞增强因子，调控NK细胞活性。红细胞血红蛋白参与抗淋巴细胞代谢中氧化作用，使 CD4／CD8比值上调。红细胞数量巨大，膜受体种类众多，红细胞参与血液免疫反应和内分泌及生化反应等系统血液生物学功能调控机制复杂。淋巴细胞可分泌抗体和各种白细胞因子参与抗感染和抗肿瘤免疫反应，淋巴细胞膜有多种受体如激素受体参与内分泌功能调控等。血小板可释放多种凝血因子调控凝血过程，血小板模有补体受体参与补体活化调节，血小板模有CD55、CD59分子参与T淋巴细胞活性调节［4］。所有血细胞都参与抗感染和抗肿瘤免疫反应，血液系统对外来致病原的反应是一种系统血液免疫反应［1-7］。这需要用系统血液生物学的理论和系统模式实验方法学去研究，才会有新发现和理论创新。这方面研究工作有很大进展，现将有关研究进展综述如下。
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地龙肽对小鼠NK、MΦ细胞活性的影响
地龙又称蚯蚓,是我国宝贵的中药材之一.临床上常用于治疗细菌、病毒感染性疾病、免疫性疾病和肿瘤[1,2].本实验所用的地龙肽(Lumbricus Peptide,LP)是从新鲜正蚓科爱胜属赤子爱胜蚓体内提取的小分子量多肽.很多文章已经报道了地龙提取物有细胞和体液免疫的作用[3,4],本实验室已证实LP可增强巨噬细胞和NK细胞分泌TNF、NO的水平,提高机体的免疫功能.在本实验中我们通过给小鼠口服不同剂量的LP,就其对巨噬细胞及NK细胞非特异性免疫功能的影响进行了研究,为地龙肽将来能应用于临床提供实验理论依据.
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损毁大鼠下丘脑弓状核对NK细胞活性及IL-2影响的研究
弓状核是下丘脑重要的神经核团,内含多种神经元胞体和几十种化学物质,其神经纤维联系也十分广泛,并参与垂体前叶内分泌、痛觉调制、免疫、情感活动、摄食等多种重要生理活动的调节过程,是神经-内分泌学研究的重要神经核团.我们已往的实验研究表明,弓状核对T、B淋巴细胞、RBC免疫功能均有调节作用[1],但对NK细胞活性的影响未见报道.为了探讨下丘脑弓状核对NK细胞活性和IL-2的影响,实验利用化学损毁的方法[2],建立了下丘脑弓状核损毁的大鼠模型.然后在成年期,观察了NK细胞和白细胞介素-2的活性[3],结果显示:在弓状核损毁组其NK活性细胞为26.39±1.49(U/ml),对照组为42.50±2.91(U/ml,P＜0.01),IL-2在弓状核损毁组为13.30±1.49 (U/ml),而对照组为23.40±2.91 (U/ml,P＜0.01),表明弓状核对机体的NK细胞活性和IL-2水平有明显的影响.
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复方片剂及单味药对化疗损伤小鼠细胞因子及NK细胞活性的影响
本文对源自<中国药典>具有填精益髓之功效,有人参、当归、黄芪、白、茯苓、熟地等十二味中药组成的人参养荣丸,在保证有效成分不损失的条件下,实行剂型改革,由蜜丸变为片剂--人参养荣片(RSYRP),并建立了小鼠化疗损伤的实验模型[1].研究了该片剂及其组方中几种主要单味药对小鼠NK细胞活性及细胞因子(IL-1、IL-6 、IL-12、EPO、G-CSF)产生的影响,并与外源性G-CSF的作用进行比较.
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白细胞介素12与慢性乙型肝炎
白细胞介素12(Interlukin-12,IL-12)是一种由单核吞噬细胞产生的细胞因子.它主要作用于细胞毒性T细胞(CTL)和自然杀伤细胞(NK),是迄今为止所发现的有效的CTL和NK细胞活性刺激因子.目前研究认为,IL-12能增强Th1应答和抑制Th2应答,在调控Th细胞的分化上起重要作用.
