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使用沃特世超高效合相色谱分析短杆菌肽
短杆菌肽是由芽孢杆菌产生的一种常见和已被良好表征的跨膜肽物质,被用作对抗革兰氏阳性和某些革兰氏阴性细菌的局部用抗生素.用反相液相色谱(RPLC)分析疏水性肽和蛋白质难度很大.因为溶液中经常需要使用洗涤剂保持疏水性物质的稳定性,而这些洗涤剂容易发生聚集或沉淀,严重影响它们的回收,这些因素及其他原因使得难以用RPLC分离疏水性肽和蛋白质.在ACQUITY UPC2 TM系统上使用沃特世(Waters(R))超高效合相色谱技术分离典型跨膜肽-短杆菌肽的方法,可得到线性和可重复的结果,测定的OTC制剂浓度为标示量的98.4%,是准确、高精度分析短杆菌肽的方法.
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广西藤茶总黄酮对金黄色葡萄球菌抗菌机制研究
目的:研究广西藤茶总黄酮(TF)抗金黄色葡萄球菌(SA)作用机制,从而初步明确其作用靶位.方法:使用不同终质量浓度TF(310 ~38.75 mg·L-1)处理SA,另设不经药物处理的SA为对照,采用扫描电镜法观察155 mg'L-1 TF对菌体的超微形态结构,微生物粘着碳氢化合物法测定155 mg·L-1 TF对菌体表面疏水性,电导率法测定77.5,155,310 mg'L-1 TF对菌体通透性及比色法测定38.75,77.5,155,310 mg·L-1 TF对细菌脱氢酶活性的影响.结果:随着药物浓度增加,作用时间延长,细菌菌体超微形态有明显改变,表现为菌体表面粗糙不平,产生瘤状突起,细胞间界限模糊不清,细胞直径变大等;与不经药物处理的SA比较,TF作用SA 4,8,16 h后,能明显降低细菌细胞表面疏水性(P<0.01);明显增加细菌细胞通透性;明显抑制细菌脱氢酶的活性.结论:广西藤茶总黄酮可能通过降低细菌表面疏水性,增加细菌通透性使细菌形态发生改变,并通过抑制细菌脱氢酶活性发挥抗菌作用.
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环糊精及其分子包合技术在中药研究中的应用
环糊精(cyclodexrin,CYD)系淀粉经酶解环合后得到的由6~12个葡萄糖分子连接而成的环状低聚糖化合物,是良好的天然合成包合材料.于1891年发现,直到1948年才认识到它的筒状分子内部可以包结多种适当大小的疏水性物质,可用于医药、食品、轻工、化工、以及农业等方面.近年来,环糊精在中药研究中的应用已较为普及和深入,本文试就环糊精及其分子包合技术在中药研究中的应用作一概述.
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生物可降解高分子材料--聚原酸酯
0 聚原酸酯概述聚原酸酯(poly(orthoesters),POE)是一种人工合成的生物可降解高分子材料,通过多元原酸或多元原酸酯与多元醇类经在无水条件下缩合形成原酸酯键而制得,产物为疏水型聚合物,不溶于水,在水溶液中也不发生溶胀,可溶于环己烷,四氢呋喃等有机溶剂.在生物体内的降解是由原酸酯键处的水解反应引起的,降解终产物为水溶性的小分子,容易被生物体所代谢[3].由于其疏水性,如果在制作成基材的过程中密度均一且不存在空隙,那么因表面张力的作用,水分子就不易进入基材内部,降解过程主要发生在材料表面,称为"表面融蚀"(surface erosion)[4],如图1所示.
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微孔高分子PLGA涂层疏水性及血小板粘附行为的研究
利用水蒸气辅助自组装方法在心血管支架用316L不锈钢表面上制备出了规则排列的微孔丙交酯乙交酯共聚物(PLGA)薄膜.实验研究表明,大气湿度和聚合物溶液浓度对孔径大小和分布有较大影响.接触角检测结果表明,微孔结构改变了PLGA涂层的亲疏水性质,呈现出疏水特性,而致密涂层及不锈钢基体表面则为亲水性.血小板粘附实验显示血小板在孔径小于3~5μm微孔涂层的表面几乎不粘附;在孔径大于5μm微孔涂层表面有微量粘附;而在致密涂层和不锈钢表面则发生粘附、聚集,甚至产生伪足.这一研究结果证明:通过水蒸气辅助自组装法制备的PLGA微孔涂层具有较强的抗血小板粘附的能力,有助于提高金属血管支架表面的血液相容性.
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成纤维细胞生长因子21对糖脂代谢调节作用的研究进展
成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor, FGF-21)是众多成纤维细胞生长因子家族中的一新成员。与其他 FGF一样,FGF-21也有一个内核区,其中28个高保守的氨基酸残基中有10个可以与FGFR相互作用。小鼠 FGF-21编码的 cDNA含210个氨基酸,其中有一约由30个氨基酸组成的疏水性氨基末端,为一分泌型蛋白质的典型信号序列。人 FGF-21编码的 cDNA含209个氨基酸,其序列与鼠源约有75%的氨基酸相同[1]。经典的 FGF途径需要肝素的参与,而 FGF-21缺乏特异性的肝素结合区域,但它的共受体结合区域β-klotho 可以结合 FGFRs[2]。因此,FGF-21主要通过细胞表面受体发挥信号传导作用,该受体由经典的 FGF酪氨酸激酶受体和β-klotho构成。体外研究表明 FGF-21主要与FGFR1c/β-klotho结合,但也有研究表明 FGF-21可以通过4个 FGFR亚型发挥作用[3]。虽然 FGFR大量表达,但是β-klotho却特异性地在白色脂肪、胰腺、肝脏和睾丸中表达,因此 FGF-21主要集中在上述器官中发挥作用[4]。本文就 FGF-21的生物学功能、药理学作用及机制进行综述。
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SARS-CoV E蛋白基因的扩增及原核表达载体的构建
加拿大英属哥伦比亚癌症研究所基因组科学中心已完成了SARS冠状病毒的全基因组测序(基因库登录号:AY274119).SARS-CoV基因组编码包括S蛋白、M蛋白、N蛋白和E蛋白等结构蛋白质.E蛋白是小的结构蛋白(为糖蛋白),散布于SARS病毒的包膜,疏水性强,其核苷酸序列为231bp,编码76个氨基酸,其等电点为6.01,相对分子质量为8.361×103.推测E蛋白的作用有利于病毒形状的形成,在病毒颗粒形成过程中起主要作用.本文利用已公布的SARS-CoV基因组序列,克隆了E蛋白基因,以期为深入研究E蛋白的生物学功能和药物或疫苗开发提供研究基础.
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胎牛及人血清中低密度脂蛋白与光敏剂药效相关的比较研究
背景与目的评价新型的光敏剂通常需检测它与细胞以及细胞所生长的培养基之间的相互作用.光敏剂在体外蓄积的机制包括扩散、电荷梯度和受体介导的吸收过程.加入到血清中的光敏剂除了与白蛋白结合外,它们还会在脂蛋白[极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)]中分布,而这种分布会影响细胞对它们的吸收.光敏剂与脂蛋白的结合与其脂溶性有关.本研究的目的是比较人和胎牛血清中脂蛋白成分的异同,进一步探讨脂蛋白成分的不同对新型疏水性光敏剂n-丁基-3-[18-(2-丁烷氨基甲酰-乙基)-3,7,12,17-四甲基-18,13-二乙烯-22,24-二氢-卟吩-2-烃基]丙酰胺(n-butyl-3-[18-(2-butylcarbamoyl-ethyl)-3,7,12,17-tetramethyl-18,13-divinyl-22,24-dihydro-porphin-2-yl]propionamide,PP-N-3)和相对疏水性血卟啉酯(haematoporphyrin ester,HpE)在人和胎牛血清中分布的影响.
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β-环糊精及衍生物在中药制剂中的应用与研究
环糊精(cyclodextrin,CD)是以淀粉为原料在环糊精葡聚糖转位酶的作用下形成的产物.由于它是环状中空筒状特殊结构,因此,它具有一些特殊性质.首先,它的外部为亲水性,而它的内部为疏水性,可以将一些大小和形状合适的客体分子包合于环状结构中,形成超微囊状包合物.其次,它为碳水化合物,进入人体可以断链开环,形成直链低聚糖,参与代谢.无毒、无积蓄作用,是一种应用前景广阔的药用辅料.β-环湖精(β-CD)包合技术在中药制剂中的应用越来越广泛,其主要作用如下.
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透析膜进展的新关注点
评价透析器功能的主要指标是溶质清除率、水超滤率和膜的生物相容性.膜材料的发展,由纤维素膜-改良纤维素-合成膜,生物相容性得到极大地提高;膜变薄、孔径变大,增加了清除率和超滤率;缩短中空纤维长度、减少内径增加了清除率;改变纤维束的形状,如纺锤形增加内滤过,波浪形增加清除率;混合膜材料既有疏水性(增加吸附能力),又有亲水性(增加弥散性能).诚然透析膜的生物相容性仍然是研究重点,但近又出现膜材料新的关注点,如降低微炎症反应、影响免疫功能、减少氧化应激、减轻对血管内皮功能的损伤、截留内毒素、减少血栓的形成以及增加磷的清除等.
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透明基材防雾涂膜的研究进展
防雾涂膜广范适用于工农业生产和民用生活中,用于透明基材的防雾涂膜是当前研究的热点.国内外制备防雾涂膜的方法较多,如化学气相沉积法、液相沉积法和溶胶一凝胶法等.本文综述了防雾机理、防雾涂膜的制备方法、制备条件以及研究近况与发展前景.
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什么是蛋白质组学的基本技术流程?
答: 蛋白质组学的基本技术流程主要为以下四方面.1. 蛋白质标本的制备及分离:寻找较好的方法尽可能完全地抽提细胞或组织中的全部蛋白质是比较蛋白质组学研究的重要前提.由于不同细胞或组织中疏水性蛋白质,低丰度蛋白质,高丰度蛋白质,极性蛋白质等共存,很难用单一抽提液和方法将不同细胞或组织中全部蛋白质完全制备出.如希望获得尽可能完全的全部蛋白质,仍有赖于现有方法的不断改进和新方法的产生.
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幽门螺杆菌黏附素基因babA2的克隆、序列测定及其生物信息学分析
目的:获取幽门螺杆菌黏附素基因babA2,并将他克隆到质粒pET-22b(+)中进行核苷酸序列分析,并对其进行生物信息学分析,为研究Hp黏附素的分子机制和免疫原性提供基础.方法:利用PCR技术扩增babA2,并将其定向插入pET-22b(+)载体,通过DNA序列分析仪进行核苷酸分析,生物信息学软件对其进行生物学特性分析.结果:DNA序列分析表明,所克隆的babA2基因序列与GenBank公布的一致.ANTHEPROT V4.3c软件预测其蛋白质分子量约为78 KD,并显示出了良好的抗原性和疏水性.结论:本研究获得了序列正确的babA2基因,生物信息学分析表明其具有优良的免疫原性,为其重组表达及其相关研究奠定了良好的基础.
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SLP-2基因在食管鳞癌中的差异表达及其生物信息学分析
目的:应用cDNA微阵列从食管鳞癌配对组织中得到一批在食管鳞癌中差异表达的基因,其中包括SLP-2.他在食管鳞癌组织中的表达比其在配对的正常组织中高6倍以上.验证SLP-2在食管鳞癌组织中高表达的结果,构建组织表达谱,同时对其进行生物信息学分析.方法:利用RT-PCR和Northern blot对SLP-2在食管鳞癌组织中高表达的结果进行验证,构建组织表达谱.利用CLUSTAL和SMART软件对SLP-2进行生物信息学分析.结果:RT-PCR和Northern blot表明,SLP-2在食管鳞癌组织中高表达,并在多种组织中表达.CLUSTAL软件分析表明,SLP-2蛋白是stomatin超家族的一员,但缺少stomatin超家族所特有的N-端疏水性结构域.SMART软件分析表明,SLP-2蛋白具有一个PHB结构域和一个螺旋丰富的区域.结论:cDNA微阵列是筛选差异表达基因的有力工具.SLP-2在食管鳞癌组织中高表达,并在多种组织中都有表达.生物信息学分析表明其缺少stomatin超家族所特有的N-端疏水性结构域,具有一个PHB结构域和一个螺旋丰富的区域,为阐明SLP-2参与肿瘤发生发展的分子机制奠定了良好的基础.
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应激对大鼠胃黏膜疏水屏障影响的实验研究
胃黏膜疏水屏障可阻滞和延缓H+等胃腔内损害因子侵袭胃黏膜,其物质基础是胃黏膜表面黏附的黏液凝胶层所含的脂类表面活性剂,以磷脂为主[1].近期文献报告多种胃黏膜病理生理过程中伴有胃黏膜疏水性的改变[2].应激是一种常见的胃黏膜致病因子,本实验研究拟揭示应激对胃黏膜疏水性的影响.
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渗透性腹泻状态下小鼠结肠水通道蛋白8表达的研究
水通道蛋白为存在于动、植物和微生物中的一种小分子疏水性跨膜蛋白,可选择性通透水,本研究以水通道蛋白8(AQP8)为研究对象,采用免疫组化和实时荧光定量PCR方法,测定渗透件腹泻状态下不同时间点结肠AQP8 mRNA表达量,探讨AQP8在结肠水转运中的作用.
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肺表面活性物质的应用及研究进展
肺表面活性物质(pulmonary surfactant,PS)是由脂质(90%)和蛋白质(10%)组成的混合物,由Ⅱ型肺泡细胞分泌,储存于板层小体,通过细胞外分泌的形式分泌后被单层肺泡上皮细胞内表面摄取,并分布于肺泡上皮细胞内表面.目前已发现四种PS载脂蛋白,分别是疏水性表面活性蛋白B(surfactant protein B,SP-B)、SP-C、SP-A及SP-D.通常认为PS具有降低表面张力的特性,可防止肺泡塌陷,有利于气体交换.新研究还显示PS具有更重要的作用,即肺的天然防御屏障,其中SP-A和SP-D在这方面发挥重要作用,二者均为凝集素家族蛋白,具有清除肺内微生物和调节免疫细胞活性等作用[1-2].此外,SP-B和SP-C及PS脂质还可能参与肺炎的调节过程.
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两种不同材料折叠人工晶状体植入术后后发障的临床观察
为探讨人工晶状体(IOL)材料与后囊膜混浊(PCO)发生的关系,我们随访了门诊施行超声乳化白内障摘除术(PHACO)联合疏水性丙烯酸IOL(AcrySof)或疏水性硅凝胶IOL(CeeOn 911A)植入的患者术后一年PCO的发生情况.
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化学处理硅胶对角膜上皮细胞生长的影响
目前,人工角膜在眼科临床应用中存在着较多的并发症.Legeais和Renard[1]认为人工角膜前表面如果能够上皮化将有利于植入物的长期稳定.硅胶是一种疏水的高分子材料,疏水性不利于细胞的黏附和生长.如果对其表面进行一定的处理,将有利于硅胶人工角膜与受体角膜的连接,从而减少人工角膜的术后并发症. 改变材料表面特性的常用方法有低温等离子体法、表面修饰法、化学改性法和杂化改性法[2,3].我们选用酸溶液和过氧化氢溶液对硅胶进行一定的处理,体外观察细胞的生长情况,细胞质和细胞膜蛋白的表达,进而推测其对组织相容性的影响.
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伴放线放线杆菌形态变化对菌体表面疏水性影响的研究
目的 研究伴放线放线杆菌形态变化对菌体表面疏水性的影响.方法 采用碳氢化合物法检测伴放线放线杆菌粗糙型和光滑型的菌体表面疏水性,观察同一菌株不同表型疏水性的变化.结果 伴放线放线杆菌粗糙型和光滑型菌体表面具有疏水性.14株粗糙型伴放线放线杆菌菌体表面疏水率高于4株光滑型,差异有统计学意义(P<0.05).4株同源的粗糙型与其光滑型转变株比较得出除1株外,其余3株菌两种表型的菌体表面疏水率差异无统计学意义(P>0.05).结论 伴放线放线杆菌形态变化可引起菌体表面疏水性的改变,粗糙型转变为光滑型后菌体表面疏水性减弱.