首页 > 文献资料
-
新一代腺病毒载体研究进展
由于腺病毒载体具有高核转移效率,对人致病性低等优点,所以在众多的载体系统中脱颖而出,成为基础研究、基因治疗和重组疫苗开发等领域中的重要工具.至今腺病毒载体已经发展了3代:第1代腺病毒载体(通常来源于Ad5和Ad2)主要是去除了E1和(或)E3区;第2代腺病毒在E1、E3缺失的基础上进一步去除了E2和(或)E4区;然后人们对腺病毒进行彻底的缺失,发展了第3代腺病毒载体,即high-capacity Ad vectors(HC-Ad),它仅含有ITRS和包装信号.
-
SARS-CoV E蛋白基因的扩增及原核表达载体的构建
加拿大英属哥伦比亚癌症研究所基因组科学中心已完成了SARS冠状病毒的全基因组测序(基因库登录号:AY274119).SARS-CoV基因组编码包括S蛋白、M蛋白、N蛋白和E蛋白等结构蛋白质.E蛋白是小的结构蛋白(为糖蛋白),散布于SARS病毒的包膜,疏水性强,其核苷酸序列为231bp,编码76个氨基酸,其等电点为6.01,相对分子质量为8.361×103.推测E蛋白的作用有利于病毒形状的形成,在病毒颗粒形成过程中起主要作用.本文利用已公布的SARS-CoV基因组序列,克隆了E蛋白基因,以期为深入研究E蛋白的生物学功能和药物或疫苗开发提供研究基础.
-
黄病毒属病毒的感染性克隆研究进展
黄病毒科包括了一大类人和动物的病毒性病原体,这些病毒均为包膜的单股正链RNA病毒,目前分三个属:经典的黄病毒属、瘟病毒属和丙型肝炎病毒属.每个属中病毒的感染性cDNA遗传学研究都使人们进一步了解病毒复制和致病性原理.对RNA病毒进行反向遗传学研究的历史,可追溯到20多年前,1978年Taniguchi首次从cDNA克隆获得了RNA噬菌体Qβ[1],1981年通过脊髓灰质炎病毒cDNA首次获得动物病毒的感染性克隆[2],从此对正链RNA病毒的反向遗传学研究系统逐步完善起来了.随后,对负链RNA病毒、分节(流感病毒)和不分节(狂犬病毒)的cDNA感染性克隆研究也获得成功.近对双链RNA病毒的反向遗传学研究也有了突破,至此,对RNA病毒的反向遗传学研究已涵括了大部分的RNA病毒.这些研究结果为疫苗开发研制提供了新途径.本文就黄病毒属病毒感染性克隆研究的技术方法和进展作一综述.
-
幽门螺杆菌免疫兔血清抗体特异性分析
对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)抗原、抗体的研究是Hp分型、检测及疫苗开发的基础.Hp免疫血清的制备已成为常规技术,但血清制备过程中的各种因素均可能影响免疫血清的抗体谱,从而引起同类研究间因所用Hp抗体不同导致的结果的差异.本研究对Hp全菌免疫的兔血清抗体谱加以分析,讨论坳免疫血清制备中存在的一些问题和应对方法.
-
幽门螺杆菌18000u外膜蛋白编码基因的克隆及表达
目的:构建含幽门螺杆菌(Hp)18000 u外膜蛋白编码基因的重组载体并在E.coli BL2l中表达.为Hp的疫苗开发、快速诊断试剂盒的研究奠定基础.方法:用PCR从Hp染色体中,扩增18000 u外膜蛋白编码基因片段.将目的基因与pET32a(+)同时经BamH I,HindⅢ双酶切、纯化、连接,转化含有目的基因的重组载体.以含目的基因片段的重组载体转化大肠杆菌BL21(DE30)并表达.表达产物经纯化后,用ELISA法检测其抗原性.结果:经酶切、测序分析表明,插入的基因片段为Hpl8000 u的外膜蛋白编码基因,与Tomb等报道相比较,有2%编码基因发生变异,1.7%氨基酸残基改变.经SDS-PAGE分析发现,融合基因表达的蛋白为38000 u,其中pET32a(+)表达的蛋白约为20000u,可溶性表达产物占全菌总蛋白的21.3%.重组蛋白经Ni-NTA琼脂糖树脂纯化后,其纯度达95%以上.ELISA法检测显示,该重组蛋白可被Hp阳性患者的血清所识别,具有良好的抗原性.结论:成功地克隆并表达Hp18000 u的外膜蛋白编码基因,为Hp蛋白质疫苗的研制和快速诊断试剂盒的研究奠定了基础.
-
日本科学家研发高血压疫苗
日本大阪大学的研究团队在用于治疗高血压的疫苗开发方面取得了成功.该团队在海外医学杂志电子版上发表了研究成果.其开发的疫苗可以减弱导致血压升高物质的功能.据称,通过对患有高血压的小白鼠注射疫苗后发现效果持续了半年左右.
-
科学家联名倡仪 AIDS疫苗开发需全球合作
-
科学家发现高度有效的中和DENV的新抗体
近日,一组包括来自墨尔本大学的国际研究科学家团队发现可使4种不同类型的登革热病毒( DENV)成为非感染性的新一类抗体。
该发现可能促进更好的疫苗生产和实验室试验研究,终可能减少登革热的发生发展。发表在Nature Immunology杂志上的研究首次报道,一种新抗体可中和所有4个类型的登革热病毒。论文作者ameron Simmons教授表示,这一令人兴奋的发现可能为所有4个株登革热病毒的疫苗开发铺平道路。 -
艾滋病防治领域取得多项重大进展抗艾或将“破冰”
经过33年的抗艾历程,技术的进步和认识的深入,人们从无知、恐惧、偏见,到了解、尊重、接纳.从今年起,3月1日被联合国艾滋病规划署定为世界“艾滋病零歧视日”;而在3月3日至6日于波士顿举行的2014年逆转录病毒和机会性感染大会上,又有多个研究团队报告了他们在防治艾滋病方面取得的新进展,涉及新药、疗法和疫苗开发等不同领域.新例证:又一名艾滋病幼童或被“功能性治愈”
-
中国婴幼儿轮状病毒腹泻的研究进展
轮状病毒( rotavirus,RV)是婴幼儿重症腹泻的主要病原.无论在发达国家还是发展中国家,婴幼儿RV感染都是比较普遍的.Parashar等的研究报告证实每年1.1亿腹泻患者需要家庭护理,2.5亿需要门诊治疗,200万需要住院治疗,引起352 000~ 592 000小于5岁儿童死亡[1].根据位于曼谷的亚太地区轮状病毒监测网络(Asian rotavirus surveillance network)的报告,中国地区由于轮状病毒引起腹泻的患者约占腹泻患者总数的44%[2].下面分别从轮状病毒的流行病学特点、流行病毒株、社会负担、临床表现及诊断、临床治疗以及疫苗开发等方面进行综述.
-
上呼吸道感染疾病的症状诊断与合理的药物治疗
上呼吸道感染((URTI或URI))是在一般人群中常见的急性疾病.症状往往涉及呼吸系统的一个或多个部位,包括鼻窦,鼻腔,咽和喉.这将导致相当数量的患者去初级保健提供者和急诊室就诊,并终由当地的药店提供处方药或非处方药缓解症状.药师应熟悉这些感染的病因和潜在的治疗方法.普通感冒与"感冒"相关的症状,实际上是由至少有五种主要的呼吸道病毒引起的,包括鼻病毒和冠状病毒.鼻病毒至少导致成人患者的50%感染,包括至少100个类型和一个亚型.遗传变异限制了疫苗开发的能力,以及人体对"普通感冒"获得免疫力的能力.
-
第8届国际疫苗年会简介
第8届国际疫苗年会于2005年5月8~11日在美国巴尔地摩(Baltimore)召开,共有来自35个国家500多名代表参加.会议针对至今尚无疫苗保护的病毒性疾病,如人乳头瘤病毒和单纯疱疹病毒和对正在研究中的疫苗进行了报道.本次会议的报告和讨论议题主要涉及疫苗的基础免疫研究、产品开发、临床试验和规则制定等方面.会议讨论了疫苗研究的新科技进展和在疫苗开发、生产、有效接种等方面所面临的新机遇和挑战.
-
以结构与调节蛋白为基础的预防性HIV疫苗的合理开发
艾滋病流行的严重形势迫切要求人们将人类免疫缺陷病毒(HIV)疫苗尽早推向临床试验阶段,然而迄今尚无一种有效的疫苗问世。本文强调了开发HIV疫苗所面临的科学问题、复杂性以及解决这些问题的可能手段。并将侧重点集中在预防HIV感染及阻止艾滋病进展的免疫相关物和机理方面,指出了开发多组分疫苗策略的合理性。
-
人类免疫缺陷病毒疫苗开发研究进展
目前人类免疫缺陷病毒(HIV)仍在全球广为传播,艾滋病在非洲国家系造成死亡的首位原因,在世界范围内属人类第四位死因.世界卫生组织估计在未来10年间,每天有16000例新HIV感染者,将有1亿人被感染.控制HIV流行的佳策略仍是开发有效的预防性疫苗,然而开发这样的疫苗仍是工业界和科学界的一大难题.
-
疫苗开发新进展与免疫接种新趋势
本文介绍了一些细菌、病毒和寄生虫疫苗的新研究进展,并指出儿童免疫接种中的重要研究趋势是开发联合疫苗.此外,还简述了粘膜免疫和粘膜免疫佐剂的研究情况.
-
土拨鼠肝炎病毒可复制性克隆的构建和鉴定
HBV慢性感染迄今仍缺乏特效的治疗措施,其中主要原因之一是缺乏完善的体内和体外复制系统.土拨鼠肝炎病毒(WHV) 发现于1978年[2],与HBV同属于正嗜肝病毒.研究发现,WHV在形态学、基因组结构、基因产物、复制过程、流行病学、感染过程及致病、致癌等方面都与HBV非常相似.目前,土拨鼠-WHV模型是人类HBV感染较理想的动物模型,已经用于疫苗开发、治疗性疫苗和抗病毒药物的研究,以及病毒生活周期、致病致癌分子机制的研究 [3].
-
沙眼衣原体E型MOMP基因原核表达载体的构建和纯化
沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)共有19个血清型,其中D~K血清型则可通过性传播,引起人类泌尿生殖道感染,并可引起并发症.沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)携带Ct亚型等多种抗原决定簇,是诊断试剂和疫苗开发的基础.本研究选择MOMP基因作为研究对象,用PCR技术扩增E型沙眼衣原体MOMP基因片段,再将其定位插入到原核表达载体pGEX中,构建重组表达质粒.然后将重组表达质粒转化人大肠杆菌(BL-21)中,并用酶切分析、PCR扩增及部分序列测定等方法对重组质粒进行鉴定.诱导表达,用SDS-PAGE及蛋白印迹进行鉴定,并以亲和层析柱纯化表达产物,为进一步研究该蛋白的生物学特性,了解衣原体的致病机制奠定基础.
-
结核分枝杆菌差异区基因功能研究及其应用进展
结核病(tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的一种慢性传染性疾病.目前,全世界大约有1/3的人感染,每年约有900万的新增病例和约200万的死亡病例[1].通过基因组比对发现,结核分枝杆菌基因组中的一些片段在牛分枝杆菌或卡介苗(Bacillus Calmette Guerin,BCG)基因组中缺失,这些缺失片段被称为差异区域(region of differences,RD).研究表明,RD区基因与结核分枝杆菌的毒力密切相关,且这些基因的功能在结核病新疫苗开发及新诊断方法建立中具有重要意义.本文将阐述RD区主要基因功能研究及其应用进展.
-
结核分支杆菌感染后树突状细胞发挥的免疫学作用
世界卫生组织新统计表明,全世界大约20亿人口被感染结核病,每年超过200万人死于结核病,超过90%的受染人群尽管体内有病原体的长期存在却并不发病,因此研究结核分支杆菌与宿主免疫系统的反应,无论是在结核病的防治以及疫苗开发方面都有举足轻重的作用.
-
霍乱毒素与粘膜免疫
霍乱毒素(CT)是霍乱弧菌产生的一种不耐热肠毒素,是霍乱弧菌引起腹泻的致病因子,CT具有很好的免疫原性,也是霍乱弧菌疫苗开发中考虑的一个重要候选抗原.另外,CT是很好的粘膜佐剂,在粘膜免疫研究中具有很重要的作用.本文将对CT的粘膜免疫诱导作用作一综述.