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SARS-CoV E蛋白基因的扩增及原核表达载体的构建
加拿大英属哥伦比亚癌症研究所基因组科学中心已完成了SARS冠状病毒的全基因组测序(基因库登录号:AY274119).SARS-CoV基因组编码包括S蛋白、M蛋白、N蛋白和E蛋白等结构蛋白质.E蛋白是小的结构蛋白(为糖蛋白),散布于SARS病毒的包膜,疏水性强,其核苷酸序列为231bp,编码76个氨基酸,其等电点为6.01,相对分子质量为8.361×103.推测E蛋白的作用有利于病毒形状的形成,在病毒颗粒形成过程中起主要作用.本文利用已公布的SARS-CoV基因组序列,克隆了E蛋白基因,以期为深入研究E蛋白的生物学功能和药物或疫苗开发提供研究基础.
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翻译后修饰对α-晶体蛋白分子伴侣活性的影响及白内障形成机制
翻译后修饰(post translational modification,PTM)是蛋白质翻译后通过酶的催化或酶控制下的反应而发生修饰,包括糖基化、氨甲酰化、氧化、磷酸化、乙酰化、脱酰胺和切除作用等。白内障和老化被认为是一类结构性疾病(conformational disease)。PTM可造成蛋白质结构改变。α-晶体蛋白作为晶状体主要的结构蛋白质,具有分子伴侣(molecular chaperone)活性,可抑制蛋白质的凝聚和酶的失活。PTM可诱导α-晶体蛋白分子内部或分子之间的交联,导致其分子伴侣活性降低,加速白内障形成。赖氨酸基团对PTM敏感,封闭赖氨酸的ε-氨基基团,可阻止和延迟蛋白质交联。寻找抑制或阻断PTM的因子,有助于药物治疗此类疾病方法的突破。
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载脂蛋白AI和B测定中标准方式的评价
载脂蛋白AI(apoA I)和载脂蛋白B(apoB)分别是高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的主结构蛋白质,它们的含量基本可反应HDL和LDL颗粒多少,血清apoA I减少和apoB升高常被作为心脑血管疾病因子的估价.
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apoA1与apoB与其相应血脂成份关系探讨
载脂蛋白(apoA1、apoB)分别是高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的主要结构蛋白质,它们分别与血管中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及总胆固醇(CH)有着重要联系.本文通过试验,主要对apoA1与HDL-C、apoB与LDL-C和CH的相关关系进行讨论.
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白细胞介素-22对小鼠实验性结肠炎肠黏膜闭合蛋白的影响
UC 是一种病因未明的自发性、慢性结肠黏膜炎病变。近年来,已发现肠黏膜屏障功能在 UC 发病机制中占有重要地位[1]。闭合蛋白(occludin)是肠上皮屏障紧密连接中的重要结构蛋白质,对保持肠黏膜屏障完整性具有重要意义,并受 IL-10等多种细胞因子的影响[2]。IL-22属于 IL-10细胞因子家族中的一员,对 UC 的肠黏膜屏障具有重要的保护作用[3],但对闭合蛋白的作用尚未明确。本研究拟通过 IL-22干预小鼠急性结肠炎模型,观察其对肠黏膜屏障闭合蛋白的影响。
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二维凝胶电泳的新技术及其应用
1975年,O'Farrell以及Klose等人发明了双向凝胶电泳(two- dimensional gel electrophoresis, 2-DE),根据样品中蛋白质的两个重要理化特性:等电点(is-oelectric points, PI)和分子量( molecular weight, MW),将样品中的蛋白质进行分离.其原理是第一向基于蛋白质 PI不同用等电聚焦( isoelectric focusing, IEF)分离,第二向则按 MW的不同用聚丙烯酰胺十二烷基硫酸钠凝胶电泳( sodium dodecyl sulfate_polyacrylamide gel electrophoresis, SDS- PAGE)分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上分开.其后的 25年中, 2- DE经过了多方面的改进,而且相应蛋白鉴定技术也得到了发展,这使得 2- DE广泛应用于蛋白质组学( proteomics)领域,成为研究"结构蛋白质组"与"功能蛋白质组"的有使用价值的方法,在蛋白质组研究中有着不可或缺的地位.现对 2- DE近期的进展及其应用作一综述.
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蛋白质组学在肿瘤标志筛查及研究中应用与评价
在人类基因组计划实施和完成后,研究重点已转移到基因的功能上,从而进入基因组时代.而生物功能主要执行者是蛋白质,1994年澳大利亚Macquarie大学的wilkius和williams首先提出蛋白质组学(Proteome)的概念,Proteome一词是蛋白质(Protein)与基因组学(genome)两个词的组合,指的是一种基因组所表达的全部蛋白质,既包括一种细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质,而蛋白质组的研究是功能基因组学研究的核心,称为蛋白质组学.其主要内容包括结构蛋白质组和功能蛋白组学,它是从细胞整体水平进行蛋白质特性的研究,如表达水平、翻译后修饰及相互作用等,并由此获得对疾病过程、细胞生理、生化特征和调控网络的广泛完整的认识.所以,蛋白质组学及其技术正在逐步成为生物学、医学及药物学等的理论依据和研究手段,也是筛选肿瘤标志的重要技术之一.