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重组人IL-2联合STAg鼻内免疫BALB/c小鼠诱导的免疫应答
目的 观察重组人白细胞介素-2(rhuIL-2)联合弓形虫可溶性速殖子抗原(STAg)滴鼻免疫小鼠诱导的免疫应答,探讨rhuIL-2的佐剂效应及适宜剂量. 方法 5~6周龄BALB/c小鼠60只,随机分为6组,每组10只.实验组以STAg 20 μg或分别加rhuIL-2 250、500、1 000、2 000 IU滴鼻免疫,抗原与佐剂溶于20 μl PBS中,对照组以PBS滴鼻,免疫2次,间隔2周.末次免疫后30 d,颈椎脱臼处死全部小鼠,ELISA法检测血清IgG和粪便sIgA水平;分离脾淋巴细胞、肠上皮内淋巴细胞(iIEL),并计数. 结果 与PBS组相比,各佐剂组血清IgG水平都有增高,其中STAg+500 IU IL-2组IgG水平增高显著(P<0.01);STAg+500 IU IL-2组和STAg+1 000 IU IL-2组粪便sIgA抗体水平显著高于PBS组和STAg组(P<0.05).联合IL-2佐剂免疫小鼠脾淋巴细胞和产生了增殖性应答,其中STAg+500 IU IL-2组和STAg+1 000 IU IL-2组脾淋巴细胞数显著高于PBS组和STAg组(P<0.05);TAg+500 IU IL-2组iIEL高于PBS组(P<0.05). 结论 rhuIL-2作为佐剂联合STAg鼻内免疫小鼠可有效诱导粘膜免疫、系统的细胞免疫和体液免疫应答;500 IU IL-2为鼻内免疫小鼠的适宜剂量.
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STAg联合CpG ODN和CT鼻内免疫小鼠诱导的特异性抗体应答和脾淋巴细胞的特异性增殖反应
目的 观察可溶性速殖子抗原(STAg)联合CpG寡核苷酸(CpG ODN)和/或霍乱毒素(CT)鼻内免疫BALB/c小鼠后血清IgG、肠冲洗液IgA抗体水平及脾淋巴细胞体外特异性增殖反应,探讨CpG ODN和CT的佐剂效应. 方法 6周龄BALB/c小鼠60只,随机分为5组,分别用20 μl PBS(PBS组)、20 μg STAg(抗原组)、20 μg STAg +10 μg CpG ODN(CpG佐剂组)、20 μg STAg + 1 μg CT(CT佐剂组)、20 μg STAg + 1 μg CT +10 μg CpG ODN(联合佐剂组)滴鼻,间隔2周,免疫2次.末次免疫后第20 d颈椎脱臼处死小鼠,收集血清和肠冲洗液,ELISA法检测血清弓形虫特异性IgG和肠冲洗液IgA.分离脾淋巴细胞,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测致敏脾淋巴细胞体外增殖活性. 结果 ELISA法测定PBS组、抗原组、CpG佐剂组、CT佐剂组及联合佐剂组小鼠血清IgG A值分别为0.025 6±0.012 1、0.054 2±0.024 4、0.109 4±0.007 5、0.110 1±0.009 1和0.124 6±0.013 7,肠冲洗液IgA A值分别为0.141 8±0.030 2、0.415 2±0.080 7、0.526 9±0.075 4、0.846 5±0.115 5和1.128 9±0.100 3,脾淋巴细胞刺激指数SI分别为1.159 0±0.275 5、1.364 0±0.349 8、1.582 0±0.375 3、1.928 0±0.278 9和2.371 0±0.646 9,差异均有统计学意义(P<0.01);联合佐剂组肠冲洗液IgA水平和脾淋巴细胞的SI值与CpG佐剂组比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 STAg联合CpG ODN和/或CT鼻内免疫小鼠可有效诱导机体免疫反应,两种佐剂联合免疫的效果优于单一抗原或抗原联合单一佐剂.
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幽门螺杆菌18kD外膜蛋白的基因克隆、重组载体的构建
近年来,由于抗生素广泛的、大剂量的应用,导致耐药菌株的产生;鉴于此,不少研究工作者正致力于开发研究新的有效控制幽门螺杆菌引发疾病的疫苗.研制Hp疫苗至关重要的问题有三种:(1) 必须发现能干扰粘附和毒性且存在于所有菌株的保护性抗原;(2)临床前试验需要能模仿感染和疾病的动物模型;(3) 需要适合人体的粘膜佐剂.因此首先要寻找有效的保护性抗原.细菌的外膜蛋白是一种里外不对称、半通透性、
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056 粘膜佐剂的研究进展
哺乳动物的粘膜免疫系统是一个完整的淋巴细胞网络,正常情况下可对经粘膜侵入的外来有害抗原物质发生免疫应答.由粘膜途径进行接种疫苗可在感染部位直接诱导局部保护性免疫应答,防止感染和疾病.大多数免疫原性弱的抗原经粘膜供给时易引起免疫耐受,阻碍了粘膜疫苗的进一步研制和开发.为了克服粘膜疫苗使用中面临的问题,人们设计出多种粘膜佐剂以增强相应抗原经粘膜供给时促进机体发生免疫应答的能力.本文将重点介绍现在研究较多的一些粘膜佐剂类型,如微生物及其代谢产物、细胞因子、CpG基序及化学合成类佐剂等的研究情况.深入了解粘膜佐剂作用的分子机理,有益于促进安全、有效的粘膜疫苗的开发.
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LTK63粘膜佐剂与脱乙酰壳多糖释放系统联用能提高鼻腔免疫疫苗的免疫原性
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免疫刺激复合物的粘膜佐剂特性
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084 亲脂性季铵盐可作为粘膜佐剂与疫苗抗原共同鼻腔接种
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017 短芽胞杆菌产生的重组霍乱毒素B亚单位作为粘膜佐剂的安全性评估
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021 HIV-gp160、HIV-1 Env CTL表位肽(E7)与粘膜佐剂LT(R192G)联合鼻腔免疫的效果
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肠毒素用作粘膜佐剂的效力与毒性
霍乱毒素(CT)是粘膜疫苗的有效佐剂,能够诱导粘膜和全身免疫应答.然而,由于其固有毒性而不适于人类应用.近年来,疫苗开发的一个重点为鼻腔接种抗原和CT以诱导粘膜IgA应答.本文讨论了CT用作粘膜佐剂的效力及其对中枢神经系统(CNS)的潜在毒性.
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霍乱毒素与粘膜免疫
霍乱毒素(CT)是霍乱弧菌产生的一种不耐热肠毒素,是霍乱弧菌引起腹泻的致病因子,CT具有很好的免疫原性,也是霍乱弧菌疫苗开发中考虑的一个重要候选抗原.另外,CT是很好的粘膜佐剂,在粘膜免疫研究中具有很重要的作用.本文将对CT的粘膜免疫诱导作用作一综述.
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幽门螺杆菌疫苗保护性抗原的研究进展
Warren 和Marshall于1983年首次发现幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)以来,经过近20年全球性的研究,世界卫生组织已将其列为一类致癌因子 [1].目前全球近50%的人口感染了Hp,在发展中国家,其感染率可高达70%以上.然而,对于Hp的抗感染治疗尚存在较大问题.使用单剂药物根除率低,使用多联药物又造成费用太高,有效率也不太高,而且不能有效阻止 Hp的再次感染和复发.此外,耐药菌株的增加也使抗Hp治疗面临越来越复杂的难题.因而,Hp疫苗已成为防治Hp感染有效的途径.美国已将Hp疫苗列为21世纪疫苗发展的重点项目之一[ 2].经过近几年的研究,Hp疫苗取得了较大的进展,包括动物模型的建立、粘膜佐剂和免疫原的筛选、抗原投递方式的比较等工作.由于Hp的致病机理目前尚未研究清楚,不同地区不同菌株间又存在较大差异,因此,在Hp[ WTBZ 疫苗研究中筛选高效及特异的Hp保护性抗原也就面临更艰巨的任务 .本文拟就Hp疫苗研究中保护性抗原的新研究与开发动态作一综述.
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不同剂量CpG ODN联合STAg鼻内免疫BALB/c小鼠诱导的免疫应答
目的观察弓形虫可溶性速殖子抗原(STAg)与不同剂量的CpGODN联合滴鼻免疫小鼠的免疫效果,探索CpG ODN佐剂佳剂量.方法5~6周龄BALB/c小鼠50只随机分为5组,每组10只,实验组以20μg STAg联合不同剂量CpG ODN佐剂滴鼻免疫小鼠,佐剂剂量分别为0、1、5、10μg,对照组以PBS滴鼻,间隔2wk免疫2次.末次免疫后30d断颈处死全部小鼠,分离脾、Peyer's patch(PP结)、肠系膜淋巴结(MLN)和IEL淋巴细胞,观察淋巴细胞增殖情况.用ELISA的方法检测血清IgG和粪便IgA含量.结果与PBS组和0剂量佐剂组相比,10μgCpG ODN联合STAg免疫后,小鼠肠粘膜淋巴组织和脾淋巴细胞增殖明显(P<0.05).10μg组血清IgG远高于对照组(P<0.05),粪便IgA高于对照组(P>0.05).结论CpG ODN可作为STAg的粘膜佐剂,10μg CpG ODN与STAg联合具有佳的免疫效果.