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抗原修复对端粒酶逆转录酶免疫组化染色效果的影响
常规石蜡切片标本,一般均用甲醛固定,而经甲醛固定的组织,其抗原蛋白的氨基与固定液中的醛基交联形成羧甲基而封闭了抗原决定簇,使其免疫组化标记的敏感性明显降低.免疫组化染色的成功与否,抗原决定簇的保存和暴露是其中一个重要的环节.要充分暴露抗原决定簇,目前常用的抗原修复法有微波、高压和酶消化等,它们对大多数抗体的标记是有益的,但是,有些抗体经抗原修复后不再发生反应或阳性率降低.
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提高肝组织中HBsAg、HBcAg阳性率的体会
常规石蜡切片标本,一般均用甲醛固定,而经甲醛固定的组织,其抗原蛋白的氨基与固定液中的醛基交联形成羧甲基而封闭了抗原决定簇,使其免疫组化标记的敏感性明显降低,且背景着色明显.免疫组化染色的成功与否,组织内源性过氧化物酶清除以及抗原决定族的保存和暴露是一个重要的环节.在日常工作中,我们发现同一肝穿组织采用不同的预处理方法,明显影响HBsAg、HBcAg的检出率.
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转基因番茄口服疫苗的研究进展
第1例转基因烟草表达链球菌变异株SpaA(surfaceprotein antigenA)蛋白疫苗的成功研制~([1]),开启了利用植物表达动物病原抗原蛋白的新纪元.1992年,Mason等~([2])提出了"转基因植物疫苗"的概念,标志着植物口服疫苗成为新药研发新途径的全面展开.
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卡氏肺孢子菌A12抗原表位及其蛋白质特征的预测
卡氏肺孢子菌A12抗原是近年来发现的一种相对分子质量为30×10~3的抗原蛋白.在SWISS-PROT数据库中检索其蛋白序列号为AAR20917.1.本实验通过DNAStar软件对A12蛋白的二级结构、亲水性、可及性及可塑性参数进行分析来综合性预测A12蛋白B细胞抗原表位;同时在SYFPE1THI服务器上预测A12蛋白T细胞表位.
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人乳头瘤病毒11型L1/CD80嵌合真核表达质粒的构建和鉴定
生殖道尖锐湿疣主要是由人乳头瘤病毒6型(HPV6)和11型(HPV11)感染引起.HPV病毒仅存在终末分化的复层鳞状上皮组织中,含量很少.HPV病毒的晚期表达基因L1所表达的外壳蛋白不仅是主要的外壳蛋白,还是主要的病毒抗原蛋白,在宿主细胞表面有其蛋白受体,可成为预防性疫苗理想的靶抗原.
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慢性乙肝患者抗病毒治疗前后特异性T细胞免疫观察
目的 了解抗病毒治疗前后慢性乙型肝炎患者特异性T淋巴细胞对HBV抗原蛋白免疫应答的变化及其特征.方法 收集17例慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前及治疗后1个月、3个月的外周血单个核细胞,以HBV特异性抗原蛋白HBsAg、HBcAg和HBeAg为刺激物,酶联免疫斑点法检测其分泌IFN-γ产生斑点的情况.同时对血清HBV DNA和HBsAg、HBeAg等病毒学指标及谷丙转氨酶(ALT)等生化学指标进行榆测并分析其相关性.结果 治疗前,所有患者ALT、总胆红素(TBiL)均高于正常上限,17例患者HBV DNA均大于104拷贝/ml;治疗1个月后,ALT复常率为35.3%,9例患者HBV DNA降为检测下限以下;治疗3个月后,ALT复常率为58.8%,有11例患者HBV DNA降为检测下限以下.抗病毒治疗前、治疗1个月、治疗3个月患者针对HBV特异性蛋白总的T细胞反应阳性率分别为64.7%、76.5%和82.4%,其差别无统计学意义.不论治疗前后,患者对HBeAg的特异性T细胞反应频率和平均反应强度高;治疗后,对3种蛋白的特异性T细胞反应频率和平均反应强度各有不同程度的增加,其中以对HBcAg蛋白的平均反应强度的增强明显,治疗前和治疗3个月,治疗1个月和治疗3个月之间的差别都有统计学意义.患者对HBcAg蛋白的特异性T细胞反应平均反应强度与病毒载量有明娃负相关,与血清ALT无明显相关性.结论 本研究结果提示抗病毒治疗后,患者对HBV的特异性T细胞免疫应答有所增强,这种改变可能与HBV DNA的下降有关,检测HBV特异性T细胞反应对丁解患者的免疫状态有重要的意义.
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疫苗新概念及新型疫苗的研制
随着免疫学研究进展,关于疫苗的传统概念也发生了根本变化:(1)成分不同:传统疫苗多为死疫苗/减毒活疫苗或重组亚单位疫苗;新型疫苗则为编码无毒力抗原蛋白的病毒核酸或能激发特异性机体免疫应答的细胞疫苗;(2)机制不同:传统疫苗主要靠病毒的抗原蛋白刺激机体产生中和性保护抗体;新型疫苗不仅能刺激机体产生保护性抗体,而且能激发特异性细胞免疫应答(3)作用不同:传统疫苗只能起到一定的预防作用,新型疫苗不仅能预防疾病,而且更能起到特异的治疗作用(治疗性疫苗),具有更广泛的应用前景.因此,我们将上述与传统疫苗不同,且能激发机体特异性免疫应答的新型疫苗统称为新概念疫苗,其中包括核酸疫苗、T细胞疫苗、树突状细胞疫苗等,并就新概念疫苗目前的研究现状作一简要的概述.
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人La自身抗原蛋白与肝炎病毒的关系
0 引言乙型和丙型肝炎呈全球分布,目前全世界有1.7亿人感染丙型肝炎病毒(HCV),3.5亿人感染乙型肝炎病毒(HBV),其中相当一部分感染者发展为慢性肝炎,少数还发展成肝硬化甚至肝癌,对人类健康造成极大危害,至今缺乏有效的控制.
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分枝杆菌LSR2蛋白的研究进展
LSR2蛋白早发现于麻风分枝杆菌(Mycobacterium leprae)中,由89个氨基酸残基构成,是麻风分枝杆菌的主要免疫原之一,具有很强的免疫原性,能同时被B细胞和T细胞所识别[1-3].这种普遍存在于分枝杆菌和部分放线菌中的抗原蛋白,其序列高度保守,为组蛋白样DNA结合蛋白,对于基因表达具有广泛的调控作用[4-6].现将LSR2蛋白的研究进展综述如下.
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流行性感冒疫苗与药物的预防作用
流行性感冒(流感)病毒属于正粘病毒科,外有包膜,直径80~120 nm,形态多变,可呈球型或丝状.在病毒表面包裹着糖蛋白血凝素(H)和神经氨酸酶(N),根据抗原蛋白的不同,流感病毒可分为A、B、C亚型,流感病毒B和C只感染人,而流感病毒A除感染人外还可感染鸟类、马、猪、海洋哺乳动物等.
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胸腔镜下闭锁性胸膜腔的处理
胸膜腔闭锁常常是腔镜较大的技术难点,处理十分棘手,常常成为中转开胸的重要原因[1].我院2004年8月~2010年9月开展电视胸腔镜(videoassisted thoracoscopic surgery,VATS)肺叶切除术97例,其中5例合并胸膜腔闭锁,虽术前X线片、CT均未提示,但全部顺利完成腔镜下肺叶切除术,现报道如下.1 临床资料与方法1.1一般资料本组5例,男3例,女2例.年龄43~65岁,平均56岁.以咳嗽、发现肺占位性病变为主要临床表现,病程1个月~2年.1例既往有胸膜炎病史,余4例均无特殊病史.5例均无特殊体征.胸片、胸部CT提示:肺占位性病变,其中2例肿瘤周围可见毛刺样改变,疑“肺癌”,3例边界清晰,疑良性病变;5例均可见肺纹理增多,未见确切胸膜增厚性改变征象.肿瘤均为周围型,大小2.5 ~4.0 cm;左肺上叶3例,右肺上叶1例,右肺中叶1例.5例肿瘤标志物(包括癌胚抗原CEA,糖类抗原蛋白CA125、CA153、CA19-9 CA242,铁蛋白SF)均阴性.术前诊断同胸部CT.
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新型呼肠病毒S1基因与宿主细胞相互作用的初步研究
目的 筛选出新型呼肠病毒S1基因和宿主相互作用的关键区段,为后续的宿主受体蛋白筛选工作提供可靠的基础.方法 将编码全长S1基因,以及N端和C端阅读框分别克隆入真核表达载体pIRSE2-EGFP,转染敏感细胞株鼠成纤维细胞(L929)和人宫颈癌细胞(Hela)后,通过荧光报告基因EGFP的表达分析,筛选出S1基因与宿主细胞相互作用时起决定性影响的区段.结果 同等量的3种真核表达质粒在单独转染L929时,pGSN质粒转染后荧光表达量大,pGSC质粒转染后荧光表达量小.不同比例混合的pGS与pGSN进行共转染时,pGSN在转染质粒中的比例越高,荧光表达量也越高.在Hela细胞中的转染结果与L929相同.结论 新型呼肠病毒R4株的S1基因N端阅读框编码区(62-406 bp)在S1基因转染时起关键作用.
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瘢痕疙瘩发生的肿瘤源性学说
瘢痕疙瘩是皮肤创伤异常修复的结果,虽然其发病机制仍然没有完全阐明,但已知与以下因素密切相关:(1)成纤维细胞、免疫细胞、角质形成细胞等细胞功能异常;(2)透明质酸、胶原、腱抗原蛋白等细胞外基质异常;(3)转化生长因子β(TGF-β)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)等生长因子表达异常;(4)细胞凋亡异常;(5)免疫学异常;(6)性激素等内分泌异常;(7)遗传;(8)力学或机械因素;(9)曲安奈德、维A酸、放射等治疗因素.
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Ki-67增殖细胞核抗原蛋白在扁平苔藓皮损处表达的意义
扁平苔藓是一种原因不明的慢性或亚急性炎症性皮肤病.有研究表明其发病可能与细胞介导的免疫反应有关.T淋巴细胞活化增殖产生、释放的淋巴因子和生长因子导致了角质形成细胞液化变性和增殖.角质形成细胞增殖是扁平苔藓的主要病理改变,为了探讨扁平苔藓皮损的细胞增殖状况.我们采用免疫组织化学技术检测了扁平苔藓皮损处Ki-67及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药机制和临床耐药研究的新进展
金黄色葡萄球菌为临床常见的病原菌,能产生多种毒素、酶及抗原蛋白,具有较强的致病力,可以引起皮肤软组织感染、血流感染及全身各脏器感染[1].随着青霉素的广泛使用,有些金黄色葡萄球菌产生青霉素酶,能水解β-内酰胺环,表现为对青霉素的耐药.甲氧西林应用于临床后曾有效地控制了金黄色葡萄球菌产酶株的感染.但是之后不久,发现了耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),成为医院感染的主要病原菌之一[2].
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4种HBs抗原检测方法的比较
HBs抗原是乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)的外膜抗原蛋白,在无症状携带者以及由HBV感染引起的急慢性肝炎,肝硬化,肝癌等疾病时能检测出HBs抗原.
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现代医学200词189.Megalin和cubilin——上皮细胞型清道夫受体
Megalin(初被称为gp330)及受体相关蛋白质(RAP),作为大鼠实验性膜性肾病(Heymann肾炎)动物模型的责任抗原蛋白已被鉴定.随后发现肾脏中的megalin还具有重吸收小分子蛋白质的功能,即负担清道夫受体作用.Cubilin作为维生素B12内因子复合物的受体也已被鉴定.它和表达于近端肾小管及羊膜的gp280是同一种蛋白质.cubilin缺乏跨膜结构,人们认为它通过与megalin相结合而发挥受体的功能.近年来与两种受体结合的各种配体逐渐被人们所知,两种清道夫受体在上皮细胞蛋白质代谢(特别是在肾脏)中的重要作用逐渐受到人们的关注.
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树突细胞和肿瘤免疫的临床实验研究
1971年Burnet提出了免疫监视的概念,认为机体免疫系统能够识别并通过细胞免疫机制破坏肿瘤细胞.大量支持肿瘤免疫监视的证据说明了免疫疗法或疫苗可以有效地治疗肿瘤.用杀死的肿瘤细胞、肿瘤细胞裂解物或肿瘤抗原蛋白、肽或DNA并辅以细胞因子或佐剂制备的疫苗可以产生免疫应答或临床反应.但是这种免疫反应通常比较弱,并且很少能产生彻底和持久的临床反应[1].
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脱钙骨免疫组化染色方法的构建
在对骨骼生理和病理的研究过程中,经常需要制备脱钙的骨免疫组化标本,然而由于骨骼组织的特殊性,制备好的骨组化标本也并不是一件容易的事.由于骨组织中60%以上为钙盐组成的羟基磷灰石结晶,脱钙是标本制备中至关重要的过程.一些强酸如盐酸,硝酸等虽能快速有效除去骨组织中钙盐,但对其中的抗原蛋白也产生了致命性破坏,使接下来的工作无法进行;我们仿照目前国外方法:EDTA低温脱钙[1],得到的结果比较满意,现总结如下.
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酶联免疫吸附剂测定法考察丹参滴注液去除蛋白工艺的研究
目的 研究丹参滴注液去除蛋白工艺,考察工艺的合理性.方法 采用酶联免疫吸附剂测定法(ELISA法),以丹参蛋白为检测指标研究丹参滴注液制备工艺中去除蛋白的效果.结果 丹参提取药液经醇沉及超滤工艺后含蛋白量大大降低,低于检测限.结论 醇沉和超滤工艺可有效去除丹参滴注液中的蛋白,保证制剂安全.
关键词: 丹参滴注液 抗原蛋白 酶联免疫吸附剂测定法 醇沉 超滤