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中药诱导白血病细胞凋亡的研究
目前,许多专家学者在对白血病的研究中发现:细胞凋亡受抑制与某些类型白血病的发生有一定关系,多种化疗药物都能诱导白血病细胞凋亡,化疗药物的有效性与其诱导凋亡的特性有关(1).现代药理研究表明许多中药具有细胞毒作用,改善体内激素水平,免疫调节作用和促诱导分化作用(2~5).这些都是其诱导细胞凋亡的药理学基础.现将中医中药和中西医结合治疗白血病在细胞凋亡方面取得的新进展做一综述.
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维生素D代谢产物联合卡铂对人卵巢癌细胞株的作用
近年来,有关研究报道,肿瘤细胞株中可检测到维生素D(VitD)受体(VDR),并观察到维生素D在体内的活性代谢产物1,25(OH)2VitD3在许多肿瘤细胞中的抗增殖和诱导分化作用[1,2].本研究通过体外实验,观察单用1,25(OH)2VitD3及其与卡铂联合应用,对卵巢癌AO及SKOV3细胞株增殖的影响.
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维甲酸诱导治疗急性早幼粒细胞白血病期间出凝血象变化及临床对策
维甲酸(RA)具有促进早幼粒白血病细胞诱导分化作用,可以避免由于化疗药物的细胞毒作用而引起或加重出凝血功能障碍,但在疾病早期及复发患者中仍有一定比例发生了严重出血及DIC,导致病情加重或死亡。我们回顾了1990年以来治疗的52例急性早幼粒细胞白血病(APL)的临床经过,对比分析……
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HPLC-ELSD测定熊果酸磷脂纳米粉针中磷脂的含量及氧化指数
熊果酸(ursolic acid,UA)具有广泛的生物学效应,其抗肿瘤的作用已日益受到国内外药学工作者的重视,对多种致癌、促癌物有抵抗作用,且对多种恶性肿瘤细胞有明显细胞毒作用和诱导分化作用及抗血管形成作用.为更好的发挥其抗肿瘤活性作用,增强对肝脏等靶组织的选择性,同时提高生物利用度,降低用药剂量,笔者采用磷脂为载体,制备了可静脉注射的熊果酸磷脂纳米粉针.
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维甲酸诱导治疗急性早幼粒细胞白血病的出凝血现象及临床分析
维甲酸(RA)具有促进早幼粒白血病细胞(APL)诱导分化作用,可以避免由于化疗药物的细胞毒作用而引起或加重出凝血功能障碍,但仍有一定比例患者发生了严重出血及弥散性血管内凝血(DIC),导致病情加重或致命性死亡.
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苦参碱作用K562细胞表面分化抗原表型的改变
近年来,肿瘤诱导分化剂的研究日渐增多,从中药和天然药物中寻找和提取诱导分化剂是一种新途径.苦参碱是传统中药苦参的有效成分,文献报道具有抗癌活性[1],对白血病细胞有抑制生长和诱导分化作用[2].本课题组在前期研究的基础上[3,4]通过流式细胞仪检测进一步表明:一定浓度的苦参碱可诱导K562细胞向成熟方向分化,并具有多向诱导分化作用.
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2-甲氧基雌二醇诱导HL-60、K562细胞分化作用初探
2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol,2ME2)为雌二醇的生理代谢产物[1],已被证实具有多种抗肿瘤活性[2].国外有文献报道2ME2浓度>0.5 μmol/L即可抑制白血病等肿瘤细胞的增殖,并且对正常细胞无明显毒副作用,目前该药已应用于Ⅱ期临床试验中[3-6].但低剂量的2ME2是否具有诱导白血病细胞分化的作用目前尚未见报道.我们以髓系白血病细胞系HL-60和K562为研究对象,初步探讨2ME2对HL-60和K562细胞系的体外诱导分化作用.
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丹参酮ⅡA对初治、复发及耐药人急性早幼粒细胞白血病细胞体外诱导分化作用
丹参酮ⅡA(TanⅡA)是从活血化瘀中药丹参中提取的有效成分.体外研究表明,TanⅡA对多种肿瘤细胞具有细胞毒作用及诱导分化作用[1].近来有学者发现,0.5μg/mlTanⅡA在体外能诱导急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4细胞及维甲酸耐药APL细胞株MR-2细胞分化成熟[2,3].在此基础上,我们选择11例临床初治、复发及全反式维甲酸(ATRA)耐药的APL患者白血病细胞进行原代培养,进一步证实TanⅡA对APL细胞体外诱导分化作用,为其临床运用提供更加可靠的实验室依据.
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二烯丙基二硫对HL-60细胞SCID小鼠移植瘤的生长抑制作用
二烯丙基二硫(DADS)为大蒜的主要有效成分之一,我们的前期研究表明,DADS对HL-60细胞、MGC803细胞均有牛长抑制与诱导分化作用[1-3].我们在前期研究的基础上,从组蛋白乙酰化水平进一步探讨DADS对小鼠体内HL-60细胞生长的抑制作用及其机制.
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1,25-二羟基维生素D3与小剂量阿糖胞苷联用对HL-60细胞诱导分化作用的实验研究
我们以1,25-二羟基维生素D3(D3)与小剂量阿糖胞苷(Ara-C)联合作用于HL-60细胞,通过形态学、细胞功能及癌基因表达的检测,研究二者的联合效应,以及时间、剂量依赖关系.
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丹参临床应用研究进展
丹参(Slvia miltiorhiza Bge)及其制剂有活血祛瘀、安神宁心、止痛等功效,在治疗心血管系统疾病、消化系统疾病、泌尿系统疾病、血液系统疾病等方面取得了较好的疗效,现将其临床应用研究进展综述如下.
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1例三氧化二砷致急性早幼粒细胞白血病患者骨髓坏死的护理
三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病的主要机制为砷剂能引起细胞凋亡,使肿瘤细胞株发生核碎裂出现凋亡小体[1],其诱导细胞凋亡过程不依赖维甲酸信号途径,而且有诱导分化作用[2].2006年6月我院收住1例应用三氧化二砷后发生骨髓坏死的急性早幼粒白血病患者,经积极治疗与精心护理,该患者骨髓达完全缓解.随着白血病发病率的增高,三氧化二砷的临床应用越来越广泛,为提高配合临床类似病例的救治成功率,现报道如下.
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雄黄在血液病中的应用概况
雄黄为含砷的矿物,作为常用中药已有上千年的历史,牛黄解毒片、青黄散等相当一部分中成药中都含有雄黄,其在传统中医,甚至是现代临床实践中的应用都十分广泛.早在50年代含雄黄的中药就开始用于治疗白血病.近年来As2O3在治疗白血病方面取得了突出的成效,它不仅缓解率高,不引起骨髓抑制,作用机制不同于传统的杀细胞化疗药物和具有诱导分化作用的维甲酸,对维甲酸和化疗药物耐药的复发患者也有一定的疗效.
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全反式维甲酸对人胰腺癌细胞PC-3诱导分化作用及其对Survivin表达的影响
维甲酸类药物是一类细胞诱导分化剂,能够抑制多种肿瘤细胞的增殖,调节着细胞的生长和分化,全反式维甲酸(A-TRA)作为维甲酸类药物的代表,具有显著的抗肿瘤作用[1,2].我们用ATRA诱导人胰腺癌细胞PC-3,观察细胞周期的改变和Survivin基因表达的变化,以及ATRA对人胰腺癌细胞增殖的抑制作用,为维甲酸类药物临床应用于胰腺癌的治疗提供实验依据.
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碱性成纤维细胞生长因子与脑神经元再生
自从1975年首次分离提纯碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)后,人们对bFGF的分子结构、生物学功能、作用机理等方面进行了较为深入的研究,发现bFGF具有多种生物学活性,包括促有丝分裂、趋化和诱导分化作用[1].
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SRS淋巴瘤的SAC-ⅡB2克隆细胞株的生物学和诱导分化研究
目的和方法:SRS腹水瘤来源于本室建立的L6565病毒性白血病的胸腺悬液,移植成功率100%.继而应用SRS腹水瘤细胞在体外建成SRS-82细胞系.许菡等对SRS-82细胞采用有限稀释法,经过培养建立了SAC-ⅡB2克隆细胞株.经用抗淋巴细胞血清和多种单克隆抗体检测证明SRC-ⅡB2为无T,B细胞表面标记的淋巴干细胞.X-C生物学检测阳性,超薄切片在电镜下观察到A型和C型病毒颗粒.2×106个克隆细胞注射昆明种或SW-1系小鼠腹腔或皮下,可发生腹水瘤或实体瘤.结果:应用细胞诱导分化剂维甲酸(RA)的研究表明,在2×10-6~2×10-5 mol/L浓度作用下,分裂指数降低,并对SRS腹水瘤生长有明显抑制作用(P<0.01),延迟荷瘤小鼠的生存期.免疫学和细胞化学方法研究显示,经RA处理的SAC-ⅡB2克隆细胞的ANAE阳性率和细胞内嘌呤核苷磷酸(PNP)活性均明显升高,而腺苷脱氨酶(ADA)活性显著下降,末端脱氧核苷酰转移酶(ADA)的表达有所减弱.结果提示RA对SAC-ⅡB2克隆细胞有一定程度的诱导分化作用.应用ABC免疫组织化学方法(郑颂国等1997),通过癌基因产物的单抗和多抗检测筛选,发现SAC-ⅡB2细胞有c-myc,c-fos的强阳性表达(+++)和c-jun, c-erbB, ras P21的弱阳性表达(+),严开平等(1997)针对c-fos cDNA第2~7编码序列设计合成18聚反义(AS)和正义(S)和无义(NS)的寡脱氧核苷酸,研究结果发现反义c-fos寡脱氧核苷酸可促使SAC-ⅡB2细胞形态向成熟阶段分化,抑制细胞增殖速度;免疫组化方法显示,克隆细胞中FOS蛋白表达下降.结论:反义c-fos寡脱氧核苷酸能特异地抑制小鼠淋巴瘤SAC-ⅡB2克隆细胞的恶性表型,并有诱导分化作用.
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骨髓基质细胞分泌抑制白血病细胞增殖的细胞因子
在研究骨髓基质细胞对造血调控的作用中,我们从人骨髓成纤维细胞克隆亚系(HFCL-1)条件培养液中发现新的能抑制HL-60细胞增殖的活性组分.1.采用MTT实验监测活性组分对HL-60细胞增殖的抑制能力.采用NBT还原实验和酸性磷酸酶测定观察活性组分对HL-60细胞的诱导分化能力.2.采用中空纤维柱超滤浓缩、DEAE cellulose-52、Phenyl Sepharose、chromatofocusing、Sephacryl S-100、Prep-PAGE和HPLC等程序,从HFCL-1细胞条件培养液中纯化出两组具有明显抑制HL-60细胞增殖的活性组分.一定剂量(抑制率60%~80%)下,一组对HL-60细胞有诱导分化作用;另一组无诱导分化作用.3.活性组分对正常骨髓细胞体外培养有一定抑制作用;对U937和K562白血病细胞有明显的抑制作用.4.活性组分的pI值在4~6之间,分子量在35~50 kD之间,在还原型8%~14% SDS-PAGE分析中呈2~3条主要区带.活性组分的pI值、分子量和生物学性质均有别于TNF-α、LIF和TGF-β等己知造血负调节因子,很可能是新型造血负调节因子.
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内皮细胞对鼠骨髓造血细胞的增殖和分化作用
探索内皮细胞对小鼠骨髓造血细胞的刺激和诱导分化作用. 人脐静脉内皮细胞取自剖腹产后12hr以内的脐带.按Jaffe法进行培养,建立内皮细胞体外培养模型,收集原代培养的内皮细胞上清液(HECS).按本室常规方法制备骨髓有核细胞.在造血细胞半固体和液体培养体系中加入不同组合的重组造血因子,分为三组 :①粒系培养组加GM-CSF(德国BM公司),终浓度为20ng/ml.②红系培养组加入IL-3(美国SIGMA公司)与EPO(德国BM公司),终浓度分别为20ng/m l和2u/ml.③实验组加入内皮细胞培养上清液,以RPMI-1640为对照组.将上述体系接种于24孔板中,每孔1ml,培养7d,收集细胞,作细胞计数,台盼蓝拒染活力检测.细胞表面标记分析:选用抗红系或粒系的单克隆抗体CD71和CD13(美国 Coulter公司)作细胞表面标记检测.培养后细胞经PBS洗涤,取细胞悬液2~5 ×105细胞),加抗体1μl,4℃孵育30min,用PBS洗去没有标记上的抗体和FITC,重新悬浮细胞,用流式细胞仪(Coulter Elite Esp,美国Coulter公司)进行分析.用T检验分析实验数据以x±SD表示.结果:HECS对小鼠骨髓细胞形成各类造血祖细胞集落具有明显的刺激作用,能够提高BF U-E,CFU-E,CFU-GM集落产率,分别为43.04±5.80,148.7 5±32.20,104.67±9.92(P<0.05);HECS诱导细胞7d后, 细胞表面表达CD13为93.75±5.38,CD71为59.95±7.10(P< 0.05).实验组与阳性对照组基本一致,阴性对照组无集落形成和抗体表达.内皮细胞不但能够促进造血干祖细胞的增殖并且能够诱导其定向分析.以往对骨髓细胞的体外培养均采用琼脂或甲基纤维素半固体培养的方法,在用流式细胞仪进行分析时,由于难以去除琼脂或甲基纤维素对实验的干扰,造成对细胞表面抗原标记的困难,影响了实验的准确性.本实验将小鼠骨髓细胞进行体外液体培养,同时加入不同组合的重组造血生长因子,诱导造血干祖细胞向红系和粒系分析,为流式细胞仪分析细胞特异性抗原的表达提供了新的途径.