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免疫组织化学标准化(二)
1.3 免疫组化染色1.3.1内源性过氧化物酶的灭活在免疫组化染色中若采用过氧化物酶检测系统,必须进行内源性过氧化物酶处理,如果不进行处理,组织中的红细胞、粒细胞着色可能会干扰染色结果的判断.
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提高肝组织中HBsAg、HBcAg阳性率的体会
常规石蜡切片标本,一般均用甲醛固定,而经甲醛固定的组织,其抗原蛋白的氨基与固定液中的醛基交联形成羧甲基而封闭了抗原决定簇,使其免疫组化标记的敏感性明显降低,且背景着色明显.免疫组化染色的成功与否,组织内源性过氧化物酶清除以及抗原决定族的保存和暴露是一个重要的环节.在日常工作中,我们发现同一肝穿组织采用不同的预处理方法,明显影响HBsAg、HBcAg的检出率.
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昌宁县湾甸乡内源性疟疾点状暴发特征分析
湾甸乡地处云南昌宁县西部,东经99°23′12″~99°24′51″,北纬24°26′00″~24°33′45″.辖5个行政村、48个村民小组,总人口12 316人,以傣族为主.总面积314 km2,属亚热带气候,年平均气温22.3℃,年均降雨量1 100 mm,低海拔608 m,适宜当地媒介按蚊孳生及疟疾传播,是昌宁县主要疟区之一.1970年7月,湾甸乡疟疾暴发流行,疟史率高达60.00%.1971年再度全面暴发流行,疟史率达58.91%.通过多年的积极防治,疟疾发病率降至1以下,1993年达到卫生部基本消灭疟疾标准,连续11年未出现内源性病例.
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云南边境地区一起内源性疟疾暴发流行的调查
2008年6月1日~7月18日孟定镇康福村暴发了一起内源性疟疾疫情,共发现疟疾病人39例,其中,镜检诊断10例,临床诊断18例,疑似病例11例.传疟媒介的大量存在,疟史者较多,疟疾易感人群增多,居住条件简陋,个人防护意识欠缺和卫生条件差是引发该起疟疾暴发疫情的主要原因.全部病例经氯、伯喹或青蒿琥酯片治疗后痊愈.通过采取正确有效措施,疫情迅速得到了控制.
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MMN与老年人及阿尔茨海默病的相关性研究进展
一、MMN的概念与基本性质失匹配负波(mismatch negativity, MMN)是一种内源性事件相关电位(event-related potential, ERP)成分,出现在刺激后100-200ms[1].1978年由Ntnen等[2]首先观察到,运用听觉oddball实验模式,在标准声音刺激中随机插入偏差刺激,分别在被试双耳中呈现,无论注意与否,在约250ms内偏差刺激皆比标准刺激引起更高负波,若以偏差刺激引起的ERP减去标准刺激引起的ERP,观察此差异波,则可见到在约100ms至250ms之间出现了一个明显的负波,此即MMN.
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内吗啡肽的构效关系研究
疼痛药物的研发一直是全球性的热点和难点.阿片类药物在其中占有重要的地位,然而它们在起到镇痛作用的同时往往伴随很多副作用.20世纪70年代起,多个阿片受体亚型被相继克隆出来,并且相应的内源性配体不断发现,但是μ阿片受体的内源性配体--内吗啡肽(endomorphins) 的发现却经历了较长一段时间,直到1997年,Zadina 等[1]于牛脑中发现了2个四肽,分别命名为endomorphin-1 (EM-1)和endomorphin-2(EM-2).之后韩济生等[2]建议它们的中文译名为内吗啡肽-1和内吗啡肽-2.
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绿色荧光蛋白放射免疫分析试剂盒的研制
绿色荧光蛋白(GFP)于1962年在一种学名为 Aequorea Victoria的水母中发现,包含238个氨基酸残基[1-2]。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会吸收蓝光的部分能量,发出绿色荧光。GFP 常用于标记某些特定的 RNA、内源性代谢产物以及靶蛋白[3],可通过荧光显微镜实时观察,也可通过荧光激活细胞,分选分离细胞[4]。这一活体生物标记[5]特性,使得 GFP成为实时观察细胞、组织、器官不可或缺的工具[6],在转基因动物生产中也得到了广泛的应用[7-12]。
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miRNAs与肿瘤
微小RNA(microRNA,miRNA)是一类长19~24 nt的单链、内源性非编码 RNA,其序列高度保守。成熟 miRNA的转录生成首先是在细胞核内经 RNA多聚酶 II和(或)多聚酶 III的作用形成初始 miRNA(pri-miRNA),然后在核内切酶 Drosha Rnase III作用下,去除 pri-miRNA的5'-cap和3'-poly(A)结构形成含茎环结构的前体 miRNA (pre-miRNA),再经由 Ran-GTP/Exportin-5受体将 pre-miRNA从核内输出到细胞质,在胞质经 Dicer酶和解螺旋酶作用后形成单链成熟 miRNA;成熟 miRNA被 RNA诱导沉默复合物(RNA-induced silencing complex, RISC)如 Argonaute核蛋白家族包裹,形成 miRNA沉默复合体(miRNP),miRNP可以与靶基因 mRNA的3'-UTR互补配对,使 mRNA发生降解或转录抑制,发挥转录后水平调控作用[1]。单一 miRNA可调控多个靶基因,一个靶基因也可由多个 miRNAs共同调控,这些靶基因大多数参与了机体分化,细胞增殖、凋亡、代谢等生理过程。新研究还发现另一类内源性长非编码 RNA(long uncoding RNA, lncRNA)可调控靶基因 mRNA表达,也可作为竞争性内源 RNA(ceRNA)拮抗 miRNA的转录抑制作用[2](图1)。早报道 miRNA是在1993年,科学家在秀丽短杆线虫体内得到,分析发现它包含约21个非编码核苷酸序列,部分序列能与 lin-14 mRNA的3'-UTR互补配对结合,抑制 lin14蛋白合成,取名为 lin-4[3-4]。后来研究发现, miRNAs在多种动植物体内都存在,截至2014年6月, miRBase数据库报道的 miRNAs总数已达28645个。越来越多的研究证实,在人类多种疾病如肿瘤、心血管疾病和代谢性疾病等病理过程中,miRNAs 的表达均出现异常。
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microRNA在造血和造血系统肿瘤中的作用
microRNA(miRNA)是一种内源性、广泛存在于真核生物中的单链小分子RNA,其大小约为21~23个核苷酸,不能编码蛋白质,可以在转录后和翻译水平上影响基因的表达.miRNA在多种生命过程中发挥着作用,miRNA在特定的细胞或组织、时间、发育阶段才会表达,提示它对组织的发育有着潜在的重要作用.近年来发现miRNA在造血的多个方面起着重要的作用:如造血干细胞自我更新、增殖、分化和凋亡,以及免疫细胞的产生、分化和发挥功能[1-2].现将miRNA在造血和造血系统肿瘤中作用综述如下.
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肺癌小RNA即时定量逆转录聚合酶链反应分析中内参照的选择
小RNA(microRNA,miRNA)是一类体积微小的内源性非编码RNA,可其通过翻译后水平调节靶基因的表达.miRNA在肺脏的发育过程中发挥多种作用,其异常表达很可能是肺癌发生的原因之一,且在肺癌的发生与发展过程中呈不同的表达水平,可作为新型的临床生物标志物用于肺癌的诊断、预后评估及指导治疗方案的选择等[1-3].即时定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription-PCR,RT-qPCR)技术目前已广泛应用于miRNA的表达分析[1-2].
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加强基因型分析发展个体化医学
疾病的诊断,从表型(phenotype)分析发展到表型和基因型( genotype)结合分析代表着医学的革命性进步。临床分子病理学,或称分子诊断,已成为当今迅猛兴起的病理亚学科之一。它从核酸水平(DNA和RNA)研究疾病发生和发展规律,揭示疾病时外源性基因在体内的存在和内源性基因的突变及表达异常,是传统形态病理学的有益补充和发展。
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首发精神分裂症患者血液中HERV pol基因的检测
为了检测首发精神分裂症患者体内,人内源性逆转录病毒(HERV)的激活状况,分析比较HERV pol基因阳性和阴性首发精神分裂症患者的临床表现,我们用RT-PCR技术检测首发精神分裂症患者血液中HERV pol基因序列的表达状况.
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内源性TNF-α对HBV转染细胞HLAⅠ表达的诱导作用
HLAⅠ分子组成性表达于各种有核细胞表面,细胞因子可通过旁分泌或自分泌效应诱导其表达增强.Zhou等[1]实验表明HBV能增强HepG2细胞的HLAⅠ表面表达,排除细胞内IFN-β的产生和介导作用.为进一步研究其它内源性细胞因子的介导作用,我们构建HBV基因组野生株(WT)及核壳蛋白变异株L97稳定表达载体,探讨TNF-α对HBV转染细胞HLAⅠ表达的调节作用.
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过氧化物酶系统对口腔厌氧菌和兼性厌氧菌存活影响的实验研究
人唾液中存在内源性硫氰酸盐(SCN-)、唾液过氧化物酶(Salivary Peroxidase,SPO)和髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO),这些因子组成一个生理条件下的生态体系:过氧化物酶系统.本实验通过模拟口腔环境中过氧化物酶系统的组合,测定乳过氧化酶系统(Lactoperoxidase System,LPS)对3株口腔可疑致病菌和1株口腔有益菌存活的影响,研究LPS与口腔致病菌和有益菌的相互关系.
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自噬对适应性免疫的调控
自噬(autophagy)是一种蛋白降解系统,根据细胞内底物运送到溶酶体腔方式的不同,可分为大自噬(macroautophagy)、微自噬(microautophagy)、分子伴侣介导的自噬(chaperone-mediated autophagy,CMA)三种[1].大自噬中,孤立的双层膜结构包裹变性坏死的细胞器,聚集的蛋白质和病原体等成分,形成自噬体( autophagosome).然后与溶酶体膜融合,形成自噬溶酶体(autophagic lysosome),降解所包裹的物质.自噬在固有免疫和适应性免疫调控中发挥重要作用.就适应性免疫而言,自噬在抗原提呈中起着必不可少的作用[2].经典免疫学认为,MHC Ⅰ类分子把内源性抗原提呈给CD8+T细胞,而MHCⅡ类分子把外源性抗原提呈给CD4+T细胞.
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猕猴实验性内毒素休克早期炎症相关细胞因子水平的检测
LPS(脂多糖)是内毒素的主要成分,虽不直接引起组织损伤,但可通过刺激某些内源性炎症介质,特别是细胞因子的过度分泌介导一系列病理生理反应,如血压过低、发热、组织坏死、血管内皮损伤、多器官功能衰竭,终导致死亡.
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小儿体外循环术中抑肽酶促进内源性白细胞介素-10释放的研究
目的探讨小儿体外循环(ECC)术中抑肽酶促进内源性IL-10释放的作用及量效关系.方法按入选标准筛选病例并随机分成6组:对照组(A1组,n=15),小剂量抑肽酶组(B1组,n=15),大剂量抑肽酶组(C1组,n=15),激素组(A2组,n=20),激素+小剂量抑肽酶组(B2组,n=20),激素+大剂量抑肽酶组(C2组,n=20).用酶联免疫吸附试验法测定各患儿在术前,ECC 30 min,ECC结束后2 h,24 h,7 d5个时间点血清IL-10的浓度.结果各组ECC 30 min,ECC结束后2 h血清IL-10浓度与术前相比显著增高(P<0.01);且B1、C1组与A1组相比,B2、C2组与A2组相比及C1组与B1组比较,C2组与B2组比较,IL-10水平增高更为明显,各组间差异有显著性(P<0.01);A1、B1组术后住院日明显延长(P<0.05).结论抑肽酶能促进内源性IL-10的释放,且药效与抑肽酶剂量呈正相关.
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非典型急性肺栓塞二例临床分析
肺动脉栓塞( pulmonary emobolism,PE)是指内源性或外源性栓子堵塞肺动脉及分支引起肺循环障碍的一种临床综合征,PE因临床表现多样,且缺乏特异性,是一种极易被误诊的急危重症疾病,误诊率可高达70% ~ 90%,治疗上亦不尽合理,未经及时治疗的肺栓塞可高达20%~30%.现把临床上遇见的两例急性肺栓塞做一分析.
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血液灌流治疗32例急性重度中毒
血液灌流(HP)治疗是借助于体外循环使血液通过有吸附作用的装置(吸附罐)来清除已吸收入血的外源性或内源性毒物,从而达到血液净化的一种方法[1].本院急诊科自1998年12月至2003年12月,应用HP抢救急性重度药物、毒物中毒患者32例,取得了良好的效果.
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硫化氢在脑缺血-再灌注损伤中的作用
H2S过去常常被人们认为是一种有毒的废气,近年来发现在哺乳动物的组织中可见其及其合成酶的表达,并有着和NO、CO许多类似的特点.研究显示不管是内源性还是外源性H2S在不同器官中均可通过不同机制产生多脏器保护作用,其作用机制涉及抑制炎症因子、抗氧化应激、抗凋亡等,H2S作为一种新型的气体信号分子,有可能为脑缺血再灌注损伤疾病提供一种多靶点的治疗方法.本文就H2S在脑缺血再灌注损伤中的作用及其可能机制研究加以简要综述.