中国药科大学学报杂志
Journal of China Pharmaceutical University 중국약과대학학보
- 主管单位: 中华人民共和国教育部
- 主办单位: 中国药科大学
- 影响因子: 0.65
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1000-5048
- 国内刊号: 32-1157/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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温敏型透明质酸/巯基化壳聚糖眼用复合纳米凝胶的制备与评价
制备温敏型的透明质酸衍生物(HA-PN)与巯基化壳聚糖(CMCS-NAC)的复合纳米凝胶(HP/CN),并对其药代动力学性质进行评价.采用孵育法制备环孢素A(CsA)复合纳米凝胶(CsA HP/CN),测定其粒度分布、Zeta电位、低临界溶解温度(LCST)和载药量等理化性质.以家兔为模型动物进一步评价了CsA HP/CN制剂眼部刺激性、黏附性和眼部药代动力学.制得的CsA HP/CN为球形,粒径(122.7±17.8)nm,Zeta电位-(27.87 ±2.16)mV,LCST约为28.4℃,载药量高可达15.08%.CsA HP/CN制剂对兔眼无刺激性;滴眼后15 min,制剂组的黏附性是单独载体(对照组)的1.97倍;家兔眼部AUC以及MRT显著提高,分别是对照组的1.67和5.17倍.所制备的CsA HP/CN粒径小、载药量高,可明显延长CsA在眼部的滞留时间,提高其生物利用度,是一个非常有应用前景的眼部递药系统.
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两种蟾蜍EDF-1 cDNA的克隆及其生物信息学分析
蟾蜍皮肤基源的中药材(如蟾皮和蟾酥),已长期应用于临床,主要治疗炎症、疼痛以及多种肿瘤.为分析这些蟾蜍中药材中含有的多肽类有效成分,通过菌落DNA聚合酶链式反应(colony polymerase chain reaction)对日本蟾蜍(Bufo japonicus formosus)皮肤cDNA质粒文库进行筛选,克隆到958 bp的转录子(GenBank accession number:KF769458),包括5 '端13 bp、3'端498 bp的非翻译区和447 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),编码由148个氨基酸残基组成的蛋白质,与人及其他动物的内皮分化相关因子-1(endothelial differentiation-related factor-1,EDF-1)显示高度同源性.为分析中华大蟾蜍(B.gargarizans)皮肤中是否存在EDF-1的表达,在日本蟾蜍cDNA序列的基础上设计引物,并以中华大蟾蜍皮肤第一链cDNA为模板,通过PCR克隆中华大蟾蜍EDF-1ORF.测序分析表明其ORF为447 bp(GenBank accessionnumber:KF769459),与日本蟾蜍的ORF长度相同,两者编码的蛋白之间存在3个氨基酸的差异,但与人源EDF-1的相似性均为95%,与其他动物的相似性介于93%~97%,表明其在进化上的高度保守性.磷酸化位点预测显示9个潜在的磷酸化位点,与已报道的该蛋白的生物学活性受上游因子的调控的研究结果相吻合.由于哺乳动物的EDF-1参与抑制内皮细胞的分化,因此它很可能是蟾蜍皮肤基源的中药材中含有的抗肿瘤的有效成分之一.
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大黄素对K562/ADM细胞阿霉素耐药的抑制作用
探讨大黄素抑制人慢性粒细胞白血病细胞耐阿霉素变异株K562/ADM的药效学及作用机制.以维拉帕米为阳性药,阿霉素为工具药,采用MTT法测定大黄素与阿霉素合用对细胞增殖的抑制作用;使用流式细胞仪考察了大黄素对于阿霉素诱导K562/ADM细胞周期阻滞和凋亡的促进作用;并采用Western blot法检测了大黄素对P-gp、Bcr-Abl和STATS蛋白表达的影响;进一步通过P-gp单克隆藻红蛋白键合UIC2抗体结合实验探讨了大黄素是否是P-gp的底物.实验结果显示,大黄素与阿霉素合用可显著抑制K562/ADM的增殖,并呈量效关系;可促进阿霉素诱导的K562/ADM细胞G2/M期周期阻滞和细胞凋亡;不同剂量的大黄素可有效抑制P-gp、Bcr-Abl、STATS蛋白表达及磷酸化;UIC2抗体结合实验结果则表明大黄素可能不是P-gp的底物.因此,大黄素能够在体外有效抑制K562/ADM阿霉素耐药,其机制可能不是通过底物竞争性抑制作用,而是与大黄素直接降低P-gp、Bcr-Abl及STATS蛋白表达和磷酸化有关.
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双重荧光实时RT-PCR技术鉴定H9N2亚型禽流感病毒
采用双重荧光实时RT-PCR技术,建立一种简便易行的HgN2亚型禽流感病毒的快速鉴定方法.通过比对GenBank甲型禽流感病毒H9N2亚型的HA和NA基因序列,设计特异性针对HA和NA的引物,分别选用FAM和JOE两种不同荧光标记探针,构建双重实时荧光PCR一步法反应体系,同时检测样本中的HA和NA基因.结果显示:扩增曲线和特异性实验结果显示,该体系具有很好的扩增效率,且仅特异性识别H9N2亚型AIV的HA、NA基因,与相关病毒或其他亚型无交叉反应.采用重组质粒pMD19-T构建HA、NA阳性质粒,10倍梯度稀释液为模板,进行荧光定量PCR.结果证实,本研究所建立的双重荧光定量RT-PCR体系敏感性能达到10个RNA拷贝数.采用本方法检测60份感染动物样品及60份环境样品,与传统PCR方法相比,检测敏感性提高了100倍;与病毒分离鉴定方法比较,二者的鉴定结果完全吻合.该方法具有特异性强、灵敏度高、快速易操作等优点,是H9N2亚型禽流感病毒鉴定的有效方法.
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Maculosin对肺成纤维细胞纤维化相关基因表达的影响
Maculosin是从红海榄根际土壤来源的曲霉属真菌菌株CGD12发酵液中分离得到的一种二酮哌嗪类化合物,由L-脯氨酸和L-酪氨酸脱水缩合而成.在本研究中,采用乳酸脱氢酶(LDH)法检测了Maculosin对肺成纤维细胞株的细胞毒性,通过实时荧光定量RT-PCR (qRT-PCR)评价了其对纤维化相关基因表达的影响.结果表明:Maculosin能明显抑制由外源转化生长因子-β2诱导的肺成纤维细胞株的活化,对细胞外基质(ECM)成分的合成有一定的抑制作用.进一步的分析结果显示:Maculosin的抗纤维化作用可能与其抑制炎症相关因子的表达和促进ECM成分的降解过程有关.
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新型法尼基硫代水杨酸/羟基肉桂酸偶联物的合成及其抗肿瘤活性
通过偶联法尼基硫代水杨酸(FTS)的羧基与羟基肉桂酸的酚羟基,设计合成了16个新型FTS/羟基肉桂酸偶联物(7a~7p),并对其进行了体外抗肿瘤活性研究.结果表明,大部分化合物对6种人肿瘤细胞具有较强的抗增殖活性,其中,化合物7b表现出佳的肿瘤细胞增殖抑制活性,对所测肿瘤细胞的IC5o为5.51~9.25 μmol/L,优于FTS和索拉非尼的活性.并且,化合物7b可以选择性地抑制肿瘤细胞的生长,而对正常细胞损伤较小.此外,流式细胞分析显示化合物7b可以浓度依赖性地诱导SMMC-7721细胞凋亡.
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联用技术鉴定与测定硫酸阿托品有关物质
建立高效液相离子对色谱法测定硫酸阿托品的有关物质,并利用LC-MS/MS进行结构鉴定.采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以磷酸二氢钾缓冲液(含庚烷磺酸钠,用磷酸调pH至5.0)-乙腈为流动相进行线性梯度洗脱,对硫酸阿托品及其碱、高温、氧化破坏的有关物质进行分离;并在挥发性流动相条件下通过高分辨LC-TOF/MS测定各有关物质的准确质量和LC-MS/MS二级质谱测定鉴定结构.建立的离子对色谱条件下各有关物质与主成分分离良好,检测到12个主要有关物质,其中6个为欧洲药典已知杂质,6个为国内外文献未见报道的未知杂质,经初步鉴定它们为硫酸阿托品的合成副产物和降解产物.新建立的离子对色谱法适用于硫酸阿托品中有关物质的检查,为硫酸阿托品质量控制和工艺优化提供了参考.
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埃索美拉唑及其光学异构体的亲和毛细管电泳手性拆分
以牛血清白蛋白为手性添加剂,建立埃索美拉唑对映体杂质检查的亲和毛细管电泳方法,并采用荧光光谱、圆二色光谱法,通过研究埃索美拉唑及光学异构体与牛血清白蛋白作用的热力学参数、焓熵驱动过程及蛋白构象变化对其拆分机理进行探讨.建立的电泳分离条件为:未涂层石英毛细管柱(50 cm×50 μm,有效长度41.5 cm),以pH 8.0的20mmol/L磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液(含250 μ mol/L牛血清白蛋白和7%正丙醇)作为运行缓冲液,正向运行电压30kV,柱温25℃,检测波长302 nm,压力进样(5 kPa,5 s).在优化的实验条件下,埃索美拉唑与其对映体的分离度大于1.8,对映体杂质的低检测限和定量限分别为0.8和2.0μg/mL,在2~20μg/mL浓度范围内线性关系良好;平均回收率为100.4%,RSD小于2.0%.该方法可用于埃索美拉唑原料药的对映体杂质检查.
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汉黄芩素抑制IL-6诱导人非小细胞肺癌A549细胞的侵袭转移作用
探讨汉黄芩素对IL-6诱导的人非小细胞肺癌A549细胞侵袭转移的抑制作用及其可能机制.采用MTT法检测汉黄芩素对A549细胞存活影响;细胞侵袭实验检测汉黄芩素的抗侵袭转移作用;免疫荧光检测转移标志蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白水平表达;Real-time PCR分析汉黄芩素对转移标志蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin以及相关转录因子Snail、Twist基因水平的影响;通过转染STAT3质粒,进一步验证汉黄芩素对转移标志蛋白作用机制.实验结果表明汉黄芩素通过调控转移标志蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白、基因表达水平,抑制IL-6诱导的A549细胞侵袭转移且呈剂量依赖性.汉黄芩素能抑制转移相关转录因子Snail、Twist的表达.由此推测,汉黄芩素可能是通过调控转录因子Snail、Twist的活性进而抑制A549细胞侵袭转移.
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基于遗传算法寻找抗HBV活性分子的关键分子指纹片断
通过活性HBV DNA聚合酶抑制剂,采用二维定量构效关系方法寻找与活性关系相关的关键分子特征.模型采用遗传逼进算法,寻找关键的分子指纹片断,所得方程调整r2为0.911 9、预测r2为0.848 9.所获得的8个分子指纹片断药效特征与药效团模型相一致.这些分子指纹片断相较于片断库或随机片断更具有针对性,通过这些片断组装的分子库将极大地提高虚拟筛选和全新药物设计的效力.
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紫菀肽类组分诱导肝脏L-02细胞凋亡的机制
探讨紫菀肽类组分Fr-2的肝细胞毒性及其作用机制.采用二甲基噻唑蓝(MTT)检测人正常肝脏L-02细胞的活力,试剂盒检测LDH、ROS、GSH、细胞色素C和Caspase-9、Caspase-3的含量,流式细胞仪检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化,Western blot法检测凋亡相关蛋白p-JNK、Bax、Bcl-2的表达.实验结果显示,紫菀肽类组分Fr-2可剂量/时间依赖性地抑制L-02细胞的生长,诱导细胞内的氧化应激反应,降低线粒体膜电位,促进细胞色素C的释放,升高Bax/Bcl-2的比值并激活Caspase-9、Caspase-3.以上结果表明,紫菀肽类组分Fr-2导致肝细胞毒性的主要诱因是氧化应激,主要作用机制是诱导线粒体依赖途径的细胞凋亡.
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辛伐他汀对非洛地平在大鼠中的代谢和药代动力学的影响
非洛地平和辛伐他汀在临床上广泛被联合使用,然而并未见关于二者相互作用的研究报道,本研究旨在从体内和体外两方面研究辛伐他汀对非洛地平的代谢和口服药代动力学的影响.非洛地平和辛伐他汀在大鼠肝微粒体中共温孵,结果表明辛伐他汀是非洛地平的非竞争性抑制剂,抑制常数K=(9.86±0.27)μmol/L.12只大鼠随机分为两组,Ⅰ组灌服非洛地平;Ⅱ组灌服非洛地平和辛伐他汀.大鼠同时灌服非洛地平和辛伐他汀后,测得非洛地平的Cmax和AUC0-∞显著增加,清除率(CLz/F)显著降低,而平均驻留时间(MRT0-∞)和半衰期(t1/2)无显著性变化.结果表明辛伐他汀促进了非洛地平在大鼠体内的吸收.该实验为非洛地平和辛伐他汀可能存在的药物相互作用提供了理论参考.
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UPLC法同时测定胆木中6种成分的含量
建立胆木药材中原儿茶酸、绿原酸、短小舌根草苷、3-表短小舌根、异常春花苷内酰胺和喜果苷同时测定的UPLC方法.采用Acquity BEH C18色谱柱(2.1mm×100 mm,1.7 μm),乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,进样量为2μL,柱温为40℃的色谱条件.在选定的色谱条件下,6种成分均能达到良好分离,并对方法进行了系统的验证.结果表明,线性关系良好(R2 >0.999 6),日内、日间精密度RSD≤4.05%,加样回收率为96.59%~101.8%.本方法简便、快速、准确,可用于胆木药材的质量控制.
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三白草中一个新的降碳木脂素类成分
从三白草的95%乙醇提取物中分离得到3个化合物,分别鉴定为Sauchinolide A(1),rel-(7S,8S,7'R,8'R)-3,3',4,4',5,5'-hexamethoxy-7.O.7',8.8'-lignan(2),galgravin(3).其中化合物1为新的降六碳木脂素,命名为三白草内酯A;化合物2和3为首次从三白草科植物中分离得到.初步评价了化合物1~3对内皮细胞EA.hy926的缺氧/复氧损伤的保护作用,化合物2对EA.hy926细胞缺氧/复氧损伤具有中等的保护作用.
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氢化咖啡酰壳聚糖-铜-阿霉素三元配位超分子的制备及肾靶向评价
合成了氢化咖啡酰壳聚糖衍生物(HCAC),其中氢化咖啡酸(HCA)的取代度为15.6%;采用不良溶剂沉淀法将HCAC、Cu(NO3)2·3H2O和阿霉素(Dox)制备成三元配位超分子HCAC-Cu-Dox.通过高效液相色谱(HPLC)和电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP-AES)分别测定Dox和Cu的含量为(7.8±0.3)%和(5.2±0.2)%;透射电镜(TEM)观察超分子为类球形纳米粒子,平均粒径为(68.7±3.9)nm;研究了超分子的键合常数和热力学性质,证明Dox在超分子中以分子态或无定型态存在;体外释放结果显示载药超分子在生理pH条件下无突释现象,24 h释放量仅13.5%;近红外荧光成像表明超分子可有效分布至肾,而极少在其他脏器分布;MTT法研究超分子的细胞毒性,表明其可明显抑制人肾癌A498细胞的增殖.因此,本研究所制备的HCAC-Cu-Dox三元配位超分子有望实现肾靶向递药和治疗.
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评价大鼠离体肝灌流模型稳定性的方法
以自建的大鼠原位循环肝灌流模型为研究模型,建立一套实用的模型稳定性评价方法.首先进行一般稳定性评价,包括肉眼观察肝脏形态,监测门脉压、灌流液pH,定时检测灌流液K+浓度、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,肝组织病理检查等;要求在整个灌流过程中肝脏色泽均匀,无斑块状改变,以门静脉压始终无骤变,稳定在8~14 mmHg范围内,变化不超过0.5 mmHg/30 min,pH始终处于7.4~7.2,变化不超过0.1/30 min,K+浓度无突然升高现象,灌流液中ALT、AST水平随时间无显著性变化,肝组织病理检查不出现除空泡性变以外的病变为标准,确定模型可维持稳定的时间.在满足一般稳定性的基础上,根据不同的研究目的对模型进行功能稳定性评估,要求研究所用的指标能在空白灌流组和阳性药灌流组之间体现显著性差异;本研究以药物肝损伤研究为例,以灌流液ALT、AST、LDH(乳酸脱氢酶)水平为指标,并进行肝组织病理检查,结果两组出现极显著性差异,故判定用所建立的灌流模型进行肝损伤研究可真实反映受试药的肝损伤情况,一般不会出现假阴性和假阳性结果.
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西他沙星关键中间体胺基氮杂螺环的不对称合成
7-(S)-(叔丁氧羰基胺基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷是合成新一代喹诺酮类抗生素西他沙星和欧拉沙星的关键中间体,但现有合成方法收率低、立体选择性较差.本研究对其合成工艺进行了改进,开发了一种新的不对称合成方法,反应的收率和立体选择性得到了明显提高,且原料易得,步骤短,所得手性异构体光学纯度高.
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核壳型磁性APTES-Fe3O4纳米涂层柱的制备及应用
以羧甲基-β-环基糊精(carboxymethyl-β-cyclodextrin,CM-β-CD)作为手性选择剂,以3-氨基丙基三乙氧基硅烷-四氧化三铁(3-aminopropyltriethoxysilane-Fe3 O4,APTES-Fe3 O4)磁性纳米粒吸附于毛细管内壁,在外加磁场下进行手性分离.本研究通过提供外加磁场的方式,将核壳结构的APTES-Fe3O4磁性纳米粒涂布于毛细管内壁,制备了一种核壳型磁性APTES-Fe3O4纳米涂层柱.此法操作简便,且毛细管涂层重复性好,柱寿命超过80次电泳分析.经0.01 mol/L HCl、0.001mol/L NaOH、CH3OH和CH3CN等冲洗15 min后,涂层未发生明显变化,化学稳定性强.外加磁场去除后,作为涂层的磁性纳米粒可进行回收重复利用.首次将此涂层柱应用于手性药物的毛细管电泳拆分,成功分离了氧氟沙星、普萘洛尔对映体.结果表明,相比于未涂层柱,APTES-Fe3O4磁性纳米涂层柱能提高柱效并改善分离效果.实验考察了手性选择剂浓度、缓冲溶液pH、有机相种类及比例、运行电压等电泳条件对分离的影响,优化条件下两种药物分离度分别为1.97和1.93.
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胰高血糖素样肽-1受体激动剂在神经系统疾病治疗中的研究进展
肠促胰素型糖尿病治疗药物胰高血糖素样肽-1(GLP-1)在人体作用广泛,GLP-1受体在人体分布广泛且疗效多样.研究表明,除治疗糖尿病外,GLP-1受体激动剂在中枢和外周神经系统均能发挥良好的神经保护和抗感染作用,显示了良好的应用前景.本文综述了近年来GLP-1受体激动剂在阿尔茨海默病、帕金森病、脑卒中等神经系统疾病中的临床前和临床治疗中的研究进展.
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新一代基因组编辑技术在基因治疗及生物制药领域中的应用
近年来,随着锌指核酸酶、转录激活子样效应因子核酸酶和成簇可调控间隔短回文重复RNA引导核酸酶的出现,“基因组编辑”技术得到广泛应用.由于此类技术具有高效和可定制的特点,在基因治疗、细胞模型、糖基化工程、细胞工程等方面许多新策略、新方法不断涌现,产生了十分重要的影响.本文就近年来基因组编辑技术的发展及其在基因治疗和生物制药领域的应用进行综述.
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阿司匹林抵抗机制研究进展
阿司匹林为抗血小板聚集药物,但是,在临床上口服阿司匹林患者仍然常会发生血栓栓塞事件,这被学术界称为阿司匹林抵抗(aspirin resistance,AR)现象.以COX-1依赖和COX-1非依赖角度阐述AR机制为基础,近年来在生理及病理情况下AR的研究取得了进一步的进展.本文分别从药代动力学及药效学机制角度对生理、病理状态下AR的机制研究进展进行综述,为AR的机制研究的深入和临床干预策略的创新提供理论基础和科学依据.
年 | 期数 |
2019 | 01 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |