顶空单液滴微萃取-气相色谱法测定水中卤代烃和烷基苯的含量

目的:建立顶空单液滴微萃取-气相色谱法,用于测定饮用水和地表水中3种挥发卤代烃和6种烷基苯污染物.方法:采用顶空单液滴微萃取法对水中的待测物进行提取和浓缩,进行提取条件优化后,以GC-FID进行定量测定.结果:在优化条件下,顶空单液滴微萃取法对水中卤代烃和烷基苯有显著的浓缩富集效率,该测定方法具有良好的线性(R2≥0.994)、重复性(RSD=6.6%)和回收率(95.7%～104.2%).结论:顶空单液滴微萃取法适合于水中有机挥发物的分析测定.

对叶大戟地上部分的化学成分

目的:研究对叶大戟 (Euphorbia sororia)的化学成分.方法:采用95%乙醇提取,硅胶、Sephadex LH-20及C18柱等层析方法分离纯化,通过理化常数和光谱数据鉴定化合物的结构.结果:从对叶大戟乙醇提取物的乙酸乙酯部位和正丁醇部位中分离得到15个化合物,其结构分别被鉴定为:kaempferol 3-O-(2″-O-E-p-coumaroyl)-β-D-glucopyranoside (1),kaempferol 3-O-(6″-O-E-p-coumaroyl)-β-D-glucopyranoside (2),apigenin 7-O-(3″-O-E-p-coumaroyl)-β-D-glucopyranoside (3),山柰酚 3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(kaempferol 3-O-β-D-galactopyranoside,4),麦黄酮 (tricin,5),槲皮素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(quercetin 3-O-β-D-glucopyranoside,6),槲皮素3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(quercetin 3-O-β-D-galactopyranoside,7),7α-羟基谷甾醇(7α-hydrositosterol,8),(22E,24R)-24-methyl-5α-cholesta-7,22-diene-3β,5,6β-triol (9),β-吲哚酸(β-indole carboxylic acid,10),胸腺嘧啶(thymine,11),腺苷(adenosine,12),尿嘧啶(uracil,13),尿苷(uridine,14)和丁香苷(syringin,15).结论:化合物1～15均为首次从该植物中分得.

六神丸可溶性砷形态的HPLC-ICP-MS研究

目的:建立中药复方中亚砷酸盐(AsⅢ)、砷酸盐(AsⅤ)、一甲基砷(MMA)和二甲基砷(DMA)的HPLC-ICP-MS方法.方法:采用Hamilton PRP-X100阴离子交换柱,15 mmol/L (NH4)2HPO4为流动相(pH 6.0),建立了同时分析中药中AsⅢ,AsⅤ、MMA和DMA的HPLC-ICP-MS方法,并对六神丸和雄黄中可溶性砷的形态进行了检测.结果:该分析方法在1～100 ng/mL范围内线性关系良好,精密度和重复性良好,回收率为93%～106%.六神丸中几种药材与单味雄黄混合后,测得的可溶性砷含量均低于单味雄黄中的可溶性砷含量.蟾酥、牛黄、麝香、冰片、珍珠与雄黄混合后,砷溶出量比单味雄黄的砷溶出量依次减少93.6%,86.4%,71.3%,27.6%和14.7%.结论:六神丸复方中的几种单味药均有抑制雄黄中砷溶出的作用,推测是降低雄黄毒性作用的可能途径之一.

原花青素对佐剂关节炎大鼠滑膜细胞Bcl-2、Bax表达的影响

目的:研究原花青素(PC)对佐剂关节炎大鼠滑膜细胞 Bc1-2、Bax表达的影响.方法:采用大鼠佐剂性关节炎(AA)模型,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定各组大鼠滑膜细胞 Bcl-2、Bax mRNA的水平,免疫印迹法(Western blotting)检测各组大鼠滑膜细胞Bcl-2、Bax蛋白表达,分析滑膜细胞caspase-3酶原的裂解,比色法测定大鼠滑膜细胞caspase-3的相对活性.结果:正常大鼠滑膜细胞Bcl-2和Bax均有表达,模型组大鼠Bcl-2、Bax表达均高于正常组.PC (6,30 mg/kg)治疗组可明显下调Bcl-2 mRNA和蛋白的表达,上调Bax mRNA和蛋白表达;而caspase-3酶原的表达随药物浓度的增加而减少,药物组大鼠caspase-3与对照组相比活性升高.结论:PC可通过下调滑膜组织中Bcl-2表达、上调 Bax表达,诱导caspase-3活化,从而诱导滑膜细胞凋亡,这可能是其治疗佐剂性关节抗炎的机制之一.

RNAi下调hENT1可增强5-氟尿嘧啶对胰腺癌细胞的毒性

目的:运用RNAi技术下调平衡型核苷转运蛋白1(hENT1)的表达,观察hENT1下调后5-氟尿嘧啶(5-FU)对胰腺癌Panc-1细胞的毒性改变情况.方法:设计并合成能表达特异性针对hENT1的shRNA(small hairpin RNA)的DNA序列,构建pSilence-hENT1 4.1-CMV neo质粒.用脂质体法将pSilence-hENT1 4.1-CMV neo质粒转染胰腺癌Panc-1细胞,并以含G418(600 μg/mL)的培养液筛选阳性转染细胞(pSilence-hENT1 4.1-CMV neo Panc-1).RT-PCR检测下调pSilence-hENT1 4.1-CMV neo Panc-1细胞hENT1 mRNA表达的效果及稳定性.MTT法检测细胞在含5-FU(0～1.56×106 nmol/L)的培养液中48 h后的生存率,并计算IC50.结果:测序显示重组质粒pSilence-hENT1 4.1-CMV neo中插入片段序列正确.RT-PCR结果显示,pSilence-hENT1 4.1-CMV neo Panc-1细胞hENT1 mRNA表达水平下调,并在两个月内(共传代15次)保持相对稳定.MTT结果显示,pSilence-hENT1 4.1-CMV neo Panc-1细胞组氟尿嘧啶的IC50显著下降,为Panc-1细胞组IC50的51.52 %(P《0.01).结论:用RNAi 方法下调hENT1 mRNA表达可增强5-FU对胰腺癌细胞的毒性.

主动载药法制备双氯芬酸钠脂质体及其体外释放

目的:采用主动载药法制备双氯芬酸钠脂质体,考察包封率的影响因素,并对其体外释放进行评价.方法:利用醋酸钙梯度法制备双氯酚酸钠脂质体,考察不同因素对包封率的影响,并对药物体外释放行为进行研究.结果:脂质体包封率随温度和醋酸钙浓度的升高而增加、随药脂比的增大而降低.与混悬剂相比,其体外释放较完全.结论:醋酸钙梯度法适于制备双氯芬酸钠脂质体,后者的体外释放具有明显缓释特征.

注射用紫杉醇聚合物胶束小鼠体内药代动力学

目的:建立一种测定小鼠血液中紫杉醇含量的HPLC方法,研究注射用紫杉醇聚合物胶束(PTX-PM)的药代动力学.方法:血样经乙醚提取后进行HPLC分析,色谱柱为 Lichrospher C18 (4.6 mm×25 mm ,4.6 μm),流动相为甲醇-水-乙腈(28∶36∶36),检测波长为227 nm,地西泮为内标.小鼠尾静脉给药,特素(市售紫杉醇注射液)给药剂量为20 mg/kg,PTX-PM给药剂量为50 mg/kg(以药液中紫杉醇含量计).采用3P87程序计算紫杉醇的药代动力学参数.考察PTX-PM给药剂量分别为30,40,50 mg/kg时,剂量与药代动力学参数之间的相关性.结果:两种制剂体内过程均符合二室模型,特素和PTX-PM的cmax分别为(60.37±17.16)μg/mL和(84.17±12.29)μg/mL,AUC分别为56.02 μg/mL*h和56.64 μg/mL·h,t1/2(β)分别为1.31 h和1.06 h.在3种给药剂量下,PTX-PM的AUC0-8 h与剂量之间有线性相关性.结论:PTX-PM给药后,紫杉醇迅速地分布于组织,血液中药物浓度低,降低了血液毒性.

LC-MS/MS法测定人血浆中福辛普利及其活性代谢物福辛普利拉

目的:建立人血浆中福辛普利及其代谢物福辛普利拉的LC-MS/MS测定方法,研究健康志愿者口服福辛普利片后的药代动力学.方法:血浆样品加入内标扎来普隆,血浆样品酸化后用乙醚-二氯甲烷(3∶1)混合溶剂提取处理,LC-MS/MS分析.流动相为甲醇-10 mmol/L醋酸胺水溶液,色谱柱为Lichrospher C8,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温25 ℃.质谱检测方式:选择性反应检测(SRM),20名健康受试者口服20 mg福辛普利钠片,计算主要药代动力学参数.结果:福辛普利在0.1～15.0 ng/mL,福辛普利拉1.0～700 ng/mL范围内线性关系良好.福辛普利的日内RSD小于3.7%,日间RSD小于6.9%;福辛普利拉的日内RSD小于2.4 %,日间RSD小于5.2 %.福辛普利与福辛普利拉的t1/2分别为(2.72±1.75) h和(7.25±0.81) h,cmax分别为(4.61±2.34) ng/mL和(409.43±136.28) ng/mL,tmax分别为(1.21±0.42) h和(3.74±0.87) h.结论:本方法灵敏度高,测定结果准确,可用于人体药代动力学及相对生物利用度研究.

可诱导的shRNAs表达系统对HeLa细胞SMYD3基因表达的抑制

目的:探讨可诱导的shRNAs表达载体介导的RNA干扰技术对HeLa细胞SMYD3基因的抑制作用.方法:设计和构建由强力霉素调控产生针对SMYD3基因的shRNAs 表达质粒,转染至HeLa细胞,倒置显微镜下观察细胞形态学变化,RT-PCR检测SMYD3基因的表达,MTT法检测对细胞增殖的影响.结果:酶切鉴定、测序分析证实shRNAs 表达质粒构建成功.转染HeLa细胞后,在强力霉素诱导下,受到特异SMYD3 shRNAs干扰的HeLa细胞发生了典型的凋亡形态学改变.同时SMYD3 mRNA表达下调,细胞生长受抑制.而阴性对照组和空白对照组无明显变化.结论:针对SMYD3基因的可诱导的shRNAs表达质粒转染HeLa细胞后,在强力霉素的作用下,可阻断SMYD3基因的表达,抑制HeLa细胞的增殖,并能诱导HeLa细胞凋亡.

穿心莲内酯酰胺类衍生物的合成及其COX-2表达抑制活性

目的:合成穿心莲内酯酰胺类衍生物并研究其对环氧化酶-2(COX-2)表达的抑制活性.方法:根据穿心莲内酯类似物具有与穿心莲内酯相似的生物活性及生物电子等排原理,以穿心莲内酯的3种类似物为原料,在无水甲醇中,经氯化氢气体醇解、酰胺化生成目标化合物.按蛋白质印迹免疫分析法(Western blot)测试此类衍生物对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞中COX-2的表达抑制活性.结果与结论:合成了未见文献报道的12个穿心莲内酯酰胺类衍生物,目标化合物结构经IR,1H NMR,MS与元素分析确证.部分化合物进行了药理活性测试,其中1个目标化合物、2个中间体与穿心莲内酯的抑制活性相当.

去甲斑蝥素对HO-8910PM细胞中NAG-1表达的影响

目的:研究去甲斑蝥素对人高转移卵巢癌HO-8910PM细胞中非类固醇抗炎药物激活基因(non-steroidal anti-inflammatory drug-activated gene,NAG-1)表达的影响,探讨其抗肿瘤的作用机理.方法:应用肿瘤基因芯片、荧光定量实时PCR和Western blot 法检测去甲斑蝥素对NAG-1表达的影响.结果:去甲斑蝥素能明显上调NAG-1表达,3种方法检测去甲斑蝥素上调HO-8910PM细胞中NAG-1表达的倍数分别为6.69、8.33±0.76和16.00倍.结论:去甲斑蝥素抗肿瘤作用与NAG-1表达有关.

靛玉红磷脂复合物的跨膜转运及其犬体内药代动力学

目的:考察靛玉红磷脂复合物的跨膜转运及其在Beagle犬体内药代动力学过程.方法;采用HPLC法测定靛玉红的浓度;通过缚管翻转肠囊实验、离体肠黏膜透过实验、Caco-2细胞透过实验考察靛玉红片及其磷脂复合物的跨膜转运作用;同时,考察靛玉红磷脂复合物在Beagle犬体内的药代动力学.结果:靛玉红磷脂复合物的转运速度和表观渗透系数均明显高于靛玉红,具有显著性差异(P《0.05);以靛玉红市售片为对照,靛玉红磷脂复合物在犬体内的相对生物利用度为(157.06±10.04)%.结论:磷脂复合物可以促进靛玉红的跨膜转运,并可提高其口服生物利用度.

碳青霉烯类抗生素厄他培南的合成

目的:合成碳青霉烯类抗生素厄他培南.方法:以4R-羟基-L-脯氨酸(1)为原料,在碱性条件下与氯甲酸对硝基苄酯反应,得到氨基保护的4R-羟基-L-脯氨酸(3).经氯甲酸异丙酯活化化合物3的羧羟基后胺解,所得中间体4用甲烷磺酰氯酰化得到化合物(5).化合物5与硫代醋酸钾置换得到4-羟基构型反转的化合物(6),化合物6经碱性水解,得到厄他培南侧链(7).侧链7与培南母核MAP(12)反应,得到保护的厄他培南(13),再经催化氢化得到目的物厄他培南(14).结果:以4R-羟基-L-脯氨酸(1)为原料,合成了对硝基苄氧羰基保护的厄他培南侧链(7),进而制备了碳青霉烯类抗生素厄他培南.结论:此方法原料易得、反应条件温和、成本低,易于放大生产.

反相离子对梯度洗脱色谱法测定甲麻芩苷那敏片中3组分含量

目的:建立测定甲麻芩苷那敏片中3组分(盐酸甲基麻黄碱、黄芩苷和马来酸氯苯那敏)含量的反相离子对HPLC法.方法:采用色谱柱Inertsil ODS-3(250 mm×4.6 mm,5 μm,柱温30 ℃),以[0.2%辛烷磺酸钠溶液-三乙胺(100∶0.2,磷酸调节pH至4.3)]-甲醇(50∶50)为流动相A,以甲醇为流动相B,流动相B的比例由1%～98%匀速递增进行洗脱;检测波长为215 nm;流速为1.0 mL/min.结果:盐酸甲基麻黄碱、黄芩苷及马来酸氯苯那敏的线性范围分别为0.5～25 μg(r=0.999 8),0.3～17 μg(r=1.000)和0.01～0.5 μg(r=1.000),平均回收率分别为100.3%(RSD=1.3%)、99.9%(RSD=1.1%)和99.6%(RSD=1.2%).结论:本文建立的方法简单、迅速,可用于甲麻芩苷那敏片中3组分的含量测定.

长期给予左甲状腺素对大鼠心室肌细胞L-型钙通道的影响

目的:观察长期给予左甲状腺素对大鼠血流动力学及心肌细胞膜L-型钙通道的影响.方法:大鼠口服左甲状腺素(levo-thyroxine,L-thy)40 d:第1～10天给予L-thy 2 mg/kg;第11～40天剂量降至1 mg/kg.运用生物实验系统观察大鼠血流动力学的改变,测定血清中T4水平以及心肌中谷胱苷肽GSH含量和乳酸脱氢酶LDH活力,全细胞膜片钳技术观察心室肌细胞L-型钙通道的变化.结果:与正常组相比,模型组T4升高33.5%(P《0.05),LVEDP显著升高,+dp/dtmax明显下降,T值显著延长.提示L-thy给药40 d后,大鼠心脏收缩和舒张功能均降低.心肌GSH下降23.6%,LDH活力增加28%;全细胞膜片钳实验表明,L-thy给予40 d后,大鼠心室肌细胞钙电流峰值降低47%(P《0.01),半激活电压从(-18.9±0.6) mV右移到(-14.8±0.7) mV(P《0.01),半失活电压从(-25.1±0.9) mV右移到(-21.7±0.9) mV(P《0.01),失活恢复常数从(102.2±2.1) ms延长到(136.9±2.5) ms(P《0.01).结论:左甲状腺素给药40 d可致大鼠心收缩,舒张功能降低,心肌细胞钙离子通功能下降.

小多孢菌次级代谢产物的研究

目的:研究小多孢菌(Micropolyspora sp.)次级代谢产物的化学成分.方法:应用多种色谱方法进行分离和纯化,并用NMR、IR和MS 等方法解析其化学结构.结果:从小多孢菌次级代谢产物中分离到2个化合物,它们的结构分别被鉴定为:17-demethyl-lebrastatin (1)和4,6-二甲氧基-3-(3,5-二甲氧基苯基)-2-(4-甲氧基苯基)-1-氢-茚-1-酮 (2).结论:化合物1是新化合物.

藤黄酸及其类似物抗肿瘤的定量构效关系

目的:研究藤黄酸及其类似物的抗肿瘤定量构效关系.方法:选取18个藤黄酸类似物,进行体外抑制人肝细胞性肝癌(SMMC-7721)的试验.采用经典二维定量构效关系方法,以IC50 为活性参数,对所选化合物的疏水性参数、电性参数、立体参数和分子连接性指数进行研究.结果:获得了这些化合物分子力学结构参数与生物活性之间的QSAR 方程.结论:通过对所得QSAR 方程进行分析,可为通过化学修饰获得具有更好抗肿瘤活性的藤黄酸类化合物提供参考.

基于整体观的中药药效物质基础的生物活性筛选/化学在线分析研究新进展

中药及其复方发挥疗效具有整体性、多靶点和多成分协同作用的特点.中药药效物质基础的阐明是中药质量控制的基础,是诠释中药作用奥秘的关键.生物活性筛选/化学在线分析技术是由生命科学与色谱、质谱分离鉴定技术交叉形成的一种综合技术,在国内外取得了瞩目的进展,当前已逐渐发展成为中药活性成分筛选和药效物质基础研究的重要手段之一.本文对近年来生物活性筛选/化学在线分析技术的发展做了简要综述,主要介绍了生物色谱法、脂质体平衡透析/液相色谱-质谱联用方法、细胞固相萃取/液相色谱-质谱联用法和微透析生物取样/液相色谱-质谱联用法的原理及其在中药活性成分筛选和药效物质基础研究中的应用.

超高效液相色谱在现代药代动力学中的应用

以小颗粒填料(粒径小于2 μm)和超高压系统(压力大于105 kPa)为特征的超高效液相色谱(UPLC)是液相色谱领域的新热点之一,它能够提供更加高效和快速的色谱系统.本文介绍了UPLC的原理、优点及其目前存在的局限性,综述了UPLC及其联用技术在现代药代动力学中的应用及其前景.

喜树碱类衍生物脂质体的研究进展

喜树碱类是一类重要的抗肿瘤药物.脂质体传递系统能够增加喜树碱类药物溶解度,延长活性内酯环血浆滞留时间,增加肿瘤靶向性,降低游离药物毒性.本文将喜树碱类衍生物分为水溶性和水不溶性两类,对近几年喜树碱类抗肿瘤药物脂质体研究的新进展作一综述,显示喜树碱类药物脂质体给药系统在临床肿瘤化疗中的广阔前景.

细胞外基质分子Tenascin-R的研究进展

Tenascin-R是Tenascin家族中的一员,是一种细胞外基质糖蛋白,主要在中枢神经系统表达,具有复杂的生理功能.本文拟对近年来对Tenascin-R的表达与分布、结构以及体内外生物学功能的研究做一综述,旨在较全面的认识Tenascin-R多样的生物学特性,并为以Tenascin-R为靶点研发新的药物提供一定的思路.

世界上市新药

药物输送系统

新适应证药物

2006年全球药品销售市场发展趋势

中国药科大学2007年1～6月获授权的专利

影响因子新公布:1.037——《中国药科大学学报》