首页 > 文献资料
-
芒柄花素对人非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡的影响及相关机制探讨
目的:探讨芒柄花素对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法:培养人NSCLC细胞株A549,分别按10,20,40,80,160 μmol· L-1梯度浓度加入芒柄花素,另设不含药物空白组,培养48 h后采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活力,利用Annexin V-FIFC/碘化丙啶(PI)双标法检测细胞凋亡情况,利用流式细胞仪检测细胞周期,利用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和免疫印迹法(Western blot)分别检测细胞中周期蛋白E1(cyclin E1),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax) mRNA和蛋白表达.结果:40,80,160 μmol· L-1芒柄花素组细胞生长抑制率和细胞凋亡率均高于空白组(P＜0.05).与空白组比较,40,80,160 μmol·L-1芒柄花素组G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,80,160μmol· L-1芒柄花素组下降更为明显(P ＜0.05);40,80,160 μmol·L-1芒柄花素组cyclin E1,Bcl-2 mRNA和蛋白表达量均较空白组降低,Bax mRNA和蛋白表达量升高,与40μmol·L-1芒柄花素组比较,80,160μmol· L-1芒柄花素组cyclin E1,Bcl-2 mRNA和蛋白表达量均降低,Bax mRNA和蛋白表达量升高(P＜0.05).结论:芒柄花素可抑制NSCLC细胞增殖,加速细胞凋亡发生,可能通过下调cyclin E1表达而影响细胞周期,并通过调控Bcl-2和Bax表达而促使细胞凋亡发生.
-
加味四君固本汤与Iressa联合抑制肺癌细胞增殖的实验研究
目的 探讨自拟加味四君固本汤含药血清与表皮生长因子受体(EGFR)靶向治疗药物Iressa联用对人非小细胞肺癌细胞系A549及HCC827增殖的抑制作用.方法 大鼠灌胃制备高、中、低剂量加味四君固本汤含药血清,采用MTT法检测加味四君固本汤含药血清单用以及联合Iressa使用对人非小细胞肺癌细胞系A549和HCC827增殖的影响.结果 Iressa抑制A549和HCC827细胞增殖的半数抑制浓度(IC50)分别为46.18 μmol/L和61.99 μmol/L(P＜0.05);加味四君固本汤含药血清作用于肺癌细胞后,随着含药血清浓度的逐渐增加,抑制率逐渐增高(P＜0.05);加味四君固本汤含药血清与Iressa联用加强了对A549和HCC827细胞增殖抑制作用(P＜0.05).结论 加味四君固本汤含药血清具有一定的抗肺癌作用,并存在一定的量效关系,联合Iressa使用可协同抑制A549和HCC827细胞增殖.
-
E钙粘蛋白/catenin复合体在人非小细胞肺癌细胞系中的表达
目的探讨E钙粘蛋白/catenin粘附系统在人非小细胞肺癌细胞系中的表达. 方法采用免疫组织化学和RT-PCR两种方法分别从蛋白及mRNA两个水平分析E钙粘蛋白、α-catenin、β-catenin在7种人非小细胞肺癌细胞系中的表达情况. 结果每个细胞系至少出现1个、两个或多个E钙粘蛋白/catenin复合体成分的表达异常. 结论 E钙粘蛋白、α-catenin和β-catenin的蛋白及mRNA异常表达与人非小细胞肺癌有关.
-
垂体腺苷酸环化酶激活多肽对胰腺癌的调控初探
垂体腺苷酸环化酶激活多肽(pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP),早是由下丘脑分离出的一种具有很强刺激作用的多肽[1].它有两种活性形式,PACAP-38和PACAP-27.结构上,PACAP同属于血清素-胰高血糖素-舒血管肠肽类多肽家族.除垂体外,广泛分布于全身.PACAP可能是胃肠运动的主要抑制性因子,包括松驰食道下段括约肌和结肠肌条,刺激胰腺腺泡分泌淀粉酶,且呈剂量相关性.PACAP还是细胞增殖、神经元生长和蛋白合成的激动剂,它能刺激人非小细胞肺癌[2]和鼠胰腺癌细胞株AR4-2J的生长[3].我们通过观察PACAP1-38对人胰腺癌细胞株HS766T的生长调控作用,探讨其作用机制以及受体后信息传导途径.
-
环氧化酶-2表达与老年人非小细胞肺癌临床病理特征的关系
非甾体类抗炎药(NSAIDs)作用靶点为环氧化酶,环氧化酶是催化花生四烯酸转化为前列腺素的限速酶.目前已被证实至少有2种同工酶COX-1和COX-2.COX-2被认为是诱导型反应基因,在正常组织中表达低下或者不能检出,但可被细胞因子、癌基因等诱导表达,并参与肿瘤的发生、发展[1].我们对44例老年人非小细胞肺癌组织中COX-2表达进行检测,探究其与老年人肺癌浸润、转移及其预后的关系.
-
老年人非小细胞肺癌的治疗进展
一、外科手术治疗对于Ⅰ～Ⅲ期非小细胞肺癌(NSCLC)的患者,手术为主要治疗方式.Sawada等[1]随访917例经手术治疗的NSCLC患者,≤75岁和>75岁组手术病死率分别为0.9%和4.1%(P>0.05),且两者生存率相当.
-
黄腐酚诱导非小细胞肺癌细胞凋亡的初步研究
目的 探索黄腐酚对人非小细胞肺癌细胞株A549与H1650凋亡的影响.方法 采用CCK-8法检测黄腐酚对A549与H1650细胞增殖的影响;流式细胞术分析黄腐酚对两种细胞凋亡的影响;Western Blot法检测两种细胞被不同浓度黄腐酚干预后细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-xl、pro-caspase-3的表达.结果 黄腐酚能有效抑制A549与H1650细胞的增殖,其抑制强度与浓度呈正相关,对H1650细胞有更好的抑制作用;两种细胞的凋亡率随黄腐酚浓度的增大而上升,5μmol·L-1诱发的凋亡率与同浓度顺铂无差异(P＞0.05);两种细胞中凋亡相关蛋白的表达与黄腐酚浓度相关.结论 黄腐酚可能通过调控Bcl-xl、Bax、Caspase-3及其相关基因使非小细胞肺癌细胞发生凋亡.
-
中药配合免疫法对老年人非小细胞肺癌生存质量的影响
老年人患非小细胞肺癌(NSCLC)的人数近年来不断增加,而疗效却不尽人意[1].我科从1993年3月至1996年3月对108例老年非小细胞肺癌病人采用中药加免疫疗法,其生活质量和生存率较对照组明显提高,报告如下.
-
老年人非小细胞肺癌逆向调强放射治疗的疗效观察
由于人口老龄化进程的加速,老年非小细胞肺癌的发病率增高,国内的中位发病年龄也呈上升趋势.老年人的肿瘤生物学特性与中青年有所不同.笔者对36例70岁以上非小细胞肺癌患者实施了逆向调强放疗,并进行了临床观察.1资料与方法1.1临床资料2005年1月至2007年1月我科36例老年非小细胞肺癌患者,采用逆向调强技术放射治疗.全部为首程放疗.男30例,女6例.年龄70～85岁,中位年龄78岁.所有病例均经细胞学证实.其中鳞状细胞癌28例,腺癌8例.按UICC的TNM分期.T215例,T320例,T41例;N1 15例,N217例,N34例;M032例,M14例,均为脑转移患者.临床分期:Ⅲ.期7例,Ⅲb期25例,期4例.全组卡氏评分18例50～60,18例＞70.
-
IQGAP1通过经典Wnt通路促进非小细胞肺癌恶性表型
目的 探讨非小细胞肺癌细胞中IQ-domain GTPase-activating protein1(IQGAP1)与Dishevelled(Dvl)的相关性.方法 应用免疫组化法检测109例非小细胞肺癌组织中IQGAP1和Dvl的表达,分析与临床病理因素的关联.结果 IQGAP1在肺癌组织中的表达水平显著高于癌旁正常组织.IQGAP1与Dvl在肺癌细胞浆及核的共定位表达显著正相关,而核共定位组的c-myc和cyclin D1表达率明显高于浆共定位组(P＜ 0.05).淋巴结转移组中二者浆/核共定位表达率明显高于未转移组(P＜ 0.05),且与生存时间呈正比.结论 IQGAP1可能在胞浆促进Dv入核从而激活经典Wnt通路,促进肺癌的恶性表型.
-
非小细胞肺癌中Bmi-1和WWOX蛋白的表达及其临床意义
目的 探讨非小细胞肺癌中BMi-1与WWOX蛋白的表达及其临床意义.方法 应用免疫组化和Western blot检测86例非小细胞肺癌中Bmi-1蛋白和WWOX蛋白的表达水平,分析BMi-1与WWOX蛋白与临床患者特征的关系,并对患者生存影响因素进行分析.结果 Bmi-1蛋白在非小细胞肺癌中的表达水平显著高于癌旁正常组织中表达水平(P＜0.01),而WWOX蛋白在非小细胞肺癌中的表达水平(0.52±0.05)则显著低于癌旁正常组织中表达水平(P＜0.01).Bmi-1和WWOX蛋白表达水平均与淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 Bmi-1的高表达和WWOX蛋白的低表达均与淋巴结转移有关.
-
CCDC33激活经典Wnt信号通路促进肺癌细胞的侵袭转移
目的 研究CCDC33在人小细胞肺癌中的表达、临床病理学意义及相应的作用机制.方法 分析了138例人非小细胞肺癌中CCDC33蛋白表达和亚细胞定位与临床病理因素的关系,采用免疫组织化学染色,免疫印迹方法和Transwell法探讨其对非小细胞肺癌增殖、侵袭能力影响的机制.结果 CCDC33在肺癌组织的细胞浆中高表达,阳性率为57.9％(80/138),明显高于相对应的癌旁组织14.7％(10/68,P＜0.001),且其高表达与非小细胞肺癌的低分化(P=0.006)、高TNM分期(P=0.008)、淋巴结转移(P =0.002)明显相关.干扰CCDC33活化的beta-catenin表达下降,肺癌细胞的侵袭转移能力也明显下降.结论 CCDC33参与非小细胞肺癌的发生发展,促进侵袭和转移,与激活经典Wnt通路相关.
-
Neuritin在人非小细胞肺癌血管内皮细胞中的表达
目的:明确Neuritin在人非小细胞肺癌血管内皮细胞(non-small lung cancer-vascular endothelial cells,NSCLC-VECs)中的表达水平,探讨Neuritin与非小细胞肺癌血管发生的关系.方法:培养及鉴定人NSCLC-VECs及肺微血管内皮细胞株(human pulmonary microvascular endothelial cell,HPMEC),使用免疫荧光组织化学染色检测细胞膜上FactorⅧ抗体及CD34抗体表达水平,应用RT-PCR及Western blotting法检测Neuritin的表达水平.结果:经加压筛选稳定传代的NSCLC-VECs及HPMEC细胞膜上可见内皮细胞特异性标记物FactorⅧ抗体及CD34抗体表达.NSCLC-VECs中Neuritin mRNA的表达水平显著高于HPMEC[(0.95±0.09)vs(0.64 ±0.05),P＜0.05],Neuritin蛋白在NSCLC-VECs中的表达的水平明显高于HPMEC[(1.15 ±0.l1) vs(0.27 ±0.14),P＜0.05].结论:Neuritin在人NSCLC-VECs中过表达,提示Neuritin可能与肿瘤血管发生相关,是一个潜在的肿瘤治疗靶点.
-
MS275协同BI2536抗人肺癌A549细胞增效作用的研究
研究组蛋白脱乙酰酶抑制剂MS275与polo样激酶1抑制剂BI2536联合作用对人非小细胞肺癌细胞株A549细胞的增效作用及其作用机制.采用CCK-8法检测MS275和BI2536单用或联用时对A549细胞增殖的影响,结果显示细胞增殖抑制率在两药联合作用后比单独用药作用显著增强；使用流式细胞仪检测细胞周期,表明联合用药时细胞被大量阻断在G2/M期.应用蛋白质免疫印迹法(western blot)检测蛋白激酶AKT和半胱氨酸蛋白水解酶caspase-3蛋白表达水平,显示细胞内激活的caspase-3切割片段增多,磷酸化蛋白激酶AKT表达量下调.研究结果提示,MS275协同BI2536阻断细胞周期,抑制A549细胞增殖,其作用机制应是通过上调caspase-3的活性,抑制蛋白激酶AKT磷酸化,影响PI3K/AKT通路来完成的.这两种药物的联合应用可能成为人非小细胞肺癌治疗中的新方案.
关键词： 人非小细胞肺癌 组蛋白脱乙酰酶抑制剂 polo样激酶1抑制剂 联合用药 -
FTY720联合吉西他滨对人非小细胞肺癌细胞株A549及H520的影响
目的：探讨FTY720联合吉西他滨对人非小细胞肺癌( NSCLC)细胞株A549及H520增殖和凋亡的影响。方法采用不同浓度的FTY720(0、2、4、6、8、10μmol/L)分别对体外培养的人NSCLC细胞株A549及H520进行处理,分别于培养后第24、48、72h检测吸光度值,观察不同浓度的FTY720对A549及H520细胞株的增殖抑制作用；分别对 A549及 H520细胞株加以 FTY720(7μmol/L)联合吉西他滨(0.2μmol/L)和FTY720(5μmol/L)联合吉西他滨(0．1μmol/L)进行处理,观察两组细胞培养48h后的抑制作用及凋亡作用差异。结果不同浓度的FTY270对体外培养的人NSCLC细胞株A549、H520的抑制作用不同(P<0．05),同一种浓度FTY720体外培养的人NSCLC细胞株A549、H520不同培养时间的抑制率不同(P<0．05),FTY720对体外培养的人NSCLC细胞株A549、H520的增殖抑制作用具有浓度、时间依赖关系。 FTY720联合吉西他滨对A549、H520细胞的抑制作用明显强于两种药品的单独应用( P<0．05)。 FTY720联合吉西他滨对A549、H520细胞的凋亡率用明显高于两种药品的单独应用( P<0．05)。结论 FTY720联合吉西他滨对人NSCLC细胞株A549及H520的增殖具有显著的抑制和促进细胞凋亡的作用,强于两者单独应用的效果。
-
老年晚期非小细胞肺癌患者三维适形放疗疗效观察
目的 分析三维适形放疗在老年人非小细胞肺癌的临床应用效果和放射性损伤情况.方法 58例老年晚期非小细胞肺癌患者,中位年龄72岁,采用三维适形常规分割,总剂量60～70GY,6～7周完成治疗.结果 58例全部完成了适形放疗计划,完全缓解12例(21%),部分缓解38例(66%),无变化6例(11%),恶化2例(4%),1.2.3年生存率分别为65%和33%、28%.急性放射性肺炎2级5例,3级1例,晚期放射性肺炎2级6例,3级3例.结论 采用三维适形放疗技术治疗老年晚期非小细胞肺癌有比较好的近期疗效,无严重不良反应,有助于提高肿瘤的局部控制率,改善患者生活质量,减少并发症.
-
辛伐他汀抑制人非小细胞肺癌H460细胞迁移和MMP2的表达
目的:观察辛伐他汀对人非小细胞肺癌H460细胞迁移的影响并探讨其作用机制.方法:CCK-8法检测辛伐他汀对H460细胞活力的影响;用划痕实验和transwell实验观察辛伐他汀对H460细胞迁移的影响;Western bolt检测H460细胞MMP2蛋白的表达.结果:辛伐他汀浓度依赖性地抑制H460细胞迁移,1.25、2.5、5μmol/L的辛伐他汀作用H460细胞24h,其迁移距离为对照组的79.18％、57.48％、45.34％;与对照组相比,穿过transwell小室膜的细胞数显著减少(P=0.013,P=0.001,P＜0.001).随着辛伐他汀作用浓度增加,H460细胞的MMP2表达逐渐降低.结论:辛伐他汀对人非小细胞肺癌H460细胞的迁移有显著抑制作用,该作用可能与其下调MMP2表达有关.
-
白花丹素通过调节线粒体相关旁路蛋白及细胞周期促进非小细胞肺癌H23细胞的凋亡
目的 研究天然小分子复合物白花丹素对人类非小细胞癌H23细胞的凋亡作用及其内在机制.方法 应用不同浓度梯度的白花丹素(0.5～200 μmol/L)培养H23细胞24 h,水溶性四唑盐(WST-1)比色法检测H23细胞增殖活力,双染流式细胞仪检测凋亡细胞及细胞周期,计算药物半数抑制浓度(IC50),CM-H2DCFDA探针检测细胞内活性氧化物(ROS),聚丙烯凝胶电泳法检测线粒体旁路相关蛋白.结果 白花丹素对于H23细胞系具有极高的抑制增殖的效应,IC50为7.80 μmol/L.该抑制增殖效应与G2/M细胞周期停滞,ROS和凋亡相关细胞死亡有关.白花丹素造成细胞周期G2/M的比例上升,并增加ROS的水平.在H23细胞系中,白花丹素增加细胞色素C(Cytochrome C)的表达,促凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶3 (caspase 3)、半胱氨酸蛋白酶9(caspase 9)的活化,而降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达.结论 白花丹素导致H23细胞G2/M周期停滞,并通过线粒体相关旁路诱导人类非小细胞肺癌H23细胞系的凋亡.
-
长非编码RNA MALAT1的研究进展
MALAT1基因(metastasis associated in lung denocarcinoma transcript 1)即人肺腺癌转移相关转录本1基因,初是在研究人非小细胞肺癌的转移中通过减除杂交法筛选鉴定出的一个新的长非编码RNA,它是定位于人类11q13染色体上,长约8 700 bp的非编码RNA,缺乏有意义的开放性编码框,在体外无法翻译出相应的蛋白质.同时其在序列上存在着进化保守,种属间具有高度同源的序列,提示其在肿瘤的发生发展和转移的过程发挥着重要功能,现将近年来对其研究作一系统综述.
-
Torin2对人非小细胞肺癌A549细胞生长和迁移的影响
目的 观察Torin2对人非小细胞肺癌A549细胞生长和迁移的影响,初步探讨其作用机制.方法 实验分为空白对照组、阴性对照组和Torin2加药组,CCK-8检测Torin2对各组A549细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞的凋亡及周期;Transwell检测细胞的迁移;Western blot检测相关蛋白的表达.结果 Torin2对A549细胞的增殖具有显著抑制作用,且呈明显的剂量依赖性,IC50为214.96 nmol/L;流式细胞仪检测对照组、加药组200 nmol/L和400 nmol/L细胞凋亡率分别为(4.51±1.32)％、(9.56±2.34)％、(16.40 ±3.57)％;各加药组凋亡率明显高于对照组(P＜0.05),且加药组与对照组比较:G1期细胞比例显著增多(P＜0.05),S期显著减少(P＜0.05).Transwell实验结果显示加药组(200 nmol/L和400 nmol/L)的A549细胞迁移能力较对照组显著下降.Western blot结果显示A549细胞经Torin2加药处理后,p-Akt473、p-4EBP1、Cyclin D1蛋白表达明显降低,Caspase 9蛋白酶切片段表达显著增加.结论 Torin2可以抑制A549细胞增殖,引起细胞周期G1/S期阻滞,抑制细胞迁移,促进细胞凋亡,其机制可能与Torin2抑制了PI3K/Akt/mTOR信号通路以及周期相关蛋白Cyclin D1的表达有关.
关键词： Torin2 PI3K/AKT/mTOR信号通路 人非小细胞肺癌 增殖 凋亡
