首页 > 文献资料
-
WWOX对胰腺癌细胞活性、凋亡及ATP含量影响及机制初步研究
目的 研究含WW域的氧化还原酶(WWOX)对胰腺癌细胞增殖活性、凋亡及细胞中三磷酸腺苷(ATP)含量影响.方法 在胰腺癌SW1990细胞中转染WWOX过表达质粒,同时转染对照质粒作为阴性组,设置只加入转染试剂的细胞为对照组.荧光定量PCR和Western blot法检测各组胰腺癌细胞中WWOX的表达水平,用MTT法测定胰腺癌细胞增殖活性,用流式细胞术测定胰腺癌细胞凋亡情况,用JC-1法检测胰腺癌细胞线粒体膜电位,用荧光素酶法测定ATP含量,用Western blot法检测胰腺癌细胞线粒体和胞质中细胞色素C(Cyt C)及细胞中剪切型Caspase-9(Cleaved Caspase-9)、剪切型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达.结果 WWOX过表达质粒转染后的SW1990细胞中WWOX mRNA和蛋白水平高于对照组(P＜0.05).高表达WWOX后的SW1990细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,细胞中ATP含量降低,线粒体膜电位降低,线粒体中Cyt-C蛋白水平降低,胞质中Cyt-C蛋白水平升高,细胞中Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3蛋白水平升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).阴性组细胞WWOX mRNA和蛋白水平、细胞增殖活性、凋亡率、ATP含量、线粒体膜电位、胞质和线粒体中Cyt-C蛋白水平、细胞中Cleaved Caspase-9和Cleaved Caspase-3蛋白水平与对照组相比均无显著差异(P＞0.05).结论 WWOX可以抑制胰腺癌细胞增殖活性,诱导胰腺癌细胞凋亡,减少细胞中ATP合成,这可能与减少线粒体释放Cyt-C和线粒体膜电位有关.
-
WWOX与p73蛋白在乳腺癌组织中的表达及相关性研究
目的 探讨WWOX与p73蛋白在乳腺癌组织中的表达及其相关性.方法 采用免疫组织化学方法检测60例浸润性乳腺癌、20例乳腺纤维腺瘤及20例乳腺癌旁组织中WWOX和p73的表达情况.结果 WWOX在浸润性乳腺癌组织中的表达(13.3％)明显低于乳腺纤维腺瘤组织(35.0％)(P＜0.05),乳腺纤维腺瘤组织中的表达明显低于乳腺癌旁组织(75.0％)(P＜0.05).WWOX的表达与有无淋巴结转移、分化程度、TNM分期、术后复发及ER受体密切相关(P＜0.05).p73在乳腺癌组织中的表达(80.0％)明显高于乳腺纤维腺瘤组织(55.0％)(P＜0.05),乳腺纤维腺瘤组织中的表达明显高于乳腺癌旁组织(15.0％)(P＜0.05).p73的表达与有无淋巴结转移、术后复发、ER受体密切相关(P＜0.05).WWOX与p73在浸润性乳腺癌组织中的表达呈负相关(r=-0.489,P＜0.05).结论 WWOX和p73参与调控乳腺癌的发生、发展,联合检测WWOX和p73对预测乳腺癌的发生、发展及评估乳腺癌患者的预后有重要意义.
-
WWOX抑癌基因和Nrf2转录因子在胆囊癌组织中的表达及相关性研究
[目的]研究WWOX抑癌基因和Nrf2转录因子在原发性胆囊癌(PGC)组织中的表达及其与临床病理的关系,以及WWOX和Nrf2表达的相关性.[方法]收集胆囊癌标本54例、胆囊腺瘤标本20例、慢性胆囊炎标本20例.应用免疫组织化学方法检测WWOX蛋白和Nrf2蛋白的表达情况,同时收集胆囊癌患者的临床病理资料,并将结果进行分析.[结果](1)WWOX蛋白在胆囊癌、胆囊腺瘤及慢性胆囊炎组织中阳性表达率分别为48.1％ (26/54)、75.0％ (15/20)和85.0％(17/20),差异有统计学意义(P＜0.01).WWOX蛋白阳性表达与病理学分级(P＜0.01)、Nevin分期(P＜0.05)、淋巴结转移(P＜0.01)有关.(2)Nrf2蛋白在胆囊癌、胆囊腺瘤及慢性胆囊炎组的阳性表达率分别为66.7％ (36/54)、20.0％ (4/20)及5.0％(1/20),差异有统计学意义(P＜0.01).Nrf2蛋白阳性表达水平与病理学分级(P＜0.05)、Nevin分期(P＜0.01)、淋巴结 转移(P＜0.01)有关.(3)WWOX阳性表达与Nrf2阳性表达均与患者的性别、年龄、病理类型及是否伴有结石无显著关系(P＞0.05).(4) WWOX阳性表达与Nrf2阳性表达呈负相关(r=-0.420,p＜0.01).[结论]WWOX和Nrf2表达可能是反映胆囊癌发生、进展、生物学行为和预后的重要生物学标记物；WWOX和Nrf2蛋白在胆囊癌中的表达呈明显的相关性,可能在胆囊癌的发生中起协同作用.
-
抑癌基因WWOX在肝外胆管癌中的表达
目的:检测WWOX mRNA及其编码蛋白在肝外胆管癌中的表达,分析其临床病理学意义.方法:用Real Time RT-PCR方法定量分析21例胆管癌组织WWOX mRNA表达情况,5例肝移植的正常胆管组织作为对照;采用UIP法染色检测相应病理切片的蛋白表达情况,并比较mRNA和蛋白在不同分级组织中的表达差异.结果:WWOX mRNA在肝外胆管癌中的表达显著低于正常胆管组织(8.936×10-7±3.253×10-7 vs 1.079×10-6±1.735×10-7,P＜0.001),47%表达缺失;蛋白表达的缺失频率为57%,其mRNA及蛋白表达与组织学分级有显著相关(r=-0.583,-0.840,P＜0.001),而年龄、性别、术前肝功能及临床分期无显著相关性.低分化胆管癌组织中的表达显著低于分化较好的肿瘤组织(P＜0.05).结论:WWOX表达改变参与胆管癌的发病,可作为预测肝外胆管癌生物侵袭性的有效指标.
-
肝细胞癌中WWOX基因启动子甲基化与蛋白表达的关系
目的:探讨wwox基因启动子甲基化及蛋白表达与肝细胞性肝癌的关系.方法:通过甲基化特异性PCR(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)方法及免疫组织化学(immunohistochemestry,IHC)法分别检测60例肝细胞性肝癌组织和癌旁组织中wwox基因启动子甲基化状态和蛋白表达水平.结果:癌组织及癌旁组织中wwox基因启动子甲基化阳性率分别为41.67％(25/60)和8.33％(5/60)(P=0.000).WWOX蛋白在癌和癌旁组织中的表达具有显著性差异[35.00％(21/60) vs 70.00％(42/60),P=0.001].wwox基因启动子甲基化和蛋白表达与肝外转移、肿瘤直径、肿瘤细胞分化密切相关(P=0.007,0.014,0.011); WWOX蛋白表达与临床分期、肿瘤直径、肿瘤细胞分化密切相关(P=0.018、0.023、0.001).wwox基因启动子甲基化与蛋白表达显著负相关(γ=-0.408,P=0.001).结论:启动子区甲基化是wwox基因失活的重要机制.wwox启动子区异常甲基化可能参与了肝癌的发生发展,在肝癌的进展发挥重要作用.
-
抑癌基因WWOX与p53在胃癌组织中的表达及相互关系
目的:研究抑癌基因WWOX与p53在胃癌(gastric cancer,GC)中的表达及相互关系,探讨其在GC发生、发展中可能的机制.方法:随机选择手术切除的GC石蜡标本70例及相应癌旁正常组织的石蜡标本20例,采用免疫组织化学的方法检测WWOX、p53蛋白表达.对所得数据进行统计学分析.结果:p53蛋白在GC中的表达率为51.42％(36/70),癌旁正常组织的表达率为0.00％(0/20);淋巴结转移组表达显著高于无转移组(x2=4.79,P＜0.05)；晚期GC组表达高于早期GC(x2=6.62,P＜0.05).WWOX蛋白在GC中的表达率为41.43％(29/70),癌旁正常组织的表达率为90.00％(18/20);淋巴结转移组与无转移组相比,无统计学意义(x2=0.29,P＞0.05)；晚期GC显著低于早期GC(x2=9.36,P＜0.05).WWOX与p53表达呈负相关(r=-0.61,P＜0.05).结论:p53、WWOX蛋白在GC中表达,与浸润深度、淋巴结转移、临床分期相关,二者在GC发生、发展中相互作用.
-
WWOX基因在肝细胞癌及手术切缘中的表达意义
目的 探讨WWOX基因在肝细胞癌(HCC)和切缘中的表达状况和术后复发及预后的关系及其临床意义.方法 用免疫组化方法检测76例肝癌组织及其切缘组织、20例正常肝组织中WWOX基因蛋白产物表达水平,用TUNEL法检测76例肝细胞癌的细胞凋亡水平,结合临床病理指标和术后生存率进行分析.结果 WWOX基因蛋白产物在HCC中定位于细胞核,在癌旁组织中定位于细胞核与细胞浆.肝癌组织中WWOX基因蛋白表达指数为(35.2±20.1)%,低于癌旁组织和正常肝组织(P<0.05).并与肝癌的细胞凋亡率下降、PCNA增高、肿瘤较大、门脉分支浸润、低分化高恶性度以及术后复发等指标有关(P<0.05).肝癌切缘ww0X基因蛋白表达水平与术后复发率和生存率有关(P<0.05),而与1 cm以上切缘距离无关.结论 肝癌组织和手术切缘存在低WWOX表达和定位异常,并可能与影响肿瘤进展、预后的生物学行为有关.肝癌组织和手术切缘WWOX表达水平测定有望成为评估肝癌进展等生物学行为和预后的有用指标之一,并有助于确定较为安全的根治切除分子切缘.
-
乳腺癌WWOX基因表达缺陷的意义及其与CpG岛甲基化的关系
目的 研究WWOX蛋白在乳腺癌组织和细胞系中的表达变化,分析其与WWOX基因启动子和第一外显子CpG岛甲基化的关系.方法 应用免疫组织化学染色检测乳腺癌组织和细胞系中WWOX蛋白表达,采用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)分析乳腺癌组织和细胞系中WWOX基因CpG岛甲基化状况.结果 32.2%的乳腺癌组织和5.4%正常乳腺组织中WWOX蛋白表达缺失,差异有统计学意义(P＜0.01).乳腺癌组织WWOX表达异常与绝经后状态(P＜0.01)关系密切.Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者中WWOX蛋白表达缺失的比例分别为23.1%、28.6%和46.2%.55%的乳腺癌组织WWOX启动子CpG岛甲基化扩增,45%的乳腺癌组织WWOX第一外显子CpG岛甲基化扩增,癌旁组织中未出现CpG岛甲基化扩增.MDA-MB-231细胞WWOX基因CpG岛完全甲基化,而MCF-7细胞无甲基化产物扩增.结论 乳腺癌中广泛存在着WWOX基因CpG岛甲基化,是WWOX表达缺陷的重要机制,并且可能通过性激素受体信号途径在乳腺癌的发生、发展中发挥作用.
-
WWOX胃癌组织中的表达及临床意义
目的 通过检测胃癌及其相应癌旁组织中的WW结构域的氧化还原酶基因(wwdomain containing oxidoreductase,wwox)的表达,探讨WWOX在胃癌中的表达及其临床意义. 方法 应用免疫组织化学方法(SP法)检测60例胃癌及相应癌旁组织中WWOX的表达情况.分析WWOX的表达与胃癌临床病理参数的关系. 结果 WWOX在相应癌旁组织中的阳性表达率为81.7％(49/60),明显高于其在胃癌组织26.7％(16/60)(x2=36.554,P＜0.001).WWOX的表达与胃癌的分化程度有关(x2=12.214,P=0.004),与患者性别、年龄、肿瘤大小、部位、大体分型、肿瘤浸润深度、有无淋巴结转移及远处转移无关. 结论 WWOX做为一种抑癌基因,在胃癌组织中低表达,并与胃癌细胞的分化程度相关.
-
卵巢浆液性腺癌中抑癌基因WWOX和PTEN的表达及临床意义
目的 研究抑癌基因WWOX及PTEN对卵巢浆液性腺癌细胞生长的影响,探讨卵巢癌基因治疗的新靶点.方法 于2013年10月-2016年10月福州市第一医院方便选取的60例卵巢浆液性腺癌标本作为研究对象,另选取30例正常卵巢组织作为对照.采用免疫组化检测抑癌基因WWOX及PTEN的阳性率表达,RT-PCR法测WWOX及PTEN的mRNA相对表达量.结果 卵巢浆液性腺癌中抑癌基因WWOX及PTEN的免疫组化阳性率及mRNA相对表达量均显著低于正常卵巢组织组(P<0.05).结论 WWOX及PTEN基因缺失可能是卵巢浆液性腺癌发生的重要分子基础,可能会干扰卵巢癌细胞的细胞周期并抑制其生长增殖,临床研究有待从基因分子调控等方面进一步深入探讨,为卵巢浆液性腺癌的基因治疗提供一种新方法.
-
WWOX、p53及Bcl-xl基因在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义
目的 探讨WWOX、p53及Bcl-xl基因在食管鳞癌组织中的表达及其与临床病理学特征的关系.方法应用免疫组织化学SP法检测10例高分化鳞癌、28例中分化鳞癌、14例低分化鳞癌及52例癌旁正常组织中WWOX、p53及Bcl-xl基因的表达并分析其与临床病理指标的相关性.结果 WW0X在食管鳞癌组织中的表达明显降低,与癌旁正常组织相比较其差异有统计学意义(P < 0.01),且WWOX的表达与癌组织的分化程度、肿瘤的浸润深度及淋巴结转移情况密切相关(P < 0.05),在低分化鳞癌中的表达低于高、中分化鳞癌.p53(突变型)基因在食管癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织,二者比较其差异具有统计学意义(P < 0.05),其表达与癌组织的分化程度、肿瘤的浸润深度及淋巴结转移情况密切相关(P < 0.05),以上两种基因的表达与患者的年龄和性别无关(P > 0.05).Bcl-xl基因在食管鳞癌组织中的表达高于癌旁正常组织(P < 0.05),其表达与癌组织的分化程度有关(P < 0.05),与肿瘤的浸润深度及淋巴结转移情况及患者的年龄性别无关(P > 0.05).WWOX基因与p53基因及Bcl-xl基因的表达均呈负相关.结论 WWOX在食管鳞癌组织呈低表达,p53(突变型)及Bcl-xl基因在食管鳞癌组织呈高表达.三基因在食管癌的发生、发展及转移过程中有明显的协同作用.
-
抑癌基因WWOX和p53在结直肠癌中的表达及临床意义
目的:探讨WWOX和p53基因在结直肠癌组织中的表达情况、与临床病理参数的关系及两者表达的相关性.方法:采用免疫组织化学染色法(SP法)检测对照组正常结直肠组织25例、结直肠癌组织45例中WWOX和P53蛋白的表达情况,分析两者的表达与患者年龄、性别及癌组织的病理参数包括肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移的关系,以及两者表达的相关性.结果:WWOX蛋白在癌组织中阳性表达明显降低,与正常组织比较差异有统计学意义(P＜0.05),P53(突变型)蛋白在癌组织中较正常结直肠组织中阳性表达率高,差异有统计学意义(P＜0.05).无论WWOX,还是P53蛋白的阳性表达率,在不同癌组织学分化程度、浸润深度、淋巴结转移情况、生存期分类的患者结直肠癌组织差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),而在不同性别、年龄、肿瘤大小分类患者差异无统计学意义(P＜0.05)；WWOX与p53基因的表达呈负相关(r=-0.388,P=0.008).结论:WWOX和p53(野生型)同为抑癌基因,检测两者的表达对于结直肠癌的临床诊断及预后判断有重要意义.
-
CHD5 和 WWOX 基因在胃癌中的表达及其对预后的影响
目的:探讨抑癌基因CHD5和WWOX的蛋白在胃癌中的表达及其对预后的影响. 方法:随机选取我院收治的胃癌患者65 例,采用免疫组化法检测胃癌组织及相应癌旁组织 CHD5 和WWOX蛋白的表达及与预后的关系. 结果:CHD5和WWOX蛋白在胃癌组织中的阳性表达率分别为36.92%(24/65)和41.54%(27/65),明显低于在癌旁组织的(P<0.05). 在胃癌组织中,CHD5 和WWOX蛋白的表达与TNM分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移均有关( P<0.05). 生存分析Kaplan-Meier法显示,CHD5和WWOX蛋白阳性表达的患者1、3年生存率显著高于阴性表达的患者,差异均有统计学意义( P<0.05). 结论:CHD5和WWOX在胃癌组织中低表达与胃癌的病变程度、侵袭转移及预后不良关系密切,提示CHD5和WWOX蛋白低表达可能参与胃癌的发生、发展及胃黏膜恶性转变等过程.
-
NDRG-1、WWOX及P53基因在大肠癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨肿瘤相关基因NDRG-1、WWOX及P53在大肠癌组织中的表达情况及其与临床、病理因素之间的关系.方法 用免疫组织化学染色的方法分别检测NDRG-1、WWOX及P53基因在35例大肠癌组织及14例正常大肠黏膜组织中的表达情况.结果 WWOX、NDRG-1基因在大肠癌组织中的表达明显降低,与正常组织比较差异有统计学意义(P＜0.05).且二者均与肿瘤的淋巴结转移情况密切相关(P＜0.05).WWOX与癌组织的分化程度密切相关(P＜0.05),而NDRG-1与癌组织的分化程度无关(P＞0.05).P53(突变型)基因在大肠癌组织中的表达明显高于正常组织,二者比较差异有统计学意义(P＜0.05),其表达与癌组织的分化程度、淋巴结转移情况无关(P＞0.05).以上3种基因的表达情况均与患者的年龄、性别无关(P＞0.05).WWOX与NDRG-1基因在大肠癌组织中的表达呈正相关(r=0.341,P＜0.05);而二者与P53基因的表达均呈负相关(WWOX与P53组:r=-0.442,P＜0.05;NDRG-1与P53组:r=-0.338,P＜0.05).结论 WWOX、NDRG-1、P53(野生型)基因同为抑癌基因,且三者之间在大肠癌的发生、发展及转移过程中有明显的协同作用.联合评价其功能对大肠癌的治疗及预后具有重要的临床意义.
-
非小细胞肺癌中Bmi-1和WWOX蛋白的表达及其临床意义
目的 探讨非小细胞肺癌中BMi-1与WWOX蛋白的表达及其临床意义.方法 应用免疫组化和Western blot检测86例非小细胞肺癌中Bmi-1蛋白和WWOX蛋白的表达水平,分析BMi-1与WWOX蛋白与临床患者特征的关系,并对患者生存影响因素进行分析.结果 Bmi-1蛋白在非小细胞肺癌中的表达水平显著高于癌旁正常组织中表达水平(P＜0.01),而WWOX蛋白在非小细胞肺癌中的表达水平(0.52±0.05)则显著低于癌旁正常组织中表达水平(P＜0.01).Bmi-1和WWOX蛋白表达水平均与淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 Bmi-1的高表达和WWOX蛋白的低表达均与淋巴结转移有关.
-
WWOX基因在肺腺癌中表达及对A549细胞增殖和凋亡的影响
目的 研究WWOX基因在肺腺癌组织的表达及在肺腺癌细胞系A549细胞增殖和凋亡的作用,探讨肺腺癌与临床病理特征之间的关系.方法 应用免疫组化技术检测62例肺腺癌组织WWOX蛋白的表达;将携有WWOX基因的表达载体转染肺腺癌细胞系A549细胞,用Western blot法检测A549细胞WWOX蛋白的表达情况;运用细胞计数法检测细胞的增殖情况;流式细胞仪观察其对A549细胞凋亡的影响.结果 肺腺癌组中WWOX的阳性表达率为45.2％,明显低于癌旁正常组织(82.9％,P=0.000).WWOX在肺腺癌的表达与分化程度(P=0.023)、TNM分期(P =0.007)、远处转移有关(P=0.009),与患者的性别、年龄以及肿瘤的大小无关(P＞0.05).A549细胞转染WWOX基因后,WWOX蛋白表达明显高于空载质粒组及未转染组(未检测到WWOX蛋白的表达);生长曲线可见pcDNA3.0-WWOX转染组的A549细胞的增殖速度比pcDNA3.0组和未转染组明显下降;流式细胞仪分析表明pcDNA3.0-WWOX转染组的凋亡率明显高于pcDNA3.0空载体组.结论 WWOX的表达能够抑制肿瘤细胞的增殖,促进其凋亡.
-
卵巢上皮性癌组织中WWOX蛋白的表达
目的:探讨卵巢上皮性癌组织中WWOX蛋白的表达.方法:应用免疫组化SP法,检测39例卵巢上皮性癌、7例卵巢交界性上皮性肿瘤、10例卵巢良性上皮性肿瘤及15例正常卵巢组织中WWOX蛋白的表达情况.结果:卵巢上皮性癌组织中WWOX蛋白的表达阳性率64.10%,明显低于正常卵巢组织100%、卵巢良性上皮性肿瘤100%及卵巢交界性上皮性肿瘤85.71%(P＜0.01),但卵巢交界性上皮性肿瘤与正常卵巢组织及卵巢良性上皮性肿瘤比较,差异无统计学意义(P＞0.05).WWOX蛋白表达阳性率随卵巢上皮性癌临床分期的增加而降低(P＜0.05).结论:WWOX蛋白在卵巢上皮性癌组织中低表达,其表达水平与肿瘤的进展密切相关.
-
WWOX基因调控Lewis肺癌细胞免疫抑制效应研究
目的:探讨WWOX基因调控Lewis肺癌细胞免疫抑制效应.方法:将已构建的真核表达载体pCDNA4.0/myc-WWOX转染到Lewis肺癌细胞中,采用MTT法检测转染前后肿瘤细胞培养上清对鼠脾细胞增殖的影响;半定量RT-PCR法检测肿瘤生长相关因子mRNA的表达.体内肿瘤局部注射pCDNA4.0/myc-WWOX质粒,计算抑瘤率并采用MTT法检测NK、CTL杀伤活性和淋巴细胞增殖能力.结果:WWOX基因转染细胞的培养上清对鼠脾细胞的增殖抑制作用与对照组比较显著下降(P＜0.05);WWOX基因转染后TGF-β、VEGF、FasL三种肿瘤生长相关因子的mRNA表达降低;WWOX基因体内注射后能够抑制肿瘤生长,抑瘤率可达71%;NK、CTL的杀伤活性和淋巴细胞转化能力与对照组比较,具显著差异(P＜0.05).结论:WWOX基因转染Lewis肺癌细胞具有抑瘤作用与免疫抑制效应,提示WWOX基因可能通过降低肿瘤生长相关因子的mRNA表达、促进淋巴细胞增殖、提高NK和CTL的杀伤活性,实现其对Lewis肺癌细胞免疫抑制效应的调控.
-
WWOX基因转染抑瘤效应的实验研究
目的 建立肿瘤抑制基因WWOX真核表达载体,观察其瞬时转染对肿瘤细胞凋亡的影响.方法 采用RT-PCR方法,从正常人胚肾细胞HEK-293中钓取WWOX基因,将其克隆至pMD18-T载体上,测序正确后克隆到真核表达载体peDNA4/myc-His中;采用脂质体介导法体外瞬时转染人肺腺癌A549细胞;RT-PCR法和Western印迹法分别检测WWOX基因mRNA和蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;克隆形成试验观察肿瘤细胞克隆形成能力的变化.结果 成功构建了WWOX的真核表达载体.体外转染的A549细胞凋亡率明显高于未转染和空载体转染细胞,且细胞克隆形成能力下降.形成率为35.43%,明显低于未转染细胞和空载体转染细胞.结论 所构建的poDNA4/myc-WWOX真核表达载体转染肿瘤细胞能够抑制肿瘤生长并诱导细胞凋亡.
-
抑癌基因WWOX对Lewis肺癌细胞c-jun蛋白表达及其转录活性的影响
目的 研究抑癌基因WWOX对Lewis肺癌细胞c-jun蛋白表达及其转录活性的影响,探讨WWOX基因的抑癌机制.方法 采用脂质体转染法将WWOX基因重组真核表达质粒转染Lewis肺癌细胞,RT-PCR和Western blot法检测WWOX基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平;免疫组化法检测WWOX基因转染后Lewis细胞中C-jun蛋白的表达水平;半定量RT-PCR法检测c-jun调控的4种肿瘤相关基因p21、cyclinD1、FasL及VEGF mRNA的转录水平.结果 重组真核表达质粒pcDNA4.0/Myc-His-WWOX转染Lewis细胞后,WWOX基因在mRNA和蛋白水平上均得到表达;与未转染细胞和空载体转染细胞相比,WWOX基因转染细胞胞浆中c-jun蛋白的表达量升高,而细胞核中c-jun蛋白的表达量未见明显差异;p21基因mRNA的转录水平升高,cyclinDl、FasL和VEGF基因mRNA的转录水平降低.结论 WWOX基因可在Lewis细胞中表达,其转染Lewis肺癌细胞后,不直接调控c-jun蛋白的表达量,但可影响其转录活性.
