南京医科大学学报（自然科学版）杂志
Journal of Nanjing Medicial University 남경의과대학학보（자연과학판）
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
不育症患者精子DNA碎片化指数与精子常规参数关系的研究
目的:近年研究认为精子DNA碎片化是评价精子质量的重要指标,本研究主要运用吖啶橙实验(acridine orange test,AOT)检测不育症患者精子DNA碎片化指数(DNA fragmentation index,DFI)与精子常规参数之间的关系.方法:收集本院男科门诊376例不育症患者的精液标本,采用改良的Neubauer血细胞计数板人工分析精子密度,计算机辅助精液分析(CASA)分析精子活力.精子形态分析采用Shorr染色法,分析标准采用WHO推荐的Tygerberg严格标准.采用AOT检测精子DNA碎片化程度.结果:DFI与精子密度呈负相关(r=-0.150,P=0.003)、与精子总活动率呈负相关(r=-0.114,P=0.028)、与精子前向运动率无统计学相关性(r=-0.089,P=0.085)、与精子正常形态率呈负相关(r=-0.155,P=0.003).结论:精子DNA碎片化指数与精子的密度、总活动率及精子正常形态率具有负相关性,AOT检测的DFI值为男性不育症的诊疗提供了一个新的指标.
-
系统性红斑狼疮伴发热的临床分析
目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者病程中伴发热的鉴别诊断.方法:回顾性分析86例SLE伴发热患者,收集整理其临床资料,分为病情活动组及感染组进行各项指标的比较.结果:86例SLE患者中,病情活动组30例,感染组56例.病情活动组系统性红斑狼疮疾病活动性指数(SLEDAI)较感染组高,C-反应蛋白(CRP)、白细胞、补体较感染组低(P＜0.05),两组血沉无统计学差异.结论:SLE患者病程中伴发热感染是重要原因,CPP升高与感染密切相关,是重要的参考指标.尽早诊断选择恰当的治疗方法是改善预后的关键.
-
子宫输卵管声学造影评价输卵管通畅性的价值
目的:探讨声诺维子宫输卵管声学造影(SonoVue hysterosalpingo-contrast sonography,SonoVue-HyCoSy)评价输卵管通畅性的价值.方法:对196例原发性或继发性不孕症患者389条输卵管(其中3例患者1侧输卵管切除)进行阴道超声监视下输卵管通水液HyCoSy检查,判断输卵管的通畅性,对怀疑输卵管阻塞或通而不畅的患者进行声诺维HyCoSy,判断输卵管的通畅性及阻塞部位,对诊断单侧或双侧输卵管阻塞或通而不畅患者,在进行声诺维HyCoSy 1周内行腹腔镜检查,将输卵管通畅情况及阻塞部位与腹腔镜通染液试验结果进行对照.结果:196例患者行输卵管通水液HyCoSy诊断145例患者双侧输卵管通畅,对其余51例(3例1侧输卵管切除)单侧或双侧输卵管阻塞或通而不畅患者进行了声诺维HyCoSy,诊断54条输卵管通畅,25条通而不畅,20条阻塞;对32例(其中1例1侧输卵管切除)共63条输卵管声诺维HyCoSy结果与腹腔镜通染液试验结果对照,二者评价输卵管通畅性方面差异无统计学意义.声诺维HyCoSy诊断阻塞部位的准确率为75%.结论:声诺维子宫输卵管声学造影能实时动态观察输卵管走形及其通畅情况,是一种可靠实用的检查方法,对评价输卵管的通畅性具有重要价值.
-
胸腺上皮源性肿瘤诱导微血管生成的预后意义
目的:通过观察胸腺上皮源性肿瘤微血管生成与部分临床病理参数的关系和对患者生存期的影响,探讨微血管密度(microvessel density,MVD)作为评估患者预后指标的临床意义.方法:用免疫组织化学Envision法检测单克隆抗体CD34在66例胸腺上皮源性肿瘤手术切除标本中的表达,对其中62例患者随访16～178个月并进行生存分析.结果:MVD在不同性别和年龄组中的差别均无显著性差异(P＞0.05),肿瘤体积增大(≥11.0 cm)时MVD有增高趋势,但与对照组(＜11.0 cm)比较差别无统计学意义(P＞0.05).MVD在各组织学类型之间存在显著性差异(P＜0.05),各Masaoka临床分期之间的差异也有统计学意义(P＜0.01).患者是否合并重症肌无力不影响MVD值(P＞0.05).Kaplan-Meier生存曲线显示不同组织学类型之间生存率存在显著性差异(P＜0.01),Masaoka临床各分期之间生存率也存在显著性差异(P＜0.01),高MVD值组(≥37.0)5年和10年生存率显著低于低MVD值组(＜37.0),差别有统计学意义(P＜0.05).结论:促微血管生成可能是胸腺上皮源性肿瘤侵袭生长和临床演进的重要事件,MVD可以作为判断胸腺上皮源性肿瘤患者预后的有价值指标,将MVD、WHO组织学分型、Masaoka临床分期结合起来更有利于评估患者的预后.
-
不规则瞳孔无晶体眼二期人工晶体植入的探讨
目的:探讨白内障术后不规则瞳孔无晶体眼二期人工晶体植入的手术技巧.方法:选取本院眼科自2005年3月～2009年3月18例19只眼因各种原因未能一期植入人工晶体的不规则瞳孔无晶体眼患者行二期人工晶体植入手术.根据病情选用不同的术式并观察手术结果.结果:老年性及并发性白内障术后无晶体眼的患者二期植入人工晶体后,视力提高较理想;外伤性白内障如果不伴有角膜混浊、玻璃体积血、机化及视网膜脱落等并发症,术后视力提高也较好;而先天性白内障患儿伴有弱视者视力提高不理想.结论:对于白内障术后不规则瞳孔无晶体眼的患者行二期人工晶体植入,不仅可获得良好的裸眼视力及矫正视力,同时可减少一系列并发症.
-
苏州市新生儿先天性促甲状腺素筛查切值的研究
目的:对苏州市2007年1月到2010年3月新生儿先天性甲状腺功能减低症(congenital hypothyroidism,CH)筛查工作进行统计,探讨初筛实验中筛查切值的设定与筛查效率的相关性.方法:对出生72 h经充分哺乳后的新生儿采集足跟血滤纸标本,采用时间分辨荧光免疫法(DELEFIA)Perkin·Elmer试剂盒检测滤纸干血斑中促甲状腺素(TSH)浓度.采用百分位数法确定切值,并应用SPSS软件-ROC曲线(受试者工作特征曲线)分析筛查切值.结果:新生儿筛查TSH检测水平呈偏态分布,平均值为2.27μU/ml,中位数值为2.74 μU/ml,正常新生儿99%百分位数值为9.20 μU/ml.初筛值为0～5μU/ml者占89.77%,其中0.00～0.99、1.00～1.99、2.00～2.99、3.00～3.99和4.00～4.99 μU/ml者分别占15.16%、27.68%、23.37%、15.20%和8.56%.有0.7%的受检者初筛TSH在8.00～8.99μU/ml之间.按照切值为9 μU/ml,复查率为1.38%.一共确诊206例CH患儿,CH发生率1/1 219,尚无漏诊报道.在确诊患儿中42.23%的初筛测定值在9～20μU/ml.结论:苏州市新生儿中CH的发生率高于全国平均水平.筛查切值9.0μU/ml较适合苏州人群,对于临界切值的样本根据质控值与筛查阳性率作2次选择.
-
PICU患儿念珠菌感染的危险因素及预测因素分析
目的:了解儿童念珠菌感染的临床危险因素并进行风险预测.方法:回顾性分析2001～2010年念珠菌培养阳性的本院儿科重症监护病房(PICU)患儿的临床资料.按1∶1比例选择年龄和性别相似、同期住院的念珠菌培养阴性PICU患儿作为对照.运用logistic回归分析相关危险因素并进行念珠菌感染的概率预测.结果:共有107例PICU患儿念珠菌培养阳性,年感染率具有上升的趋势.恶性肿瘤、中心静脉置管、糖肽类抗生素与抗厌氧菌抗生素使用超过3天均是独立的风险预测因素,其中中心静脉置管的校正后的OR值为25.68(95%CI:8.72～97.47).当上述4个因素均存在时,PICU患儿念珠菌感染的概率为0.36(95%CI:0.01～0.97).结论:应积极干预PICU患儿念珠菌感染的危险因素.
-
非酒精性脂肪肝炎肥胖儿童脂肪因子水平与相关发病机制
目的:探讨肥胖儿童非酒精性脂肪肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)与脂肪因子的关系.方法:对符合NASH诊断的23例患儿、符合单纯性肥胖诊断的17例儿童以及20例正常儿童分别检测血丙氨酸氨基转移酶(ALT)、游离脂肪酸、瘦素、脂联素、肿瘤坏死因子(TNF-α),比较它们的水平并分析ALT与各指标的关系.结果:NASH组患儿游离脂肪酸、瘦素、TNF-α水平高于单纯肥胖组和对照组(P＜0.05,P＜0.01),而脂联素水平低于另两组(P＜0.05,P＜0.01).相关分析显示:ALT与游离脂肪酸、瘦素、TNF-α各指标间存在正相关(r=0.407,P＜0.01;r=0.338,P＜0.05;r=0.372,P＜0.05),与脂联素间存在负相关(r=-0.378,P＜0.05).结论:NASH患儿高血脂、高瘦素血症、高TNF-α单独或共同构成NASH的发病因素之一,而脂联素则起保护作用.
-
胆囊癌肉瘤的影像表现及临床病理分析
目的:探讨胆囊癌肉瘤(carcinosacoma of gallbladder)的临床表现、影像特征、病理特点及治疗方法,提高对本病的认识.方法:回顾性分析经手术病理证实的5例胆囊癌肉瘤患者的CT表现及临床资料,并结合文献进行总结.结果:临床症状有右上腹疼痛、轻压痛,腹部肿块等;CT平扫5例均见胆囊内有结节状或菜花状软组织影突入、胆囊体积增大、胆囊壁增厚,可伴有肝内侵润、淋巴结及远处转移;增强的3例中,增厚的胆囊壁、腔内软组织肿块有轻中度不均匀强化;镜下均可见癌和肉瘤两种成分,免疫组化波形蛋白(Vim)、抗胰蛋白酶(AAT)、抗胰糜蛋白酶(AACT)等表现阳性;5例均经手术切除,短期内均有复发或转移.结论:胆囊癌肉瘤是一种罕见的高恶性肿瘤;临床表现无特异性;CT检查能为其诊断及鉴别诊断提供有用的参考价值;确诊依靠病理及免疫组化;治疗方式主要以手术为主,预后差.
-
ECLIA法检测CMV-IgM抗体在孕妇CMV感染诊断中的临床应用
目的:探讨电化学发光法(ECLIA)检测巨细胞病毒(CMV)-IgM对孕妇CMV感染的诊断价值.方法:对360例孕妇血清标本分别以ECLIA法及ELISA法检测CMV-IgM,同时进行PCR检测CMV-DNA,分析ECLIA法检测CMV感染的临床应用价值.结果:360例受检孕妇中,ELISA法检测CMV-IgM阳性率为8.61%,ECLIA法阳性率为7.78%,差异无统计学意义(P＞0.05).ECLIA法与传统的ELISA法比较,其相对灵敏度为87.0%,特异度为99.6%,两种方法一致率为98.6%;与PCR法比较,其相对灵敏度为89.7%,特异度为91.7%,一致率为90.6%.结论:ECLIA法检测CMV-IgM是一种敏感、特异、快速的检测方法,具有良好的临床应用价值,适用于临床大批量样本快速筛查和确诊.
-
母亲HBV DNA载量对婴儿接种乙型肝炎疫苗免疫应答的影响
目的:了解母亲分娩前乙型肝炎病毒核糖核酸(hepatitis B virus DNA,HBV DNA)载量对婴儿经过乙型肝炎疫苗联合乙型肝炎免疫球蛋白(hepatitis B immunoglobulin,HBIG)预防接种后免疫应答的影响.方法:选择2008年2月至2010年2月在东南大学附属第二医院住院分娩,母亲为乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)阳性,婴儿出生时HBV DNA及HBsAg均为阴性者128例,按照母亲分娩时HBV DNA载量分A、B、C 3组,选择母亲为HBsAg阴性的婴儿21例为对照组即D组,各组婴儿行相同的预防接种,相同时段实验室检测乙型肝炎表面抗体(hepatitis B sulface antibody,HBsAb)浓度.结果:A、B、C、D4组婴儿在1个月时HBsAb平均浓度分别是(240.19±79.34)、(248.58±57.07)、(240.87±61.97)、(266.03±70.93)mU/ml,各组比较差异无统计学意义(F=0.666,P=0.574);2个月时各组HBsAb平均浓度分别是(155.87±97.78)、(155.72±141.11)、(196.90±141.51)、(175.26±105.34)mU/ml,各组比较差异无统计学意义(F=0.884,P=0.451);7个月时各组HBsAb平均浓度分别是(766.86±314.27)、(754.30±363.56)、(687.18±326.45)、(888.68±247.83)mU/ml,各组比较差异无统计学意义(F=0.857,p=0.466).结论:母亲产前HBV DNA载量对婴儿1、2、7个月时HBsAb平均浓度无影响;各组婴儿经过联合预防接种后在1个月时都出现了具有保护性的HBsAb,2个月时HBsAb平均浓度均有下降,婴儿对乙型肝炎疫苗联合免疫的免疫应答不受母亲分娩前HBV DNA载量的影响.
-
呼出气一氧化氮测定对儿童支气管哮喘的诊断价值
目的:评估呼出气一氧化氮(FeNO)测定对儿童支气管哮喘诊断的临床价值.方法:选取2010年6月～9月就诊于南京市儿童医院疑似支气管哮喘的患儿87例,测定FeNO水平,以临床表现和支气管激发或舒张试验为哮喘诊断的金标准,绘制ROC曲线,结合ROC曲线明确FeNO的诊断临界点,以评价FeNO对儿童支气管哮喘的诊断价值.结果:87例患儿中诊断哮喘患儿52例,非哮喘患儿35例;哮喘组FeNO[(59.77±42.48)ppb]高于非哮喘组[(25.26±22.60)ppb,P＜0.05].FEV1%与FeNO无直线相关(r=-0.151,P＞0.05).FeNO与外周血嗜酸性粒细胞有相关性(r=0.546,P＜0.01).ROC曲线下面积是0.818,FeNO以34.5 ppb为阈值,敏感度0.712,特异度0.686,阳性预测值0.755,阴性预测值0.605,正确率0.689.结论:FeNO测定有助于儿童支气管哮喘的诊断和鉴别诊断.
-
超声刀在47例胃癌D2根治术中的应用
目的:探讨超声刀在胃癌D2根治术中使用的优点及价值.方法:对比2008年5月至2010年5月由同一手术组完成的101例胃癌根治术病例,其中47例手术由超声刀完成清扫,54例作为对照组施行了常规手术方法.两组均观察了手术时间、术中出血量和输血量、术后48 h引流量、并发症发生率以及淋巴结清扫数目等.结果:超声刀组与对照组相比,手术时间缩短,术中出血量和输血量减少,术后引流量及并发症率明显减少.同时两组的淋巴结清扫数目相当.结论:使用超声刀进行胃癌D2根治术安全、高效,降低了手术风险.
-
270例男科就诊患者精液分析及其与年龄的关系
目的:了解目前男性精液质量情况以及年龄对精液质量的影响.方法:选取男科门诊就诊患者中行精液检查的270例患者,分为5组:20～25岁组、26～30岁组、31～35岁组、36～40岁组以及40岁以上组,采用计算机辅助精液分析(CASA)技术以及Shorr染色法进行精液的动态和形态分析.结果:随着年龄的增长,精子活力呈逐渐下降趋势,但各精液参数在各组间比较并无明显统计学差异;31～35岁组各项精液参数指标均达到WHO标准的比率高,占该组人数的61.76%,比率低的是40岁以上组,占该组人数的50.0%.结论:随着年龄的增长,男性的精液质量呈下降趋势,但是多数男性仍然具有较好的生育能力.
-
异位妊娠腹腔镜保守治疗与药物治疗效果的比较
目的:探讨腹腔镜保守治疗异位妊娠的临床应用.方法:回顾性分析本院178例保守治疗异位妊娠的病历资料,比较不同治疗方法的住院时间、治疗效果以及对未来妊娠的影响.所有资料根据治疗方法分为两组:A组米非司酮(MTX)保守治疗73例;B组腹腔镜输卵管切开取胚105例,其中腹腔镜单纯切开取胚34例(B1组),腹腔镜切开取胚术前给予MTX(25 mg每天两次×3天)预处理48例(B2组),腹腔镜切开取胚术中使用小剂量MTX(20 mg)输卵管系膜局部注射23例(B3组).结果:A组住院时间长,持续性宫外孕发生率较高,对改善治疗后正常妊娠无优势,并且有比较明显的药物不良反应;B组住院时间短,其中B1组有发生持续性宫外孕的风险,但风险较A组低(P＜0.05),B2及B3组均无持续性官外孕发生,无明显药物不良反应.结论:腹腔镜治疗异位妊娠有手术时间短、创伤小、术中出血少、术后恢复快的明显优势,对于有生育要求的女性,腹腔镜输卵管切开取胚术可能是更好的治疗方法.
-
淋巴细胞中POT1mRNA表达、端粒酶活性与2型糖尿病发生发展的关系
目的:研究淋巴细胞中端粒保护蛋白(POT1)的表达、端粒酶活性与2型糖尿病发生发展的关系.方法:以2型糖尿病患者162例为实验组,以健康体检者162例为对照组,RT-PCR检测POT1 mRNA的表达;TRAP-ELISA分析端粒酶活性.结果:实验组POT1 mRNA的表达和端粒酶活性均明显高于对照组.其中血糖控制尚可组和差组分别与对照组比较,POT1 mRNA表达和端粒酶活性均明显增高;按糖尿病性视网膜病变分期中各组POT1 mRNA表达和端粒酶活性与对照组比较存在显著性差异;且病程5～10年组、10年以上组与5年以下组相比,POT1 mRNA表达和端粒酶活性也存在显著性差异.结论:2型糖尿病淋巴细胞中POT1 mRNA的表达和端粒酶活性均明显增高,且与病情发展呈正相关.POT1和端粒酶的表达变化作为预后的评价依据有重要的临床意义.
-
鼻息肉患者血清抗EBV-LMP1抗体的检测及其临床意义
目的:检测鼻息肉患者血清抗Epstain-Barr病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP1)抗体并探讨其临床意义.方法:行功能性鼻内镜手术治疗的鼻息肉患者20例为实验组,健康自愿者20例为对照组.以谷胱甘肽-EBV-LMP1胞外区融合蛋白(GST-LMP1)为检测抗原,ELISA和Western blot检测健康自愿者和鼻息肉患者手术治疗前、治疗后第15、30、90、180天血清抗EBV-LMP1抗体.结果:ELISA检测鼻息肉患者和健康自愿者血清抗EBV-LMP1抗体水平分别为0.976±0.131、0.400±0.102,两组比较有统计学差异(P＜0.01).鼻息肉患者术前和术后第15、30、90、180天血清抗EBV-LMP1抗体水平分别为:0.976±0.131、0.921±0.138、0.899±0.168、0.576±0.144、0.521±0.117,术后第90、180天与术前比较,差异有统计学意义(P＜0.01);但是术后第15、30天与术前比较,无统计学差异.Western blot检测鼻息肉患者术前血清抗体水平与术后第15、30天比较无统计学差异;但是与术后第90、180天比较有统计学差异(P＜0.01).结论:鼻息肉和EBV感染有关,鼻息肉患者血清抗EBV-LMP1抗体水平随着疾病的有效治疗而下降,可作为评价临床疗效的有效指标.
-
血清/血浆microRNA检测方法探讨与建立
目的:观察实时荧光定量PCR技术检测血清/血浆microRNA表达水平的影响因素.方法:从样本来源、抗凝剂选择、样本储存时间等方面探讨实时荧光定量PCR技术检测血清/血浆miRNA表达的影响因素.结果:miRNA表达在血清和血浆中没有明显差异,样本储存时间对miRNA的表达没有明显影响,但使用肝素抗凝会明显抑制miRNA的表达.结论:成功建立了一套标准化的血清/血浆miRNA表达检测方法.
-
胃肠道肿瘤患者腹内脂肪脂联素的表达及临床意义
目的:探讨胃肠道肿瘤患者腹内脂肪组织中脂联素mRNA的表达及其临床意义.方法:临床收集39例胃肠道肿瘤手术患者(其中转移组21例,未转移组18例)和20例非肿瘤正常对照组腹内脂肪;提取脂肪组织中总RNA,采用real-time PCR技术检测脂联素的表达水平.结果:胃肠道肿瘤组脂肪组织脂联素水平较对照组降低,差异有统计学意义(P＜0.05),肿瘤转移组(3.85±1.41)较未转移组(4.90±1.06)脂联素表达水平降低,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论:脂肪组织脂联素表达水平降低与胃肠道肿瘤发生相关,为肿瘤治疗的新途径提供理论依据.
-
人胰腺癌耐药细胞株Patu8988/5-Fu的建立及其耐药机制的初步探讨
目的:建立人胰腺癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药细胞株Patu8988/5-Fu,观察其生物学特性并初步探讨其耐药机制.方法:采用5-Fu体外低浓度梯度递增联合大剂量冲击诱导法诱导培养人胰腺癌细胞株Patu8988,10个月建立获得性Patu8988/5-Fu多药耐药细胞株,光镜观察形态学变化;MTT法分析Patu8988/5-Fu耐药谱;绘制细胞生长曲线,计算倍增时间;流式细胞术分析亲子代细胞的细胞周期分布;RT-PCR检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及多药耐药基因(MDR1)的表达情况;罗丹明外排实验检测Patu8988/5-Fu细胞膜上的P-糖蛋白(P-gp)泵功能;Annexin V-FITC染色流式细胞术分析两种细胞株在受到5-Fu作用后的凋亡情况.结果:成功建立了人胰腺癌Patu8988/5-Fu多药耐药细胞株模型.与亲本细胞株Patu8988相比,Patu8988/5-Fu在形态学上发生了一系列变化;其对5-Fu、阿霉素(ADM)和吉西他滨(GEM)的耐药指数分别达到36.98(P＜0.01)、2.76(P＜0.05)和2.42(P＜0.01);与亲本细胞株相比生长速度变慢,倍增时间延长(P＜0.01);G0/G1期细胞分布比率略增多,而S期比率显著减少(P＜0.01),G2/M期比率明显增加(P＜0.05).HIF-1α(P＜0.01)、MDR1 mRNA(P＜0.05)的表达亦明显高于亲本细胞株Patu8988.罗丹明在耐药细胞株内的积聚量低于亲本细胞株(P＜0.01);在不同浓度梯度的5-Fu作用下Patu8988/5-Fu的凋亡率都较亲本细胞低(P＜0.01).结论:利用体外浓度梯度倍增法建立了稳定传代的人胰腺癌耐药细胞株Patu8988/5-Fu.HIF-1α介导的凋亡耐受和通过上调主要耐药基因MDR1的表达可能在不同程度上参与了Patu8988/5-Fu获得性耐药的产生.
-
二甲双胍对高糖状态下大鼠肾小球系膜细胞增殖的作用及机制
目的:探讨二甲双胍对高糖状态下大鼠肾小球系膜细胞增殖的作用以及可能的作用机制.方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1),①分为正常对照(NC)组(葡萄糖浓度5.6 mmol/L)、NC+二甲双胍组(葡萄糖浓度5.6 mmol/L+二甲双胍浓度200 mmol/L)、高糖(HG)组(葡萄糖浓度30 mmol/L)、HG+二甲双胍组(葡萄糖浓度30 mmol/L+二甲双胍,浓度分别是50、100、200、400 mmol/L),作用时间分别为6、12、24 h.MTT法检测各组HBZY-1细胞增殖的情况;②分为NC组、NC+二甲双胍组、HG组和HG+二甲双胍组(二甲双胍浓度200 mmol/L),作用时间12 h,用Western blot;法检测各组细胞内转化生长因子-β1(TGF-β1)、p-AMPK和AMPK蛋白表达的变化.结果:①与NC组相比,高糖刺激12 h后HBZY-1增殖明显,差异有显著性(P＜0.01);与HG组相比,HG加二甲双胍干预12 h后,随着二甲双胍的浓度逐渐增加,对HBZY-1增殖的抑制程度逐渐加大,差异均有显著性(P均＜0.01);NC+二甲双胍组与NC组相比,两组之间HBZY-1增殖差异没有显著性(P＞0.05);②与NC组相比,高糖刺激12 h后HBZY-1细胞TGF-β1的表达增高而p-AMPK表达水平明显下降,差异均具有显著性(P均＜0.01).与HG组相比,加用二甲双胍干预后,TGF-β1的表达水平有明显下降,p-AMPK表达水平有显著升高,差异均具有显著性(P均＜0.01).4组之间AMPK表达差异无显著性(P＞0.05).结论:高糖环境下HBZY-1增殖明显,二甲双胍可能通过增加肾小球系膜细胞p-AMPK的表达、降低TGF-β1的表达抑制HBZY-1的增殖.
-
不同脂肪酸饮食对大鼠肝脏XBP-1的影响
目的:探讨饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸饮食对大鼠肝脏X盒结合蛋白-1(XBP-1)的影响.方法:48只雄性Wistar大鼠随机分为4组:正常对照组(N组)、饱和脂肪酸饮食组(S组)、单不饱和脂肪酸饮食组(M组)、多不饱和脂肪酸饮食组(P组).正常对照组给基础饲料(脂肪占10.3%);饱和脂肪酸饮食组的饲料是在基础饲料中添加15%猪油;单不饱和脂肪酸饮食组的饲料是在基础饲料中添加15%茶油;多不饱和脂肪酸饮食组的饲料是在基础饲料中添加15%豆油(脂肪占35.4%).8周后4组各随机选8只大鼠行高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验,同时留取空腹状态血清测定血脂、胰岛素等指标.肝脏XBP-1蛋白表达分别用Western blot法和免疫组化法测定.结果:①实验第8周末,与N组相比,P、M、S组大鼠进食量有所减少(P＜0.05).除外进食量的影响,与N组相比,S组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)升高(P＜0.05),M、P组差异无统计学意义(P＞0.05);S、P组空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)升高,葡萄糖输注率(GIR)明显下降(P均＜0.05),但S、P两组间无统计学意义(P＞0.05);M组血清FINS、FBG有升高趋势,差异无统计学意义(P＞0.05),GIR明显下降(P＜0.05).与M组相比,S、P组GIR明显下降(P＜0.05).②XBP-1在细胞浆和细胞核均有表达,呈棕黄色或棕褐色染色.N、M组主要在细胞核表达,而P、S组在细胞浆和细胞核均有表达,但是4组间无统计学意义(P＞0.05);Western blot显示XBP-1蛋白相对表达的量分别是:M组(0.85±0.15)、N组(0.79±0.14)、P组(1.09±0.16)、S组(1.15±0.21).与N组比较,P、S组肝脏XBP-1蛋白表达升高,差异有统计学意义(P＜0.05);但P、S两组间及N、M两组间比较均无统计学意义(P＞0.05).结论:饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸饮食喂养所致大鼠肝脏中XBP-1蛋白表达明显高于正常对照和单不饱和脂肪酸饮食大鼠组,说明内质网应激可能参与了胰岛素抵抗的发生.
-
重组人血管内皮抑制素注射液联合放射对鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用
目的:观察分析重组人血管内皮抑制素注射液(Endostar,恩度)对鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤有无放射增敏作用.方法:以CNE1细胞株建立移植瘤裸鼠模型,每4天测量空白对照组(A组)、单纯恩度用药组(B组)、单纯放射组(C组)、恩度+放射联合组(D组)肿瘤的直径,计算肿瘤体积、预期值/观察值(E/O),称取瘤重,计算肿瘤抑瘤率.恩度为瘤周注射20mg/(kg·天),连续给予10天,照射为移植瘤局部单次20Gy电子线照射.取瘤体行免疫组化染色检测HIF-1α的表达情况,透射电镜观察肿瘤细胞的凋亡情况.结果:恩度联合放射对鼻咽癌皮下移植瘤的生长有显著的抑制作用,治疗4周后肿瘤平均体积D组[(765.697±78.725)mm3]明显低于B组[(2340.186±370.606)mm3]、C组[(1454.028±180.371)mm3]及A组[(3112.452±720.764)mm3],E/O值为1.43;D组瘤重[(0.523±0.180)g]低于B组[(1.294±0.346)g]、C组[(0.926±0.233)g]及A组[(1.849±0.596)g,P＜0.05];而D组抑瘤率为71.71%,明显高于C组(49.92%)和B组(30.07%),免疫组化染色显示使用恩度的治疗组HIF-1α的表达下降,透射电镜观察,与A、B、C组相比,D组肿瘤细胞数量减少,凋亡明显.结论:恩度对鼻咽癌裸鼠移植瘤有抑制作用和放射增敏作用.
-
CRP基因C+1444T多态性与中国苏皖地区汉族人群ACS的易感性无关
目的:探讨C反应蛋白(C-reactive portein,CRP)基因C+1444T多态性与急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)的易感性.方法:选择2003年11月～2008年5月住院的ACS患者443例(ACS组)和同期经冠脉造影排除冠心病者285例(对照组),采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RELP)方法检测CRP基因C+1444T多态性.结果:ACS组的CC、CT和TT基因型以及C等位基因频率分布与对照组无显著性差异(83.7%vs 86.7%、14.4% vs 12.3%、1.8% vs 1.1%和91.0% vs 92.8%,P值分别为0.292、0.439、0.540和0.243).调整年龄、性别、吸烟、收缩压、舒张压、血糖和血脂等多因素后采用多元Logistic回归分析显示,CRP基因C+1444T多态性与ACS的发生仍无显著性关联(P＞0.05).结论:在中国苏皖地区汉族人群中,CRP基因C+1444T多态性与ACS的易感性无显著相关性.
-
江苏汉族人群HLA-A、B、DRB1高分辨基因多态性和单体型研究
目的:分析中国江苏地区汉族人群中造血干细胞捐献志愿者人类白细胞抗原(HLA)-A、B、DRB1在高分辨基因分型水平上的基因多态性和单体型的分布特征.方法:采用聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸探针(PCR-SSOP)基因分型以及基因序列分型(sequence-based typing,SBT)技术,对中国造血干细胞捐献者资料库江苏分库644例无关供者的HLA-A、B、DRB1位点上的等位基因作高分辨分型,直接计数法计算等位基因频率.应用Arlequin 3.01软件,以大似然法分析单体型频率.结果:在644例无关捐献志愿者中共检出高分辨HLA-A基因29个,HLA-B基因60个,HLA-DRB1基因36个.A位点频率高的是A*1101(17.86%),B位点频率高的是B*4601(9.55%),DRB1位点频率高的是DRB1*0901(15.76%).频率高的HLAA、B、DRB1单体型是A*3001-B*1302-DRB1*0701(5.98%),频率高的HLA-A、B单体型是A*3001-B*1302(6.68%),频率高的HLA-B、DRB1单体型是B*1302-DRB1*0701(7.22%),频率高的HLA-A、DRB1单体型是A*3001-DRB1*0701(6.06%).结论:本资料从高分辨水平分析了江苏地区汉族人群HLA的分布状况,对指导临床寻找HLA匹配的无关造血干细胞供者、HLA与疾病相关研究和我国人群群体遗传学研究等有重要意义.
-
大鼠切口痛模型中氯化锂对瑞芬太尼诱发痛觉过敏的影响
目的:在大鼠切口痛模型中,观察氯化锂对瑞芬太尼引起的痛觉过敏的影响.方法:42只SD雄性大鼠,随机分成7组:对照组(C组);切口痛组(Ⅰ组);瑞芬太尼组(R组);切口痛+氯化锂组(IL组);切口痛+瑞芬太尼+低浓度氯化锂组(RL1组);切口痛+瑞芬太尼+中等浓度氯化锂组(RL2组);切口痛+瑞芬太尼+高浓度氯化锂组(RL3组).每组6只.IL组给予氯化锂36 mg/kg体重;RL1、RL2、RL3组分别给予氯化锂9、18、36 mg/kg体重,均在七氟醚吸入前10 min腹腔注射,体积均为0.4 ml,而C、I、R组给予生理盐水0.4 ml.R组和各RL组均在七氟醚吸入后15 min在皮下以0.8 ml/h的速度泵人瑞芬太尼40 μg/kg体重,C、I、IL组泵生理盐水.除C组外均做切口痛模型.各组均测定并计算出术前24 h(T0)、术后6 h(T1)、24 h(T2)、48 h(T3)大鼠右后爪的机械缩足反射阈值(PMW)及热缩足反射潜伏期(PWTL).结果:在T1、T2、T3时点,与I组相比,R组的PMW和PWTL明显降低(P＜0.05).与Ⅰ组相比,IL组能缓解PMW和PWTL的降低(P＜0.05).与R组比,各RL组能明显缓解PMW和PWTL的降低(P＜0.05).结论:在大鼠切口痛模型中,瑞芬太尼可以诱发切口周围组织的痛觉过敏;氯化锂可以提高切口痛的阈值并预防瑞芬太尼诱发的痛觉过敏.
-
结缔组织生长因子ELISA定量检测方法的建立及初步应用
目的:建立定量检测人结缔组织生长因子(CTGF)双抗体夹心ELISA方法,并应用此方法检测人血清中CTGF含量.方法:利用简易过碘酸钠法对纯化的抗CTGF单克隆抗体(mAbs)进行HRP标记后,行抗体配对实验;通过方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体的适工作浓度;以纯化的CTGF抗原为标准品建立标准曲线;以重复性、灵敏性和回收率实验评价ELISA方法.用该方法初步对正常人、HBsAg阳性非肝癌患者及HBsAg阳性肝癌患者血清中的CTGF水平进行检测.结果:佳配对组合为抗CTGF mAb 3H5和HRP标记的抗CTGF mAb 4C5,适工作浓度分别为40μg/ml和1/4 000,该方法的平均批内、批间变异系数分别为4.59%和5.70%,灵敏度达1.46 ng/ml,平均回收率为(98.73±4.84)%.用本方法测定35例HBsAg阳性肝癌患者、76例HBsAg阳性非肝癌患者和40例正常人血清CTGF水平,与正常对照组[2.65(2.16～3.18)ng/ml]比较,HBsAg阳性非肝癌组[5.53(2.74～8.23)ng/ml]和HBsAg阳性肝癌组[8.27(4.81±13.65)ng/ml]血清CTGF水平均显著升高(P＜0.001);且HBsAg阳性肝癌组与HBsAg阳性非肝癌组比较也明显升高(P=0.014).结论:建立了一种可用于检测人CTGF的双抗体夹心ELISA方法.初步应用结果表明CTGF水平在HBsAg阳性肝癌患者血清中较HBsAg阳性非肝癌患者、正常人异常升高,提示CTGF分子有望成为HBsAg阳性肝癌早期预警标志物.
-
电针对性发育期雄性大鼠睾酮和精子发生影响的实验观察
目的:观察电针(EA)对不同发育阶段正常大鼠血清睾酮(T)和精子发生的效应.方法:将109只SD雄大鼠按不同年龄段分为幼年段(JG)、青春发育早期段(EPG)、青春发育后期段(LPG)、成年段(AG);每个年龄段随机分为穴位组(EWA)、非穴位组(ENA)、非特异刺激组(IC)和自然对照组(NC).EWA组选取"百会"、"太溪"、"命门"、"肾俞"穴.3Hz的EA分别刺激EWA组与ENA组大鼠10天,每天20 min.10天后,测定所有大鼠血清T值和精子计数.结果:持续电针后,EPG、LPG与AG中的大鼠血清T值均显著下降(P＜0.05),LPG与AG中的大鼠精子数量也明显减少(P＜0.05).结论:持续EA刺激可减少性发育后雄性大鼠血清T的含量和精子数量.
-
miR-146a基因多态与卵巢癌易感性的关系:病例-对照研究
目的:探讨miR-146a G＞C(rs2910164)基因多态与江苏人群卵巢癌遗传易感性的关系.方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测131例卵巢癌患者和227例年龄相匹配非肿瘤者miR-146a G＞C多态的频率和分布,比较不同基因型携带者患卵巢癌的危险性;通过分层分析探讨年龄、初潮年龄、产次、流产数及绝经史对罹患卵巢癌的影响.结果:病例组和对照组间miR-146a G＞C各基因型频率差异无统计学意义(P＞0.05),分层分析结果显示,在不同年龄、初潮年龄、产次、流产数及是否绝经特征分层中,病例组与对照组各基因型频率差异仍无统计学意义.结论:本研究未发现miR-146aG＞C基因多态与罹患卵巢癌危险性存在统计学关联.
-
葡萄柚漱口液对变异链球菌抗菌机制的研究
目的:研究葡萄柚漱口液对变异链球菌的抗菌活性,初步探讨其抗菌机制.方法:采用液体稀释法测定葡萄柚漱口液对变异链球菌的小抑菌浓度(MIC)和小杀菌浓度(MBC);同时扫描电镜下观察葡萄柚漱口液对变异链球菌细胞壁的影响.结果:葡萄柚漱口液对变异链球菌的MIC为46.875 mg/L,MBC为93.75 mg/L.扫描电镜观察显示,葡萄柚漱口液处理后的变异链球菌出现细胞壁破裂,内容物溢出.结论:葡萄柚漱口液对体外培养的变异链球菌有明显的抑制和杀灭作用,其抑制机制可能与葡萄柚提取物破坏细胞壁结构的完整性有关.
-
新型KATP开放剂埃他卡林对原代培养人肺动脉平滑肌细胞PCNAmRNA表达的影响
目的:观察新型ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂埃他卡林(IPT)对原代培养人肺动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA表达的影响.方法:分离3～4级人肺小动脉,按照组织贴块法原代培养人肺动脉平滑肌细胞,分成对照组、缺氧组、缺氧+埃他卡林或吡那地尔组及缺氧+埃他卡林或吡那地尔+格列本脲组,应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RTPCR)技术检测细胞PCNA mRNA表达.结果:缺氧使人肺动脉平滑肌细胞PCNA mRNA表达增加(3.90+0.24)倍,与对照组比较差异有显著性(P＜0.01);相同条件下,在缺氧的同时,分别在培养液中加入IPT 10-7、10-6、10-5mol/L,PCNA mRNA表达分别下降(26.00±2.01)%、(55.33±4.04)%、(79.00±1.00)%,与缺氧组比较差异均有显著性(P均＜0.01);加入IPT 10-5mol/L前30 min,预先加入格列本脲(GLI)10-5 mol/L,IPT的抑制作用抵消,与缺氧+IPT 10-5 mol/L组比较差异有显著性(P＜0.01).结论:IPT通过激活细胞KATP通道,浓度依赖性地抑制缺氧时原代培养人肺动脉平滑肌细胞PCNA mRNA表达的增加.
-
SKI-Ⅱ促胃癌SGC7901细胞凋亡的实验研究
目的:研究鞘氨醇激酶(sphingosine kinase,SphK)抑制剂SKI-Ⅱ对人胃癌SGC7901细胞凋亡的影响,并探讨其具体作用机制.方法:常规培养人胃癌SGC7901细胞,SKI-Ⅱ单用或联合顺铂(DDP)干预,流式细胞术检测细胞凋亡率;电镜下观察用药后细胞超微结构的改变;免疫细胞化学、Western blot检测药物作用后细胞中Sphk1、NF-κB、Bcl-2、Bax的表达.Pearson相关分析检测Sphk1与NF-κB、NF-κB与Bcl-2表达的相关性.结果:SKI-Ⅱ单用或联合DDP干预48 h后,SKI-Ⅱ 5μmol/L组、SKI-Ⅱ 10 μmol/L组、DDP 2.5mg/L组、DDP 2.5 mg/L+SKI-Ⅱ 5 μmol/L组和DDP 2.5 mg/L+SKI-Ⅱ10μmol/L组细胞凋亡率分别为(40.39±1.06)%、(45.58±0.75)%、(47.27±1.13)%、(53.64±1.11)%和(66.98±2.32)%.与阴性对照组比,差异均有统计学意义(P＜0.05);电镜下观察到SGC7901细胞胞浆内出现凋亡小体;SGC7901细胞中Bax阳性表达率增加,Sphk1、NF-κB、Bcl-2阳性表达率减少.Sphk1与NF-κB、NF-κB和Bcl-2的表达呈正相关.结论:SKI-Ⅱ可以通过抑制细胞中Sphk1的表达从而下调NF-κB的表达,并升高Bax/Bcl-2的比例诱导人胃癌SGC7901细胞的凋亡.
-
IL23R基因多态与食管癌遗传易感性的关联研究
目的:探讨白细胞介素23受体(IL23R)基因多态与中国人群食管癌易感性的关系.方法:采用病例-对照研究设计,收集经病理组织学确诊的食管癌新发病例共1 045例,性别、年龄等人口学特征与病例频数匹配的健康对照1047例.选取IL23R基因启动子区域SNP rs6682925 T＞C以及第二外显子区域SNP rs1884444 T＞G为研究位点.应用TaqMan基因分型技术进行基因型检测并进行相关统计分析,比较不同基因型与食管癌发病风险的关系.结果:在调整年龄、性别、吸烟、饮酒因素后,携带IL23R rs1884444TG/GG基因型的个体发生食管癌的风险较携带IL23R rs1884444TT基因型者增加了20%(校正OR=1.20,95%CI=1.01～1.43),携带rs6682925 TC/CC基因型者发生食管癌的风险较携带T r基因型者增加17%(校正OR=1.17,95%CI=0.98～1.40).分层分析结果显示rs1884444风险等位基因G和rs6682925风险等位基因C的危险作用在年轻者(≤60岁)和不饮酒者中尤为明显.结论:IL23R rs1884444和rs6682925多态与中国汉族人群食管癌遗传易感性有关.
-
异种骨髓间充质干细胞胸腺修饰诱导免疫耐受的可行性研究
目的:确定骨髓间充质干细胞(BMSCs)在异种胸腺内的演化过程,为进一步进行BMSCs胸腺修饰诱导异种免疫耐受的研究提供可行性依据.方法:取豚鼠BMSCs经分离纯化体外扩增至第3代,并行胎牛血清-Fe2O3和4,6-二咪基-4-联苯基吲哚(DAPI)标记,标记后的豚鼠BMSCs行胸腺注射,7天后进行切片普鲁士蓝-中性红染色和荧光显微镜观察豚鼠BMSCs演变过程.结果:BMSCs移植至异种胸腺中能够生存,并能转化为多种组织细胞成分,即仍具有多向分化能力.结论:异种BMSCs胸腺修饰在诱导异种受体移植免疫耐受方面将是可行的.
-
大型流行病学调查资料的数据管理和质量控制
目的:以1项大型流行病学调查研究为例,探索该类研究资料的数据管理和质量控制.方法:从制度建立、人员培训、现场组织、实验室和数据录入等一系列环节进行质量控制,并通过数据核查评价数据质量.结果:将核查输出的异常数据与原始表格核对修正部分异常数据后,随机抽取的3个项目点的人次错误率都在10%左右,项目错误率都在0.5%以内.结论:医学科学研究中,影响数据质量的因素是多方面的,数据管理和质量控制虽然需要大量人力和物力,但根据实际制定合理的数据管理和质量控制方案是保证数据质量的关键.
-
泰兴市2005～2009年病毒性肝炎报告质量分析
目的:通过分析江苏省泰兴市病毒性肝炎报告病例的有关特征,分析现有的病毒性肝炎诊断、报告中存在的问题,为规范病毒性肝炎的诊断和报告提供依据.方法:收集2005～2009年泰兴市通过国家疾病监测信息报告管理系统报告的所有病毒性肝炎病例有关病例临床分类、实验室分型,以及分类、分型证据等数据,应用Excel 2007和SPSS 13.0软件对所收集的数据进行整理和分析.结果:泰兴市2005～2009年病毒性肝炎报告发病率在31.01/10万～46.63/10万之间;成人中的慢性乙型肝炎报告发病率在不同年间有明显波动,乙肝未分类报告发病率在6.25/10万～13.40/10万之间,占全部乙型肝炎报告病例的31.0%～70.2%.甲型肝炎总体呈缓慢下降趋势(趋势x2=6.10,P＜0.05),而丙型肝炎呈明显上升趋势(趋势x2=82.04,P＜0.01).未分型肝炎在病毒性肝炎报告病例中所占比例在16.6%～23.0%之间.报告病例的复核诊断显示,甲肝和戊肝的病原分型诊断符合率为66.7%(12/18);乙肝急、慢性分类符合率为51.35%(19/37);报告的丙肝病例主要为无症状抗体阳性人群占68.42%(13/19);报告的未分型病例中有53.97%(34/63)可进行病原分型.结论:泰兴市5年间慢性乙肝报告发病率的变化缺乏合理性,提示医疗机构执行的病毒性肝炎报告标准不准确;病毒性肝炎分型、分类诊断的准确性也有待进一步提高.
-
2005～2009年江苏省艾滋病患者抗病毒治疗前流行病学特征分析
目的:了解江苏省艾滋病免费抗病毒治疗患者入组时的流行病学特征,以探讨对治疗可能存在的影响因素.方法:收集江苏省2005～2009年5年内所有接受抗病毒治疗艾滋病患者入组治疗时的基本情况表,建立Excel数据库并用SPSS17.0软件分析其流行病学特征.结果:江苏省累计治疗732例,新增治疗人数逐年上升.95.5%为本省籍,男女性别比2.1∶1,平均年龄41.9岁,已婚或同居67.3%.发现来源主要为由医院被动发现,占48.36%,感染途径主要为异性性传播和同性性传播,两者合计占67.76%,且同性传播比例有上升趋势.90%治疗前有发热、腹泻等症状,治疗时CD4+T细胞平均为111.1个/μl.开始治疗时间与确证时间间隔天数中位数为116天(P25=40天,P75=410天).结论:江苏省艾滋病患者开始抗病毒治疗时机较晚,患者发现晚是主要原因,感染者早发现能力及模式亟待加强.
-
江苏省一般人群乙型肝炎表面抗原阳性率与乙肝疫苗免疫的关系
目的:调查分析江苏省3个县一般人群乙型肝炎表面抗原阳性率和乙型肝炎疫苗免疫接种史的关系,为采取针对性干预措施,提高乙型肝炎综合防治水平提供依据.方法:采用分地区整群随机抽样方法确定凋查对象,开展问卷调查,采集静脉血,检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg).结果:张家港、丹阳和泰兴的HBsAg阳性率按全国人口构成标化后分别为4.61%、6.88%和10.06%,18岁以上计划免疫前出生人群HBsAg阳性率均显著高于18岁以下计划免疫后出生人群.张家港、丹阳和泰兴3个县中18岁以上年龄组接种乙型肝炎疫苗人群的HBsAg阳性率均明显低于未接种乙肝疫苗人群.结论:张家港、丹阳和泰兴的乙型肝炎疫苗纳入儿童计划免疫已显成效,儿童组HBsAg阳性率明显降低,成人乙型肝炎疫苗接种也可获得明显效果,应提高成人疫苗接种率,以期降低该人群HBsAg阳性率.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
