中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子: 1.38
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 2095-4344
- 国内刊号: 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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脂肪间充质干细胞移植治疗1型糖尿病模型大鼠的作用
背景:干细胞移植是1型糖尿病比较有前景的治疗方法,脂肪间充质干细胞是继骨髓间充质干细胞后的又一研究热点。
目的:观察脂肪间充质干细胞移植对1型糖尿病大鼠的治疗作用。
方法:将45只SD大鼠随机分为正常组、模型组和细胞移植组,后2组采用链脲菌素腹腔注射建立1型糖尿病模型。造模后7 d,正常组腹腔静脉注射生理盐水,模型组腹腔静脉注射无血清的DMEM培养液,细胞移植组腹腔静脉注射脂肪间充质干细胞悬液。移植后2周,监测各组大鼠体质量、血糖水平,ELISA法检测各组大鼠胰岛素分泌量,RT-PCR检测胰腺组织PDX-1 mRNA的表达。
结果与结论:①移植前细胞移植组与模型组的体质量均低于正常组,移植后2周细胞移植组大鼠体质量逐渐增加,而模型组的体质量持续下降;②与正常组比较,模型组大鼠空腹血糖维持在较高水平(P<0.05),与模型组相比,细胞移植组大鼠空腹血糖水平显著下降(P<0.05);③与正常组比较,模型组胰岛素水平明显降低(P<0.05),与模型组比较,细胞移植组胰岛素水平则显著增加(P<0.05);④正常组胰腺组织PDX-1 mRNA表达高,模型组低,各组间比较差异有显著性意义(P<0.05);⑤结果表明,脂肪间充质干细胞移植促进胰岛组织PDX-1表达,改善了大鼠的高血糖状态。 -
糖原合成酶激酶3β过表达心肌干细胞移植治疗心肌梗死
背景:糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)与细胞的各项生命活动之间存在密切的联系,关于其在心肌干细胞向心肌细胞分化中的作用机制和效果尚不清楚。
目的:探讨GSK-3β过表达心肌干细胞移植治疗心肌梗死大鼠的效果。
方法:分离培养乳鼠心肌干细胞,使用慢病毒感染心肌干细胞使其过表达GSK-3β或对照基因LacZ。30只SD大鼠制备心肌梗死模型随机分为3组:GSK-3β组、LacZ组、PBS组。模型制备后6周,于梗死心肌内局部注射过表达GSK-3β、LacZ心肌干细胞以及等量PBS。移植后4周,检测心功能及心室胶原生成情况。
结果与结论:①GSK-3β组的左室射血分数显著大于其他两组(P<0.05),左室舒张末内径显著小于其他两组(P<0.05);②GSK-3β组羟脯氨酸含量、Ⅰ型胶原mRNA、Ⅲ型胶原mRNA表达显著小于其他两组(P<0.05);③经Masson染色发现,GSK-3β组的心室肌蓝染的胶原含量明显低于LacZ组;④GSK-3β组的心肌梗死范围显著小于其他两组(P<0.05);⑤实验结果表明,心肌干细胞过表达GSK-3β能提高心肌干细胞移植治疗效果。 -
三七皂苷联合骨髓间充质干细胞移植促进急性脑损伤的恢复
背景:研究证明,三七皂苷治疗脑缺血损伤有着广泛的药理基础,骨髓间充质干细胞移植治疗脑损伤动物模型的实验研究也已广泛开展,但二者联用鲜有报道。
目的:观察三七皂苷联合骨髓间充质干细胞移植促进大鼠急性脑损伤的恢复作用。
方法:采用液压冲击法建立SD大鼠脑损伤模型,将60只SD大鼠随机分为脑损伤组、骨髓间充质干细胞移植组及骨髓间充质干细胞+三七皂苷联合治疗组。治疗后采用Bederson神经缺损评分评估神经功能恢复情况,Western blot法检测脑组织中神经生长因子蛋白表达变化,苏木精-伊红染色观察脑组织形态学变化,TUNEL法检测皮质神经元凋亡情况。
结果与结论:①Bederson评分:脑损伤组>骨髓间充质干细胞移植组>联合治疗组,各组间比较差异有显著性意义(P<0.05);②神经生长因子蛋白表达:联合治疗组>骨髓间充质干细胞移植组>脑损伤组,各组间比较差异有显著性意义(P<0.05);③与脑损伤组及骨髓间充质干细胞移植组比较,联合治疗组脑组织炎症浸润细胞明显减少,水肿程度明显减轻;④与脑损伤组及骨髓间充质干细胞移植组比较,联合治疗组神经元凋亡细胞显著减少;⑤结果表明,三七皂苷联合骨髓间充质干细胞移植能够促进大鼠急性脑损伤后的神经功能恢复,其可能与促进神经生长因子表达及减少神经元细胞凋亡有关。 -
骨髓间充质干细胞移植对胃癌模型大鼠肿瘤细胞的影响
背景:近年来研究发现,骨髓间充质干细胞对肿瘤组织具有靶向性迁移的特性。
目的:探讨骨髓间充质干细胞移植对大鼠胃癌细胞趋向性及增殖分化的影响。
方法:SD大鼠皮下注射胃癌细胞株SGC-7901建立胃癌模型,建模成功后细胞移植组腹腔注射荧光标记培养的骨髓间充质干细胞(1×107个/只),移植后10 d采用荧光DiI标记检测骨髓间充质干细胞的靶向性,荧光实时PCR和Western blot检测胃癌组织中细胞周期素D2 mRNA和蛋白的表达,原位末端标记法染色观察胃癌细胞凋亡情况。
结果与结论:①骨髓间充质干细胞成功靶向到大鼠胃癌组织;②细胞移植组的细胞周期素D2 mRNA及其蛋白的表达水平均显著高于模型组(P<0.05);③与模型组比较,细胞移植组阳性凋亡细胞明显减少(P<0.05);④结果表明,骨髓间充质干细胞具有靶向迁移到胃癌组织的能力,骨髓间充质干细胞移植可促进胃癌肿瘤细胞的增殖。 -
舒芬太尼联合脐血间充质干细胞移植对梗死心肌的保护作用
背景:药物预处理的延迟性保护作用成为近年来预处理领域的研究热点,舒芬太尼是一种非选择性阿片受体激动剂,有明显的心肌保护作用。
目的:探讨舒芬太尼预处理联合脐血间充质干细胞移植对心肌梗死后损伤心肌的保护作用。
方法:采用结扎左冠状动脉前降支的方式建立大鼠心肌缺血再灌注模型(缺血30 min,再灌注180 min),建模后随机分为缺血再灌注组,脐血间充质干细胞组,舒芬太尼+脐血间充质干细胞组,每组30只。缺血再灌注组于缺血再灌注前5 min经腹腔静脉注射1 mL生理盐水,脐血间充质干细胞组经腹腔静脉注射脐血间充质干细胞悬液1 mL,舒芬太尼+脐血间充质干细胞组在此基础上于冠脉阻断前10 min经腹腔静脉注射舒芬太尼10μg/kg,治疗后2周进行相关指标检测。
结果与结论:①心肌梗死面积:舒芬太尼+脐血间充质干细胞组<脐血间充质干细胞组<缺血再灌注组,差异有显著性意义(P<0.05);②与缺血再灌注组比较,脐血间充质干细胞组血清肌酸激酶、乳酸脱氢酶及肌钙蛋白Ⅰ水平降低,一氧化氮水平增加,与脐血间充质干细胞组比较,舒芬太尼+脐血间充质干细胞组血清肌酸激酶、乳酸脱氢酶及肌钙蛋白I水平明显降低,一氧化氮水平增加更明显,差异有显著性意义(P<0.05);③Caspase-3蛋白表达:舒芬太尼+脐血间充质干细胞组<脐血间充质干细胞组<缺血再灌注组,差异有显著性意义(P<0.05);④血流动力学指标:与缺血再灌注组比较,脐血间充质干细胞组、舒芬太尼+脐血间充质干细胞组左心室舒张压升高,左心室舒张末压降低,差异有显著性意义(P<0.05);⑤与缺血再灌注组比较,脐血间充质干细胞组心肌组织病理学损伤程度减轻,舒芬太尼+脐血间充质干细胞组明显减轻;⑥结果表明,舒芬太尼预处理联合脐血间充质干细胞移植能够减轻大鼠心肌梗死程度,保护损伤的心肌。 -
促红细胞生成素基因修饰内皮祖细胞移植治疗下肢动脉闭塞:磁标记MR成像评价
背景:促红细胞生成素及内皮祖细胞移植均对下肢动脉闭塞有一定的治疗作用。
目的:探讨超顺磁氧化铁纳米颗粒(super paramagnetic iron oxide,SPIO)标记的内皮祖细胞体外促红细胞生成素基因修饰效果及体外磁共振成像的可行性。
方法:将对数生长期的大鼠骨髓来源内皮祖细胞分4组培养,内皮祖细胞组,SPIO标记转染组将pcDNA3-EPO 重组质粒并转染至内皮祖细胞,随后进行SPIO标记;SPIO标记空载病毒组将空质粒转染至内皮祖细胞,随后进行SPIO标记;SPIO标记内皮祖细胞组直接进行SPIO标记。采用4.7 T MR成像SPIO标记的内皮祖细胞;检测4组细胞增殖、细胞周期分布及促红细胞生成素蛋白表达。
结果与结论:①MR成像:T1WI、T2WI、T2*WI序列均见细胞信号降低,随着细胞数目增多,信号降低逐渐明显;相同数量级细胞,T1WI信号降低弱,T2*WI信号降低明显;T1WI、T2WI、T2*WI所能检测到的小细胞数分别为2×104、1×104、0.5×104;②细胞增殖、细胞周期分布:3组标记内皮祖细胞增殖、细胞周期分布与内皮祖细胞组比较差异均无显著性意义;③促红细胞生成素蛋白表达:仅SPIO标记转染组可见促红细胞生成素蛋白表达;④结果表明:SPIO标记的内皮祖细胞体外促红细胞生成素基因修饰后对细胞增殖、细胞周期无影响,4.7 T MR能够在体外对SPIO标记的促红细胞生成素基因修饰内皮祖细胞成像。 -
脐血间充质干细胞移植在卵巢癌化疗损伤中的作用
背景:研究证实,脐血间充质干细胞对多种损伤细胞有修复功能。
目的:探讨脐血间充质干细胞移植在卵巢癌化疗性损伤中的作用。
方法:健康级成年雌性Wistar大鼠60只,随机分为正常对照组,损伤组及治疗组,每组20只。对照组不做任何处理,损伤组及治疗组建立大鼠卵巢癌化疗性损伤模型。模型成功后对照组尾静脉注射生理盐水,损伤组注射紫杉醇,治疗组在损伤组基础上给予脐血间充质干细胞移植。移植后2周,应用RT-PCR检测卵巢癌组织XAF1、Survivin mRNA的表达,Western blot检测卵巢癌组织中XAF1、Survivin蛋白的表达,TUNEL法检测卵巢癌细胞凋亡情况。
结果与结论:①与损伤组比较,治疗组肿瘤组织XAF1 mRNA和蛋白表达显著上调,凋亡抑制蛋白Survivin mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.05);②损伤组卵巢组织结构较对照组明显破坏,有大面积的出血坏死区域,治疗组损伤程度较损伤组明显减轻;③与损伤组比较,治疗组卵巢癌细胞凋亡率明显升高(P<0.05);④结果表明,脐血间充质干细胞移植可以促进卵巢癌化疗性损伤大鼠卵巢组织的修复, XAF1、Survivin在肿瘤新生血管形成及卵巢癌细胞凋亡过程中发挥了作用。 -
脂肪间充质干细胞移植治疗慢性阻塞性肺疾病
背景:慢性阻塞性肺疾病是一种具有气流受限特征的以炎症为核心的慢性呼吸系统疾病。
目的:探讨脂肪间充质干细胞对慢性阻塞性肺疾病大鼠的治疗作用。
方法:健康雄性SD大鼠60只随机分成3组(n=20),治疗组和模型组大鼠通过烟熏及气管内注入脂多糖的方法建立慢性阻塞性肺疾病模型,对照组大鼠不进行任何处理。造模后治疗组大鼠经尾静脉注射CM-Dil 标记的脂肪间充质干细胞,模型组及对照组给予等量生理盐水,移植后14 d,检测大鼠肺通气功能、炎症因子水平和肺组织病理学变化。
结果与结论:①与对照组比较,模型组和治疗组肺功能明显下降,治疗组肺功能较模型组明显改善(P<0.05);②治疗组肺泡灌洗液中白细胞总数、巨噬细胞数及中性粒细胞数均显著低于模型组(P<0.05);③治疗组肺泡灌洗液中白细胞介素8、肿瘤坏死因子α、C-反应蛋白水平低于模型组(P<0.05);④与模型组相比,治疗组血清中超氧化物歧化酶活性显著增高、丙二醛水平显著降低(P<0.05);⑤治疗组较模型组肺气肿样改变减轻;⑥CM-Dil 标记的脂肪间充质干细胞能够归巢到慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织并存活;⑦结果表明,脂肪间充质干细胞移植能改善慢性阻塞性肺疾病大鼠肺功能,减轻炎症反应,具有一定治疗作用。 -
白血病患儿骨髓间充质干细胞与白血病细胞株K562/AO2生长增殖及凋亡的相关性
背景:骨髓微环境是白血病的发病根源,微环境的改变对白血病细胞的生物学行为和性能有一定的影响。
目的:探讨白血病患儿骨髓间充质干细胞对K562/AO2细胞生长增殖及凋亡的影响。
方法:体外环境下进行K562/AO2细胞单独悬浮培养,K562/AO2细胞与白血病患儿骨髓间充质干细胞共培养。锥虫蓝染色计数活细胞数,描绘两组细胞生长曲线,PI单染法检测细胞周期,Annexin V/PI法检测细胞凋亡情况。
结果与结论:①单独培养组前3d细胞生长未出现明显改变,第4天开始细胞增殖速度明显加快,并于培养第6天达到高峰。共培养组整体增殖曲线较为平缓,无明显的增殖高峰;②单独培养组的G0-G1期细胞比例显著低于共培养组,S期细胞比例显著高于共培养组(P<0.05)。两组G2-M期细胞比例差异无显著性意义;③单独培养组的细胞凋亡数显著高于共培养组(P<0.05);④结果表明,与白血病患儿骨髓间充质干细胞共培养后K562/AO2细胞生长受到抑制,细胞周期阻滞在G0-G1期,且会对K562/AO2细胞凋亡产生抵抗作用。 -
细胞传代对骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化的影响
背景:体外持续细胞传代是否影响骨髓间充质干细胞分化为神经干细胞的机制尚未明确。
目的:观察细胞传代对骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化的影响。
方法:采用全骨髓贴壁法培养大鼠骨髓间充质干细胞,取传代至第3,6,9,12代的骨髓间充质干细胞,在无血清神经干细胞培养基中诱导培养7,14 d,观察细胞生物学特征,通过流式细胞仪检测Nestin的表达情况观察骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化能力,再进一步诱导分化,通过免疫组织化学荧光技术检测神经烯醇化酶及胶质酸性蛋白表达,以鉴定神经干细胞的多向分化能力。
结果与结论:各组骨髓间充质干细胞加入诱导剂后均分化成神经干细胞,Nestin表达阳性,各组细胞分化的比例差异有显著性意义(P<0.05),其中第6代骨髓间充质干细胞分化能力强,诱导7 d及14 d Nestin阳性细胞的比例分别为(93.7±2.3)%,(96.2±1.8)%,第6,9代明显较第3,12代骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化的比例高,且所得神经干细胞球经贴壁分化后可表达神经烯醇化酶、胶质酸性蛋白。结果表明,骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化与细胞传代有关,过早或过晚均不利于分化。 -
SDF-1/CXCR4信号通路参与骨形态发生蛋白2在诱导骨髓间充质干细胞迁移的作用
背景:SDF-1/CXCR-4生物轴对多种细胞的趋化能力,使其在多种组织的再生过程中发挥着重要的调控作用,但其是否参与介导骨形态发生蛋白2在骨修复过程中骨髓间充质干细胞归巢目前尚不清楚。
目的:探索SDF-1/CXCR4信号通路在骨形态发生蛋白2诱导小鼠骨髓间充质干细胞迁移中的作用。
方法:取对数生长期骨髓间充质干细胞,分别以0,50,100,200μg/L SDF-1,0,50,100,200μg/L骨形态发生蛋白2以及50μg/L AMD3100进行干预,诱导细胞迁移并Transwell检测。
结果与结论:骨髓间充质干细胞的迁移数量与SDF-1和骨形态发生蛋白2密切相关,并且与SDF-1和骨形态发生蛋白2的浓度成正比,当联合使用SDF-1和骨形态发生蛋白2时,细胞迁移数较单独使用时增多,当质量浓度为200μg/L时,骨髓间充质干细胞迁移数量多,并呈“巢穴”样分布。阻断剂AMD3100明显抑制骨形态发生蛋白2诱导骨髓间充质干细胞迁移,但当增加骨形态发生蛋白2浓度达到一定量时,骨髓间充质干细胞迁移数随着骨形态发生蛋白2浓度的增加而增多。提示SDF-1/CXCR4信号通路参与骨形态发生蛋白2诱导骨髓间充质干细胞的迁移。 -
果糖和二硫苏糖醇对骨髓间充质干细胞冻存后活性及多能性的影响
背景:冻存是保证干细胞临床应用的关键步骤之一,但现有冻存技术常导致细胞活性降低、多能性丧失及分化能力下降。
目的:探究果糖及二硫苏糖醇是否有助于维持冻存后骨髓间充质干细胞多能性及成骨分化潜能。
方法:分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,在细胞冻存前分别用果糖(200μmol/L),二硫苏糖醇(500μmol/L)及果糖(200μmol/L)+二硫苏糖醇(500μmol/L)预处理1 h。冻存6个月后,复苏细胞并用倒置显微镜观察细胞形态,MTT实验检测细胞活性,定量PCR检测相关干性基因(Nanog,Oct4及Sox2)的表达,碱性磷酸酶活性测试及茜素红染色检测复苏骨髓间充质干细胞成骨分化能力。
结果与结论:①复苏后各组细胞在形态上无明显差别;②果糖预处理及联合预处理有助于骨髓间充质干细胞活性维持;③二硫苏糖醇预处理可显著促进骨髓间充质干细胞多能性相关基因Nanog及Sox2的表达;④果糖、二硫苏糖醇及联合预处理皆有助于维持骨髓间充质干细胞成骨分化潜能,但以二硫苏糖醇及联合预处理组效果佳;⑤结果表明,果糖预处理有助于维持冻存骨髓间充质干细胞活性,二硫苏糖醇有助于维持冻存骨髓间充质干细胞多能性及成骨分化能力。 -
肾脂肪囊与腹股沟来源脂肪干细胞体外培养的生物学特性
背景:脂肪组织来源丰富,不同部位脂肪组织分离培养的脂肪干细胞在体外生物学特性上是否存在差异,目前相关研究较少。
目的:观察肾脂肪囊来源与腹股沟来源脂肪干细胞的体外增殖和成软骨诱导分化能力。
方法:收集大鼠肾脂肪囊来源与腹股沟区来源组织进行脂肪干细胞培养与鉴定,MTT法检测两组细胞的体外增殖能力。取第3代细胞进行软骨定向诱导2周,免疫荧光检测诱导后细胞CollagenⅡ表达, RT-PCR检测两组细胞诱导后Aggrecan、Collagen ⅡmRNA表达水平。
结果与结论:①肾脂肪囊来源与腹股沟区来源脂肪干细胞经原代与传代培养,形态基本一致;②经流式细胞仪检测,不同来源脂肪干细胞的CD44阳性率均达到95%以上;③两组细胞的体外生长曲线均呈“S”型;④诱导后两组细胞均表现出CollagenⅡ阳性表达;⑤两组细胞的Aggrecan、Collagen ⅡmRNA表达水平比较差异无显著性意义(P>0.05);⑥结果显示,肾脂肪囊来源与腹股沟区来源脂肪干细胞均在体外生长稳定,迅速增殖,经定向诱导向软骨细胞发生分化,二者无明显区别。 -
心脏干细胞分离培养及其增殖与迁移的机制
背景:体外环境下进行心脏干细胞培养的过程中,生长微环境可能会对细胞的的增殖等产生一定的影响。
目的:在体外环境下培养大鼠心脏干细胞,探讨心脏干细胞增殖、迁移的可能机制。
方法:纳入SD大鼠10只,获得心肌组织块进行原代和传代培养。收集第3代心脏干细胞进行免疫荧光染色,进行干细胞鉴定,检测干细胞生长因子受体(c-kit)和CD45、CD90的表达。收集培养后的组织块,随机分为2份,一份用多聚甲醛进行固定,常规石蜡包埋后切片,进行苏木精-伊红染色、Masson染色以及细胞凋亡检测;另一份在培养基中添加EdU标记增殖细胞,采用免疫荧光染色检测c-kit阳性细胞以及基质金属蛋白酶2,9及转化生长因子β1等表达。
结果与结论:①细胞鉴定结果:心肌组织培养7-10 d后有明亮的圆形细胞长出,细胞贴壁后呈梭状,生长、增殖能力旺盛。免疫荧光染色可观察到大量细胞呈c-kit、CD45阳性表达,CD90阴性表达;②细胞凋亡情况:培养的组织块切片后染色见大量新生细胞生长的同时伴随心肌细胞的凋亡;③免疫荧光染色结果:经EdU标记后阳性细胞分布于心肌间隙,基质金属蛋白酶2,9及转化生长因子β1少量表达,但周围心肌组织上述3因子表达明显增多。④结果表明,心肌组织体外培养可获取心脏干细胞,伴随细胞增殖和迁移,其机制与基质金属蛋白酶2,9及转化生长因子β1的表达有关。 -
来源于乳腺癌正常组织乳腺干细胞的安全性
背景:乳腺干细胞的培养对研究乳腺的发育及乳腺癌具有重要的意义。
目的:找到一种易操作的体外分离培养乳腺干细胞的方法,并验证其安全性。
方法:分离培养乳腺癌旁正常组织中乳腺上皮细胞,流式细胞仪分选CD49f和EPCAM阳性细胞进行干细胞表面标记分析及细胞集落形成能力分析,然后在乳腺干细胞、乳腺癌组织和乳腺癌旁正常组织中提取mRNA,实时荧光定量PCR检测C-erbB-2和Maspin基因的表达。
结果与结论:①成功培养出人乳腺干细胞,并且细胞表面特异性标志物CD49f,EPCAM高表达;②集落形成能力分析可见混合集落、腔上皮细胞集落、肌上皮细胞集落;③乳腺干细胞C-erbB-2低表达,而Maspin高表达,证明来源于乳腺癌正常组织的乳腺干细胞具有生物安全性。 -
白细胞介素8参与CD133+肝癌细胞的侵袭与转移
背景:白细胞介素8是一种重要的炎性趋化因子,其在调节肿瘤细胞增殖、血管新生方面发挥了重要作用。
目的:探讨白细胞介素8对CD133+肝癌细胞侵袭转移能力的影响。
方法:分离培养人肝癌MHCC97-H细胞株,免疫磁珠分选出CD133+/CD133-MHCC97-H细胞,流式细胞仪检测CD133表达,ELISA检测上清液白细胞介素8水平。克隆形成实验、裸鼠成瘤实验、Transwell小室分别检测CD133+/CD133-MHCC97-H细胞克隆形成率、小鼠成瘤能力、细胞迁移侵袭能力。另外,采用白细胞介素8中和抗体处理细胞,比较CD133+/CD133-MHCC97-H细胞CD133表达、上清液中白细胞介素8水平及细胞克隆形成能力和迁移、侵袭能力。
结果与结论:①CD133+MHCC97-H细胞的CD133表达率、上清液白细胞介素8水平及克隆形成率均显著大于 CD133-MHCC97-H 细胞(P <0.05);②细胞浓度为1×106 L-1和1×107 L-1的 CD133+MHCC97-H细胞接种后有部分小鼠出现皮下移植瘤,但CD133-MHCC97-H细胞在同样细胞浓度下,均未出现皮下移植瘤;③CD133+MHCC97-H细胞的透膜细胞数量均显著大于CD133-MHCC97-H细胞(P<0.05);④经白细胞介素8中和抗体处理之后,CD133+/CD133-MHCC97-H细胞的CD133表达率、上清液中白细胞介素8水平、克隆形成率均显著下降(P<0.05),且CD133+MHCC97-H细胞下降程度更大(P<0.01);CD133+MHCC97-H细胞的迁移、侵袭透膜细胞数显著减少(P<0.05),CD133-MHCC97-H细胞则未出现明显的改变(P>0.05);⑤结果表明,白细胞介素8可以特异性参与调节CD133+MHCC97-H细胞侵袭、转移能力。 -
紫杉醇联合顺铂通过Wnt/β-catenin信号通路抑制鼻咽癌肿瘤干细胞增殖并促进其凋亡
背景:肿瘤干细胞具有自我更新和分化成新肿瘤的能力,会导致肿瘤放化疗不敏感,是肿瘤发生和复发的根源。
目的:探索紫杉醇联合顺铂对鼻咽癌干细胞增殖和凋亡的影响并探索其作用的信号通路。
方法:免疫磁珠的方法分离培养鼻咽癌干细胞,紫杉醇和顺铂处理细胞,Western blot检测凋亡相关蛋白caspase-3、活化的caspase-3、Bcl-2和β-catenin及下游原癌基因c-myc的表达,用RNA干扰技术敲降β-catenin表达或者使用抑制剂XAV939抑制Wnt/β-catenin通路活性,MTT法检测细胞增殖率,流式细胞仪检测细胞凋亡。
结果与结论:①紫杉醇或顺铂均会抑制鼻咽癌干细胞的增殖,促进其凋亡,并且凋亡标志蛋白活化caspase-3表达上升,凋亡抑制蛋白Bcl-2表达下降,联合用药具有协同作用,②紫杉醇或顺铂均会抑制Wnt/β-catenin通路的活性及下游靶基因c-myc的表达,抑制Wnt/β-catenin通路活性抑制鼻咽癌干细胞的增殖,促进其凋亡。③结果表明,紫杉醇和顺铂可能是通过Wnt/β-catenin信号通路调控鼻咽癌干细胞的增殖和凋亡。 -
石菖蒲对脐血干细胞成骨分化的影响
背景:研究表明石菖蒲及其活性成分能促进成体神经的发生,对抗衰老和治疗相关神经退行性疾病有良好疗效。
目的:探究中药石菖蒲浸提液对脐血干细胞增殖、成骨分化的影响,从中药学角度为促进干细胞的成骨分化提供新的思路。
方法:采用溶剂提取法提取中药石菖蒲浸提液;流式细胞分选技术分离筛选脐血干细胞;电子显微镜观察脐血干细胞生长情况;CCK8法观察石菖蒲对脐血干细胞增殖的影响;ELISA方法检测石菖蒲对脐血干细胞培养上清液中骨钙素、骨形态发生蛋白2含量的影响;碱性磷酸酶染色试剂盒检测石菖蒲对脐血干细胞中碱性磷酸酶分布表达的影响。
结果与结论:①分选出脐血单核细胞中的脐血干细胞纯度可达到(89.66±3.47)%;②加入石菖蒲浸提液低剂量、中剂量、高剂量培养脐血干细胞24,48,72 h后,干细胞的增殖率明显高于空白对照组(P<0.05),中剂量组的增殖率高于低剂量、高剂量组(P<0.05);③加入石菖蒲浸提液培养脐血干细胞5,10,15 d后,上清液中骨形态发生蛋白2、骨钙素的含量明显高于空白对照组(P<0.05),中剂量组的骨形态发生蛋白2、骨钙素含量高于低剂量、高剂量组(P<0.05);④碱性磷酸酶染色结果显示,加入石菖蒲浸提液培养干细胞10 d后碱性磷酸酶的分布表达明显高于空白对照(P<0.05),中剂量组和高剂量组的表达明显高于低剂量组(P<0.05)。⑤结果提示中药石菖蒲可以促进脐血干细胞的增殖以及其成骨分化。 -
脂肪干细胞在颗粒脂肪移植中的作用
背景:血管基质层细胞中含有大量的脂肪干细胞,有研究显示脂肪干细胞在移植过程中可能发挥着很重要的作用。
目的:观察脂肪干细胞在颗粒脂肪移植中的作用。
方法:选取10只雄性SPF级BALB/C小鼠,取出正常脂肪组织,提取动物腹部脂肪中的脂肪干细胞和颗粒脂肪,选取24只裸鼠作为移植受体,所有动物分为3个实验组,分别为对照组、颗粒脂肪移植组、混合移植组(脂肪干细胞和颗粒脂肪)。2个移植组分别将颗粒脂肪细胞悬液及脂肪干细胞和颗粒脂肪混匀后细胞悬液注射到小鼠腹背左右肩胛处;对照组注射等量的细胞基础培养液。4周后,分离血浆及取出移植物进行指标检测。
结果与结论:①混合移植组能显著性的增加移植物的质量,降低移植脂肪的吸收率,相对于颗粒脂肪移植组差异有显著性意义(P<0.01);②移植后血浆中血管内皮细胞生长因子相对于对照组明显提升,其中混合移植组高于颗粒脂肪移植组(P<0.01);③颗粒脂肪移植组碱性成纤维细胞生长因子的含量明显低于相混合移植组;④混合移植组微血管密度显著高于颗粒脂肪移植组(P<0.01);⑤动物移植物中的细胞形态较单纯颗粒脂肪细胞完好;⑥混合移植组的脂肪油滴的数目明显多于颗粒脂肪移植组;⑥结果提示,脂肪干细胞能够显著性提高碱性成纤维细胞生长因子的表达,改善移植物的微循环,显著改善颗粒脂肪细胞的形态和功能。