角膜移植后核因子κB表达动态以及环孢霉素A的干预作用

背景:核因子κB在转录水平调控着许多细胞因子、黏附因子的表达,在角膜移植排斥反应中可能起着中心调控作用.目的:观察核因子κB和细胞间黏附分子1、血管内皮生长因子在角膜植片中的动态表达规律以及环孢霉素A的干预作用.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-01/07在解放军第一军医大学珠江医院眼科完成.材料:选用健康清洁级SD大鼠40只及Wistar大鼠50只.随机分为3组:同基因移植组Wistar大鼠10只为供者,Wistar大鼠20只为受者;同种异体移植组Wistar大鼠10只为供者,SD大鼠20只为受者:同种异体移植+环孢霉素A治疗组Wistar大鼠10只为供者,SD大鼠20只为受者.方法:建立大鼠角膜移植模型,移植后所有受者术眼结膜下注射庆大霉素,隔日1次,每次2000U,共用3次;2.5 g/L氯霉素眼液滴眼,2次/d,每次2滴,连续用18d.50/L托品酰胺眼液滴眼,1次/d,每次2滴,连用1周.环孢霉素A治疗组移植后第1天开始用10g/L环孢霉素A眼液滴眼,3次/d,每次2滴,连续用18 d.主要观察指标:各组移植后3,7,12,18d测定角膜移植排斥反应指数评分,并于各时间点观察角膜植片病理学变化,检测核因子κB与细胞间黏附分子1、血管内皮生长因子的表达.结果:在观察期18 d内,同基因组未出现排斥反应,同种异体移植组在各时间点的排斥反应指数高于同基因移植组(P.<0.05),而同种异体移植+环孢霉素A治疗组排斥反应指数低于同种异体移植组(P<0.05).免疫组织化学结果显示:核因子κB与细胞间黏附分子1、血管内皮生长因子分布角膜上皮层、基质层及新生血管内皮细胞.各时间点,同种异体移植组角膜中核因子κB与细胞间黏附分子1、血管内皮生长因子的表达高于同基因移植组(P<0.05),而低于同种异体移植+环孢霉素A治疗组(P<0.05).结论:环孢霉素A通过减弱核因子κB核转位和发挥活性,抑制受其调控的多种细胞因子、黏附分子等移植排斥相关因子的表达,从而抑制角膜移植排斥反应的发生发展.

大鼠胚胎卵巢冷冻保存和异体无血管皮下移植的生长

背景:胚胎卵巢组织免疫原性低,不易引起宿主的免疫排斥反应,是卵巢异体移植的理想供体.但由于获取胎儿卵巢的不随意性和来源限制,标本的冷冻显得至关重要,成功的冷冻保存和复苏技术是建立胎儿卵巢库的关键.目的:通过对大鼠新鲜或冻融胚胎卵巢组织异体无血管移植后的组织形态和功能的观察,探讨胚胎卵巢组织异体移植和超速冷冻保存的可行性.设计、时间及地点:随机对照动物实验.于2006-03/05在云南省第一人民医院生殖遗传科进行课题设计,于2006-05/2007-02在云南大学单克隆抗体研究中心完成实验.材料:卵巢来源于孕龄为18～20 d SD大鼠胚胎.取阴道脱落细胞涂片证实有正常动情周期未交配过的SD成年雌性大鼠作为移植对象,分4组:正常对照组(n=10)、去势对照组(n=10)、新鲜胚胎卵巢移植组(n=25)、冷冻胚胎卵巢移植组(n=25).方法:正常对照组仅行皮肤筋膜肌肉切开缝合术,去势对照组切除双侧卵巢组织.将孕龄为18～20 d的新鲜或经超速冷冻法冷冻复苏的大鼠胚胎卵巢植入去势后4周的大鼠颈部皮下作为实验组,分别为新鲜移植组和冷冻移植组.主要观察指标:通过阴道脱落细胞的观察和血清雌二醇、孕酮的测定了解大鼠内分泌恢复情况,并对移植卵巢进行组织学观察.结果:新鲜移植组和冷冻移植组分别有52.17%和38.01%大鼠恢复了动情周期,两组血清雌二醇和孕酮在分别在35和49 d恢复到正常,且动情周期天数与正常对照组比较,差异无显著性意义.冷冻移植组大鼠恢复动情周期虽稍短于新鲜移植组,但差异并无统计学意义.63 d后取出移植物观察,见移植物色泽红润,表面有丰富的血管形成,镜下见卵巢内有大量的小动脉和小静脉;移植物组织学检查发现卵泡的发育,光镜下可见不同发育阶段的卵泡,有成熟卵泡和黄体形成,形态与正常卵巢无明显差别.结论:大鼠胚胎卵巢异体异位无血管皮下移植后能存活、生长发育并具有与正常卵巢相似的内分泌功能;超速冷冻法能较好的保存胚胎卵巢的活性,复苏后与新鲜胚胎卵巢组织具有相同的生理活性.

胸腺内注射脾细胞诱导神经移植的免疫耐受反应

背景:心脏等移植时常采用胸腺内注射脾细胞抑制或减弱移植排斥反应,而在神经移植中很少有报道.目的:应用大鼠胸腺内注射脾细胞的方法,诱导大鼠同种异体坐骨神经产生特异性免疫耐受.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-06/2008-06在哈尔滨医科大学动物实验中心完成.材料:选用清洁级雄性SD大鼠30只为受体,随机分为自体神经移植组,异体神经移植组,异基因抗原注射组,每组10只.雄件Wistar大鼠20只为供体.方法:异体神经移植组大鼠在显微镜下,从犁状肌下孔0.5 cm处整齐剪下长约1 cm的坐骨神经,将供体神经桥接于神经缺损处.自体神经移植组神经缺损处进行自体神经移植.异基因抗原注射组在异体神经移植后注入供体异基因抗原.主要观察指标:移植后2 周进行运动神经传导速度、病理学、混合淋巴细胞培养和血清白细胞介素检查.结果:运动神经传导速度异基因抗原注射组与自体神经移植组无显著差别(P0.05),但明显优于异体神经移植组(P<0.05).病理学及透射电镜观察,与运动神经传导速度检测结果一致.混合淋巴细胞培养和白细胞介素水平异基因抗原注射组明显优于异体神经移植组(P<0.05).结论:胸腺内注射异基因抗原可以诱导大鼠对异体坐骨神经移植的免疫耐受.

小鼠脾脏树突状细胞的体外扩增与培养

背景:脾脏来源的树突状细胞诱导周期长,产量相对较少,相关报道亦较少.目的:建立简便的体外扩增小鼠脾脏树突状细胞的方法.设计、时间及地点:细胞形态学观察实验,于2007-02/09在华北石油总医院中心实验室完成.材料:健康BALB/C小鼠、C57小鼠及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素4.方法:无菌手术取C57小鼠脾脏,用1 mL注射器抽取Hanks液,刺入脾脏并反复冲洗,获取单个核细胞,用0.1 g/L粒-单核细胞集落刺激因了、白细胞介素4的H-DMEM培养,8 d后即得成熟的树突状细胞.同时无菌取BABIJC小鼠脾脏制备单细胞悬液,收集非黏附细胞调整密度后作为反应细胞.再将两种细胞混合培养.主要观察指标:成熟树突状细胞的形态学观察,并对其表面CD11c,CD86及MHC-Ⅱ类分子进行检测.并计算两种细胞混合培养后的吸光度值.结果:体外诱导培养8 d后获得大量成熟的树突状细胞,细胞表面具有典型的树枝状突起,高表达树突状细胞相对特异性表面分子CD11c(78.46%)、CD86(87.24%)及MHC-Ⅱ(92.65%),同时具有较强的刺激同种异基因混合淋巴细胞增殖的能力.结论:联合应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素体外诱导培养小鼠脾脏细胞,可生成大量功能成熟的树突状细胞.

中国人群HLA-DRB11454等位基因和HLA-DRB1第3外显子鉴定意义

目的:在中国人群中鉴定人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)DRB11454等位基因,分析供受者HLA-DRB1第3外显子DNA序列信息对器官移植、细胞移植及人类遗传学研究的重要现实意义.方法:应用聚合酶链反应-直接测序分型方法对58例等待造血干细胞移植供受者进行人类白细胞抗原测序分型,1 268例广东地区随机健康供者采用聚合酶链式反应-序列特异寡核苷酸探针反向杂交法进行HLA-DRB1中高分辨基因分型,部分模棱两可结果采用聚合酶链式反应-序列特异引物PCR-SSPHLA-DRB14高分辨方法分型法.结果:在1 268例广东地区随机健康人群中检出HLA-DRB11403,1406,1410,1412,1418,1425和1454等位基因,HLA-DRB1401/1434/1454等位基因模棱两可结果的8例样本被确认为HLA-DRB11454等位基因,DRB11454等位基因可能是广东人群为常见的HLA-DRB114 基因. 中国人群HLA-DRB114第3外显子存在多态性.结论:中国人群HLA-DRB11454等位基因确认了DRB1等位基因第3外显子多态性的存在,进一步明确了开展中国汉族人群及少数民族HLA-DRB1第3外显子检测的意义.

不同种类骨移植后路矫治青少年特发性脊柱侧凸

背景:同种异体骨被广泛应用于脊柱侧凸后路手术,大量研究显示同种异体骨移植与自体髂骨移植可取得相近的临床效果.目的:观察不同种类骨移植材料在青少年特发性脊柱侧凸后路矫形植骨融合中的临床应用效果.设计、时间及地点:回顾性对比分析,病例来自2000-01/2005-12华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科.对象:选择行后路钉-棒系统矫形手术且具有完整随访资料的71例青少年特发性脊柱侧凸患者,其中自体骨移植组21例,同种异体骨移植组23例,自体骨混合同种异体骨移植组27例.同种异体骨为冻干同种异体松质骨,由山西省医用组织库提供.方法:3组骨移植融合手术方法保持一致,按脊柱侧凸类型及后路矫形植骨融合原则进行植骨床准备及植骨.自体骨移植组植入修剪成火柴状的自体髂骨;同种异体骨移植组植入经生理盐水浸泡30～40 min的冻干同种异体松质骨条;自体骨混合同种异体骨移植组植入髂骨碎块与经上述处理的冻干同种异体松质骨碎块.主要观察指标:比较术后第3,9,15,36个月的植骨融合率、Cobb角丢失率及各组术后不良反应.结果:71例患者均进入结果分析.自体骨移植组半均融合节段7个,同种异体骨移植组平均融合节段7.6个,自体骨混合同种异体骨移植组平均融合节段8个.术后第9个月,自体骨移植组融合率高于其他2组(P<0.05);Cobb角丢失率3组差异无显著性意义(P0.05).术后第3,15,36个月,植骨融合率、Cobb角丢失率3组间差异亦无显著性意义(P0.05).3组均未发生螺钉及棒的松动、断裂、感染等并发症,其中自体骨移植组发生取骨处疼痛3例,自体骨混合同种异体骨移植组发生取骨处疼痛1例.结论:同种异体骨移植、自体骨混合同种异体骨移植与自体骨移植在青少年特发性脊柱侧凸后路矫形中对维持矫形可取得相近的近远期临床效果.

大鼠气管上皮细胞培养:3种方法的比较

背景:目前常用分离气管上皮细胞的方法有蛋白酶法和胰酶法,但各有不足,控制不好会影响细胞的增殖和活力.目的:改进气管上皮细胞培养技术,比较链酶蛋白酶、胰酶和联合消化3种不同酶消化法在培养气管上皮细胞中的区别.设计、时间及地点:对比观察,实验于2007-09/2008-07在同济大学分子生物开放实验室和解放军第二军医大学动物实验室完成.材料: SD雄性大鼠12只,体质量200～250 g.链酶蛋白酶、胰酶为Gibco公司产品.方法:将SD大鼠分3组,每组4只.链酶蛋白酶组使用1 g/L链酶蛋白酶在4℃消化18 h;胰酶冷消化组使用2.5 g/L胰酶4℃消化18 h;联合消化组使用链酶蛋白酶4℃消化18 h后用2.5 g/L胰酶37 ℃消化5 min,用以上3种方法分离、培养SD大鼠气管上皮细胞.主要观察指标:用细胞计数板,激光共聚焦显微镜测定细胞分离的数量以及纯度、成活率.结果:链酶蛋白酶、胰酶冷消化和联合消化法所得细胞数量分别为(1.21±0.17)×106;(1.35±0.13)×106和(1.36±0.16)×106.联合消化法所得细胞状态好,贴壁能力和增殖能力好,其次为链酶蛋白酶法,胰酶冷消化法较差.结论:链酶蛋白酶与胰酶的联合法是一种有效的培养气管上皮细胞的方法.

显微镜下角膜缘干细胞移植联合胬肉切除治疗翼状胬肉198例:不同种族患者的对比分析

背景:大多数针对翼状胬肉治疗效果的研究都着眼于手术技巧、辅助治疗手段和患者自身原因对胬肉切除后复发率的影响,种族因素与胬肉的发生发展及复发是否有关仍无确切依据.目的:对不同种族的翼状胬肉患者施行自体角膜缘干细胞移植联合翼状胬肉切除,观察比较其治疗结果.设计、时间及地点:回顾性病例分析,于2000-01/2006-06在厦门大学附属中山医院眼科完成.对象:厦门大学附属中山医院眼科同期收治的中国汉族翼状胬肉患者144例(152眼),均为初发病例;作者在非洲同期接诊的黑色人种翼状胬肉患者54例(54眼),均为复发病例.两组患者在年龄、性别组成、胬肉长度等方面差异无显著性意义(P0.05).方法:198例患者显微镜直视下常规切除翼状胬肉,力求角膜面无胬肉组织残留.取患者自体颢上方球结膜的带角膜缘的薄层游离结膜瓣,覆盖于翼状胬肉切除创面区.术后6周及6,12个月进行随访,患眼分级标准为1～4级,级别越高复发程度越严重.主要观察指标:胬肉切除联合角膜缘干细胞移植后的复发情况、患眼分级及并发症.结果:第6周两组均未发现翼状胬肉复发,6个月时中国汉族与非洲黑色人种胬肉患者的复发率分别为6.6%和14.8%,12个月时分别为11.8%和24.5%,后者术后复发率明显高于前者(t=4.607,P=0.032).第6周两组患眼分级情况存在显著差异(x2=15.608,P<0.01),中国汉族胬肉患者恢复较快;至6,12个月时两组患眼分级无明显差异(x2=4.401,6.206,P0.05).两组患者并发症均较少,主要为角膜浅层瘢痕、持续性眼表刺激症状.结论:显微镜下行自体角膜缘干细胞移植联合翼状胬肉切除的方法,具有切除胬肉较彻底、组织损伤小、复发率较低的优势,有一定的临床实用价值.非洲黑色人种翼状胬肉患者的术后复发率高于中国汉族翼状胬肉患者.

反复冻融处理同种异体移植兔跟腱组织学及生物力学变化

背景:近年来反复冻融处理技术作为一种同种异体肌腱的保存处理方法,主要原理是反复利用0～-60℃腱细胞易损伤的冷冻温度,使得肌腱内细胞无活性,从而降低免疫原性.目的:拟观察反复冻融处理对同种异体移植兔跟腱组织学和生物力学的影响.设计、时间及地点:组织形态学及生物力学水平的对照动物实验,于2007-10/2008-02在北京大学运动医学研究所实验室完成.材料:选用17只成年健康新西兰大白兔.方法:无菌条件下取兔跟腱并带0.6 cm×0.4 cm跟骨骨块,按照组织库程序行60Co照射68 min,照射剂量为25 kGy.分为3组,-80 ℃冷冻,室温融解,反复冻融次数分别是1,3和10次,每组又抽取7条肌腱作生物力学测定,4条作组织学观察.主要观察指标:取肌腱行苏木精-伊红染色、胶原Van Gieson染色和透射电镜扫描,观察跟腱组织形态学改变,并进行跟腱拉伸实验以观察生物力学变化.结果:组织学观察发现,随着反复冻融次数的增加,腱束和胶原纤维捧列变得混乱直至断裂,细胞崩解,并且由于冰晶形成造成明显的腱束间裂隙.生物力学方面,与冻融1次组比较,冻融3,10次组的大载荷、大载荷能量及大应力均显著降低(P<0.05),其他指标如弹性模量、能量密度也有下降但不明显.结论:反复冻融处理肌腱是一种有创的处理方法,正如组织学表现的可以引起细胞崩解、腱纤维紊乱甚至断裂等,终会导致其生物力学水平的下降.

细胞因子诱导杀伤细胞/自然杀伤细胞培养过程中CD16及CD11a的表达变化

背景:由于细胞因子诱导杀伤细胞、自然杀伤细胞上表达的CD16和CD11a均与其介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用和直接接触杀伤的抗肿瘤效应密切相关.因此了解两种细胞扩增过程中这两种分子表达的强弱,对根据免疫效应细胞的终用途决定两种细胞的佳收获时机具有重要意义.目的:了解细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞在培养过程中的CD16和CD11a表达的变化规律.设计、时间及地点:细胞移植免疫学动态观察,于2006-09/2008-03在中山大学附属第二医院完成.材料:脐血来自本院健康足月妊娠产妇.方法:采用Ficoll-Hypaque法分离脐血单个核细胞,接种于含体积分数为0.15胎牛血清的IMDM,双抗生素青、链霉素各1×105U/L24孔培养板中,在培养体系中加入白细胞介素2、白细胞介素7、白细胞介素15、干细胞因子及FLT3L制备细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞,每隔3天半量换液及全量补充上述细胞因子.主要观察指标:流式细胞仪榆测CD3+CD56+细胞因子诱导杀伤细胞以及CD3-CD56+自然杀伤细胞在4周培养过程中CD16和CD11a表达的变化.结果:CD16在细胞因子诱导杀伤细胞、自然杀伤细胞上的表达随着培养时间的延长逐渐增加,在两类细胞上均在培养的第4周达到高峰,分别为(55.99±3.90)%和(7.86±1.66)%,但CD16存自然杀伤细胞上表达比例较低,整个培养过程中自然杀伤细胞上CD16的均数表达没有超过8%.CD11a在细胞因子诱导杀伤细胞培养的第3周,自然杀伤细胞培养的第2周达到高峰,分别为(49.32±6.32)%和(82.31±11.33)%,之后逐渐出现下降,到培养第4周几乎消失.结论:CD16和CD11a在细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞上的表达随培养时间呈动态变化,使用单克隆抗体联合细胞因予诱导杀伤细胞介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用效应时,细胞的收获期可在细胞培养的第4周,利用细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞的直接杀伤效应进行细胞过继免疫,那么收获细胞的时间以细胞培养的第3周为宜.

CD40配体-受体载体介导的CpG ODN靶向脐血B淋巴细胞的特异传递及其免疫效应

背景:CpG寡核苷酸是一种高效低毒的免疫佐剂,在许多疾病的基因治疗中具有广阔的应用价值.但存在种属和细胞特异性,细胞摄取率低,易被酶降解,成为临床应用的障碍.目的:拟验证CpG寡核苷酸通过CD40配体-受体载体系统对脐血B淋巴细胞特异靶向传递及其免疫效应的增强作用.设计、时间及地点:观察对比实验,于2004-0412007-10在广州暨南大学附属第一医院血液科、儿科完成.材料:取健康新生儿的肝素抗凝新鲜脐血,事先征得父母知情同意并获医院伦理委员会审核批准.方法:制备CD40配体-碳二亚胺-多聚左旋赖氨酸-CpG寡核苷酸交联复合物,与脐血单个核细胞共培养.分别于24,48,72,96 h应用流式细胞仪检测单个核细胞对FAM标记CpG寡核苷酸的摄取率及平均摄入强度;培养96 h后用直接免疫荧光标记法标记CD19,CD20,CD22单抗,以流式细胞仪检测阳性表达率;细胞悬液加入96孔板,3组分别加入CD40配体-碳二亚胺-多聚左旋赖氨酸-CpG寡核苷酸、单纯CpG寡核苷酸及ddH2O,培养92 h,以四甲基偶氮唑盐比色法测细胞增殖能力;以酶联免疫吸附法测以上3组细胞培养上清IgG水平.主要观察指标:单个核细胞对CpG寡核苷酸的摄取率及平均摄入强度,淋巴细胞亚群的表达,细胞增殖能力,培养上清IgG水平.结果:与单纯CpG寡核苷酸未交联组相比,单个核细胞对交联复合物摄取率更高(98%),达摄取峰值时间吏早.共培养后CD19+,CD22+,CD20+细胞表达升高,细胞增殖量及上清IgG水平均高于对照组(P<0.05).结论:CD40配体-受体载体系统有助于CpG寡核苷酸特异高效的B细胞靶向投递,并增强其免疫效应.

大黄素对大鼠肝移植后急性排斥反应中肝细胞凋亡的影响

背景:抑制急性件排斥反应的高效免疫抑制剂为器官移植所必需,较多的中药成分具有免疫调节作用.课题组在前期实验成功建立全血供大鼠肝移植模型基础上,初步发现大黄素对大鼠肝移植后急性排斥反应具有抑制作用,而且这种抑制作用可以通过多途径达到.目的:观察大黄素对同种异体大鼠肝移植后早期急性排斥反应过程中肝细胞凋亡的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-04/09在西安交通大学第一附属医院肝胆外科实验室完成.材料:供体选用SD大鼠80只,雌雄不限;受体选用雄性Wistar大鼠80只,制备SD→Wistar大鼠全血供肝移植模型.方法:将制备的80只大鼠模型按随机数字表法分为4组,每组20只.于移植后第1天开始按分组设计行腹腔内药物注射,模型对照组仅给予生理盐水,大黄素组给予大黄素1.5 mg/(kg·d),环孢素A组给予环孢素A 3 mg/(kg·d),环孢素A+大黄素组给予环孢素A3 mg/(kg·d)+大黄素1.5mg/(kg·d).主要观察指标:移植后第7天各组处死10只大鼠,取肝脏标本,观察移植肝组织急性排斥反应强度、肝细胞凋亡指数、Bcl-2蛋白的表达.余受体继续应用药物干预直至死亡,记录其生存时间.结果:与模型对照组相比,大黄素组、环孢素A组、环孢素A+大黄素组大鼠移植后存活时间明显延长(P<0.05),以环孢素A+大黄素组存活时间长.移植后第7天,与模型对照组相比,大黄素组、环孢素A组、环孢素A+大黄素组大鼠移植肝排斥反应强度、肝细胞凋亡指数显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05);大黄素+环孢素A组大鼠的移植肝排斥反应强度、肝细胞凋亡指数显著低于其他3组(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著高于其他3组(P<0.05).结论:大黄素具有抑制同种异体大鼠肝移植急性排斥过程中肝细胞凋亡程度,改善肝功能的作用,与环孢素A具有一定的协同作用,同时又能减轻环孢素A引起的肝功能损害.

冷保存-再灌注损伤对大鼠移植肝胆管上皮细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响

背景:移植肝胆管上皮细胞凋亡是影响肝移植后胆道功能恢复的因素之一,调控基因bcl-2/bax可能对胆管上皮细胞的生存起到决定作用.目的:观察缺血-再灌注损伤后大鼠肝内胆管上皮细胞的凋亡及调控基因bcl-21bax mRNA表达的变化.设计、时间及地点:动物实验,细胞形态学观察,于2008-02/08在解放军第三军医大学西南医院肝胆外科研究所实验室完成.材料:健康雄性Wistar大鼠100只,随机分为3组:供肝冷保存1 h组40只,冷保存12 h组40只,对照组20只.方法:供肝冷保存1,12 h组,组内随机配对,体质量相对较轻的大鼠做为供体,供肝置于4℃器官保存液中,分别保存1、12 h后行原位肝移植,对照组只行开、关腹手术.在"两套袖法"基础上,以"支架法"建立动脉化大鼠原位肝移植模型,供受体肝总动脉采用改良"支架法"进行端端吻合,重建肝动脉血供.主要观察指标:分别于移植后1,3,7,14 d检测血清总胆红素、碱性磷酸酶及肝内胆管上皮细胞的凋亡,实时荧光定量RT-PCR法检测胆管上皮细胞内bcl-2 mRNA和bax mRNA的表达.结果:保存1 h组移植后1,3 d可见轻度胆道损伤的血清学及病理学表现,肝内胆管上皮细胞凋亡指数分别为(4.6±0.23)%,(3.42±0.22)%,(2.91±0.23)%,(2.87±0.16)%,且在移植后7 d即与对照组无明显差异.在保存12 h组移植后1,3,7 d,胆汁郁积征象明显,伴有严重的胆管损伤病理学改变,且肝内胆管上皮细胞凋亡指数明显高于保存1h组和对照组,分别为(6.51±0.33)%,(8.52±0.36)%,(3.51±0.27)%,(2.91±0.28)%.在移植后各时相点,保存1h组肝内胆管上皮细胞内bcl-2mRNAlbaxmRNA比值分别为(1.12±0.12)%,(1.34±0.13)%,(1.51±0.14)%,(1.60±0.15)%,在移植后7 d即接近对照组水平,而保存12h组则为(0.90±0.08)%.(0.79±0.02)%,(1.36±0.12)%,(1.59±0.14)%,在移植后7d仍明显低于保存1 h组和对照组,且与肝内胆管上皮细胞凋亡指数显著负相关(P=0.029).结论:冷保存时间延长导致胆道功能严重损伤,导致肝内胆管上皮细胞内bcl-2 mRNNA/bax mRNA下调,促进移植后早期肝内胆管上皮细胞的凋亡.

肾移植后抗HLA和MICA抗体对移植肾慢性排斥反应的影响

背景:体液免疫是影响移植肾长期存活的重要因素之一,抗HLA类抗体和抗MICA抗体在诱发慢性移植肾排斥反应中发挥了重要作用.目的:探讨肾移植受者血清抗HLA抗体及MICA抗体与术后移植肾慢性排斥反应及存活率的相关性及其临床意义.设计、时间及地点:病例对照分析,2001-01/2006-06南方医科大学附属珠江医院器官移植科.对象:选择接受肾移植后长期随访的患者60例,男32例,女28例,年龄25～73岁,平均(45.3±10.8)岁.将移植肾慢性排斥反应受者34例设为排斥组,同期手术移植肾功能仍稳定的26例受者设为对照组.方法:应用One Lambda混合抗原板通过酶联免疫吸附试验检测受者肾移植前血清中的抗HLA抗体,于2007-01/07月检测受者术后抗体情况,对阳件血清进一步用抗原板检测抗体阳性率及其特异性.采用免疫磁珠流式细胞仪液相芯片技术对肾移植者术前后进行抗MICA抗体测定;采用序列特异性引物聚合酶链反应技术进行HLA基因分型.主要观察指标:①肾移植患者手术前后抗HLA抗体滴度及特异性的动态变化.②受者术后抗MICA抗体合成情况.③移植肾功能.④移植受者及移植物的存活率.结果:在60例肾移植受者中,抗体阴性者27例,抗体阳性者33例,阳性率为55%,其中抗HLA抗体阳性12例,抗HLA和MICA抗体均阳性7例,抗MICA抗体阳性14例.慢性排斥组的抗HLA抗体阳性率显著高于移植肾功能稳定组(P<0.01);慢性排斥组和肾功能稳定组MICA抗体阳性受者分别为16例(47.1%)和5例(19.2%),两者比较具有显著性差异(P<0.05);抗体阳性患者血清肌酐明显高于抗体阴性者,其中抗HLA和MICA抗体均阳性者肌酐水平显著高于单一抗体阳性者(P<0.05).结论:抗HLA抗体介导的体液性排斥反应在诱发慢性移植肾排斥中发挥了主要作用.同时,抗MICA抗体可与内皮细胞上表达的多态性MICA抗原作用,也可导致移植物的慢性损伤.

不同幼年供体胰段的超微结构观察

背景:随着胰腺移植供体的不足,胰段移植已倍受关注.从解剖学角度认识胰腺各段胰岛和胰岛细胞(A,B细胞)的分布规律,可否得出胰段移植的佳选择.目的:观察幼年大鼠胰腺胰尾的微细结构,胎尸胰腺胰尾的微细结构,胰岛B细胞胰高血糖素和胰岛素阳性表达面积及胰岛B细胞免疫阳件染色面积,并予以比较.设计、时间及地点:对比观察,于:2006-01/2007-06在福建医科大学人体解剖组织胚胎学系实验室完成.材料:出生1周内健康SD大鼠33只,3～10个月龄胎尸胰腺80个,每月龄10个.胰高血糖素抗血清为武汉博士德生物工程公司产品,胰岛素抗血清为北京中山金桥生物技术公司产品,图像处理系统(Videopro32型)由福建医科大学人体解剖实验审提供,Hu-12A型透射屯镜为日本电子株式会社产品.方法:随机选择30只大鼠,取胰尾切片苏木精-伊红染色后光镜观察,显微测微器测量胰岛个数和面积,用胰高血糖素抗血清和胰岛素抗血清进行免疫组织化学染色.另3只大鼠取胰尾组织块铀铅染色,每月龄胎尸各取2例胰尾组织,1例行ABC法胰岛素免疫组化染色,另1例行铀钳染色.主要观察指标:透射电镜观察并比较胎尸胰及幼年大鼠胰腺B细胞及胰岛形态和数量、结构及其分泌颗粒.结果:幼年大鼠胰尾组织中胰岛B细胞内分泌颗粒多,内质网、高尔基复合体和线粒体等细胞器发达,胰岛数目分布多,胰岛B细胞的免疫阳性染色面积大.胎尸胰尾有较多而密的胰岛B细胞散在分布,胰岛B细胞分泌颗粒多.结论:幼年大鼠和胎尸胰腺细胞的分泌活动均旺盛的,消化功能强,适宜作为胰腺胰段胰岛移植供体,且以胰尾为佳.

趋化因子受体拮抗剂对大鼠小肠移植的影响

背景:排斥反应的发生是导致小肠移植失败的主要原因,趋化因子及其受体介导的细胞免疫在急性排斥反应中具有重要作用,以趋化因子受体为靶位的治疗方案,可能为临床小肠移植的免疫治疗提供借鉴.目的:观察趋化因子RANTES(Met-RANTES)对同种异体大鼠异位小肠移植术后移植物的存活时间和组织病理学改变的影响,以及与小剂量他克莫司的协同效应.设计、时间及地点:随机数字表法区组,对照观察实验,于2003-09/2005-03在解放军第四军医大学西京医院胃肠外科实验室完成.材料:健康成年雄性大鼠180只,90只SD大鼠作为供体,90只Wistar大鼠作为受体,施行异位节段性小肠移植.方法:小肠移植后,大鼠随机分为3组,30只/组:对照组,只做异位小肠移植,不给予任何药物治疗,Met-RANTES治疗组:移植后0～7 d,腹腔注射Met-RANTES200 μg/d;Met-RANTES联合小剂量他克莫司治疗组:移植后0～7 d,腹腔注射Met-RANTES 200 μg/d+肌肉注射他克莫司0.5 mg/(kg·d).主要观察指标:观察移植大鼠的一般状况和存活时间,并于移植后第1,3,5,7天每组各处死6只大鼠,切取移植肠标本进行组织病理学检查和组间比较.结果:移植后的90只受体大鼠全部进入结果分析.对照组大鼠存活时间中位数为7.2 d(1.5),全部死于急性排斥反应及感染.组织病理学检查显示移植后第3,5,7天分别符合轻、中、重度排斥反应.Met-RANTES治疗组大鼠存活时间中位数为19.2 d(16.4),与对照组相比存活时间明显延长(P<0.01).Met-RANTES+小剂量他克莫司治疗组大鼠存活时间中位数为30.9 d(9.0),与前两组有显著差异(P<0.01).Met-RANTES治疗组和Met-RANTES+小剂量他克莫司治疗组大鼠组织病理学检查无明显排斥反应征象,可长期存活.结论:Met-RANTES能明显抑制小肠移植急性排斥反应,有效保护移植肠功能,显著延长移植物的存活时间,并可增强小剂量他克莫司的免疫抑制作用.

大鼠原位肾移植模型的移植技巧及并发症预防

背景:大鼠器官移植模型可重复性好,可稳定模拟临床缺血再灌注损伤、急性排斥反应及慢性排斥反应等情况,是免疫耐受以及新型免疫抑制剂开发不可缺少的组成部分.目的:探讨稳定的大鼠原位肾移植模型的移植技巧及并发症的预防.设计、时间及地点:显微外科操作实验,于2002-10/2008-03在中山大学附属第一医院动物中心、蒙特利尔大学实验中心及河南省动物中心完成.材料:健康、雄性、清洁级Wistar大鼠、SD大鼠,分别为供、受体;Lewis大鼠、F344大鼠,分别为供、受体.方法:在Fisher的移植方法的基础上进行改良,采用大鼠左侧原位肾脏移植,动、静脉及输尿管均采用端端吻合方式,实验在德国产Carl Zeiss手术显微镜下进行.主要观察指标:监测移植后大鼠一般情况及尿量,大鼠尿量<1 mL认为移植肾脏功能差,活检确认原因.结果:共实施大鼠原位肾移植500次.供体手术时间(15.5±2.1)min,受体移植时间(40.6±5)min,移植成功(移植后存活5 d)率93.2%(466/500),一组慢性排斥模型大鼠达到长期存活(180 d).结论:施行多次肾移植可建立稳定、快速的大鼠原位肾移植模型,娴熟的动物外科解剖和精湛的显微外科技术是预防移植后并发症的先决条件.

移植肾切除标本中C4d的表达及其体视学测定

背景:2003年Banff移植病理会议正式将C4d在肾小管周围毛细血管中的特异性沉积列入体液性排斥反应的Banff诊断标准,体视学测定是一种重要的分析手段.目的:检测C4d在难治性排斥反应移植肾组织中的表达情况,对C4d阳性细胞进行体视学定量测定,分析其体视学指标与移植肾存活时间的关系.设计、时间及地点:回顾性病例分析,2006-12/2007-06在解放军总医院第二附属医院器官移植完成.对象:选择难治性排斥反应导致移植肾切除患者40例,所有移植肾标本石蜡切片均由解放军总医院第二附属医院病理科提供,移植肾存活时间大于5年者17例,小于5年者23例.方法:应用C4d多克隆抗体对移植.肾组织石蜡切片行免疫组织化学染色.检测CAd在切除移植肾中的表达情况,运用图像分析系统在显微镜下测量C4d阳性细胞的体视学参数.主要观察指标:患者性别、年龄、冷缺血时间、热缺血时间、免疫抑制方案、移植后高血压以及是否为2次移植,C4d细胞群在移植肾标木中的分布情况,体视学分析结果.结果:40例切除移植肾中C4d阳性17例(42.5%),移植肾存活时间小于5年者的C4d细胞阳性率明显大于存活时间大于5年者(70.6%,29.4%).移植肾组织中C4d阳性沉积与移植供受者的年龄、性别、免疫抑制方案、冷、热缺血时间以及是否为2次移植无关.存活时间大于5年的移植肾组织中CAd阳性细胞体视学参数核体密度、核表面积密度均小于存活时间小于5年者(F=12.741 5,9.7337,P<0.01).结论:C4d阳性沉积预示着移植肾功能预后较差,移植肾组织中C4d阳性细胞的核体密度、核表面积密度是影响其存活时间的重要指标.

大鼠肾移植技术改进与分析

背景:大鼠肾移植模型足器官移植和肾脏相关疾病研究中常用的动物模型,目前已有多种建模方式,但这些模型在移植时间、移植效果等方面都存在各种问题.目的:拟建立一种简便、安全、成功率高的单侧供肾大鼠肾移植模型.设计、时间及地点:动物模型分析实验,于2008-03/06在复旦大学泌尿外科研究所完成.材料:Wistar大鼠作供体,SD大鼠作为受体,各60只.方法:切取供体左侧肾脏作为供肾,分别以供体腹主动脉、左肾静脉与受体腹主动脉、下腔静脉端侧吻合,供肾输尿管以5-0带针线牵引插入膀胱,吻合缝针破口完成尿路重建.肾包膜下切除受体原有双肾.统计移植时间和移植成功率.主要观察指标:移植时间、热缺血时间、冷缺血时间、动静脉吻合和尿路重建时间、移植失败率及原因、受体大鼠存活率.结果:手术时间100～140 min.其中供肾热缺血时间8～10 s,冷缺血时间40～60 min.移植成功率为85%,失败原因分别为吻合口狭窄伴血栓6.67%、吻合口出血5%,感染1.67%,不明原因1.67%.结论:实验建立的建模方法简便、可靠,明显缩短热缺血及尿路重建的时间,减少相关并发症.

细胞间黏附分子1与移植肾急性排斥反应

目的:检测移植肾组织内细胞间黏附分子1的表达水平,分析其与移植肾急性排斥反应的关系.方法:选择解放军南京军区福州总医院全军器官移植研究所在2002/2005进行的72例尸体肾移植的移植肾穿刺活检标本72份,其中移植肾急性排斥反应54份,环孢素A中毒标本18份;并取8份正常肾组织作对照.采用免疫组化技术检测细胞间黏附分子1在移植肾内的表达,分析其与病理形态结构的关系.结果:发生急性排斥反应的受者肾小管上皮细胞间黏附分子1表达显著高于正常者及环孢素A中毒受者(P<0.05),且随移植肾排斥程度加重,细胞间黏附分子1表达明显增多(P<0.05).结论:细胞间黏附分子1的表达与移植肾急性排斥反应病理分级密切相关,移植肾组织内细胞间黏附分子1的检测对于肾移植后急性排斥反应的诊断具有参考价值.

慢性移植肾肾病肾组织中转化生长因子β1、金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制剂1的表达及意义

背景:相关实验表明,转化生长因子β1、金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制剂1在慢性移植肾肾病中发挥着重要作用,但发病机制尚不十分明确.目的:探讨转化生长因子β1、金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制剂1在慢性移植肾肾病患者肾组织及正常肾组织中的表达及意义.设计、时间及地点:细胞组织形态对照观察实验,于2008 06/10在福建漳州解放军第一七五医院病理实验室完成.材料:24例慢性移植肾肾病患者的移植肾组织,10例正常肾组织做对照.方法:34例参试者肾组织标本均进行免疫组织化学染色:常规甲醛固定,石蜡包埋,切成厚3 μm的切片,正常非免疫性血清封闭,依次加一抗、二抗及SP复合物,DAB显色,苏木精复染,透明封固.主要观察指标:免疫组织化学染色观察34例肾组织标本的转化生长因子β1、金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制剂1的表达情况,并分析3者间及与慢性移植肾肾病病理分级之间的相互关系.结果:定性分析:在移植肾肾病的肾组织中转化生长因子β1、金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制剂1在肾小管上皮细胞胞浆和胞膜多呈强阳性表达.定量分析:转化生长因子β1,金属蛋白酶组织抑制剂1、金属蛋白酶2在正常组和慢性移植肾肾病组间的表达有显著差异(P<0.01),且转化生长因子β1、金属蛋白酶组织抑制剂1的表达随慢性移植肾肾病的病理分级的增加而增加,而金属蛋白酶2则略有下降趋势.同时转化生长因子β1和金属蛋白酶组织抑制剂1的表达之间呈正相关(r=0.651,P<0.05).结论:转化生长因子β1、金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制剂1的表达异常是慢性移植肾肾病的重要表现,转化生长因子β1可能通过上调金属蛋白酶组织抑制剂1的表达从而抑制细胞外基质的降解引起移植肾纤维化.

肾移植术后受者外周血淋巴细胞的早反应基因表达谱变化

背景:同种异体免疫应答过程中有许多基因参与淋巴细胞的活化及其调控.目的:研究肾移植后受者外周血淋巴细胞差异表达基因,尤其是早反应基因.设计、时间及地点:基因水平的对照观察实验,于2003-09/2004-02在解放军第二军医大学长征医院泌尿外科及器官移植中心以及上海博星基因芯片公司完成.对象:选取无明显急性排斥反应的同种异体肾移植受者16例.方法:应用包含4 096个人cDNA克降的微矩阵芯片,分析肾移植受者移植后24 h外周血淋巴细胞的基因表达谱.每位受者于移植前当日和术后24 h分别抽取外周血10mL,分离外周血淋巴细胞.16例受试者同一时间点的淋巴细胞混合.按一步法抽提两个时点细胞总RNA并纯化mRNA,分别反转录合成、标记cDNA探针,与包含4 096个人cDNA克隆的微矩阵芯片杂交,结果通过生物信息学方法分析.主要观察指标:差异表达的基因.结果:肾移植后24 h与移植前相比,肾移植受者外周血淋巴细胞差异表达的基因共有216个,其中下调基因103个,上调基因113个.这些基因主要涉及细胞信号转导、细胞凋亡等多个种类.结论:肾移植后24 h,基因芯片技术可有效地筛选出受者外周血淋巴细胞早反应基因的差异表达.

体内和体外两种方法猪小体积肝移植模型建立的比较

背景:猪肝结构与人类较为相似,结构相对简单,是研究活体肝移植较好的模型之一.供肝体积过小是临床成人活体肝移植面临的主要问题之一,探索稳定高效的动物模型对于推动小肝综合征的相关研究具有重要意义.目的:对体内和体外2种小体积肝移植物获取方法进行对比分析,以提供一个理想的成功率高的猪小体积肝移植模型建立方法.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-01/03在上海市泰科公司医疗培训部完成.材料:选用健康成年实验用广西巴马小型猪42只,制备21例次猪小体积肝移植模型.方法:选取体质量相近的广西巴马小型猪作为供受体,将动物按随机数字表法分为2组,体内切除减体积组共10对动物,体外切除减体积组共11对动物.应用全频超声乳化吸引刀+滴水双极电凝镊分别通过体内和体外2种途径,切除部分肝叶以获取小体积供肝植入受体.主要观察指标:小体积肝移植的无肝期时间,总手术时间、冷缺血时间、受体移植术中出血量和移植后肝断面胆漏例数.结果:两组在无肝期时间、总手术时间和冷缺血时间差异无显著性意义(P>0.05).在移植术中出血量上,体外切除减体积组明显多于体内切除减体积组(P<0.05).体外切除减体积组移植后肝断面胆漏发生率亦较体内切除减体积组高(50%,20%,P<0.05).结论:选取体质量相近的供受体,应用超声刀行体内切除减体积是猪小体积肝移植模型建立可行有效的方法.

皮瓣修复中前足背皮肤软组织缺损的解剖学依据及应用现状

中前足背软组织覆盖较薄,容易造成肌腱、骨头外露,导致组织坏死,功能欠佳.综合分析目前国内外用于修复中前足皮肤软组织缺损的皮瓣的解剖与临床应用现状及存在的问题.车祸及其他重物压伤易致中前足背皮肤软组织缺损,临床上常用修复方法包括带蒂皮瓣修复,游离血管皮瓣修复以及腓肠神经营养血管皮瓣,隐神经营养血管皮瓣,这些修复方法都存在各种各样的缺点.低旋转点腓肠神经营养血管皮瓣,隐神经营养血管皮瓣,足背皮神经营养血管皮瓣及外踝上皮瓣或筋膜瓣是目前临床上常用的修复中前足皮肤软组织缺损的较好方法,但都还存在或多或少的问题有待改进.

抗氧化剂在降低肝缺血再灌注损伤中的作用

肝移植、肝部分切除、缺血性休克等往往引起临床上肝脏缺血再灌注损伤,在这些过程中一个显著的特征就是氧化应激反应的发生并伴有内源性抗氧化剂的缺失.机体内复杂的抗氧化系统包括细胞内的酶类或非酶类的自由基清除剂以及饮食中的物质等.采用抗氧化剂治疗可以降低肝缺血再灌注损伤,关且当某些外科策略如缺血预处理不能实施时,药物治疗就显示出独特的优势.近年来,在肝缺血再灌注损伤治疗上有一些新的发展,如超氧化物歧化酶衍生物、含巯基化合物、选择性一氧化氮合酶抑制剂的出现及基因治疗等,多在一定程度上降低了肝缺血再灌注损伤的程度.

胰腺β细胞分化的信号通路调控

细胞替代治疗给糖尿病的根治带来了新希望.文章综述了近年来干细胞向胰岛细胞定向分化的分子研究进展,综合分析细胞信号通路在β细胞分化发育过程中所发挥的作用.其中Wnts信号是通过阻止β-Catenin分解从而激活Tcf/Lef介导的转录,促进干细胞向内胚层分化;Notch及其配体Delta或Jagged也对干细胞分化有重要影响,当Notch活性被抑制时,干细胞进入分化程序,发育为功能细胞;Hedgehog信号转导对许多发育过程是必须的,其主要以浓度依赖方式控制细胞的增殖、分化和组织的形成,这些信号通路按一定的顺序上调或下调,以启动PDX1等β细胞分化相关的转录因子的表达,从而调控着β细胞的分化发育.因此深入分析并通过调控这些信号通路为以后进行相关细胞定向分化,获取发育成熟、功能完整的β细胞,进行细胞治疗糖尿病奠定基础.

待肾移植者维持性血液透析过程中的微炎症反应

近年来实验表明,心血管疾病、感染及营养不良是维持性血液透析患者多发的并发症,也是死亡的主要原因.进一步的实验发现,透析患者存在微炎症状态,这与尿毒症本身及血液透析有关,并且患者存在的微炎症反应与上述并发症的发生均密切相关.因此,探讨维持性血液透析患者微炎症反应的发生机制,寻找有效的改善微炎症反应的治疗方法,从而提高维持性血液透析患者的生话质量和存活率,成为近年来研究的热点.

免疫分型及临床应用

血液系统疾病与白细胞分化抗原相关,白细胞分化抗原是存在于白细胞不同谱系,不同分化阶段以及激活过程中出现或消失的细胞表面抗原分子,可作为不同细胞谱系的表面标志.流式细胞术已成为诊断血液系统恶性肿瘤不可缺少的工具,广泛应用于白血病的临床检测.免疫分型是免疫治疗的必要前提,在白血病的分型中具有越来越重要的作用.通过对细胞抗原分子研究的不断深入,分子生物学等相关技术的发展,免疫学分型在白血病、多发性骨髓瘤、再生障碍性贫血及阵发性睡眠性血红蛋白尿诊断、治疗及预后中必将起到越来越重要的作用.

肺移植围麻醉期肺动脉压、混合静脉血氧饱和度及呼吸力学监测

检索PubMed数据库及中国期刊全文数据库1990-01/2008-05与肺移植等重危患者围麻醉期监测肺动脉压、混合静脉血氧饱和度和呼吸力学指标有关的文献,评价肺动脉压、混合静脉血氧饱和度及呼吸力学监测在肺移植等重危患者围麻醉期心肿功能维护中的临床价值.病肺切除及供肺植入期的监测重点是肺动脉压、心输出量和混合静脉血氧饱和度.植入肺通气后的监测重点为呼吸力学监测和混合静脉血氧饱和度,前者为预测肺移植反应及肺水肿的可靠指标,后者可指导呼气末正压调控及选择撤除体外氧合器的伟时机.将肺动脉压、肺毛细血管嵌压、心输出量及中心静脉压等血流动力学参数与呼吸力学参数及混合静脉血氧饱和度监测有机结合,构成了对心肺功能较全面的监测.通过综合分析,证实可有效地指导肺移植等重危患者围麻醉期调控和维护心肺功能.

低剂量吗替麦考酚酯在直系亲属活体肾移植中的应用

近年来,国内亲属活体肾移植呈明显上升趋势,鉴于供受体之间良好的组织相容性、排斥反应也相对较少,有学者提出适当减少免疫抑制剂剂量,但目前对此尚无一致及具体的方案.为了探讨低剂量的免疫抑制剂方案应用的可行性,使活体肾移植技术更加安全、经济,对厦门大学附属东南医院具有直系血缘关系、亲属活体肾移植患者56例,活体肾移植后2周起实施低剂量吗替麦考酚酯分散片的免疫抑制方案,人/肾存活率分别均为96.4%(54/56)和98.2%(55/56).排斥反应5例,其中2例为移植后2周内发生.肿部感染2例、带状疱疹1例、水痘1例,贫血1例、腹泻3例.结果证明应用该治疗方案疗效满意,排斥反应发生率并无增加、而肺部感染等并发症明显减少,而且节省了费用.

肝移植围手术期110例中10例死亡原因分析

目的:回顾性分析110例成人肝移植病例的1临床资料,以期筛选出影响肝移植围手术期死亡率的危险因素.方法:选择2005-01/2007-12在解放军总医院第二附属医院器官移植中心完成肝移植的资料完整、符合统计学要求的受者110例,均为经典式同种异体原位肝移植,尸体供肝.其中移植后存活<30d的10例患者列入围于术期死亡组,移植后存活/30 d的100例患者列入生存组.对影响两组患者移植后转归的因素进行比较分析,并对差异显著的影响轩素进行Logistic回归分析.结果:单因素分析结果显示,死亡组受者的终末期肝病模型评分、凝血酶原国际标准化比值、移植术中出血量及输血量均高于生存组(P<0.01),凝血酶原活动度低于生存组(P<0.05).Logistic回归分析表明,移植前终末期肝病模型评分、凝血酶原活动度是肝移植围手术期死亡率的独立危险因素.结论:移植前终末期肝病模型高评分、凝血酶原活动度低是导致肝移植患者围手术期死亡的主要原因,改善移植前受者的危重病情及凝血功能障碍能够降低肝移植围手术期的死亡率.

维持性血液透析患者心血管疾病调查及其危险因素

背景:心血管疾病是影响慢性肾脏病患者预后的重要因素,维持性血液透析患者中80%存在不同程度及类型的心血管并发症.目的:调查维持性血液透析患者心血管疾病的发病情况和病变特点,并探讨其危险因素.设计、时间及地点:病例调查分析,于2007-09在徐州医学院附属医院血液净化中心完成.对象:选择接受维持性血液透析治疗的52例尿毒症患者,男37例,女15例,年龄(55.1±16.5)岁,透析年龄平均18.5个月.方法:对52例维持性血液透析患者进行流行病学调查,收集患者临床资料和生化指标,心脏超声检查测量心脏腔径及心功能参数,分析心脏结构和功能异常的患病率、病变特点及其影响因素.主要观察指标:左房增大、瓣膜返流、瓣膜钙化、肺动脉高压、心包积液、左室肥厚、左室舒张功能减低及左室收缩功能减.结果:52例维持性血液透析患者中,瓣膜返流的患病率高为73%,左室舒张功能减低次之为71.2%,左室肥厚为67.3%,左房增大53.8%.危险因素进行单因素计量参数及多因素Logistic回归分析发现,血脂异常包括总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇增高、高密度脂蛋白胆固醇降低,血尿素氮、血尿酸、贫血(红细胞比容下降)、高血磷、低白蛋白、收缩压、透析龄、超滤量足维持性血液透析患者心血管疾病的危险因素(P<0.05).结论:维持性血液透析患者心血管疾病的患病率较高,主要表现为瓣膜返流、左室舒张功能减低、左室肥厚、左房增大.脂代谢紊乱、收缩压高、贫血、高血磷、低白蛋白可能是维持性血液透析患者并发心脏病变的主要危险因素.

肾移植术后46例肺部感染病原体及预后分析

背景:肾移植术后肺部感染与许多潜在的病原体有关.目的:分析肾移植术后肺部感染的病原体以及预后因素.设计、时间及地点:病例分析,2008-09在上海交通大学附属第一人民医院呼吸科完成.对象:1999-01/2008-08所有肾移植术后肺部感染患者46例,男37例,女9例.年龄20～65岁.方法:回顾性分析46例肾移植术后肺部感染患者的临床资料.详细记录每位患者的信息,包括:性别、年龄、起病时间,器官移植时间、症状、免疫抑制剂的使用情况、肺部浸润的情况、APACHE评分、是否使用机械通气、疾病的转归等.主要观察指标:①患者的临床特点、病原学诊断和病死率.②患者预后的单因素和多因素分析.结果:细菌仍足常见的病原体(35%),其他病原体依次为巨细胞病毒(15%)、真菌(11%)、结核(7%)、呼吸道病毒(4%)、卡氏肺孢子菌(2%)、以及蠊缨滴虫(2%).12例死亡.总的病死率为26%.各病原体间病死率无显著差异.呼吸困难,APACHE Ⅱ评分,需要机械通气是影响肾移植术后肺部感染死亡的危险因素.结论:多种病原体参与了肾移植术后肺部感染的发生,包括呼吸道病毒和蠊缨滴虫,而呼吸困难、APACHE Ⅱ评分、需要机械通气是重要的预后因素.

解放军第三军医大学新桥医院泌尿移植科黄赤兵教授

北京中医药大学附属护国寺中医医院骨科陆明博士

肝移植相关心理问题分析

肝移植是治愈终末期肝病的有效方法,但由于移植本身的特殊性及经济状况等原因,移植给患者带来了巨大的心理压力.文章分析了肝移植患者移植前及移植后存在的心理问题,证实了移植前患者除了有躯体不适外,还存在由原发病所致的不同程度的精神社会功能缺损及生活质量水平下降导致的心理障碍;移植后主要为忧郁、过分乐观、放纵的心理.探讨了缓解肝移植相关问题的思路和对策,得出结论:对患者进行心理疏导,满足患者需求心理,帮助患者了解肝移植知识有助于减轻患者心理压力,使患者积极配合医疗并接受移植.