中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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表面肌电图在周围神经损伤修复过程中的应用价值
背景:表面肌电图是一种客观量化的分析指标,其分析方法较多,具有安全、无创、无痛、可靠、客观量化等多项优点,在康复评定中起着不可替代的作用.目的:总结并分析表面机电在康复医学领域的应用研究,为进一步临床应用提供线索和方向.方法:以"Surface electromyography;rehabilitation assessment;Clinical"为英文检索词,以"表面肌电;康复评估;临床"为中文检索词,由第一作者检索Medline,PubMed,万方,维普,中国知网数据库2006至2018年表面肌电相关相关文献,经过筛选终获得59篇文献进行综述.结果与结论:表面肌电普遍的运用于康复医学及运动医学等领域,能客观、定量检测卒中患者肢体功能活动状况,特别是在运动分析、肌肉功能等方面有很好的评估作用.表面肌电图对康复医学科的康复评估与康复目标的制定起着重要作用,能比较直观的表现出肌肉功能的变化情况.
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类器官技术在肿瘤研究中的应用与展望
背景:作为一类新型的体外模型,类器官能用于研究正常组织器官的生理特性,也能稳定地维持肿瘤细胞在体内的特征,同时可应用于抗肿瘤药物筛选和个性化治疗.目的:简述类器官技术的发展历程及现状,综述其在肿瘤研究中的应用.方法:第一作者以"类器官,肿瘤研究,3D培养,干细胞;Organoid,Three-dimensional culture,Cancer research,Stem cell"为关键词,检索2013年5月至2018年5月期间收录在CNKI、PubMed数据库中的相关文献,文献类型包括临床研究、基础研究及综述类文章,排除与文章研究目的无关及重复性的文献,终纳入47篇文献进行综述.结果与结论:肿瘤类器官为癌症研究和治疗提供了可靠的模型,特别是为个性化癌症治疗开辟了新的视野.肿瘤来源的类器官是源自组织或肿瘤特异性干细胞的三维组织细胞簇,它可模拟体内肿瘤特征及肿瘤细胞异质性.目前,科研人员通过优化各种培养条件成功产生了许多肿瘤类器官,包括结肠癌、前列腺癌、胃癌、乳腺癌和胰腺癌、宫内膜/卵巢癌、子宫癌肉瘤、尿路上皮癌和肾癌等.但类器官培养具有明显的局限性,其中之一就是该模型中神经、血管及免疫细胞缺乏,这就使其不能完全表现出器官的全部特征,对于疾病过程的模拟也只能是部分重现.
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人参皂苷Rb1与皮瓣缺血再灌注损伤的研究与进展
背景:在整形外科中,缺血再灌注损伤是常见的病理生理过程,在随意皮瓣、游离皮瓣及复合组织瓣移植手术中都时有发生,严重者将导致皮瓣部分甚至全部坏死.近年来大量研究报道了人参皂苷Rb1在多种组织器官缺血再灌注损伤中均有良好的保护作用.目的:就皮瓣缺血再灌注损伤机制与人参皂苷Rb1的作用机制研究进展综述.方法:检索中国期刊全文数据库(CNKI)和PubMed数据库1996年1月至2018年6月相关文献;检索词为"皮瓣,缺血再灌注损伤,人参皂苷Rb1;Ginsenosides,Reperfusion Injury,Flaps".纳入有关人参皂苷Rb1药理作用、人参皂苷Rb1减轻组织器官缺血再灌注损伤及皮瓣缺血再灌注损伤研究的文献进行分析探讨.结果与结论:皮瓣缺血再灌注损伤是缺血组织器官恢复血供后出现的一种复杂的非特异性损伤级联反应,涉及过量的氧自由基生成、炎症细胞激活浸润及其与内皮相互作用、能量衰竭、细胞内钙超载、一氧化氮生成等方面.人参皂苷Rb1可通过其抗氧化、抑制炎症反应、增加一氧化氮合成、抗凋亡、抑制钙超载等机制在皮瓣缺血再灌注损伤中发挥保护作用.
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心血管系统建模仿真的研究进展及医学应用
背景:近年来,建模仿真技术作为一种有效的测试研究手段在军事演练、工业试验及医疗检测等众多领域得到了越来越多的信赖和应用,其中以医疗心血管系统为例就汇集众多的学科及行业人员加入了该方面研究.目的:通过对相关论文的分析和总结,提供较为全面的心血管系统仿真介绍及方法参考.方法:以"心血管系统,建模仿真,心脏模型"和"cardiovascular system,modeling simulation,the heart model"为检索词进行查找,应用计算机在PubMed数据库、维普科技期刊全文数据库和中国知网-期刊论文库中检索1974年至2018年与心血管建模仿真相关应用的相关文章,对心血管系统建模方法、系统仿真分类种类以及近年来心血管建模仿真在冠心病、心瓣膜病、心力衰竭、高血压病、心肌梗死等心血管疾病中的应用进行了概括性总结,进而对心血管后续研究发展进行了展望和预测分析.结果与结论:①根据临床、医学教学及科研需求整理总结包括:冠状动脉循环系统的血流动力学模型,对冠心病情况下的冠状动脉循环系统进行仿真,解决了创伤性破坏及价格昂贵的问题;对冠心病的早期诊断和治疗具有重要意义;②二尖瓣三维仿真模型分析了二尖瓣的应力分布,在几何结构上体现更为精细,可以辅助完善治疗方案,间接降低手术风险;③心血管系统着重分析研究较多的电网络模型报道,对心血管系统疾病中的临床分析和诊断具有一定的辅助作用;④人体左心室的三维有限元力学模型的建立,对心肌梗死病变情况下电兴奋传播和心肌梗死病变进行仿真,可以指导临床分析验证;⑤通过心血管系统建模仿真全面总结,有助于进一步增进对心血管疾病机制的认识,同时对心血管疾病的预防、辅助诊断和临床治疗也具有重要意义.
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三七总皂苷干预激素性股骨头缺血坏死模型兔的超微结构评价
背景:前期研究证实三七总皂苷对早期兔酒精性股骨头缺血性坏死骨细胞超微结构形态的修复可以起到良好的促进作用.目的:透射电镜观察三七总皂苷干预兔激素性股骨头缺血坏死骨细胞形态结构变化.方法:9-10周龄健康雄性新西兰兔90只,体质量3.5-4.0 kg,由广西中医药大学实验中心提供.采用改良马血清联合甲泼尼龙琥珀酸钠造模方法建立兔激素性股骨头缺血性坏死模型.实验过程死亡15只,余75只分为生理盐水组、鹿瓜多肽组、三七总皂苷组各25只,分别生理盐水、鹿瓜多肽、三七总皂苷干预治疗5周,透射电镜观察各组骨细胞结构变化.结果与结论:①生理盐水组兔股骨头骨细胞成熟减少,血管内皮细胞受损,线粒体肿胀,嵴结构模糊,核碎裂,脂滴出现;②三七总皂苷组、鹿瓜多肽组兔股骨头骨细胞成熟,血管内皮细胞损伤少,肿胀线粒体减轻,结构清晰,肥大脂肪细胞及脂滴减少;③三七总皂苷组和鹿瓜多肽组骨细胞形态结构变化优于生理盐水组(P<0.05);④结果说明,三七总皂苷干预兔激素性股骨头缺血性坏死,对骨细胞形态结构有修复作用.
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小尾寒羊主动脉瓣及二尖瓣置换过程中的麻醉管理
背景:目前有关小尾寒羊心脏手术实验麻醉方法方面的研究甚少,其有效性和安全性尚需大量的实验进行验证.目的:探讨小尾寒羊心脏手术麻醉方法的有效性和安全性.方法:市售雄性小尾寒羊40只,年龄(10.95±0.89)月,体质量(71.3±7.7)kg.小尾寒羊肌注氯胺酮8-12 mg/kg+东莨菪碱10-20μg/kg(或者静注氯胺酮2.5-3.5 mg/kg+东莨菪碱10-15μg/kg)进行基础麻醉,再静脉注射丙泊酚和芬太尼全身麻醉下行主动脉瓣及二尖瓣置换.观察气管插管反应、小尾寒羊围术期(切皮前5 min、切皮后5 min、体外转机前5 min、体外停机后5 min、术毕、术后1 d)生命体征、血流动力学变化、麻醉恢复情况及围术期并发症.结果与结论:①所有动物气管插管均成功;②围术期镇静镇痛效果满意,生命体征平稳;无体动发生,能很好地耐受瓣膜置换术;③围术期血气分析显示内环境稳定;④未发生反流误吸;无死亡;⑤结果说明,丙泊酚复合异氟烷加小剂量芬太尼全身麻醉用于小尾寒羊心脏手术血流动力学平稳,术后苏醒快,麻醉效果好,安全性高.
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载脂蛋白E基因敲除(APOE-/-)小鼠基因的鉴定方法及模型应用
背景:载脂蛋白E基因敲除小鼠是广泛应用于动脉粥样硬化研究的理想模型,也有用于其他疾病的相关报道,但是缺乏对其模型应用的总体概括.目的:系统总结载脂蛋白E基因敲除小鼠在疾病模型中的应用情况.方法:将南京大学生物模式中心所引进的SPF级载脂蛋白E基因敲除小鼠雌雄各6只饲养于SPF实验室,按照1:1搭配进行保种繁殖,采用煮沸裂解法以提取鼠尾组织基因组DNA,采用PCR法检测其基因型.将基因鉴定为载脂蛋白E基因敲除雄性小鼠10只普通饲料喂养至8周龄,继而予以西方饮食饲料(北京华阜康公司提供,型号:H10141,脂肪21％,胆固醇0.15％)连续喂养至25周龄,同时选用8周龄C57/6 J野生型雄性小鼠10只普通饲料喂养至25周龄.结果与结论:①基因鉴定:琼脂糖凝胶电泳显示载脂蛋白E基因敲除小鼠PCR产物与预期的目的基因片段的大小一致;②相关指标变化:与野生小鼠相比,载脂蛋白E基因敲除小鼠的体质量、肝脏质量、脾脏质量、腹部脂肪质量、肝指数、血清中总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、谷丙转氨酶及谷草转氨酶明显升高(P<0.05);③组织学改变:载脂蛋白E基因敲除小鼠苏木精-伊红染色主动脉弓、主动脉瓣、颈总动脉部位有明显的斑块,野生鼠无斑块;载脂蛋白E基因敲除小鼠肝脏苏木精-伊红染色有大小不等的空泡,细胞核被挤到一边,野生鼠肝脏核大居中,胞浆红染,无空泡现象;④结果证实,实验采用煮沸裂解法以提取DNA,采用PCR法检测成功鉴定了载脂蛋白E基因敲除小鼠的基因型.载脂蛋白E基因敲除小鼠是研究动脉粥样硬化、脂肪肝、高血脂、高胆固醇血症及肥胖等许多疾病的理想模型.
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脊髓电刺激治疗房颤模型犬炎性因子水平的变化
背景:有研究表明脊髓电刺激治疗可通过调节心脏自主神经的平衡起到抑制房颤的作用,但脊髓电刺激治疗对房颤引起的炎症反应的影响亦少见文献报道.目的:观察脊髓电刺激治疗对房颤模型犬炎性因子水平的影响.方法:选取昆明医科大学实验动物中心的成年比格犬9只作为实验犬,将其随机分为空白对照组3只,房颤模型组3只,接受脊髓电刺激的房颤模型组3只,后2组通过右心房快速起搏制作房颤犬模型,并植入心电追踪器监测房颤负荷,脊髓电刺激组实验犬造模成功后植入脊髓刺激器并对其进行长期慢性电刺激(12周),分别在房颤模型组建立房颤模型的前后(即植入起搏器前及第一次出现大于15 min的持续性房颤时),脊髓电刺激组行脊髓电刺激治疗前后(即脊髓电刺激治疗前及脊髓电刺激治疗12周结束时)抽取实验犬静脉血,同期抽取空白对照组犬静脉血(与房颤模型组植入起搏器前同时抽血),分离血清以ELISA法测定炎性因子C-反应蛋白、超敏C-反应蛋白、白细胞介素1,6及补体C3的浓度.结果与结论:①炎性因子质量浓度:房颤模型组各炎性因子质量浓度较空白对照组均升高(P<0.05);脊髓电刺激组较房颤模型组各炎性因子质量浓度均降低(P<0.05);房颤模型建模后的炎性因子均较建模前升高(P<0.05);脊髓电刺激组治疗后炎性因子均较治疗前降低(P<0.05);②房颤负荷:脊髓电刺激组较房颤模型组的房颤负荷明显降低(P<0.05);③结果证实,房颤可引起炎症反应,脊髓电刺激治疗对房颤有明显抑制作用,可抑制由房颤引起的炎症反应.
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人羊膜修复急性坐骨神经损伤模型大鼠
背景:人羊膜具有免疫原性低、可以减少瘢痕形成、抑制炎性反应、抗血管生成等作用.目的:观察人羊膜对坐骨神经急性损伤修复与再生的作用.方法:选用成年雌性SD大鼠(河北医科大学实验动物中心提供)90只,制备坐骨神经急性损伤模型,随机分为羊膜组、几丁糖组、空白对照组,每组30只.羊膜组坐骨神经损伤处用新鲜羊膜包裹,羊膜两端各缝合1针固定;几丁糖组坐骨神经损伤处近端用9-0无创缝线做标记,损伤神经周围注入约0.5 mL医用几丁糖凝胶;空白对照组坐骨神经钳夹处近端用9-0无创缝线做标记,不用任何材料处理.术后进行大体、光镜、透射电镜观察以及轴突图像分析和神经电生理检测.结果与结论:①大体、光镜、透射电镜观察显示:与空白对照组相比,羊膜组大鼠术后肢体肿胀较轻,神经充血水肿轻,与周围组织粘连轻,炎性反应小,成纤维细胞及新生血管少,许旺细胞内细胞器增生活跃,成纤维细胞及胶原产生少,修复时程短,与几丁糖组差别不大;②轴突图像分析显示:羊膜组和几丁糖组髓鞘厚度及有髓纤维直径大于空白对照组(P<0.05);③神经电生理检测显示:3组神经传导速度比较无明显差异,3组之间波幅比较差异均有显著性意义(P<0.05),羊膜组和几丁糖组潜伏期均短于空白对照组(P<0.05);④结果表明,羊膜可为神经修复提供相对稳定微环境,减少粘连,抑制炎性反应,促进神经修复与再生,获得较好的治疗效果.羊膜在体内存留时间长,有利于神经再生和微环境的维持,利于神经再生与功能恢复,羊膜要优于几丁糖.
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化学神经根炎症模型大鼠的制备及评价
背景:化学神经根造模实验优化为椎间盘的研究提供稳定的动物模型.目的:探索甲醛浸泡滤纸诱发腰椎间盘突出-化学性神经根炎症大鼠模型构建方法,寻找佳手术造模方案及造模浓度.方法:先将10只由北京市华阜康生物科技股份有限公司提供的SD大鼠随机分为2组,分别采用咬断棘突及不咬断棘突后,在背根神经加以放置预浸泡4％甲醛滤纸进行造模,并结合行为学观察,确定适手术造模方案.然后探索不同浓度甲醛溶液浸泡滤纸对造模的影响.将另20只SD大鼠随机分为4组,其中3组15只SD大鼠采用上述确定的手术方案(即咬断棘突横突方案),分别在背根神经放置预浸泡1％,2％,4％甲醛溶液滤纸造模,并以Siegal神经评分、苏木精-伊红染色及相关炎症因子的检测结果综合评价造模效果.结果与结论:与不咬断棘突的大鼠相比,咬断棘突L4、L5的大鼠Siegal神经评分及评级明显升高.与正常对照组相比,1％,2％,4％甲醛组大鼠在造模后2-8 d时Siegal神经评分及评级明显升高,但仅有2％和4％甲醛组的效果可以维持到2周时,且大鼠神经、肌肉、椎间盘组织内均出现较明显的炎症细胞浸润,血清相关炎症因子水平增高明显.提示改进后的模型制备方法,成模率高、死亡率低、模型稳定,可为后续疾病研究及药物研发提供理想的动物模型.
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高脂饮食与线栓法制作慢性缺血模型鼠:方法的评估与比较
背景:有研究使用线栓法建立慢性缺血动物模型,但其观察周期较长,实验动物经过手术及疾病的打击,生存期有可能会缩短.作者在此基础上加用高脂饮食因素,进一步确立可靠的慢性缺血动物模型.目的:探讨高脂饮食大鼠线栓法建立慢性缺血动物模型的可行性.方法:健康2周龄SD大鼠40只,体质量为50-70 g,由承德医学院动物实验中心提供.采用随机数字表法将大鼠分成实验组及对照组:实验组大鼠选用高脂饲料进行喂养,对照组大鼠选用普通饲料进行喂养,2组均采用线栓法建立大鼠后肢缺血模型.分别于大鼠模型建立成功后第1,2,4,6周进行肌力观察、激光多普勒血流仪检测后肢血流情况、苏木精-伊红染色观察腓肠肌组织和血管组织变化.结果及结论:①实验组造模后1周大部分大鼠出现肌力异常表现,对照组大部分未出现(P<0.05);造模后2周及4周2组大鼠大部分均出现明显肌力异常表现,差异无显著性意义;造模后6周对照组肌力异常例数少于实验组;②激光多普勒血流检测及组织学检测均提示实验组较对照组要早出现缺血表现,且实验组缺血表现恢复程度较对照组要低;③结果说明,线栓法可有效制作慢性缺血大鼠模型,合并高脂饮食可较普通饮食早出现缺血表现,且高脂饮食可使慢性缺血状态持续时间更长.
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野生型小鼠慢性根尖周炎模型PLCγ2的表达
背景:研究表明,抑制BTK-PLCγ2-Ca2+信号通路,破骨细胞的形成和功能受到抑制,说明PLCγ2参与了破骨细胞的形成和分化.目的:通过建立野生型小鼠慢性根尖周炎模型,观察PLCγ2在小鼠实验性根尖周炎组织中的表达.方法:选用20只C57BL/6L野生型雄性小鼠,随机选取16只为实验组行双侧下颌第1磨牙开髓术,并将开髓后的髓腔暴露于口腔环境,诱导形成根尖周炎病损.分别于开髓后1,2,3和4周各随机处死4只小鼠,分离下颌骨.剩余4只不开髓作为空白对照,0周时处死后分离下颌骨.制作冰冻切片后用苏木精-伊红染色方法观察小鼠根尖组织炎症情况,免疫组织化学染色检测PLCγ2的表达与分布情况,酶组织化学染色检测根尖组织炎症区域破骨细胞的表达.结果与结论:①苏木精-伊红染色结果:对照组小鼠下颌第1磨牙牙周组织几乎无炎性细胞浸润;实验组1-4周,下颌第1磨牙牙周组织炎性细胞浸润范围越来越大,牙槽骨破坏也逐渐增多,说明成功建立了小鼠根尖周炎模型;②免疫组织化学染色结果:发现PLCγ2在小鼠根尖周炎的0-4周都有表达;对照组根尖周组织中仅有少量PLCγ2的表达;实验组1-4周PLCγ2阳性表达随炎症细胞浸润范围的逐渐扩大而增长(P<0.05);③TRAP染色结果:对照组根尖牙周组织中几乎不能观察到破骨细胞;实验组1周,可观察到少量的多核破骨细胞;实验组2周,破骨细胞的数量持续增多;实验组3周达到峰值;实验组4周破骨细胞数量逐渐减少;与对照组相比差异均有显著性意义(P<0.05);④相关性分析:TRAP阳性细胞计数值和PLCγ2阳性细胞计数之间有显著相关性(r=0.627,P<0.001);⑤结果说明,PLCγ2在小鼠根尖周组织中有表达,提示其可能与根尖周炎症反应和骨吸收作用相关.
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构建不同脊髓损伤节段模型大鼠下肢功能恢复的评价
背景:研究脊髓损伤的病理生理、解剖结构等的改变,需要建立一个理想的动物模型,在选好一种损伤方式的同时选择一段安全有效的脊髓同样至关重要.目的:观察不同脊髓损伤节段对下肢功能恢复情况的影响.方法:将72只SD大鼠随机等分为6组:T8组、T9组、T10组、T11组、T12组及假手术组.T8组、T9组、T10组、T11组、T12组采用微型血管夹闭法分别夹闭T8,T9,T10,T11,T12脊髓,建立脊髓损伤模型.假手术组仅切除椎板暴露硬脊膜.结果与结论:①T8组、T9组、T10组、T11组和T12组大鼠随着造模后时间的延长,爬网格实验踏空次数减少;②与假手术组相比,T8组、T9组、T10组、T11组和T12组大鼠的BBB评分明显降低.在损伤后第2-4周时,T9组、T10组和T11组大鼠的BBB评分高于T8组和T12组,且其中T10组大鼠的BBB评分高于T9组和T11组;③提示T10是脊髓损伤后下肢功能恢复好的节段.
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实验性根尖周炎模型大鼠髓样分化因子88的表达
背景:研究发现大鼠牙卵泡中髓样分化因子88有表达,并影响牙齿的萌出和破骨细胞数量.目的:进一步验证髓样分化因子88在大鼠根尖周炎动物模型中的表达.方法:选取6周龄雄性SD大鼠25只,由大连医科大学SPF动物实验中心提供.将大鼠下颌第1磨牙开髓,建立大鼠实验性根尖周炎模型,并将开髓0周作为对照组;开髓1,2,3,4周作为实验组.开髓后于各时间点随机选取5只大鼠,麻醉后取材,用多聚甲醛固定下颌骨,组织脱钙,制作冷冻切片.分别用苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色观察根尖组织炎症区域的病理变化,并用RT-PCR检测髓样分化因子88在实验性根尖周炎模型中的表达.结果与结论:①苏木精-伊红染色:结果显示实验组的根尖区有炎症浸润,并向周围蔓延扩展,表明成功建立了大鼠实验性根尖周炎动物模型;②免疫组织化学染色:结果显示髓样分化因子88在1,2,3,4周4个时间点根尖周炎症区域中均呈阳性表达,髓样分化因子88阳性细胞的表达量在1-3周明显增加,并在第3周时出现高峰;而在4周时,其表达量降低;仅少量髓样分化因子88阳性细胞出现在正常对照组;③RT-PCR结果显示髓样分化因子88 mRNA表达量从1-3周逐渐增高,到第4周下降;④结果说明,在实验性根尖周炎的动物模型中髓样分化因子88有表达,并随时间呈一定的表达趋势,髓样分化因子88可能参与了根尖周炎的发生及根尖牙槽骨的吸收.
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幼兔颅盖骨成骨细胞的分离培养及鉴定
背景:成骨细胞的提取分离尚无公认的高效简便的实验方法.目的:探讨用改良酶消化法体外分离、培养并鉴定新西兰幼兔颅盖骨成骨细胞的实验方法.方法:实验利用成纤维细胞胰酶消化时脱壁早,终止消化后贴壁快的特点,采用改良酶消化法分离3 d龄新西兰幼兔颅盖骨成骨细胞并用差速贴壁法纯化培养.倒置显微镜每日观察细胞形态及其生长状况,采用MTT法检测细胞增殖情况并绘制细胞生长曲线,测定碱性磷酸酶含量,免疫组织化学染色法检测Ι型胶原、骨钙素,Runt相关转录因子2(Runt related transcription factor 2,RUNX2)表达,茜素红染色矿化结节等对成骨细胞及其生物化学特性进行鉴定.结果与结论:①成功分离提取并差速贴壁法纯化培养成骨细胞;②分离培养的成骨细胞贴壁生长,显示正常的成骨细胞形态和生长特征;细胞增殖能力良好;③细胞碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原、骨钙素、RUNX2染色均阳性,常规培养21 d茜素红染色形成矿化结节;④结果证实,改良酶消化法培养出的成骨细胞具有典型的成骨细胞特征,成分单一,存活率高.
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去卵巢大鼠血清来源外泌体促进原代成骨细胞的增殖
背景:骨代谢过程中,成骨细胞的数量和功能的变化影响骨的生物学特性,外泌体能够通过细胞间的传递进行信号传递,具有促进细胞增殖、分化的潜能.目的:探讨骨质疏松大鼠血清中外泌体的性质及其对成骨细胞的作用.方法:32只成年健康雌性SD大鼠,24 h新生SD大鼠若干只用于原代成骨细胞分离培养,实验动物由广东省医学动物实验中心提供.①建立去卵巢骨质疏松大鼠模型,以假手术组大鼠为对照组.通过ExoQuick提取对照组和骨质疏松大鼠血清中外泌体,用电镜、nanosight、Western blotting进行鉴定;②取对数期的原代成骨细胞接种于96孔细胞培养板中,接种浓度为2×104/孔.实验分为空白对照、外泌体对照组、骨质疏松外泌体组,分别加入DPBS、正常血清外泌体和骨质疏松血清外泌体,100μL/孔,CO2培养箱培育1 d,采用四甲基偶氮唑盐比色法检测成骨细胞的增殖;酶联免疫吸附试验法检测外泌体中血管内皮生长因子的浓度.结果与结论:①成功提取大小在100 nm以下外泌体颗粒;②蛋白定量检测12周组外泌体蛋白质量浓度高;不同时间点外泌体颗粒数12周组略高,但未见明显差异;③骨质疏松大鼠血清来源外泌体与空白对照组及正常外泌体组相比较,明显促进成骨细胞的增殖,且外泌体内血管内皮生长因子升高;④结果说明,骨质疏松大鼠血清中外泌体能够促进成骨细胞的增殖.
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骨密度测试联合老年人运动功能量表-25评估筛查老年人基础运动障碍及跌倒风险:天津市6个社区1458例调查
背景:老年人运动功能量表(geriatric locomotive function scale,GLFS)-25、平衡功能评定、步态测试等常用于筛查老年人运动功能障碍和预测跌倒风险的方法均属于主观评定方法,因此结合客观的评价指标能更为全面地反映老年人的运动功能状态和平衡功能.目的:探讨GLFS-25量表联合骨密度测试在筛查天津市6个社区老年人基础运动障碍和评估患者跌倒风险中的应用效果.方法:采用分区整群随机抽样调查法抽取天津市和平区、南开区的6个社区老年人1458例进行调查,根据GLFS-25得分情况将其分为运动功能障碍组(198例,GLFS-25≥16分)和非运动功能障碍组(1260例,GLFS-25<16分).比较两组调查对象的身高、体质量、体质量指数、体脂肪率、内脏脂肪面积等相关因素,比较两组受试者骨密度、跌倒次数、膝关节灵活度和下肢力量、平衡功能评分及步态分析,并进行相关性分析;采用受试者工作特征曲线分析GLFS-25联合骨密度测试诊断老年人基础运动障碍及跌倒风险的效能.结果与结论:①运动功能障碍组身高显著低于非运动功能障碍组、体质量指数和体脂肪率显著高于非运动功能障碍组(P<0.05),运动功能障碍组骨密度值显著低于非运动功能障碍组(t=7.467,P=0.000);②非运动功能障碍组的过去1年平均跌倒次数和跌倒危险指数显著低于运动功能障碍组,30 s内坐立姿势转换次数、自我平衡感觉评分显著高于运动功能障碍组(P均为0.000);非运动功能障碍组的总路程、平均步速、左右平均步长均显著高于运动功能障碍组,其左右步幅变异系数均显著低于运动障碍组(P<0.05);③Pearson相关性分析结果显示,GLFS-25评分、骨密度与身高、体质量指数和体脂肪率无明显相关性(P>0.05),GLFS-25评分与骨密度、自我平衡感觉、总路程、平均步速、左右平均步长均呈负相关,与跌倒次数、跌倒危险指数、左右步幅变异系数呈正相关(P<0.05);④受试者工作特征曲线曲线分析显示,GLFS-25联合骨密度预测运动功能障碍及跌倒风险的曲线下面积分别为0.895和0.903,均显著高于GLFS25和骨密度单独检测,其灵敏度分别提高至90.73％和90.15％;⑤结果说明,天津市市区社区老年人存在基础运动功能障碍者的比例较高,运动功能障碍患者的GLFS-25评分更高、骨密度更低,由于其膝关节灵活度和下肢力量及平衡能力更差,跌倒风险相应也更高,而GLFS-25联合骨密度测试在老年人基础运动障碍的筛查和跌倒风险评估预测中的效能更优.
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生物信息分析细粒棘球绦虫EgA31蛋白T细胞及B细胞的优势抗原表位
背景:EgA31蛋白是参与成虫吸盘肌收缩的一类蛋白,是细粒棘球蚴绦虫保护性免疫中重要的候选疫苗分子.目的:应用生物信息学方法对细粒棘球绦虫EgA31蛋白进行分析,预测其可能的T细胞及B细胞优势抗原表位.方法:从GenBank中获取EgA31蛋白的氨基酸序列(GenBank登记号为AAC21558.1),利用ProtParam在线程序分析EgA31蛋白的分子质量、理论等电点、氨基酸组成、原子组成、消光系数、不稳定系数和总平均疏水性,DNAstar Protein模块、SOPMA在线服务器分析蛋白二级结构,Phyre的同源建模服务器预测其蛋白质三级结构,后通过ABCpred、BepiPred、SYFPEITHI、IDBE等软件联合预测细粒棘球绦虫EGA31蛋白的T细胞及B细胞的优势抗原表位.结果与结论:①EgA31蛋白由601个氨基酸组成,其中含有112个强碱性氨基酸,121个强酸性氨基酸,归类为不稳定且亲水性蛋白;②在线分析发现,EgA31蛋白的二级结构中α-螺旋约占82.36％,延长链约占4.16％,β-转角约占3.16％,无规则卷曲约占10.32％;③通过ABCpred、BepiPred、SYFPEITHI、IDBE等软件联合分析后预测了4段优势T细胞抗原、6段优势B细胞抗原以及1段T-B细胞联合表位;④生物学信息方法能较为全面地预测细粒棘球绦虫EgA31蛋白的优势T细胞及B细胞抗原表位,为进一步研制疫苗和检测试剂奠定了基础.
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脂联素干预高糖介导人牙周膜细胞凋亡的相关机制
背景:脂联素是近发现的一种由脂肪细胞分泌的特异蛋白质,因其在调节糖脂代谢和抗氧化应激等方面的功效,而被认为是治疗糖尿病及其并发症的潜在物质.目的:探讨脂联素干预对高糖介导人牙周膜细胞凋亡及其经典Wnt/β-catenin信号转导通路的影响.方法:体外复苏培养人牙周膜细胞.将所有细胞随机平均分为4组:对照组(正常RPMI1640完全培养基,葡萄糖浓度为11 mmol/L),高糖组(葡萄糖浓度40 mmol/L的RPMI1640培养基),甘露醇组(RPMI1640培养基+甘露醇19.5 mmol/L)和脂联素组(葡萄糖浓度40 mmol/L的RPMI1640培养基+20 mg/L脂联素).在培养24-96 h后的不同时间点,采用MTT法检测各组细胞的细胞存活情况,采用流式细胞术检测各组细胞周期及凋亡情况的变化.通过RT-PCR和Western blot检测Wnt1、Wnt10b及β-catenin的表达水平.结果与结论:①高糖在体外对人牙周膜细胞有显著的抑制增殖和促进凋亡作用,但对细胞周期的影响不明显;②人牙周膜细胞经体外高糖培养基培养24-96 h后,其抑制增殖作用呈时间依赖性;而脂联素则显著提高了高糖干预下细胞的增殖并抑制了细胞凋亡(P<0.05);③RT-PCR和Western blot结果显示,与对照组及甘露醇组相比,高糖组Wnt1、Wnt10b及β-catenin mRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.05),脂联素干预后Wnt1、Wnt10b及β-catenin mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05);④结果提示,高糖条件可以促进人牙周膜细胞凋亡,抑制细胞增殖,对细胞周期无显著影响.而脂联素可以抑制上述作用,可能通过上调Wnt1和Wnt10b表达继而激活Wnt/β-catenin信号转导通路发挥作用.
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过表达雌激素相关受体α干预沉默Bak1、Bcl2重组腺病毒载体转染MG63细胞的增殖与分化
背景:雌激素缺乏是绝经后骨质疏松症的主要发病机制,而关于雌激素相关受体α(estrogen-related receptor alpha,ERRα)与骨质疏松症的相关性研究较少,ERRα在骨质疏松症中的具体作用及其机制在目前尚不明确.目的:研究过表达ERRα对沉默Bak1、Bcl2重组腺病毒载体转染的MG63细胞和相关蛋白的影响.方法:构建过表达ERRα和沉默Bak1、Bcl2腺病毒载体,将培养好的MG63细胞分成空载病毒组、Ad-shBak1组、Ad-shBcl2组、Ad-shBak1+shBcl2组,过表达ERRα进行干预.MTT法检测细胞增殖,考马斯亮蓝蛋白定量检测碱性磷酸酶活性,流式法测定钙离子浓度,Western blot法分析骨调节蛋白(骨形态发生蛋白4、结缔组织生长因子、骨桥蛋白、Runt相关转录因子2、肿瘤坏死因子α)的表达.结果与结论:①与空载病毒组对比,Ad-shBak1组的细胞活性、碱性磷酸酶活性均升高,钙离子浓度降低,各骨调节蛋白除肿瘤坏死因子 α 降低外,其余均升高;Ad-shBcl2组细胞活性、碱性磷酸酶活性、结缔组织生长因子均降低,但无显著性意义(P>0.05),钙离子浓度、骨形态发生蛋白4、Runt相关转录因子2均降低,骨桥蛋白、肿瘤坏死因子α显著升高(P<0.01);Ad-shBak1+shBcl2组的细胞活性、碱性磷酸酶活性稍升高,钙离子浓度稍降低,各骨调节蛋白水平均升高,但差异不明显(P>0.05);②与Ad-shBcl2组比较,Ad-shBak1组与Ad-shBak1+shBcl2组细胞活性、碱性磷酸酶活性升高,钙离子浓度显著降低,除肿瘤坏死因子α水平显著降低外,其余骨调节蛋白水平显著升高(P<0.01或P<0.05);③结果提示,过表达ERRα可提高重组腺病毒Bak1转染后的MG63细胞增殖和碱性磷酸酶活性,降低钙离子浓度,且对骨调节蛋白有一定影响作用.
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人参皂苷Rg1对氧糖剥夺/复氧复糖损伤PC12细胞的保护机制
背景:人参皂苷具有抗肿瘤、抗氧化、抗疲劳、抗衰老、降血脂、增强记忆力、提高免疫力等作用,其中Rb1和Rg1是人参皂苷的主要的活性成分.但人参皂苷Rg1对氧糖剥夺诱导的PC12细胞凋亡是否也有保护作用,尚不清楚.目的:观察人参皂苷Rg1预处理对于PC12细胞氧糖剥夺/复氧复糖模型中PC12细胞活力、survivin及caspase-3表达和细胞凋亡的影响.方法:采用构建的PC12细胞氧糖剥夺/复氧复糖模型,并使用5,10,20,40μmol/L的人参皂苷Rg1对其进行预处理,以正常细胞做对照.通过MTT法检测细胞活性,通过免疫细胞化学技术检测survivin及caspase-3蛋白,通过TUNEL法检测细胞凋亡.结果与结论:①细胞活力检测氧糖剥夺/复氧复糖组细胞活性明显下降(P<0.05),人参皂苷Rg1干预后药物组各亚组细胞活性均较氧糖剥夺/复氧复糖组有所恢复,但仍较正常组为低(P<0.05);②人参皂苷Rg1干预使survivin阳性细胞增多,caspase-3阳性细胞和TUNEL阳性细胞计数值减少;③神经元凋亡出现与人参皂苷Rg1诱导的survivin成负相关,与caspase-3成正相关.④结果说明,人参皂苷Rg1对于PC12细胞氧糖剥夺/复氧复糖处理后的survivin蛋白表达具有促进作用,并通过促进survivin蛋白的表达来对抗caspase-3的表达,从而抑制细胞凋亡,且该作用具有剂量依赖关系.
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针灸并构音训练脑卒中后构音障碍:文献计量分析及临床治疗结果验证
背景:卒中后构音障碍目前在治疗上尚缺乏能明显奏效的药物,单纯的康复训练效果不是很显著,传统中医针灸治疗在临床上取得了不错的效果.目的:应用文献计量学方法分析卒中后构音障碍的研究重点及趋势;并观察针灸合并构音训练治疗卒中后构音障碍的效果.方法:①应用计算机检索中国知网CNKI数据库2004年1月至2018年12月收录的与卒中后构音障碍相关文献,利用知网的分组分层次浏览功能及可视化工具分析文献的发表年度趋势,作者、机构及基金分布情况等;阅读文题和摘要,排除综述文章及护理影像类文献,筛选针灸相关的文章,总结分析针灸治疗卒中后构音障碍的方法;②纳入2013年6月至2015年8月在沈阳市第一人民医院治疗的卒中后构音障碍患者96例,按治疗方式不同分为2组,对照组48例进行构音训练,治疗组48例进行构音训练+针灸(舌针、项针)治疗,每个患者接受2个疗程共40 d治疗,应用改良Frenchay构音障碍评价法评估临床疗效,并记录不良反应.结果与结论:①共检索到卒中后构音障碍相关的中文文献121篇,从2004年发表1篇至2018年14篇,整体呈上升趋势;发表卒中后构音障碍相关文章多的是成都中医药大学附属医院(5篇),均为胡卡明团队发表,发表文章多前10个单位及前8位作者中有60％来自中医药大学或中医药大学附属医院;121篇中有72篇包含针灸治疗,其中单纯舌针治疗的7篇,舌针+项针治疗的8篇,舌针+头针治疗的7篇,针灸+电刺激治疗的12篇,针灸+高压氧治疗的3篇,针灸+康复训练的35篇;②在沈阳市第一人民医院治疗的卒中后构音障碍患者96例的临床治疗结果显示:治疗组总有效率92％,明显高于对照组总有效率54％,组间比较差异有显著性意义(P<0.05).提示:在中国,目前研究卒中后构音障碍治疗多的是中医药大学及相应的附属医院,中医方法尤其针灸是治疗卒中后构音障碍的重要手段,常用的是舌针及项针.临床治疗结果显示,项针、舌针联合构音训练治疗脑卒中后构音障碍疗效满意.
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肝移植后多重耐药菌感染的相关危险因素
背景:肝移植后多重耐药菌感染严重影响肝移植后患者的存活率和死亡率,多重耐药菌感染治疗的高失败率也引起了关注.目的:分析肝移植后多重耐药菌感染的危险因素.方法:采用队列研究对114例肝移植患者的临床资料进行收集和分析,多重耐药菌感染组共28例;非多重耐药菌感染组共86例.统计多重耐药菌感染率,进行单因素分析及多元Logistic回归分析确定独立危险因素.结果与结论:①肝移植后多重耐药菌的感染率为24.6％;②多元Logistic回归分析结果显示,4个因素是影响肝移植后多重耐药菌感染的独立危险因素:凝血酶原时间延长(OR:3.102,95％CI 0.066-9.024,P=0.038)、ICU留置时间≥10 d(OR:3.745,95％CI 1.313-10.687,P=0.014)、气管插管时间≥72 h(OR:8.972,95％CI1.983-40.582,P=0.004)、胸腔穿刺(OR:3.564,95％CI 1.223-10.387,P=0.020);③结果显示,凝血酶原时间延长、ICU留置时间≥10 d、气管插管时间≥72 h和胸腔穿刺会增加肝移植后患者发生多重耐药菌感染的风险.
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还原型谷胱甘肽和乌司他丁对冻融人类卵巢组织异种移植的保护作用
背景:还原型谷胱甘肽是有效的抗氧化剂,可直接消除氧自由基,具有抑制炎症细胞因子的作用.乌司他丁能抑制氧自由基的产生,抑制多种炎症递质的产生,维持细胞膜和溶酶体膜的稳定性,还可抑制大量亢进的酶的活性,发挥了对移植器官的保护作用.目的:探讨还原型谷胱甘肽和乌司他丁在改善冻融人类卵巢组织异种移植方面的效果.方法:收集6名来源于中山大学附属第一医院年龄(31.8±5.7)岁妇女的卵巢组织,慢速程序化冻融后每一份卵巢组织随机分成4组:还原型谷胱甘肽组(谷胱甘肽组)、乌司他丁组、谷胱甘肽+乌司他丁组、空白对照组,卵巢组织培养箱中平衡15 min后移植在雄性NOD-SCID小鼠背部皮下,移植后4组小鼠分别连续5 d给药还原型谷胱甘肽、乌司他丁、还原型谷胱甘肽和乌司他丁、生理盐水.移植后第1,3,7,14,28,56和85天回收移植物,用苏木精-伊红染色法及酶消化分离荧光染色法观察卵泡组织学形态、各阶段卵泡比例及卵泡的存活率.结果与结论:①解冻后的卵巢组织中以始基卵泡为主(79.5±14.3)％.新鲜卵巢组织切片的卵泡存活率为97.6％,解冻后卵巢组织的卵泡存活率为(84.4±5.7)％;②还原型谷胱甘肽组、乌司他丁组及谷胱甘肽+乌司他丁组卵泡存活率均高于空白对照组(P=0.022),联合用药与单独用药比较无显著差异(P>0.05);移植后第3天卵泡存活率达到低值(P<0.05),移植1周后有所上升;③用药各组在各时间点分离卵泡后的平均卵泡存活率稍高于对照组但差异无显著性意义(P=0.114),与组织学切片部分比较,分离卵泡的存活率明显更高;④结果说明,使用还原型谷胱甘肽和乌司他丁可以改善人类卵巢组织异种移植后早期的卵泡存活率,联合用药暂未见优势.
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辣椒素抑制成纤维细胞增殖的作用及其分子机制
背景:研究报道辣椒素具有抑制纤维化作用,可抑制增生性成纤维细胞增殖能力和胶原合成能力,但是辣椒素抑制成纤维细胞增殖的确切机制尚未明确.目的:探讨辣椒素对抑制表皮成纤维细胞增殖的影响及其相应的分子作用机制.方法:体外原代培养获得新生SD大鼠表皮成纤维细胞,采用不同质量浓度辣椒素(0.5,1,2,4,8 mg/L)作用24 h后,并以不加辣椒素为阴性对照组.倒置显微镜观察表皮成纤维细胞形态变化和MTT法检测皮肤成纤维细胞的存活率及其IC50值,用Hoechst 33258染色法和AnnexinV-FITC/PI双染法观察和检测其细胞凋亡;采用流式细胞术检测表皮成纤维细胞的细胞周期;Western blot检测不同质量浓度的辣椒素(0,2,4,8,16 mg/L)诱导大鼠表皮成纤维细胞FoxO1、p-FoxO1、Akt、p-Akt蛋白表达改变.结果与结论:①随着辣椒素质量浓度的增高,表皮成纤维细胞的细胞存活率逐渐降低,且呈现浓度依赖性,其IC50值为3.55 mg/L;②与对照组相比,辣椒素作用于表皮成纤维细胞24 h后,表皮成纤维细胞阻滞在G1期而且凋亡率增加,同时能降低p-Akt及p-FoxO1的蛋白表达水平;③结果说明,辣椒素能抑制皮肤成纤维细胞的增殖、促进细胞凋亡,且呈现浓度依赖效应,Akt-FoxO1信号通路可能参与了辣椒素的抑制增殖效应.
