中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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人鼻咽癌CD133+干细胞的生物学特性及意义人鼻咽癌CD133+干细胞的生物学特性及意义
背景:有研究表明肿瘤细胞株中存在肿瘤干细胞,是肿瘤复发、转移的根源,但人鼻咽癌细胞株CNE-2中肿瘤干细胞的表达及生物学特性至今少有报道.目的:观察人鼻咽癌CD133+干细胞生物学特性及意义.方法:采用流式细胞仪检测人鼻咽癌细胞株CNE-2中CD133的表达情况.免疫磁珠分选技术获得人鼻咽癌CD133+干细胞,分别采用无血清培养法、CCK-8法、平板克隆形成试验及裸鼠体内成瘤实验检测CD133+干细胞的体外增殖及体内成瘤能力,并将其与CD133-及未分选鼻咽癌细胞进行比较,以了解CD133+干细胞的生物学特性.结果与结论:免疫磁珠富集的CD133+细胞在无血清培养基中呈悬浮生长,并可以形成肿瘤干细胞球.CD133+细胞与CD133-细胞比较具有较高的克隆形成能力(P < 0.01);CD133+细胞在裸鼠体内的成瘤率高于CD133-细胞(P < 0.05).结果证实,鼻咽癌CD133+干细胞能在体外分离培养,形成干细胞球,增殖能力强,在裸鼠体内具有极强的成瘤能力.
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荧光原位杂交技术在异基因造血干细胞移植监测中的作用
背景:异基因造血干细胞移植后,嵌合率下降与移植物被排斥及白血病复发密切相关,常规骨髓细胞学检查、染色体检查、流式细胞学检查等均不能敏感特异地监测嵌合率.目的:验证荧光原位杂交技术检测异基因造血干细胞移植后嵌合率的敏感性和特异性.方法:应用荧光原位杂交法检测异性同胞异基因造血干细胞移植后患者X、Y 性染色体及慢性粒细胞白血病序列特异性bcr/abl融合基因,以骨髓细胞学检查为对照.结果与结论:3例异基因造血干细胞移植患者共复查骨髓细胞学检查及荧光原位杂交检查7次.4次骨髓细胞学检查及荧光原位杂交检查均完全相符,另外3次骨髓细胞学检查提示完全缓解,而荧光原位杂交检查能检测到少量异常信号,证实应用荧光原位杂交法较骨髓细胞学具有显著优越性,能动态敏感、特异地检测嵌合率.
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不同时间自体骨髓动员急性缺血心肌的血管再生
背景:正常组织在损伤后可动员骨髓干细胞至损伤组织,在局部微环境作用下定向增殖分化修复组织.目的:应用集落刺激因子动员猪急性心肌梗死模型,观察骨髓动员对猪急性心肌梗死模型的心功能影响及新生血管的作用.方法:健康太湖梅山猪15头,明胶海绵栓塞冠状动脉(左前降支)法建立猪缺血性心脏病-心肌梗死模型,随机分为3组.对照组建模后4周后经冠状动脉注射DMEM;立即动员组建模后3 h并连续5 d注射粒细胞集落刺激因子;1周动员组:建模1周后连续5 d注射粒细胞集落刺激因子.结果与结论:与对照组相比,立即动员组和1周动员组射血分数、左室舒张期内径、左心室收缩期内径心功能指标均有改善.骨髓动员后,两组血清血管内皮生长因子水平上升明显,血管密度明显增加,对照组无明显变化.提示自体骨髓干细胞动员后可归巢到心肌受损区域,在局部环境诱导下可分化成原始的血管结构,参与缺血区的血管形成.
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颅脑损伤后内源性神经干细胞增殖与迁移中的基质细胞衍生因子1
背景:神经干细胞的迁移在颅脑损伤中起着极其重要的作用,但是其具体迁移机制尚不明确.目的:观察大鼠颅脑损伤后基质细胞衍生因子1在内源性神经干细胞的增殖与迁移中的作用.方法:采用Feeney's等的方法用自制自由落体撞击器撞击大鼠左侧皮质运动感觉区以制备大鼠中度重型颅脑损伤模型,于伤后6 h,3 d,5 d,7 d灌注取脑,通过冰冻切片免疫组织化学检测Nestin及基质细胞衍生因子1表达,比较分析大鼠颅脑损伤后基质细胞衍生因子1和内源性神经干细胞的增殖与迁移之间的关系.并设正常对照组和假手术组做对照.结果与结论:颅脑损伤大鼠的神经行为学评分与对照组比较差异显著.冰冻切片免疫组织化学显示:伤后3 d,基质细胞衍生因子1表达较对照组明显,海马区可见大量Nestin阳性细胞,未见向损伤区迁移;伤后5 d和7 d,基质细胞衍生因子1表达更明显,范围扩大,损伤区可见少量Nestin阳性细胞.对照组及假手术组未有上述改变.结果表明大鼠颅脑损伤后基质细胞衍生因子1表达时间推移越加明显,提示基质细胞衍生因子1参与内源性神经干细胞的增殖及向损伤区迁移的过程.
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BrdU标记法检测不同年龄阶段小鼠神经前体细胞的增殖潜能
背景:BrdU是胸腺嘧啶核苷类似物,常用来标记前脑室管膜下区具有增殖潜能的神经前体细胞.目的:建立不同年龄阶段BrdU标记方法,系统分析不同年龄阶段神经前体细胞增殖特点以及变化规律.方法:选取胚胎期小鼠、新生小鼠、成年小鼠和老年小鼠各5只,腹腔注射BrdU,观察不同年龄阶段神经前体细胞增殖潜能及不同年龄阶段前脑衰老细胞,探讨微环境对神经前体细胞增殖潜能的影响.结果与结论:胚胎期小鼠、新生小鼠、成年小鼠和老年小鼠前脑室管膜下区BrdU+细胞分别为(897.20±22.38),(262.17±26.26),(76.67±5.63),(43.8±2.61)个,随年龄增加细胞增殖潜能逐渐降低(P < 0.05).成年小鼠和老年小鼠脑室周围有大量β-半乳糖苷酶染色阳性衰老细胞,说明随年龄增加脑内β-半乳糖苷酶染色活性增强,衰老细胞逐渐增多,神经前体细胞生存微环境失衡可能与神经前体细胞增殖潜能下降有关.
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急性淋巴细胞白血病患者骨髓细胞中CCL2mRNA的表达
背景:临床工作中希望能够根据骨髓CCL2表达对急性淋巴细胞白血病患者进行危险分层和预后判断.目的:观察急性淋巴细胞白血病患者骨髓细胞中CCL2 mRNA的表达情况.方法:初诊50例急性淋巴细胞白血病患者为实验组,30例非血液肿瘤患者为对照组.初诊急性淋巴细胞白血病患者化疗2个疗程后按疗效分为完全缓解组43例,未完全缓解组7例.实验抽取研究对象骨髓5 mL,采用半定量聚合酶链反应法检测CCL2 mRNA表达.结果与结论:①初诊急性淋巴细胞白血病组CCL2 mRNA表达水平明显高于对照组(P < 0.05);完全缓解组CCL2 mRNA水平明显低于未完全缓解组(P < 0.01);完全缓解组治疗后CCL2 mRNA表达水平明显低于治疗前(P < 0.01).未完全缓解组治疗2个疗程后CCL2 mRNA表达水平无明显下降(P > 0.05).②前B-急性淋巴细胞白血病患者骨髓CCL2 mRNA表达水平明显高于普通B及T系急性淋巴细胞白血病患者(P < 0.05).初诊时白细胞≥50×109 L-1急性淋巴细胞白血病患者CCL2 mRNA表达水平明显高于白细胞<10×109 L-1及10×109 L-1≤白细胞＜50×109 L-1组(P < 0.05),10×109 L-1≤白细胞＜50× 109 L-1组明显高于白细胞<10×109 L-1组(P < 0.01).结果表明急性淋巴细胞白血病患者骨髓细胞能分泌CCL2,骨髓CCL2 mRNA表达水平与患者初诊时的白细胞计数及免疫分型有一定的关系,在一定程度上能反映患者的近期疗效.
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组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA诱导骨髓瘤细胞的凋亡
背景:SAHA是一种新型的组蛋白去乙酰化酶抑制剂,目前有关其对多发性骨髓瘤细胞作用的研究还少见报道,而且其诱导细胞凋亡的分子机制还不十分清楚.目的:观察SAHA对多发性骨髓瘤细胞株U266细胞增殖和凋亡的影响,并分析其可能机制.方法:采用锥虫蓝拒染法、四氮唑蓝比色法检测SAHA 对U266细胞增殖的影响.AllllexinV和PI染色后应用流式细胞仪检测SAHA 作用U266细胞的凋亡率,Hoechst33342染色法检测凋亡细胞的形态.Western-blot方法检测信号转导通路Ras/Raf/Mek/Erk相关蛋白的表达水平.结果与结论:锥虫蓝拒染法和四氮唑蓝比色法均显示,SAHA可明显抑制U266细胞增殖,且具有时间剂量依赖性.0.5,2,4 μmol/L SAHA作用U266细胞48 h后,经流式细胞仪检测细胞凋亡率分别为 (17.61±1.30)%,(43.13±3.80)%和(74.01±4.39)%,呈剂量依赖性(P < 0.05).Hoechst33342染色荧光显微镜下可见,SAHA组细胞胞核出现明显的核固缩、核碎裂,而对照组改变不明显.Western-blot结果显示U266细胞经SAHA处理后,Raf-1和Erk蛋白的磷酸化水平受到明显抑制,药物作用48 h时出现显著降低.提示SAHA抑制多发性骨髓瘤细胞株U266细胞增殖并诱导凋亡,信号转导通路Ras/Raf/Mek/Erk阻断是机制之一.
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前列腺癌干细胞分离方法的对比及筛选
背景:前列腺癌干细胞是前列腺癌复发侵袭的重要原因,目前研究难点在于前列腺癌干细胞分离技术效率较低.目的:探索高效地从人前列腺癌PC-3及LNCap细胞株分离前列腺癌干细胞的方法.方法:采用含血清贴壁培养法及无血清悬浮培养法培养PC-3及LNCap细胞株,然后利用流式细胞表面标记CD133及CD44检测两种细胞在不同培养条件下可获取前列腺癌干细胞的比例,同时采用诱导分化实验初步鉴定前列腺癌干细胞特性.结果与结论:PC-3及LNCap细胞能在添加生长因子的无血清培养基中形成悬浮细胞球,接种在含血清培养基后可以诱导分化为贴壁细胞;无血清培养组的CD44+/CD133+细胞比例:PC-3为0.59%,LNCap为1.71%,含血清培养组中的CD44+/CD133+细胞比例:PC-3为0.32%,LNCap为0.73%,其中LNCap细胞采用两种方法所获的CD44+/CD133+细胞均高于PC-3所获的的细胞(P < 0.05),在两种细胞中无血清悬浮培养和含血清贴壁培养差异无显著性意义 (P > 0.05),但无血清悬浮培养周期长,获得细胞数相对较少,直接影响分选后肿瘤干细胞功能测定.因此可以证实含血清贴壁培养LNCap细胞较无血清悬浮培养法更能高效快捷的获取前列腺癌干细胞.
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离子型谷氨酸受体拮抗剂MK-801浓度与全脑缺血再灌注大鼠海马内源性神经干细胞的增殖
背景:脑缺血再灌注后,过度释放的兴奋性氨基酸可通过N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体激活内源性神经干细胞,促使其增殖、分化,修复神经细胞,但同时也导致细胞内钙离子超载,引起神经细胞的损伤.目的:观察NMDA受体拮抗剂MK-801浓度对脑缺血再灌注大鼠海马内源性神经干细胞增殖的影响.方法:SD大鼠随机分为正常对照组、手术对照组及MK-801 0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2 mg/kg组.除正常对照组外,大鼠首先进行侧脑室插管,3 d后进行4条血管阻断方法制备大鼠全脑缺血再灌注模型.在模型制作前30 min按照不同浓度侧脑室注射MK-801.正常对照组和手术对照组侧脑室注射同剂量的生理盐水.免疫组织化学、RT-PCR技术检测各组脑海马nestin阳性细胞及其mRNA表达.结果与结论:MK-801浓度在0.8 mg/kg以下时,用药组大鼠脑海马nestin mRNA及蛋白的表达与手术对照组差异无显著性意义(P > 0.05),呈现高表达;当MK-801浓度达到0.8 mg/kg时,与手术对照组相比,用药组大鼠脑海马nestin基因及蛋白的表达明显下降(P < 0.05),并随浓度的增高呈递减趋势.提示MK-801在浓度为0.6 mg/kg时,即可抑制钙超载保护神经元,又有良好的刺激神经干细胞增殖作用.
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低强度脉冲超声波对SD大鼠前软骨干细胞增殖及细胞外基质mRNA表达的影响
背景:研究证明低强度脉冲超声波不仅可以促进骨折愈合,而且还对软骨细胞增殖和细胞外基质分泌具有一定的调节作用.目的:进一步验证低强度脉冲超声波对大鼠前软骨干细胞增殖及细胞外基质分泌的影响.方法:分离新生大鼠乳鼠的前软骨干细胞,鉴定后第3代细胞培养,分为空白对照组、5,12,20 min/d组4组.以低强度脉冲超声波刺激后继续培养细胞24 h.分别于刺激后第1,3,5天用CCK-8法检测细胞增殖.另以低强度脉冲超声波刺激后间隔30 min提取总RNA,用RT-PCR法检测Ⅱ型胶原、Aggrecan、转化生长因子β1及Sox9基因的表达.结果与结论:低强度脉冲超声波对大鼠前软骨干细胞的增殖有促进作用,与对照组相比第1天时20 min/d组增殖明显(P < 0.05).大鼠前软骨干细胞Ⅱ型胶原、Aggrecan、转化生长因子β1及Sox9基因mRAN的表达均有明显增加,刺激天数越多mRAN的表达量越多,以20 min/d组增高为明显.提示低强度脉冲超声波可以促进SD大鼠前软骨干细胞的增殖能力,并可以促进细胞外基质mRAN的表达,这一效应可能是通过转化生长因子β1及Sox9基因所介导的.
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2型糖尿病合并急性脑梗死外周血CD34+水平变化及其意义
背景:CD34+细胞是一种新的血管内皮标志物,通过检测CD34+细胞水平可以反映血管内皮功能的变化.目的:分析外周血CD34+细胞数量变化与脑梗死发病的关系.方法:纳入观察对象110例,分为4组,2型糖尿病组、急性脑梗死组、2型糖尿病合并急性脑梗死组各30例,健康对照组20例.应用流式细胞仪ProCOUNT方法测定外周血CD34+/外周血单核细胞值,分析外周血CD34+/单核细胞值与脑血管病危险因素的相关性.结果与结论:4组外周血CD34+/单核细胞值经过方差分析,差异具有显著性意义(P < 0.05),健康对照组高于2型糖尿病组、急性脑梗死组、2型糖尿病合并脑梗死组(P < 0.01),2型糖尿病组高于急性脑梗死组、2型糖尿病合并脑梗死组(P < 0.01).2型糖尿病合并急性脑梗死患者外周血CD34+/单核细胞值与空腹血糖和收缩压呈负相关,与高密度脂蛋白胆固醇/低密度脂蛋白胆固醇的比值呈正相关,与舒张压、吸烟、胆固醇、三酰甘油无相关性.提示CD34+细胞可能使脑血管病危险因素受到影响从而参与了脑梗死的发生,监测CD34+细胞水平变化也许能用来预测2型糖尿病患者急性脑梗死的发生.
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血红素氧化酶1可提高脐血间充质干细胞移植梗死心肌细胞的存活率
背景:血红素氧化酶1具有较强的内源性抗氧化作用,可减轻炎症反应,发挥细胞保护作用.目的:观察血红素氧化酶1对犬脐血间充质干细胞梗死心肌移植后细胞存活率的影响.方法:取第4代体外培养脐血间充质干细胞,用含氯化高铁血红素的培养液培养24 h,免疫组织化学法检测细胞血红素氧化酶1的表达;将细胞经LacZ报告基因标记后经冠状动脉植入犬心肌梗死区域.结果与结论:经含氯化高铁血红素培养液培养后的脐血间充质干细胞血红素氧化酶1表达明显上调,并持续2周以上;移植犬梗死心肌区后可长期存活,存活能力明显增强.结果表明氯化高铁血红素可诱导上调犬脐血间充质干细胞血红素氧化酶1的表达,血红素氧化酶1可明显提高脐血间质干细胞梗死心肌移植后的细胞存活率.
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促红细胞生成素基因修饰脐带间充质干细胞移植颅脑损伤大鼠脑细胞形态及神经功能的恢复
背景:很多研究表明,促红细胞生成素具有神经保护作用.目的:探讨促红细胞生成素修饰的脐带间充质干细胞脑内移植对脑损伤大鼠脑损伤的治疗效果.方法:用Western blot鉴定外源人促红细胞生成素基因在脐带间充质干细胞中的表达.90只大鼠成功建立重型液压颅脑损伤模型,随机数字表法均分成为对照组、脐带间充质干细胞移植组、促红细胞生成素+脐带间充质干细胞移植组.结果与结论:Western blot结果显示转染人促红细胞生成素基因的人脐带间充质干细胞体外能表达促红细胞生成素;与对照组比较,移植后1,2,3,4周脐带间充质干细胞移植组、促红细胞生成素+脐带间充质干细胞移植组大鼠神经缺损评分均降低(P < 0.05),后者更低(P < 0.01).各组平均潜伏时间均逐渐缩短,3~5 d时平均潜伏时间为促红细胞生成素+脐带间充质干细胞移植组<脐带间充质干细胞移植组(P < 0.05)<对照组(P < 0.01).穿越平台次数及在目标象限游泳距离与总距离百分促红细胞生成素+脐带间充质干细胞移植组高(P < 0.05).形态学可见3组损伤处脑组织瘢痕和软化灶为:促红细胞生成素+脐带间充质干细胞移植组<脐带间充质干细胞移植组<对照组,CM-Dil阳性细胞数则3组相反.说明促红细胞生成素修饰的脐带间充质干细胞脑内移植后对脑损伤大鼠脑损伤具有较好的治疗作用.
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大鼠视网膜干细胞的增殖和多向分化
背景:国内对视网膜干细胞的体外分离培养及鉴定仍处于初步探索阶段.目的:体外分离、培养及鉴定新生大鼠视网膜干细胞,探讨其多向分化潜能.方法:用神经干细胞无血清培养方法分离和培养新生24 h的SD大鼠睫状体细胞,第6代视网膜干细胞经胎牛血清诱导分化,应用免疫细胞化学方法检测视网膜干细胞的分化特性.结果与结论:体外培养的细胞球具有连续克隆能力,Nestin抗原阳性,BrdU 标记结果显示悬浮细胞团主要由分裂增殖的细胞组成,并表达胚胎发育早期视网膜内原始细胞的特异性抗原Chx-10;诱导分化后的细胞表达星形胶质细胞特异性标志物GFAP、神经元特异性标志物NSE、感光细胞标志物Opsin、双极细胞特异性抗原PKC和节细胞特异性抗原β-tubulin,实验初步证实培养的视网膜干细胞具有神经干细胞特性,能自我更新和增殖分化成为感光细胞类型的细胞.
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静脉移植脐血干细胞可抑制脑缺血大鼠的神经细胞凋亡
背景:已有实验证实脐血干细胞移植后可迁移至脑损伤区域,存活并分化为神经细胞.目的:探讨经静脉移植脐血干细胞治疗大鼠脑缺血的疗效以及对神经细胞凋亡的影响.方法:改良线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型,48只大鼠随机数字表法分成治疗组和对照组,分别在造模1 d后经尾静脉注射脐血干细胞和PBS进行观察.结果与结论:治疗后3,7 d两组神经功能评分比较,差异无显著性意义(P > 0.05);14,21 d治疗组神经功能评分明显低于对照组(P < 0.05).对照组未见BrdU阳性细胞,治疗组大鼠脑组织切片中可见BrdU阳性细胞,对侧半球也可见少量BrdU阳性细胞.对照组大鼠缺血侧凋亡细胞显著多于治疗组(P < 0.05).提示经静脉移植的脐血干细胞可迁移至大鼠缺血侧脑组织,抑制神经细胞凋亡,并显著改善大鼠神经功能.
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N-乙酰半胱氨酸拮抗6-羟基多巴胺对骨髓基质细胞的毒性作用
背景:内源性6-羟基多巴胺能参与氧化应激,N-乙酰半胱氨酸能有效抗氧化和清除自由基.目的:探讨6-羟基多巴胺对骨髓基质细胞的毒性作用及N-乙酰半胱氨酸对其的拮抗作用.方法:在体外培养SD大鼠骨髓基质细胞,取第3代骨髓基质细胞分别加入终浓度为0,0.05,0.1 g/L的6-羟基多巴胺和终浓度为0,0.075,0.3,1.2,4.8 g/L的N-乙酰半胱氨酸.结果与结论:MTT检测发现0.05和0.1 g/L 6-羟基多巴胺可以明显降低骨髓基质细胞的细胞活性,而加入6-羟基多巴胺的同时加入0.3 g/L N-乙酰半胱氨酸可以显著抑制6-羟基多巴胺的毒性作用.提示抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸可以影响6-羟基多巴胺的作用.
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梯度血清递减体外培养人脐带间充质干细胞
背景:人脐带间充质干细胞的扩增与培养条件密切相关,而含体积分数10%~20%胎牛血清的培养基可促进细胞生长.目的:建立梯度血清递减扩增培养脐带间充质干细胞的培养技术.方法:采用胶原酶Ⅱ消化分离获得脐带间充质干细胞悬液,并通过贴壁培养进行纯化,细胞贴壁后采用梯度血清递减方法,即第1代80%含血清培养基,20%无血清培养基;第2代50%含血清培养基,50%无血清培养基;第3代20%含血清培养基,80%无血清培养基;第4代100%无血清培养基.另一种传代中始终采用含体积分数10%胎牛血清的α-MEM完全培养液.用流式细胞仪检测细胞的表面标记,进行成骨诱导试验,同时与经典的含10%胎牛血清的α-MEM培养体系进行比较.结果与结论:梯度血清递减培养法与经典α-MEM培养体系所获得的细胞在扩增能力、细胞形态、免疫表型等方面相似.细胞在两种培养体系中均能保持良好的分化潜能.但梯度血清浓度法培养间充质干细胞可使用更少量胎牛血清,提高临床应用安全性.
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不同种系鼠源骨髓间质干细胞的分离培养及成脂能力
背景:目前常用骨髓间质干细胞为鼠源细胞,然而就大鼠和小鼠来源骨髓间质干细胞在传代过程中的纯化程度,表面抗原的表达和分化能力的差异性仍少见报道.目的:分离、鉴定并纯化不同种系鼠源骨髓间质干细胞,比较其在成脂分化中的差异.方法:采用差速贴壁法分离SD大鼠及Balb/c小鼠骨髓间质干细胞,通过传代纯化,并观察骨髓间质干细胞在此过程中得纯化程度及增殖状况,流式细胞数鉴别两种骨髓间质干细胞表面抗原的表达,比较不同来源间质干细胞在成脂分化的差异.结果与结论:在SD大鼠骨髓间质干细胞分离和培养过程中,其增殖能力显著强于Balb/c小鼠骨髓间质干细胞(P < 0.05).其半数增长期为36 h,在第3代时即可见典型的漩涡状贴壁生长特性.经流式细胞检测,Balb/c小鼠及SD大鼠均为不表达造血干细胞标志CD34,再后续的各代检测中亦未见该细胞标志表达(< 5%),CD29随着不断的传代纯化其表达数量不断的增加,其中SD大鼠在第3代时其表面标志的纯度及达到99%,但Balb/c小鼠各代CD29随着纯化上升程度并不甚明显,与该种细胞镜下存在大量类内皮细胞表现相符合.在成脂方面SD大鼠骨髓间质干细胞依旧表现出了较强的多能特新,出现脂滴的时间明显早于Balb/c小鼠,随传代次数的增加,两种原代细胞均出现了自发的成脂分化的现象,且SD大鼠的出现程度大于Balb/c小鼠.说明SD大鼠来源骨髓间质干细胞较易获得纯度较高且增殖旺盛的细胞源,在成脂方面的能力强于Balb/c小鼠.
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超顺磁性氧化铁纳米颗粒体外标记兔骨髓间充质干细胞的安全性以及MRI成像特征
背景:传统的干细胞标记方法常需要病理组织学等侵袭性手段检测,无法动态观察整个实验过程,也不适合临床研究.目的:观察超顺磁性氧化铁纳米颗粒体外标记对兔骨髓间充质干细胞生物学特性的影响以及标记兔骨髓间充质干细胞的体外MRI成像特征.方法:采用红细胞裂解贴壁法培养扩增兔骨髓间充质干细胞.采用不同浓度超顺磁性氧化铁纳米颗粒(100,50,25,12.5 mg/L)联合多聚赖氨酸(0.75 mg/L)标记兔骨髓间充质干细胞.对标记兔骨髓间充质干细胞进行MRI检测,观察其成像特征.结果与结论:25 mg/L的超顺磁性氧化铁纳米颗粒联合0.75 mg/L多聚赖氨酸标记兔骨髓间充质干细胞具有较好的安全性和有效性.此浓度对细胞的生长活性没有影响,不影响骨髓间充质干细胞的成骨成脂分化能力.MRI扫描在T2*WI序列上能明显有效地显像超顺磁性氧化铁纳米颗粒标记的兔骨髓间充质干细胞.
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骨髓间充质干细胞来源成骨细胞培养体系中加入α-玉米赤霉醇干预后的骨保护素表达
背景:研究显示α-玉米赤霉醇对绝经后骨质疏松症具有明显的防治作用.目的:观察α-玉米赤霉醇对体外大鼠成骨细胞骨保护素分泌及其mRNA表达的影响.方法:将体外培养的成骨细胞中分别加入雌激素和α-玉米赤霉醇(10-5~10-10 mol/L)进行干预.结果与结论:ELISA法和RT-PCR检测发现,不同浓度的α-玉米赤霉醇(10-5~10-10 mol/L)作用于成骨细胞后,骨保护素的分泌量及细胞骨保护素mRNA表达较对照组均增加(P < 0.05).结果证实,在骨髓基质细胞来源的成骨细胞中加入α-玉米赤霉醇可促进成骨细胞骨保护素的分泌及其mRNA的表达.
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乙醇改变骨髓间充质干细胞神经肽的表达
背景:研究发现骨髓间充质干细胞的分化受神经系统调控.目的:观察乙醇对人骨髓间充质干细胞降钙素基因相关肽受体、P物质受体、过氧化物酶体增殖子活化受体γ mRNA及Runx2 mRNA表达的影响.方法:将第2代人骨髓间充质干细胞随机分组培养:实验组加入0.09 mol/L乙醇,对照组正常培养.结果与结论:培养11 d后,实验组降钙素基因相关肽受体、P物质受体、Runx2 mRNA表达较对照组明显降低(P < 0.01),过氧化物酶体增殖子活化受体γ mRNA水平较对照组明显增高(P < 0.01).表明乙醇改变了骨髓间充质干细胞中神经肽类物质的表达,减弱了其向成骨细胞方向分化.
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不同来源骨髓间充质干细胞对CD34+细胞增殖的影响
背景:作者前期研究显示,银屑病患者与正常人骨髓间充质干细胞的生物学特性、免疫学反应及抗原提呈功能有明显差异,而与流产胎儿骨髓间充质干细胞无明显差异.目的:观察不同来源骨髓间充质干细胞对正常人骨髓CD34+细胞增殖的影响.方法:密度梯度离心法分离银屑病患者和流产胎儿骨髓单一核细胞并培养、传代,传至第2代72 h后收集培养上清液,流式细胞仪鉴定骨髓CD34+细胞及骨髓间充质干细胞纯度.倒置显微镜下观察培养细胞的生长状态,细胞磁珠分选仪分选出的正常人骨髓CD34+细胞加入骨髓间充质干细胞培养上清液培养24 h 后,四甲基偶氮唑盐比色法检测骨髓CD34+细胞的增殖活性.结果与结论:CD34+细胞加入银屑病患者和流产胎儿骨髓间充质干细胞培养上清培养24 h后,细胞形态无差别.银屑病患者和流产胎儿骨髓间充质干细胞培养上清液对正常人骨髓CD34+细胞增殖的影响差异无显著性意义(P > 0.05).
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胎儿微嵌合体在经产妇疾病及组织损伤修复中的作用
背景:胎儿微嵌合体是指存在于经产妇体内、来自胎儿的干细胞,其对母体健康的影响日益受到重视.目的:介绍胎儿微嵌合体的检测手段、胎儿微嵌合体在母体疾病及组织损伤修复中的作用,引起临床对胎儿微嵌合体研究的重视.方法:以"fetal microchimerism"为检索词,应用计算机检索Pubmed数据库2011-05-20之前的相关文章.纳入与胎儿微嵌合体研究相关的文献,排除重复性研究.结果与结论:共检索到655篇文献,排除无关重复的文献,保留26篇文献进行综述.目前研究证实多种检测胎儿微嵌合体的手段可供研究者选择,胎儿微嵌合体在引起母体发生自身免疫性疾病、提高母体对于肿瘤等侵害因素的抵御能力、促进损伤修复等方面具有一定作用.
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骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的相关信号通路研究现状
背景:研究表明骨髓间充质干细胞被诱导分化成为神经细胞涉及的信号通路复杂多样.目的:总结分析骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中涉及的信号通路研究进展.方法:应用计算机检索 CNKI 和Web of Science数据库中 2001-01/2010-12关于骨髓间充质干细胞分化为神经细胞的文章,以"骨髓间充质干细胞,神经细胞,信号"或"bone marrow mesenchymal stem cells,neural cells,signal"为检索词进行检索,重点对19篇文献进行分析.结果与结论:细胞信号通路之间的关系错综复杂,相互之间或协调促进,或拮抗抑制,从而使得调节细胞的特异性应答更加精确.多条信号转导通路参与调控骨髓间充质干细胞向神经细胞分化,BMSCs向神经细胞的诱导分化过程中,所涉及的信号通路也并非独立存在,包括Ca2+信号通路、蛋白激酶 A信号通路、MEK-ERK通路、PI3K/AKt信号通路、MAPK信号通路等,信号通路之间关系复杂,彼此相互关联存在.
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干细胞移植联合免疫抑制治疗1型糖尿病的应用前景
背景:近许多研究报道,干细胞细胞移植联合免疫干预可维持较长的胰岛素非依赖时间并减少糖尿病并发症的发生,但其机制尚不清楚.目的:探讨应用干细胞移植联合免疫抑制治疗1型糖尿病的前景.方法:应用计算机检索了Pubmed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/)、CNKI数据库(http://www.cnki.net)、维普数据库(http://www.cqvip.com/index.shtml)、万方数据库(http://g.wanfangdata.com.cn/),检索范围为各数据库中的全部文章,英文检索词为"stem cells,diabetes mellitus,immunosuppression",中文检索词为"干细胞,糖尿病".从检索出的1 676篇文章中选择出文章内容与干细胞移植、免疫抑制治疗1型糖尿病密切相关、较为权威的文章,排除较陈旧文献及重复研究,共纳入中英文文章共29篇进一步分析.结果与结论:就目前干细胞移植联合免疫抑制治疗1型糖尿病的研究现状,对国内外29篇相关文献和报道进行研究总结.结果显示干细胞移植联合免疫抑制治疗1型糖尿病可提高治疗效果,减少并发症的出现,具有良好的应用前景.
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基因和干细胞疗法修复慢性难愈创伤的研究与应用
背景:许多疾病和因素都会使伤口久治不愈或延迟愈合,基因疗法和干细胞疗法为慢性难愈创伤的治疗提供了新的技术途径.目的:针对基因疗法和干细胞疗法用于治疗慢性难愈创伤的研究作一综述.方法:以"gene therapy,stem cell therapy和chronic wound"为检索词,检索Medline数据库(1980/2010-12),文献检索语种限制为英语.将近年发表的针对性强的文章纳入研究范围,同一领域的文献则选择近期发表或权威杂志的文章.排除与基因疗法和干细胞疗法相关性不强、陈旧的文献.结合自身的研究经验和纳入排除标准,对查阅到的新研究成果详细分析并加以总结概括.结果与结论:初次检索到267篇文献,严格按照纳入标准,终将33篇文献纳入研究.基因疗法和干细胞疗法都是新的治疗方法,其相关理论和技术已经成熟,为慢性难愈创伤的治疗提供了新的技术途径,它们的有效运用有望给慢性难愈创伤带来突破性的治疗效果.
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肝脏干细胞研究及应用前景展望
背景:近年肝脏干细胞移植治疗终末期肝病得到人们的广泛关注,但临床应用中却面临来源有限,细胞数量不足,移植后干细胞往往弥散、流失,且分化率低,无法有效发挥其修复功能等技术问题制约.目的:总结肝脏干细胞组织工程的研究进展,并展望其应用前景.方法:应用计算机检索1999-01/2010-12 PubMed数据库相关文献,英文检索词"liver stem cell tissue engineering"分别与"three dimensional culture,biodegradable materials,biological reactor"组合,并限定文献语言种类为English.共检索到文献241篇,终纳入符合标准的文献43篇.结果与结论:肝脏干细胞来源有限,而肝脏组织工程需要大量可靠的种子干细胞,三维培养是目前发现行之有效的体外扩增手段.在三维培养条件下,使用不同支架材料和反应器扩增效率及移植效果存在巨大差异,如何确定具有肝脏干细胞特异性的理想扩增条件、改善支架生物相容性以提高移植效率是关键技术问题.未来的研究需要进一步探讨肝脏干细胞特异性扩增生物反应器及肝脏干细胞特异性支架构建等技术难点.
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干细胞治疗与运动性脊髓损伤
背景:截止目前仍难以找到一种良好的针对运动性脊髓损伤的治疗方法.随着干细胞技术的发展,应用干细胞技术治疗为运动性脊髓损伤修复带来了强大的潜力.目的:通过检索干细胞技术及其运动性脊髓损伤防治等方面的研究文献资料,探讨干细胞移植、干细胞神经营养因子以及基因修饰的干细胞疗法在脊髓损伤修复中的作用.方法:应用计算机检索PubMed数据库、万方数据库、维普数据库有关干细胞移植、干细胞神经营养因子以及基因修饰的干细胞疗法修复脊髓损伤的文章,英文检索时间为1987/2010,中文检索时间为1997/2010;英文检索词为"stem cells,transplantation,neurotrophic factor,sports spinal cord injury,rehabilitation",中文检索词为"干细胞;移植;神经营养因子;运动性脊髓损伤;康复治疗".排除重复性、陈旧的文献,共保留37篇文献进行综述.结果与结论:以干细胞所具有的移植性、迁移性、自我更新和多向分化潜能等的优势,将干细胞技术应用于运动性脊髓损伤的修复也已成为必然.但运动性脊髓损伤修复过程中,由于多种细胞因子和基因参与了调控,其基本机制还不清楚,因此仍需要对干细胞移植、诱导分化机制及其基因治疗和营养因子的作用等多方面进行深入的研究.
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干细胞分泌因子促进难愈性创面愈合的机制及应用前景
背景:干细胞能够分泌多种伤口愈合相关因子.目的:总结并分析干细胞分泌的创面愈合相关因子治疗难愈性创面的可行性,及其可能的调控及修复机制.方法:应用计算机检索Google、Pubmed及万方数据库相关文献,英文检索词为"chronic wound,refractory wound,cutaneous,wound healing,wound repair,diabetic wound,stem cell-derived conditioned medium,cellular cytokine solution".中文检索词为"创面修复,创伤修复".选择论点论据可靠且分析全面的与干细胞分泌的促进伤口愈合因子密切相关的文章,排除内容重复文献,终纳入34篇文献进行总结综述.结果与结论:多种干细胞培养上清液中富含创面愈合相关因子,可作为细胞因子制剂治疗难愈性创面.然而由于干细胞来源不同,体外培养条件不同,其因子分泌状况也有所差异,因此应用何种来源的干细胞分泌因子,如何在体外大限度地刺激干细胞产生创面愈合相关因子以及其未来在临床应用中的使用时机、频次和剂量仍有待进一步探索.
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非亲缘供者异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病15例
背景:异基因造血干细胞移植是治愈恶性血液病的主要方法,但中国多为单子女家庭,因此探索非亲缘供者异基因造血干细胞移植的治疗效果及并发症防治具有重要的意义.目的:观察非亲缘供者异基因造血干细胞移植治疗15例恶性血液病的疗效和相关并发症.方法:15例恶性血液病患者接受非血缘关系异基因造血干细胞移植治疗.所有患者均采用经典或改良的马利兰联合环磷酰胺预处理方案.4例采用环孢素A+短程甲氨蝶呤+麦考酚吗乙酯预防移植物抗宿主病,另11例患者同时加用抗胸腺细胞球蛋白.输注供者有核细胞中位数为6.3×108/kg,CD34+细胞中位数为3.1×106/kg.结果与结论:除1例移植后早期死亡不能评估外,其余14例经检测均证实植活.发生急性移植物抗宿主病Ⅰ度5例,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ度各1例;慢性局限性移植物抗宿主病8例.发生肺部真菌感染5例,巨细胞病毒病毒血症3例,带状疱疹病毒感染2例,出血性膀胱炎6例.15例患者中目前无病存活10例,生存期为5个月~11年.结果提示非血缘关系异基因造血干细胞移植是安全且可行的,治疗恶性血液病疗效良好,降低移植相关并发症已成为非血缘关系异基因造血干细胞移植需解决的首要问题.
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肿瘤干细胞研究国际发展态势:基于国际数据库的文献检索结果分析
背景:肿瘤干细胞是存在于肿瘤组织中的一小部分具有干细胞性质的细胞群体,具有自我更新能力和不定向分化潜能,肿瘤干细胞学说认为,肿瘤干细胞是肿瘤形成及其不断生长的根源.目的:通过对汤森路透Web of Science数据库、美国NIH基金及北美临床试验注册库有关肿瘤干细胞相关文献的计量学分析,得出成肿瘤干细胞国际动态的研究趋势.设计:文献计量学分析.资料提取:由第一作者检索汤森路透Web of Science数据库,美国NIH基金在线查询网站(NIH Research Portfolio Online Reporting Tools)及北美临床试验注册库(ClinicalTrials.gov)有关肿瘤干细胞的文献,基金资助项目,以及专利情况,分析其研究进展.检索文献时间范围为2002-01/2011-12.数据下载日期为2011-12-18.入选标准:纳入标准:①经同行评议的肿瘤干细胞研究的已发表文章,包括研究原著,综述,会议记录,会议摘要.②与肿瘤干细胞相关的基金资助项目.③与肿瘤干细胞研究相关的临床试验注册数据库.排除标准:①需采用手工检索和电话检索方式收集的文章.②未正式出版的文章.③在收录数量之外排除勘误类文献类型.主要数据的判断指标:①文献收录总量.②文献类型.③学科类型.④国家分布.⑤基金资助机构.⑥发文机构.⑦高被引文章.⑧来源期刊.⑨NIH在研资助项目和机构.⑩北美临床试验注册数据信息.结果:①汤森路透Web of Science数据库过去10年共收录肿瘤干细胞研究相关文献3 642篇,2002年仅发表并收录肿瘤干细胞相关研究10篇,从2007年开始文献数量成倍增长,2011年收录该领域的相关文献927篇,已是2002年92.7倍.其中研究类文章共收录2 033篇.且集中以细胞生物学、生物化学分子生物学和动物实验研究类文献为主要研究方向.②目前已发表的文献美国为主,占全球相关领域发稿量的44.878%.中国在过去10年间被收录文章总量中排名第2,共发表375篇相关文章,占全球相关文章的10.299%.相关研究主要由美国国立卫生研究院、中国国家自然科学基金和美国国立癌症研究所资助.其高被引文章主要发表在Nature<自然>、Cancer Research<癌症研究>、Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America<美国科学院院刊>和Cell Stem Cell<细胞干细胞>.③美国国立卫生研究院目前持续对肿瘤干细胞研究提供大量的资金资助,目前仍在资助365项研究,总资助金额超过1亿5千万美元.④全球在北美临床试验注册中心注册肿瘤干细胞相关研究2 958项,其中美国相关研究共注册2 080项,居世界首位.来自中国的肿瘤干细胞研究的注册项目为30项.结论:文献分析显示了肿瘤干细胞研究领域的国际发展趋势,为针对肿瘤干细胞的药物研发和治疗方法及癌症的临床治疗提供了可借鉴的参考建议.
