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食管癌原发灶及淋巴结转移灶中趋化因子受体CCR7的检验结果
目的:探讨食管癌原发灶和淋巴转移灶中趋化因子受体CCR7检测结果以及表达特点.方法 选择我院2011年1月至2013年1月行食管癌根治术的患者62例,收集所有患者食管癌组织标本,采用免疫组化法进行趋化因子受体CCR7的检测.结果 食管癌原发病灶中CCR7阳性38例(阳性率61.3％,38/62),淋巴结转移灶中CCR7阳性33例(阳性率83.3％,33/42),其中32例与原发灶同时表达,1例为仅在淋巴结转移灶表达,原发灶阴性.食管癌患者有无淋巴结转移、漫润深度、TNM分期不同,CCR7表达差异有统计学意义(P＜0.05).CCR7表达与食管癌患者性别、年龄、肿瘤大小、分化程度等无关.结论 对食管癌患者进行CCR7表达检测,可以帮助了解患者淋巴结转移情况、准确分期,并预测预后.
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神经胶质瘤趋化因子及其受体的研究
趋化因子在恶性肿瘤方面作用很复杂,一些趋化因子能够提高宿主抗肿瘤特异免疫能力;另外一些有利于肿瘤生长、转移,促进肿瘤血管形成,促进肿瘤细胞增殖.通过本文,总结了趋化因子近的研究进展,重点谈论胶质瘤趋化因子及其受体的研究.
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趋化因子在弓形虫感染中的作用
弓形虫(Toxoplasma Gondii)是一种机会性的、专性的、细胞内寄生原虫,可寄生在除红细胞外的几乎所有有核细胞中.弓形虫病是一种呈世界性分布的、严重危害人类健康的人兽共患性疾病.
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CCR5-894ΔC等位基因在普通人群和艾滋病病毒亚型感染者中的分布
CCR5既是一种重要趋化因子受体,也是艾滋病病毒1亚型(HIV-1)感染CD+4T细胞的协同受体.
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蓝萼香茶菜二萜类物质对乳腺癌癌前病变肝郁肾虚证模型大鼠的干预作用
目的:通过加热回流的方法提取蓝萼香茶菜中二萜类物质,测定其含量,研究二萜类物质对乳腺癌癌前病变肝郁肾虚证模型大鼠的干预作用及其作用机制.方法:雌性SD大鼠随机分层分组为正常组、枸橼酸他莫昔芬片组、模型组、蓝萼组.除正常组外其他各组均用二甲基苯蒽(DMBA)结合慢性不可预见应激行为制备乳腺癌癌前病变肝郁肾虚证模型,造模结束后,观察记录各组大鼠的生物表征变化及病理变化验证模型.蓝萼组给予二萜类提取物水溶液5 mg·kg-1灌胃,正常组和模型组给予蒸馏水10 mL·kg-1灌胃,各组均连续灌胃30 d.30 d后,记录各组大鼠肉眼可见肿瘤的发生情况;腹腔取血,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测血清中雌二醇(E2),孕激素(P)水平;采集乳腺织织,用苏木素-伊红(HE)染色观察乳腺组织病理学变化,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测乳腺组织血管内皮生长因子(VEGF),趋化因子受体4(CXCR4) mRNA及蛋白表达水平.结果:提取得干燥品质量2.162 g,干燥品中二萜类质量分数为26.35％.与模型组比较,蓝萼组血清中E2,P水平明显降低(P＜0.05),乳腺组织中VEGF,CXCR4蛋白及mRNA表达水平均明显降低(P＜0.05).结论:蓝萼香茶菜二萜类物质有可能通过抑制VEGF,CXCR4蛋白及mRNA表达,抑制血管生成和趋化因子受体表达,调节大鼠激素水平,从而抑制大鼠乳腺癌癌前病变癌变的发生.
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体外扩增γδ T细胞的肿瘤组织趋向性
目的 探查体外扩增的γδ T细胞向结直肠癌细胞迁移的能力.方法 采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMCs),并利用固相化抗T细胞受体(TCR)γδ抗体进行2周的体外扩增.对扩增的γδT细胞进行免疫荧光染色和流式细胞仪分析或流式细胞仪分选.采用Bioplex 200流体芯片系统分析细胞因子和趋化因子的表达.采用transwell小室进行趋化实验.结果 体外扩增的γδT细胞主要表达CCR5和CXCR32种趋化因子受体.4种结直肠癌细胞系和10种结直肠癌肿瘤组织中存在CCR5和CXCR3配体的表达.体外扩增的γδ T细胞在TCR激活的情况下可以大量产生Th1和Th2型细胞因子,进一步募集γδ T细胞.特别是其产生的干扰素γ(IFN-γ)能够提高结直肠癌细胞CXCR3配体的表达量,从而进一步促进γδ T细胞的趋近.结论 本研究结果为γδ T细胞过继免疫治疗结直肠癌提供了重要指征.
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CXCR4基因表达增强K562细胞的趋化作用
目的 构建高表达人CXCR4蛋白的白血病细胞系并测定CXCR4基因对其侵袭转移能力的影响.方法 从外周血淋巴细胞中提取基因组RNA,用RT-PCR扩展编码CXCR4基因片段,将CXCR4基因定向克隆到含有双启动子的真核表达载体PBudCFA.1,采用酶切和序列测定方法鉴定.将所构建的重组质粒用脂质体2000转染K562细胞,Zeoein筛选阳性克隆.流式细胞术和RT-PCR对阳性克隆进行鉴定;用Transwell板检测转染与未转染CXCR4的K562细胞对趋化因子SDF-1趋化活性.结果 成功构建编码CXCR4基因的真核表达质粒PBudCE4.1/CXCR4.经转染入K562细胞,筛选获得能稳定高表达人CXCR4蛋白的K562/CXCR4细胞;K562/CXCR4细胞对SDF-1的趋化能力较K562细胞明显增强.结论 成功构建了转染人CXCR4基因的白血病细胞系,为进一步研究白血病细胞髓外浸润的分子机制奠定基础.
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星形胶质细胞产生的趋化因子在阿尔茨海默病发生发展中的作用
阿尔茨海默病可被视为一种慢性神经系统炎症性疾病，星形胶质细胞分泌的趋化因子与其受体结合从不同途径参与了阿尔茨海默病的发生发展，而阿尔茨海默病患者趋化因子水平亦发生相应变化。本文简要总结了星形胶质细胞与阿尔茨海默病的关系，并就趋化因子/趋化因子受体在阿尔茨海默病发生发展中的作用作一综述。
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基因编辑技术成功精确修饰人类T细胞
《科技日报》报道，美国加州大学旧金山分校的研究小组利用基因编辑技术CRISPR/Cas9精确修饰了人类T细胞。由于T细胞在人体免疫系统中作用十分重要，这一研究成果将为治疗糖尿病、艾滋病及癌症等提供全新的手段。CRISPR/Cas9是新出现的一种由RNA指导的Cas9核酸酶对靶向基因进行编辑的技术。新的方法能使T细胞表面一种称为趋化因子受体CXCR4的蛋白质失去功能。这种蛋白可被艾滋病病毒利用感染T细胞，进而引发艾滋病。在癌症免疫疗法中，科学家发现，新方法还可成功关闭PD?1分子，进而诱导T细胞攻击肿瘤。
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HIV-1与趋化因子受体的研究进展
近年来,HIV-1在借助趋化因子受体(CCR5, CXCR4)感染免疫细胞方面的研究引起了广泛关注.对趋化因子受体在HIV-1感染中结构与功能的研究对于促进人们了解艾滋病的发病机制及其预防具有重要意义.另外,对CCR5与CXCR4相关抑制剂的作用分析更为艾滋病疫苗的研制与应用提供了新的方向.本文就HIV-1与趋化因子受体的研究进展情况作一综述.
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CCR7在成人急性白血病中的表达及其临床意义
目的:探讨成人急性白血病中的趋化因子受体-7(CC-chemokine receptor 7 CCR7)表达及其与临床特征的关系.方法:应用流式细胞术检测71例成人急性白血病患者(年龄≥12岁)骨髓白血病细胞CCR7的表达水平,探讨其在成人急性白血病中的表达及与年龄、性别、诊断分型、外周血WBC数、骨髓原始幼稚细胞比例、CD56表达、分子生物学、细胞遗传学,危险度分层、髓外浸润等临床特征的关系.结果:19例急性淋巴细胞白血病(ALL)中CCR7+者7例(36.8％),52例急性髓系白血病(AML)中CCR7+者5例(9.6％),在ALL中CCR7+率明显高于AML中(P＜0.05),在ALL中CCR7+组髓外浸润发生率明显高于CCR7-组(100％ vs 41.7％)(P＜0.05),ALL伴有髓外浸润组CCR7平均荧光强度(MFI)明显高于无髓外浸润组(50.00±10.42 vs 18.14±1.39)(P＜0.05).结论:CCR7在成人急性白血病中表达增加,在ALL中阳性率高于AML中,并与ALL髓外浸润相关.
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rhG-CSF对健康供者T细胞CCR5表达的不同调控及其与急性移植物抗宿主病的相关性研究
探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对健康供者T细胞趋化因子受体CCR5表达的影响及其与急性移植物抗宿主病(aGVHD)的相关性,从而了解rhG-CSF动员在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后诱导免疫耐受的机制.选取68名亲缘allo-HSCT健康供者及相应的68例受者为研究对象,应用流式细胞技术测定健康供者rhG-CSF动员前后外周血CD4+和/CD8+T细胞表面CCR5的表达,比较其变化.根据动员前后供者外周血CD4 +/CD8+T细胞表面CCR5的表达变化情况,将其中可供分析的62例供者分为表达下调组和未下调组,比较两组受者II-IV度aGVHD的累计发生率.结果表明,与动员前外周血相比,rhG-CSF动员后的外周血中CD4+和CD8+T细胞表面CCR5表达均值无明显变化,但在不同个体之间表现出明显的不一致性.34例(50％)供者CD4+细胞CCR5表达下调,50％表达不变或上调,而42例(61.8％)供者CD8+T细胞CCR5表达下调,26例(38.3％)供者CCR5表达不变或上调.分析可供评价的62例移植患者表明,供者CD4+T细胞CCR5下调组受者II-IV度aGVHD发生率较未下调组明显降低(16.6％ vs 43.3％,P=0.032),而CD8+T细胞CCR5下调组受者II-IV度aGVHD的累计发生率较未下调组呈现增高趋势(37.8％ vs 16.0％,P=0.065).结论:rhG-CSF动员影响T细胞表面CCR5的表达,而这些作用可能影响T细胞体内迁移行为,减少T细胞向GVHD靶器官聚集,从而降低allo-HSCT后aGVHD的发生率.
关键词： 重组人粒细胞集落刺激因子 T淋巴细胞 趋化因子受体 CCR5 急性移植物抗宿主病 -
改良的混合细胞因子在诱导树突状细胞中的作用研究
目的:探讨“改良”的混合细胞因子(cytokine cocktail)在诱导树突状细胞(DC)成熟和提高其迁移能力中的作用.方法:采用密度梯度离心法从人外周血干细胞(PBSC)中分离单个核细胞(PBMNC),以GM-CSF和IL-4体外诱导成未成熟DC (imDC),用电穿孔法把A549的总RNA转染入imDC.分别用“金标准”混合细胞因子和“改良”的混合细胞因子刺激DC成熟.用流式细胞术检测各组DC表面标志(CD11c、HLA-DR、CD80、CD83和CD86)和趋化因子受体(CCR5、CCR7和CXCR4)的表达;RT-PCR检测各组DC趋化因子受体(CCR2、CCR5、CCR7、CXCR3和CXCR4)和趋化因子(CCL2、CCL3、CCL5、CCL19、CCL21、CXCL10和CXCL12)mRNA的表达水平.结果:与“金标准”混合细胞因子相比,“改良”的混合细胞因子DC较高水平表达其表面标志(CD11c、HLA-DR、CDS0、CD83和CD86)、趋化因子受体(CXCR4)和趋化因子(CCL2、CCL3、CCL5、CCL19、CCL21、CXCL10和CXCL12).结论:与“金标准”混合细胞因子诱导相比,“改良”的混合细胞因子诱导能更好地诱导DC的成熟并提高其迁移能力.
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IFN-α对体外培养CML-DC功能、表达- 趋化因子及其受体的影响
为了研究α-干扰素(IFN-α)对慢性粒细胞白血病(CML)来源的树突状细胞(DC)分泌趋化因子、表达趋化因子受体及其功能的影响,取13例CML慢性期患者骨髓单个核细胞,在小牛血清培养体系中诱导培养CML来源的DC,以rhSCF、rhFlt-3L作为扩增体系的细胞因子,加入rhGM-CSF、rhTNF-α、rhIL-4,加或不加rhIFN-α诱导DC的生成,培养2周后流式细胞术检测培养细胞的免疫表型,ELISA法检测培养上清液中CML-DC分泌MIP-3β的含量,MTT法检测CML-DC刺激健康人外周血T淋巴细胞增殖能力.结果表明:IFN-α组培养所获DC表面CD86、CD83、CD40、MHC-Ⅰ类分子、CCR7的表达均高于对照组(P＜0.01);IFN-α组诱导培养的CML-DC表达MIP-3β较对照组明显增高(P＜0.01);IFN-α组诱导培养的CML-DC刺激异体T淋巴细胞增殖的能力较对照组明显增强(P＜0.01).结论:IFN-α可能部分通过纠正CML-DC的免疫表型以加速CML-DC的成熟,增强CML-DC的功能.
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Th17在支气管哮喘中的作用研究进展
辅助 T 细胞（helper T，Th）17是 Th1和 Th2亚型之外，新近发现的能够产生 IL-17的 CD4+辅助 T 细胞，因此被命名为 Th17，其主要分泌 IL-17A（IL-17）、IL-17F、IL-21、IL-22、IL-23、IL-25（IL-17E）、IL-8、IL-26和 TNF-α等细胞因子[1]。人 Th17起源于 CD161+CD4+T 前体细胞，其成熟后表面表达 IL-23R、趋化因子受体 CCR6[2]和植物凝集素受体 CD161[3]。研究显示，Th17在自身免疫性疾病以及由多种细菌和真菌引发的免疫反应，尤其是黏膜免疫中具有重要作用，因此被界定为“促炎”免疫细胞。支气管哮喘是一种多细胞参与的异质性的慢性气道炎症性疾病。近年来的研究显示，Th17及其相关细胞因子在哮喘发病中具有重要作用，本文将从 Th17分化的转录调节、Th17及其相关细胞因子在支气管哮喘中的作用等方面进行综述。
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CXCR5/CLCL13在恶性肿瘤中的研究进展
趋化因子在细胞向炎症定向迁徙中发挥重要的作用,它的功能由相应受体介导,两者的相互作用控制各种免疫细胞在循环系统与组织器官之间的定向迁徙.新研究显示趋化因子及其受体与肿瘤的发生发展有关,趋化因子通过自分泌或旁分泌方式刺激肿瘤细胞增殖和控制肿瘤细胞运动,其中趋化因子受体 CXCR5与其配体 CXCL13在多种肿瘤中异常表达且与肿瘤进展密切相关.本文就趋化因子受体 CXCR5与其配体 CXCL13在恶性肿瘤中的新进展进行综述.
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趋化因子受体CCR7及其配体在肿瘤侵袭和转移中的研究进展
趋化因子是一组由组织细胞和炎性细胞产生的、能够趋化细胞定向移动的小分子分泌蛋白,由70至100个氨基酸组成.迄今已发现50余种人的趋化因子,且在趋化因子中都有4个保守的半胱氨酸(C).
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蛋白CXCR7的发现及其作用
CXCR7,以前称为RDC1,1989年从狗甲状腺cDNA库筛选出来的,初报道是一个具有血管活性肠肽(VIP)的受体,接着被确定为与降钙素基因相关肽结合的受体,后来又认为与肾上腺髓质素结合,然而这些定论终都被否决了.事实上,RDCI与已知的一些趋化因子受体有高度相似序列,故属于G蛋白耦联受体(G-protein coupled receptor,GPCR)的亚族[1].然而因为不知道或者认为没有配体故一直将RDC1归类为孤儿GPCR[2].
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趋化因子受体CXCR7在结直肠肿瘤中的表达及其临床意义
结直肠癌的发病率和病死率逐年上升,且有年轻化趋势,早期症状隐匿,而且临床上超过一半患者手术前就已有了微小转移.侵袭和转移是恶性肿瘤的重要生物学特征,是肿瘤患者致死的主要原因.许多生理、病理过程中,趋化因子引导细胞定向运动,趋化因子形成浓度梯度调控细胞的运动路径.肿瘤细胞能分泌趋化因子受体,并与趋化因子浓度梯度相应答,这种现象可能与肿瘤的生长和扩散有关[1-2].
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HIV感染者体内抗小分子多肽抗体与病情发展的初步研究
目的研究HIV感染者体内抗-R7V含量与病情发展的关系.方法用ELISA、中和沉淀等方法检测HIV感染者、长期生存者、艾滋病患者等的抗-R7V含量.结果抗-R7V检出率在无症状组和长期生存组较高,在进展者和艾滋病患者中较低,溶解处理标本后抗-R7V含量及阳性率明显提高.结论抗-R7V主要通过干扰HIV与CCR5、CXCR4结合,使HIV不能进入CD4+T淋巴细胞内,并阻止病毒的复制.
