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扑朔迷离的『性反转综合征』
友人的女儿小翠,26岁,身材、外阴都与一般女性无异,但一直未有过月经来潮.近她到首都某医院诊治,经检查腹腔中确有发育较幼稚的卵巢组织,外生殖器呈女性,检查结果上还写着"染色体核型46,XY,SRY基因检测阴性",诊断为"性反转综合征".也就是说,她的染色体具男性特征,可却无决定睾丸发育的基因.因此在性别上出了麻烦.
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不同卵巢组织冷冻方法对保存女性生育力的研究
目的 比较程序化冷冻和玻璃化冷冻两种方法保存人卵巢组织,解冻后组织病理分析原始卵泡存活情况.方法 卵巢组织取自15例卵巢畸胎瘤患者,卵巢皮质切割成10 mm×1 mm×1 mm的组织条随机分配到玻璃化冷冻组(A组)、程序化冷冻组(B组),新鲜对照组(C组),组织病理分析比较三组原始卵泡形态的影响. 结果 三组共有572个原始卵泡,C组中96.9%的原始卵泡保持形态学正常,A和B组分别为85.6%与83.9%,差别有统计学意义(P<0.01);A与B组比较,差别没有统计学意义(P>0.05). 结论 尽管冻融后组织的原始卵泡存活率小于新鲜组织,玻璃化冷冻与程序化冷冻方法都能较好地保存人类卵巢组织,可用于人类卵巢组织的冷冻保存.
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卵母细胞和卵巢组织的冷冻
精子冻存已取得了一定的成功,但是冻存的卵母细胞体外发育的成功率很低,因为卵母细胞冻存与许多因素有关,成熟的卵母细胞对冻存非常敏感,很容易出现非整倍体现象.为了提高卵母细胞的受精率,人们已着手研究不成熟卵母细胞及卵巢的冻存.要建立一个方法,使生长完全的生殖泡(germinal vesicle,GV)和MII卵母细胞暴露于与冻存有关的物理和化学逆境后,仍然具有很高的存活率、受精率和发育率.目前还没有一个简单可行的冻存方法,而且主要困难在于如何使原始卵泡中的未成熟卵母细胞发育为成熟的卵母细胞.
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人类卵巢组织条厚度对超低温冷冻效果影响的研究
目的 探索不同卵巢组织条厚度对超低温冷冻效果的影响,同时评估卵巢组织的凋亡情况.方法 卵巢组织取自10例手术的妇女.冷冻前行卵巢组织切片,按小厚度随机分成1.0、0.5、0.25 mm 3组.采用二甲基亚砜(DMSO)为冷冻保护剂的程序慢速冷冻法进行超低温冷冻保存.冻融后进行卵泡计数及各组间正常卵泡形态学分析比较,使用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)进行组织细胞凋亡检测.上述结果与新鲜卵巢组织进行比较.结果新鲜卵巢组中97.6%原始卵泡保持形态学正常,切片厚度为1.0、0.5、0.25 mm三组形态正常率分别为71.1%、73.9%和72.7%,与新鲜组比较,三实验组下降明显,差别有统计学意义(χ2=15.66,P<0.001);而三冷冻组间相比差别无统计学意义(χ2=0.153,P=0.926).TUNEL原位杂交显示窦前卵泡颗粒细胞中未见凋亡阳性信号,窦卵泡中可见散在阳性信号细胞,卵巢间质细胞亦有散在凋亡信号.结论 0.5～1.0 mm厚度卵巢组织为行超低温冷冻保存是较合理厚度,卵泡闭锁的机理值得进一步研究.
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冻融人胎儿卵巢组织异种移植的实验研究
目的 探求冻融人胎儿卵巢组织异种移植后的生长发育能力. 方法 胎儿卵巢组织分为新鲜胎儿卵巢组织(新鲜组),慢冻-快融胎儿卵巢组织(冻融组),解冻的胎儿卵巢组织异种移植到8只裸鼠肾被膜下(移植组)三组.2个月后开始隔天注射孕马血清促性腺激素(PMSG),持续5个月.注射人绒毛膜促性腺激素(Hcg)36 h后裸鼠处死取得移植物.胎儿卵巢组织石蜡包埋后连续切片,进行组织学评价和增殖细胞核抗原(PCNA)的检测. 结果 冻融组和新鲜组中绝大多数是原始卵泡.与新鲜组相比,冻融组中正常及总的原始卵泡数虽有下降,异常原始卵泡数虽有升高,但均无显著性差异.移植组的原始卵泡数明显少于新鲜组和冻融组(7.2±1.64,20.4±5.68,17.2±4.27,P＜0.05),但可见到数个形态正常的初级卵泡、次级卵泡和窦卵泡.三组的原始卵泡均未见有PCNA阳性表达,PCNA阳性表达见于移植组初级卵泡的颗粒细胞和卵母细胞、次级卵泡和窦卵泡的颗粒细胞. 结论 冻融人胎儿卵巢组织异种移植后能存活,卵泡能正常发育到窦卵泡.
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冻融成人卵巢组织异种移植后形态和功能的研究
目的 探讨经玻璃化法冷冻保存的成人卵巢组织异种皮下移植后卵泡生长发育和雌激素分泌情况. 方法 将30只SCID小鼠随机分为2组:去势对照组和移植组.两组小鼠均于术后7d开始隔日给予重组卵泡刺激素(rFSH)及重组黄体生成素(rLH)各5U.移植术20周后将获取的移植物进行光学显微镜观察,并测定两组小鼠血清雌二醇(E2)浓度及子宫相对重量. 结果 卵巢皮质移植物内可以观察到各级卵泡发育,移植组小鼠血清E2水平及子宫相对重量高于去势对照组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 经玻璃化冷冻保存并异种皮下移植的人类卵巢组织可以存活,具有雌激素分泌功能,并作用于靶器官.
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小鼠卵巢组织在不同冷冻方案中形态学比较
目的比较小鼠卵巢组织在不同降温过程中组织形态学变化.方法取21 d 10只ICR小鼠双侧卵巢,随机均分为对照、快速、中速和慢速4组进行冷冻保存.5 d后解冻复苏,光镜下观察组织切片,比较各组不同发育阶段卵泡的比例以及卵泡、卵子和颗粒细胞形态、分布情况.结果4组不同发育阶段卵泡构成比无明显差异,初级卵泡占5.3%、次级卵泡占7.6%、窦前卵泡占85.7%及偶见少量窦卵泡,均未见典型的原始卵泡.4组皱缩卵子的比例分别为3.9%、42.6%、41.6%和34.9%;卵子保持圆形但胞浆内空泡体积＞10%的分别占16.2%、57.2%、59.6%和19.5%;形态基本正常的卵子分别为80.6%、24.3%、23.6%和52.4%,在所有冷冻组中慢速组高,但明显低于对照组.结论慢速冷冻结合植冰是小鼠卵巢组织冷冻保存比较有效的方案,但是冷冻方案尚需进一步完善.
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不同方法冻融山羊卵巢组织的研究
目的 探讨山羊卵巢组织不同玻璃化冷冻方法对其卵母细胞体外成熟、体外受精及胚胎发育的影响.方法 采用三种不同的冷冻保护液(I、II、III)保存的卵巢组织吸入0.25 ml麦管中直接投入液氮中冷冻保存.采用慢速解冻法解冻后对卵巢组织进行形态学观察;收集卵母细胞进行体外培养.结果 三种不同冷冻方法冷冻卵巢组织解冻后收集的卵母细胞存活率分别为55.2%、48.9%和46.7%,组间比较无显著性差异(P＞0.05);成熟率分别为58.5%(I组)、28.9%(II组)、33.3%(III组),I组显著高于II、III组(P＜0.01);三组的受精率、卵裂率、8细胞胚胎的形成率均无显著性差异(P＞0.05);卵巢组织解冻后形态学分析表明,I组效果好于II、III组.结论 采用玻璃化方法冷冻卵巢组织,在冷冻保护液中加入卵黄可提高冷冻保护效果.
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小鼠卵巢组织冷冻保存方法对组织内分泌功能的影响
目的 比较不同的冷冻方法对小鼠卵巢组织的保存效果及对组织内分泌功能的影响. 方法 25只6周龄ICR雌鼠,取卵巢皮质切块后,根据不同冷冻方法随机分成5组:新鲜对照组、二甲亚砜慢速冷冻组(A组)、丙二醇慢速冷冻组(B组)、冷冻管玻璃化冷冻5min组(C组)及冷冻管玻璃化冷冻8min组(D组).分别进行卵巢组织冷冻复苏,复苏后体外培养2周以及复苏后同种移植饲养2周实验.比较各组体外培养液中以及复苏移植后小鼠静脉血中雌二醇(E2)水平. 结果 体外培养过程中,各组培养液中E2水平均随培养时间不断增加(F=14.146,P＜0.001);同一天的E2水平比较,A、B组显著高于对照组及C,D组(P＜0.05),C、D组与对照组无统计学差异(P＞0.05).移植饲养2周后,DMSO慢速冷冻复苏移植组、PROH慢速冷冻复苏移植组的平均E2水平显著高于两组玻璃化复苏移植组、新鲜组织移植对照组、未处理自然对照组及去势未移植对照组(P＜0.05),新鲜移植对照组、两组玻璃化复苏移植组及去势未移植对照组的平均E2水平显著低于未处理的自然对照组(P＜0.05). 结论 慢速冷冻及玻璃化冷冻的小鼠卵巢组织复苏后,经过体外培养及同种移植均能保持一定的内分泌功能;慢速冷冻效果可能优于冷冻管玻璃化冷冻.
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兔卵巢组织慢速冷冻和玻璃化冷冻保存方法的研究
目的 比较不同冷冻方法对兔卵巢组织的保存效果.方法 15只新西兰雌兔,取卵巢皮质切块后,随机分成5组:新鲜组(A组)、二甲亚砜慢速冷冻组(B组)、丙二醇慢速冷冻组(C组)、冷冻管玻璃化冷冻组(D组)及固相表面玻璃化冷冻组(E组).比较各组卵巢组织的原始和初级卵泡形态正常率；通过体外培养测定培养液中雌二醇(E2)水平；比较冻融后卵巢组织的内分泌功能；通过TdT介导的dUTP缺口末端标记技术,检测细胞凋亡情况.结果 原始卵泡正常形态率与A组相比,B、D组显著降低(P＜0.05),C、E组无显著性差异；初级卵泡正常形态率5组间无显著性差异.培养14d后,各实验组原始卵泡形态正常率均低于A组(P＜0.001),各实验组间无显著性差异；组间初级卵泡形态正常率无明显差异.体外培养过程中,培养液E2水平不断增加(P＜0.001),慢速冷冻和玻璃化冷冻的E2平均浓度有显著性差异(P＜0.05).细胞凋亡检测显示,无论是原始卵泡还是初级卵泡,与A组相比,各实验组的卵泡凋亡率均无显著性差异.结论 本实验中,慢速冷冻和固相表面玻璃化冷冻均能很好地保存兔卵巢组织,经过体外培养,能保持一定的内分泌功能.
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不同玻璃液冻存卵巢组织移植于鸡胚前后的氧化应激和细胞凋亡研究
目的 研究不同玻璃液(VS)保护下冻存的卵巢组织移植于鸡胚前后的氧化应激和细胞凋亡情况,以评估不同玻璃液的冷冻保护效果. 方法 将卵巢组织分割成1～2 mm×1 mm×1 mm的小块分别放入VS1、VS2、VS3、VS4 4种不同的玻璃液中,经过4种玻璃液平衡后冻存并复苏的卵巢组织称为冻存卵巢组织(FOT),分别将经4种玻璃液冻存的FOT移植到胚龄10 d的鸡卵绒毛尿囊膜(CAM)上培养,于鸡卵胚龄16d取出移植于CAM的卵巢组织(TOT),以未经玻璃液平衡的新鲜卵巢组织为对照(COT),分析4种玻璃液保存的FOT、TOT、COT中线粒体活性、细胞内活性氧自由基(ROS)水平和间质细胞凋亡情况. 结果 线粒体活性:经过VS1、VS3和VS4冻存的FOT和TOT中的线粒体活性低于COT,差异有统计学意义(P＜0.05);经VS2冻存的TOT与COT中线粒体活性无显著性差异(P＞0.05).细胞内ROS水平:经过VS1、VS3和MS4冻存的FOT和TOT细胞内ROS水平低于COT,有统计学差异(P＜0.05);经VS2冻存的FOT细胞内ROS水平与COT组比较无显著性差异(P＞0.05).间质细胞凋亡情况:经过VS1、VS2、VS3和VS4平衡的FOT间质细胞凋亡率和COT组之间的差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 由玻璃液VS2保护冻存卵巢组织的冷冻损伤小、移植后缺血损伤轻,是本研究优化的卵巢冷冻保护玻璃液;玻璃化冷冻对间质细胞损伤小,适于人卵巢组织的冷冻保存.
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输卵管结扎误伤卵巢1例报告
资料:张某,女,25岁,农民,产后46d在本站做输卵管结扎术.局麻下行腹式直切口输卵管结扎术,术中右侧输卵管结扎顺利,左侧取管困难,牵扯,并触及肿大卵巢.延长切口,暴露视野提取左侧卵巢,见卵巢异常肿大,约10cm×8cm×3cm大小,表面乳白色呈现泡状,有一2mm大小破损处溢出透明液体,切除肿大卵巢并结扎同侧输卵管.术后病检为正常卵巢组织,溢液经检验为普鲁卡因.
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卵巢成形手术与术后卵巢功能关系的探讨
目的:探讨改良传统术式与术后卵巢功能即性激素水平及排卵的关系.方法:对50例手术治疗的卵巢良性肿瘤患者进行术后随访其排卵、监测子宫内膜厚度、性激素水平.结果:50例施术者性激素水平,子宫内膜厚度均符合排卵期;并经阴道超声扫描术侧卵巢,32%患者术后第1个月即有排卵.结论:此手术方法完全保留卵巢组织及其血供,从而保护了卵巢功能,提高了妇女的生活质量;而且方法简单,安全.
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人卵体外成熟研究及临床应用进展
人卵体外成熟的概念及意义人卵体外成熟(in vitro maturation,IVM)技术一般是指在不用或少量应用促性腺激素(gonadotropin,Gn)超促排卵的情况下,从患者卵巢中获取未成熟卵,或从手术离体的卵巢组织中直接分离未成熟卵泡,在体外经过适宜的条件进行体外成熟培养,使卵子成熟达到MⅡ期并具备受精能力.其意义主要在于:在不孕症治疗中免除患者超促排造成过度刺激的危险,尤其是多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者;由于不用或少用促性腺激素超排卵,节省医疗费用和就医时间;帮助解决卵巢组织或卵泡冷冻保存后卵细胞的成熟问题和未成熟卵冷冻保存后的应用问题,为卵巢去势患者保存生育力和建立"卵子库";开展有关人卵子成熟机制的基础性研究.
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什么样的囊肿必须治
囊肿通常是一种良性病变,它可以长在人体表面,也可以长在内脏里,外有囊壁,内有液体或其他成分.常见的囊肿有:肾囊肿、肝囊肿、卵巢囊肿、子宫囊肿、表皮囊肿等.还有一些特殊囊肿,如巧克力囊肿,又叫卵巢子宫内膜异位症,这是子宫内膜“跑”到了卵巢组织内部,并和子宫一样周期性出血,由于陈旧的血液颜色类似巧克力,故叫巧克力囊肿.
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Aurora A在原发性上皮性卵巢癌组织中的表达
Aurora A(又称为BTAK、SKT15、AIK1、ARK1)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,属于AuroraIpI1相关激酶家族中的一员,其编码基因位于染色体20q13.2-13.3,此区域在多种上皮性恶性肿瘤中经常发生扩增[1].它在中心体的成熟、纺锤体的组建及染色体的正常分离过程中起着重要的调节作用.Aurora A基因的异常表达可引起有丝分裂的错误,导致异倍体的产生或染色体拷贝数的增加,终引起细胞死亡或者诱发细胞恶性转化[2].提示Aurora A与肿瘤的发生存在着强烈的相关性.本研究采用免疫组织化学的方法,检测了52例不同组织类型的原发性上皮性卵巢癌组织中Aurora A的蛋白表达,并与其在正常卵巢组织及癌旁组织中的表达水平比较,以探讨Aurora A与卵巢癌发生发展的关系.
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两种冷冻方法对人大块卵巢组织卵泡活性的影响
目的 探讨两种冷冻方法冻融人类大块卵巢组织的冷冻效果及对卵泡活性的影响.方法 收集15例人卵巢组织,每例修剪成3块卵巢组织(约15 mm×15 mm ×2mm),分别随机分配到新鲜对照组(A组)、玻璃化冷冻组(B组)、两步法冷冻组(C组),组织学分析3组卵泡形态学变化,并进行卵巢组织体外培养后测定培养液上清中雌激素、孕激素浓度,免疫组织化学染色测定培养后的卵巢组织细胞核增殖相关抗原Ki67及B细胞淋巴瘤／白血病-2基因(Bel-2)表达水平,评估卵泡增殖及凋亡活性.结果 A组正常形态卵泡比率(91.9％)显著高于B组(71.3％)和C组(82.9％),差异有统计学意义(P＜0.05),C组高于B组,差异有统计学意义(P＜0.05).C组的始基卵泡和初级卵泡的正常形态率分别为86.8％、54.4％,均分别高于B组73.8％、44.4％,差异有统计学意义(P＜0.05).同一时期3组激素测定结果差异不显著(P＞0.05).C组Ki67的阳性率为73％,分别显著高于A组50％和B组55％ (P ＜0.05),A组低于B组(P＜0.05).Bcl-2阳性率,A组为57％和C组61％相比无差异(P＞0.05),但B组42％阳性率分别低于A组和C组(P＜0.05).结论 人体大块卵巢组织冻融后仍具有活性,并且两步法冻存效果优于玻璃化冷冻法.
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卵巢外卵巢2例
例l女,25岁.因停经4月余,反复右下腹痛入院,诊断"右卵巢囊肿扭转"行右附件切除.巨检:卵巢肿瘤一个已剖开,外露凝固黄脂及毛发,8cm×7cm×4cm大.距肿瘤0.8cm处扭转粘连蒂上,有一梭形肿块2cm×lcm×1cm.切面中央白色,周围一圈黄色.镜检:肿瘤壁内衬一层鳞状上皮,角化物及毛屑可见.囊壁内卵巢纤维水肿变性,淋巴细胞散在.梭形肿块周边为肥大黄体细胞,中央为黄体液,二者间为疏松的纤维网状白体.黄体外卵巢组织被压缩,有陈旧性出血.蒂组织内静脉扩张充盈,单核细胞附壁及组织内浸润.纤维断裂,组织水肿和新鲜出血.
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卵巢放线菌病1例
患者女性,35岁.因右下腹阵发性渐进性疼痛2个月,加重4天入院.宫内放置节育环4年.查体:子宫右后方可触及一直径8cm质硬包块,活动度差,与子宫右侧壁有分界,压痛(+).B超示:右侧卵巢囊实性包块,以实性为主.遂行右侧附件切除术.病理检查巨检:卵巢及输卵管组织.卵巢呈椭圆形,5.2cm×3.6cm×2.3cm大小,被膜紧张,表面光滑、充血,切面中央有一直径1.5cm大小化脓灶,其中可见细小的硫黄颗粒,脓肿周围卵巢组织内还可见散在的粟粒大小脓点,周围卵巢组织水肿.
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真两性畸形伴睾丸曲细精管内生殖细胞肿瘤一例
患者社会性别为女性,15岁. 患者自幼阴蒂肥大,近1年多来阴蒂进行性增大,长出胡须及阴毛半年.于2004年3月5日入院.患者出生后发现外生殖器畸形,表现为女性阴唇和男性阴茎.染色体检查为:46XY,83%,46XX,17%.3岁时将外阴整形为女性.父母体健,非近亲结婚.体检:外生殖器畸形,阴蒂肥大似阴囊样,其内未触及睾丸.大阴唇包绕阴道及尿道开口.阴阜部阴毛密集,呈男性分布.B超和CT检查:左卵巢肿块.剖腹探查发现双侧腹股沟管内无鞘状突及输精管和睾丸结构.盆腔中见子宫和双侧卵巢、输卵管.左卵巢旁见一2 cm×3 cm大小肿块.术中冷冻切片检查为睾丸组织和少量小细胞巢.右侧卵巢旁见一0.5 cm×0.5 cm大小结节,冷冻切片观察为纤维组织和少量小腺管,未见性腺结构.根据本例患者对社会性别的要求,术中保留双侧卵巢组织和子宫.
