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大鼠胚胎卵巢异体异位移植的探讨
为了研究胚胎卵巢移植后的存活和生长发育情况,以及不同移植部位对胚胎卵巢的影响,将大鼠胚胎卵巢分别移入去势雌鼠的颈部皮下及肾被膜下,HE观察颈部移植物移植后5 d处于坏死状态,含有大量红细胞;10 d周围有结缔组织包裹,内有原始卵泡;25 d及以后移植物内存在大量发育卵泡并可见间质腺及黄体.肾被膜移植物移植后5 d呈结缔组织样;10 d出现大量原始卵泡结构;25 d及以后可见发育卵泡、间质腺和黄体.细胞化学显示发育卵泡的3-β羟甾脱氢酶呈阳性反应.移植后25 d左右阴道涂片出现动情周期.结果说明胚胎卵巢能在异体异位存活并可发育成具有内分泌功能的腺体.
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大鼠胚胎卵巢冷冻保存和异体无血管皮下移植的生长
背景:胚胎卵巢组织免疫原性低,不易引起宿主的免疫排斥反应,是卵巢异体移植的理想供体.但由于获取胎儿卵巢的不随意性和来源限制,标本的冷冻显得至关重要,成功的冷冻保存和复苏技术是建立胎儿卵巢库的关键.目的:通过对大鼠新鲜或冻融胚胎卵巢组织异体无血管移植后的组织形态和功能的观察,探讨胚胎卵巢组织异体移植和超速冷冻保存的可行性.设计、时间及地点:随机对照动物实验.于2006-03/05在云南省第一人民医院生殖遗传科进行课题设计,于2006-05/2007-02在云南大学单克隆抗体研究中心完成实验.材料:卵巢来源于孕龄为18～20 d SD大鼠胚胎.取阴道脱落细胞涂片证实有正常动情周期未交配过的SD成年雌性大鼠作为移植对象,分4组:正常对照组(n=10)、去势对照组(n=10)、新鲜胚胎卵巢移植组(n=25)、冷冻胚胎卵巢移植组(n=25).方法:正常对照组仅行皮肤筋膜肌肉切开缝合术,去势对照组切除双侧卵巢组织.将孕龄为18～20 d的新鲜或经超速冷冻法冷冻复苏的大鼠胚胎卵巢植入去势后4周的大鼠颈部皮下作为实验组,分别为新鲜移植组和冷冻移植组.主要观察指标:通过阴道脱落细胞的观察和血清雌二醇、孕酮的测定了解大鼠内分泌恢复情况,并对移植卵巢进行组织学观察.结果:新鲜移植组和冷冻移植组分别有52.17%和38.01%大鼠恢复了动情周期,两组血清雌二醇和孕酮在分别在35和49 d恢复到正常,且动情周期天数与正常对照组比较,差异无显著性意义.冷冻移植组大鼠恢复动情周期虽稍短于新鲜移植组,但差异并无统计学意义.63 d后取出移植物观察,见移植物色泽红润,表面有丰富的血管形成,镜下见卵巢内有大量的小动脉和小静脉;移植物组织学检查发现卵泡的发育,光镜下可见不同发育阶段的卵泡,有成熟卵泡和黄体形成,形态与正常卵巢无明显差别.结论:大鼠胚胎卵巢异体异位无血管皮下移植后能存活、生长发育并具有与正常卵巢相似的内分泌功能;超速冷冻法能较好的保存胚胎卵巢的活性,复苏后与新鲜胚胎卵巢组织具有相同的生理活性.
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大鼠胚胎卵巢移植的形态与功能研究
目的 明确胚胎卵巢移植后的生存,生长及功能恢复情况.方法 将大鼠胚胎卵巢移植入去势成年雌鼠颈部皮下及肾被膜下,分别于移植后5、10、25～35、35 d以上取移植卵巢进行组织学和组织化学研究,并测定血清雌、孕激素水平.结果 移植后第5 d移植物内有大量血细胞;第10 d移植物内有大量原始卵泡及初级卵泡;第25 d及以后移植物内可见不同阶段的发育卵泡,并可见间质腺及黄体.受体在移植后第23 d左右阴道涂片出现动情周期.组织化学显示移植物3-β-羟甾脱氢酶及油红O呈不同程度阳性反应,与正常卵巢阳性部位一致.血清学研究显示移植卵巢具有与正常卵巢接近的分泌雌、孕激素的能力.结论 胚胎卵巢移植后能在异位存活并可发育成具有内分泌功能的腺体.
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宿主自身卵巢与移植胚鼠卵巢的生长发育相互影响的实验研究
目的 探讨宿主自身卵巢与移植胚鼠卵巢的生长发育是否存在相互影响的关系.方法 将胚鼠卵巢分别移植至单侧卵巢摘除及去势雌鼠皮下,观察同时存在的自身卵巢对移植物生长发育有无影响,以及是否受移植物影响.结果 单摘移植的宿主卵巢黄体总体均数较高,与单侧卵巢摘除组比较差异有统计学意义(P<0.05).去势宿主体内移植的胚胎卵巢中的原始卵泡会继续生长发育出各阶段卵泡,而单摘受者体内的移植物停止发育,抑或纤维化吸收.结论 宿主体内卵巢与移植胚鼠卵巢卵泡存在相互竞争关系,自身卵巢较移植物卵泡更具优势.
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大鼠胚胎卵巢异体异位移植的实验研究
目的 研究大鼠胚胎卵巢异体异位无血管皮下移植后的生长、发育及大鼠内分泌功能恢复情况.方法 将孕龄为18～20d的新鲜或冻融大鼠胚胎卵巢植入去势后4周的大鼠颈部皮下,通过阴道脱落细胞的观察和血清雌二醇(E2)、孕酮(P)的测定了解大鼠内分泌恢复情况,并对移植卵巢及自身子宫进行组织学观察.结果 新鲜组和冷冻组分别有52.17%和38.01%的大鼠恢复了动情周期,激素水平分别在移植35d和49d恢复到正常水平,移植卵巢明显增大,内可见不同阶段的发育卵泡及黄体,子宫内膜有雌激素效应.结论 大鼠胚胎卵巢异体异位无血管皮下移植后能存活、生长发育并具有与正常卵巢相似的内分泌功能.超速冷冻法能较好的保存胚胎卵巢的活性,复苏后与新鲜胚胎卵巢组织具有相同的生理活性.
