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胰母细胞瘤的诊断及外科治疗
胰母细胞瘤( Pancreatoblastoma,PBL),也称小儿胰腺癌,是一种非常罕见的胰腺恶性肿瘤[1].目前国外已报道约200例,主要发病于儿童,极少数在成人中发病[2].1977年,Horie等[3]首次描述这种胰腺肿瘤在组织学上类似于第8周胎儿胰腺结构的特征.PBL总的5年生存率是50％.目前尚无统一的指南指导治疗,但临床上普遍采取以外科手术切除为主的治疗原则.
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超声检查胎儿胰腺的可行性研究
近年来,随着产前超声检查技术水平的不断提高和仪器分辨力的不断改善,超声对胎儿腹部脏器如肝、胆、脾、肾、胃、膀胱甚至肾上腺的检查已成为常规内容[1],然而,作为腹部重要脏器之一的胰腺,却很少被提及,究其原因:一方面可能是胎儿胰腺体积小,位置隐蔽,难以显示;另一方面可能是胎儿胰腺病变罕见,很少有人去关注.
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不同幼年供体胰段的超微结构观察
背景:随着胰腺移植供体的不足,胰段移植已倍受关注.从解剖学角度认识胰腺各段胰岛和胰岛细胞(A,B细胞)的分布规律,可否得出胰段移植的佳选择.目的:观察幼年大鼠胰腺胰尾的微细结构,胎尸胰腺胰尾的微细结构,胰岛B细胞胰高血糖素和胰岛素阳性表达面积及胰岛B细胞免疫阳件染色面积,并予以比较.设计、时间及地点:对比观察,于:2006-01/2007-06在福建医科大学人体解剖组织胚胎学系实验室完成.材料:出生1周内健康SD大鼠33只,3～10个月龄胎尸胰腺80个,每月龄10个.胰高血糖素抗血清为武汉博士德生物工程公司产品,胰岛素抗血清为北京中山金桥生物技术公司产品,图像处理系统(Videopro32型)由福建医科大学人体解剖实验审提供,Hu-12A型透射屯镜为日本电子株式会社产品.方法:随机选择30只大鼠,取胰尾切片苏木精-伊红染色后光镜观察,显微测微器测量胰岛个数和面积,用胰高血糖素抗血清和胰岛素抗血清进行免疫组织化学染色.另3只大鼠取胰尾组织块铀铅染色,每月龄胎尸各取2例胰尾组织,1例行ABC法胰岛素免疫组化染色,另1例行铀钳染色.主要观察指标:透射电镜观察并比较胎尸胰及幼年大鼠胰腺B细胞及胰岛形态和数量、结构及其分泌颗粒.结果:幼年大鼠胰尾组织中胰岛B细胞内分泌颗粒多,内质网、高尔基复合体和线粒体等细胞器发达,胰岛数目分布多,胰岛B细胞的免疫阳性染色面积大.胎尸胰尾有较多而密的胰岛B细胞散在分布,胰岛B细胞分泌颗粒多.结论:幼年大鼠和胎尸胰腺细胞的分泌活动均旺盛的,消化功能强,适宜作为胰腺胰段胰岛移植供体,且以胰尾为佳.
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胎儿胰岛中干细胞的分离与鉴定
目的:已证实胰腺来源的干细胞或祖细胞在体内外均能分化为胰岛素分泌细胞,但成人胰腺来源的干细胞增殖潜能较差.实验旨在分离并鉴定胎儿胰岛样细胞团中的干细胞,为糖尿病细胞移植治疗寻找可用的种子细胞.方法:实验于2006-10/2007-07在解放军军事医学科学院输血研究所干细胞与再生医学研究室完成.①对象:所用胰腺标本取自流产胎儿,胎龄14～20周,由解放军总医院妇产科提供,胎儿组织的使用得到孕妇本人的知情同意,实验经医院医学伦理委员会批准.②实验方法:无菌条件下取出胎儿胰腺,37 ℃下用0.5 g/L的V型胶原酶进行消化,分离得到胎儿胰岛样细胞团,悬浮培养,加入含体积分数为0.1胎牛血清、1 mmol/L丙酮酸钠、1 mmol/L谷氨酰胺、71.5 μmol/L β-巯基乙醇、100 U/mL青霉素和100 mg/L链霉素的RPMI1640培养基,每日转皿除去贴壁细胞,72 h后挑选出悬浮生长的胰岛样细胞团予以贴壁培养,待长成上皮样单层细胞克隆时传代.③实验评估:将悬浮培养的胰岛样细胞团行双硫腙染色.另将少部分胰岛样细胞团及第4代细胞种植于24,96孔板中,采用免疫荧光染色检测细胞表面分子标志物增殖细胞核抗原、胰十二指肠同源盒基因1、Nestin、角蛋白19、波形蛋白、胰岛素、胰高血糖素、CD29的表达情况.MTT法分析第6代细胞的生长曲线.结果:①悬浮及贴壁培养的胰岛形态:刚分离出的胰岛呈簇状,边缘不规整,细胞排列较疏松.贴壁后胰岛样细胞团由簇状逐渐展开形成上皮样单层细胞克隆.传代后细胞形态发生改变,呈梭形或分支样,增殖较快.②悬浮培养的胰岛双硫腙染色检测:分离得到的胎儿胰岛样细胞团双硫腙染色呈阳性表达.③细胞表面标志免疫荧光染色检测:贴壁的第1代细胞大部分呈增殖细胞核抗原、胰十二指肠同源盒基因1、Nestin、波形蛋白阳性,极少数细胞呈胰岛素、胰高血糖素阳性,而角蛋白19为阴性.传代后仍呈增殖细胞核抗原、胰十二指肠同源盒基因1、Nestin、波形蛋白阳性,角蛋白19弱阳性,而胰岛素、胰高血糖素为阴性,所有细胞均不表达CD29.④细胞生长曲线:传代第3天细胞进入对数生长期,第6天进入平台期,细胞生长曲线呈"S"形.结论:由胎儿胰岛成功分离并培养出具有自我更新和良好增殖能力的干细胞,稳定表达多种胰腺干细胞特征性标志,而不表达胰岛细胞标志物,提示该细胞可作为候选的胰岛干细胞用于糖尿病细胞移植治疗.
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妇女一生各期妇科内分泌功能特点
妇女一生自胎儿期开始,生殖系统的发生、生长、分化、发育乃至成熟,均在神经内分泌的支配和调节下,并与体内的其他内分泌腺有一定关联,从而赋予女性逐渐具备女性的特征、行为、性生理和生殖功能.女性生殖生理机制的任一环节发生异常和缺陷,即在女性不同生理期出现特有的病变;且这些病变不仅与妇科内分泌关系密切,与医学遗传学、分子生物学、免疫学以及内分泌代谢学也不无关系.本文仅就妇女一生各期内分泌功能特点做一简述.1 胎儿期内分泌特点1.1 胎儿甲状腺甲状腺是胎儿期早发生的腺体(约在胚胎第4周),孕10～13周时,胎儿血中有低水平的TSH和T4,孕20周后迅速上升,不论TSH或T3、T4均不能通过胎盘,故胎儿甲状腺素来源于自已的甲状腺.孕28周时达高峰,足月时T4超过母体水平[1,2].1.2 胎儿肾上腺胎儿期另一具有活性的器官是肾上腺.孕7周时,胎儿肾上腺皮质即分化为内层的胎儿带(fetal zone,占肾上腺组织的80%)和外层的定型带,并产生大量甾体激素,胎儿带于生后6个月退化消失,外带则终形成肾上腺皮质.1.3 胎儿胰腺孕12周时,胰腺自十二指肠内胚叶向外生出,并通过β细胞分泌胰岛素(Ins),成为调节胎儿生长的主要内分泌.正常情况下,胎儿Ins对高胰岛素血并不敏感,但如糖尿病母亲的反复持续地高血糖刺激,则胎儿胰腺β细胞增生,分泌大量Ins,故糖尿病母亲常分娩巨大儿,新生儿产后出现高胰岛素血[1].1.4 胎儿下丘脑-垂体孕10周时胎儿下丘脑方出现GnRH,随即出现(约孕10～12周)FSH和LH的分泌,开始建立初的胎儿下丘脑-垂体单元(H-P)的活动,表明二者之间存在功能上的联系,由于孕期持续存在的高浓度雌激素的反馈抑制,使H-P持续处于抑制状态.研究发现女性胎儿FSH和LH水平均高于男性,胎儿期出现的卵子峰和卵泡闭锁的发生均受胎儿GnH的调控.胎儿期所产生的促性腺激素均由垂体前叶合成.此类蛋白激素在整个胚胎期对胎儿生长和代谢的明确作用尚不十分清楚.
