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葛根素对成骨细胞增殖及骨形态发生蛋白的影响
目的:探讨葛根素对成骨细胞增殖及骨形态发生蛋白的影响.方法:采用血清药理学方法制备葛根素含药血清,分为葛根素组、阳性对照组和阴性对照组.从SD大鼠乳鼠颅骨获取成骨细胞,分别用含药血清培养分离得到的成骨细胞.采用CCK-8检测成骨细胞增殖、酶联免疫吸附试验检测骨形态发生蛋白2(BMP-2)的表达;采用微量酶标法检测碱性磷酸酶的活性.结果药物作用24、48和72 h后,葛根素组D值显著高于阴性对照组(P＜0.05),且显著低于阳性对照组(P＜0.05).随着时间的增加,葛根素组和阳性对照组D值在药物作用48 h达到高,至72 h后有下降趋势.药物作用3d和7d后,葛根素组BMP-2表达水平均显著高于阴性对照组(P＜0.05),且显著低于阳性对照组(P＜0.05).药物作用3d和7d后,葛根素组BMP-2表达水平均显著高于阴性对照组(P＜0.05),且显著低于阳性对照组(P＜0.05).药物作用3d和7d后,葛根素组碱性磷酸酶活性均显著高于阴性对照组(P＜0.05),且显著低于阳性对照组(P＜0.05).结论葛根素可能通过诱导BMP-2表达促进增殖,活化碱性磷酸酶活性促进生物矿化.
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桃仁、木香、黄芪分别与红花配伍对大鼠早期桡骨骨折愈合过程中BMP-2表达的影响
目的:研究桃仁、木香、黄芪分别与红花配伍对实验性SD大鼠早期桡骨骨折愈合过程中骨痂厚度及BMP-2表达的影响,探讨骨折三期辨证的治疗方法.方法:756只SD大鼠造模后随机分为模型组、桃仁红花组、木香红花组、黄芪红花组4组,每组各64只,每组再随机平均分为4个小组,分别作为骨折后第3、7、10、14d组,每小组16只.于造模后第3、7、10、14d,处死1小组大鼠.取材进行常规HE染色观察骨痂厚度、BMP-2-DAB显色计数观察BMP-2阳性细胞数.结果:造模后第3d,各给药组与模型组比较,标本BMP-2阳性细胞数及骨痂厚度差异无统计学意义;造模后第7、10、14d,各给药组与模型组比较,标本BMP-2阳性细胞数及骨痂厚度差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),桃仁红花组、黄芪红花组与木香红花组比较,标本BMP-2阳性细胞数及骨痂厚度差异有统计学意义(P<0.05).结论:木香与红花配伍能显著提高SD大鼠早期桡骨骨折断端局部BMP-2的表达水平,增加骨痂厚度,就促进SD大鼠骨折愈合过程中BMP-2表达作用而言,理气活血法可能是四肢闭合骨折早期的较佳治法.
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骨形态发生蛋白2诱导P19细胞体外向心肌样细胞分化
目的 探讨骨形态发生蛋白2(BMP-2)诱导P19细胞形成细胞聚集体并向心肌细胞分化的作用.方法 将P19细胞接种于铺有0.5%软琼脂的培养皿中,BMP-2诱导悬浮培养4d形成细胞聚集体,将细胞聚集体用生长培养基黏附培养至19d.相差显微镜观察细胞形态学变化,应用免疫细胞化学、激光扫描共焦显微镜技术检测α-横纹肌肌动蛋白(α-sarcomeric actin)和心肌特异性肌钙蛋白T(C-TnT)的表达,透射电镜观察分化细胞的超微结构.结果 经BMP-2诱导悬浮培养24h后即可见多个悬浮的细胞团形成,至第4天形成细胞聚集体/类胚体(Ebs).将Ebs再用生长培养基黏附培养后,可见位于Ebs中央的细胞密集、颜色较深,为Ebs的内核.Ebs贴壁生长后 8h,细胞由Ebs边缘逐渐爬出,在周边形成单层的生长晕,中央细胞多层排列,增殖速度较快,细胞体积较小,具有高核质比,为未分化细胞.培养至11d后,细胞生长晕中一些细胞变形,胞体伸长,体积增大,呈放射状排列.培养至第19天,Ebs边缘生长晕中变形的细胞表达α-横放肌肌动蛋白和c-TnT蛋白.免疫荧光双标染色显示α-横纹肌肌动蛋白和C-TnT蛋白均定位于细胞质并且呈共表达.透射电镜下观察到,分化细胞呈杆状,细胞核呈卵圆形,位于细胞中央,细胞器丰富,并可见到平行排列的肌丝.结论 BMP-2暴露结合悬浮培养可以诱导P19细胞向心肌样细胞分化.
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转化生长因子β1与骨形态发生蛋白2联合修复膝关节软骨损伤
目的 通过探讨转化生长因子β1(TGF-β1)和骨形态发生蛋白2(BMP-2)联合使用对兔膝关节全层关节软骨的修复作用,为关节软骨损伤的治疗提供参考依据.方法 取8只6月龄健康家兔,随机分成两组,每组4只.在无菌条件下,于兔双侧膝关节股骨内外侧髁关节负重面制备直径3mm、深2mm全层关节软骨缺损,用胶原海绵填充或将胶原海绵吸附TGF-β1和BMP-2填充,缝合创口后分笼饲养.两组分别接受如下治疗:C组家兔单用胶原海绵填充;T组家兔用胶原海绵吸附1μg TGF-β1与4μg BMP-2填充.于术后第2、4、8、12周时分批处死2只(4膝)进行取材,通过大体观察、光镜组织学检查,对其修复效果进行比较分析.并将第8、12周取材标本进行透射电镜观察,从超微结构上对比其修复效果.结果 大体观察显示,第12周,C组缺损区胶原海绵完全吸收,但组织修复仍不完全,T组缺损区组织修复较好,与正常软骨表面界限模糊.光镜组织学观察显示,第12周,C组缺损区表面仍不平整,成纤维细胞趋于软骨细胞表面,T组可见较多新生的同源细胞群,细胞排列规则,软骨膜基本修复.透射电镜下可见,第12周,T组大量增殖的软骨细胞聚集在一起,胞核呈椭圆形,细胞器更为发达,细胞外胶原纤维粗大,分布均匀,排列规则,C组主要的表现为纤维细胞特征.结论 1μg TGF-β1与4μg BMP-2联合使用能有效促进关节软骨缺损的修复; 胶原海绵可以作为TGF-β1与BMP-2的有效载体来修复关节软骨损伤.
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Bio-Oss骨粉复合BMP-2及VEGF修复大鼠胫骨缺损的实验研究
目的：探讨Bio-Oss骨粉复合骨形态发生蛋白2（BMP-2）和血管内皮生长因子（VEGF）修复骨缺损的成骨效果。方法选取SPF级SD大鼠54只，随机分为三组：单纯骨粉组、骨粉/BMP组、骨粉/BMP/VEGF组，每组18只。麻醉后在大鼠左侧胫骨前部、胫骨结节下1 cm处磨除5 mm长的骨块缺损（包括髓腔），余留后侧1/3骨皮质和腓骨起固定和支撑作用。按分组分别植入Bio-Oss骨粉、Bio-Oss骨粉复合BMP-2、Bio-Oss骨粉复合BMP-2/VEGF。术后2、4、8周每组各取6只大鼠行X线检查、HE染色、CD31免疫组化。结果 X线检查、HE染色显示术后2周时各组新骨形成极少，4、8周时骨粉/BMP/VEGF组新骨形成多，骨粉/BMP组次之，单纯骨粉组少。术后2、4周时，骨粉/BMP/VEGF组的CD31阳性细胞数目多，单纯骨粉组少，骨粉/BMP组居中，三组间比较差异具有统计学意义（ P ﹤0.01）。术后8周单纯骨粉组CD31阳性表达较前增多，但骨粉/BMP组、骨粉/BMP/VEGF组的CD31阳性表达较4周时有所下降。结论 Bio-Oss骨粉复合BMP-2和VEGF修复骨缺损的成骨效果理想，明显优于单纯应用Bio-Oss骨粉及只复合BMP-2的效果。
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检测慢性肝病患者血清BMP2和BMP4的临床价值
目的 研究慢性肝病患者血清中的骨形态发生蛋白2(BMP2)和骨形态发生蛋白4(BMP4)的表达,了解两者在诊断和鉴别诊断原发性肝癌(PHC)中的临床价值.方法 按照病理学诊断或者临床资料诊断,对住院的60例患者进行分组,PHC组25例,肝硬化组17例,肝炎组18例.9例健康对照组采自同期健康体检者.分别检测各组患者及正常者血清甲胎蛋白(AFP)、BMP2和BMP4.结果 ①PHC组患者血清中的BMP2较健康对照组、肝炎组、肝硬化组低,差异都有统计学意义(P<0.05).②PHC组患者血清BMP4较其余3组组低,差异都有统计学意义(P<0.01).③BMP2诊断PHC的敏感性为92.00%,特异性为100%,准确率是97.10%;BMP4诊断PHC的敏感性为80.00%,特异性为100%,准确率为92.75%.结论 BMP2、BMP4对PHC的诊断和鉴别诊断具有一定的价值.
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BMP2在原发性肝癌患者血清中的表达
目的:探讨血清骨形态发生蛋白2(BMP2)对原发性肝癌(PHC)的诊断价值.方法:对70例慢性肝病患者及17例正常对照者血清进行检测,并按临床诊断或病理诊断分组,其中慢性病毒性肝炎20例,肝炎后肝硬化20例,PHC 30例.分别用酶联免疫法检测血清BMP2,用放射免疫法测定血清甲胎蛋白(AFP),结果:肝癌组患者血清BMP2较正常对照组、肝炎组、肝硬化组降低,且差异均有统计学意义(P<0.05);BMP2诊断PHC的敏感性是90%,特异性是100%,准确率是96.55%;BMP2诊断PHC的敏感性高于AFP(x2=22.78,P=0.001).结论:血清BMP2对PHC的诊断具有一定的价值.
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骨形态发生蛋白2在腰椎融合术中应用的效果与并发症
Objective To summarize the effects and complications of bone morphogenetic protein-2 ( BMP-2 ) used in lumbar fusion surgery.Methods CNKI, Embase and Pubmed databases were searched for articles on BMP-2 application by a computer with key words "BMP-2", "lumbar fusion", "complications" and "bone healing". Eligible articles published during the recent 10 years were enrolled.Results Bone morphogenetic protein could promote the rate of bone fusion and shorten integration time, and there were potential applications in the field to promote bone fusion, but studies had shown that using BMP-2 in lumbar fusion process can also lead to adverse results and complications.Conclusions Although BMP-2 can substitute for autologous bone and allograft transplantation, reduce the damage and immune rejection in other parts of the body, but the surgical method and its quantity of application and postoperative adverse outcomes require further studies .
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骨折修复过程中骨形态发生蛋白2对趋化因子12表达的调控及其意义
目的 探讨骨形态发生蛋白 2(bone morphogenetic protein,BMP2)对趋化因子 12(chemokine C-X-C motif-ligand-12,CXCL12)表达调节及其在骨折修复过程中的意义.方法 构建 BMP2 敲除鼠 BMP2cKO/+和 BMP2cKO/cKO.免疫组化分析正常小鼠、BMP2cKO/+小鼠及 BMP2cKO/cKO小鼠胫骨骨折模型中骨内膜细胞 CXCL12的表达及其随时间的变化.实时定量 PCR(RT-qPCR)比较对照组与 BMP2cKO/+小鼠骨内膜细胞及其分化细胞CXCL12、骨钙蛋白、α-SMA 表达差异.结果 BMP2cKO/+和 BMP2cKO/cKO小鼠 BMP2 显著低于对照组.小鼠骨折修复过程中骨内膜细胞和成骨细胞 CXCL12 表达明显升高,且表达 CXCL12 细胞先增多再减少;BMP2cKO/+小鼠骨折修复过程中表达 CXCL12 的骨内膜细胞和成骨细胞逐渐增加.BMP2cKO/+小鼠分离的骨内膜细胞CXCL12 表达显著高于正常小鼠.在诱导分化的小鼠骨内膜细胞中添加 rhBMP2,CXCL12 的表达减少,骨钙蛋白和 α-SMA 表达显著增加.诱导分化的 BMP2cKO/cKO骨内膜细胞 CXCL12 表达显著高于正常小鼠,而骨钙蛋白的表达则显著降低.CXCL12 受体拮抗剂 AMD3100 处理诱导分化的 BMP2cKO/cKO骨内膜细胞,骨钙蛋白和α-SMA 表达显著增加.结论 骨折修复过程中,BMP2 下调 CXCL12 的表达有助于成骨细胞的分化从而促进骨折的修复.
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Ad－BMP－2／GFP 转染兔骨髓间充质干细胞前后生物学特性的研究
目的：对Ad－BMP－2／GFP转染兔骨髓间充质干细胞（ BMSCs ）前后的生物学特性进行观察。方法采用密度梯度离心结合贴壁培养法分离获取第10代兔BMSCs，应用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD44、CD45、CD29的表达，用携带BMP2和GFP基因的腺病毒转染细胞。分别通过倒置荧光显微镜下观察转染前后细胞形态改变，MTT 法分析转染前后细胞增殖的情况，体外Ⅰ型胶原免疫组化染色和钙结节茜素红染色以观察转染前后细胞的成骨分化情况，Western Blot 检测转染前后细胞内目的蛋白表达。结果密度梯度离心结合贴壁培养法能获取高纯度第10代兔BMSCs ，流式细胞仪检测显示CD44、CD29阳性，CD45阴性。 Ad－BMP－2／GFP转染兔BMSCs后在荧光显微镜下观察到绿色荧光，细胞形态向成骨方向分化，在短时间内能促进兔BMSCs 的增殖（P＜0．05），Ⅰ型胶原免疫组化染色、茜素红染色均呈阳性，Western Blot显示细胞内稳定表达BMP－2目的蛋白。结论 Ad－BMP－2／GFP能成功转染兔骨髓间充质干细胞并能改变其生物学特性。
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Bcl2促进UMR-106细胞BMP-2、OPG表达及补肾健脾活血方对其影响
目的 基于构建Bcl2沉默和过表达腺病毒观察Bcl2对成骨细胞骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)蛋白的调节作用及补肾健脾活血方对其影响.方法 将培养的UMR-106细胞分为空载腺病毒组(沉默Bcl2空载腺病毒NC-bcl2,过表达Bcl2空载腺病毒WT-bcl2)、Bcl2腺病毒组(沉默Bcl2腺病毒sh-bcl2,过表达Bcl2腺病毒Ad-bcl2),空载腺病毒+空白血清组(NC-bcl2,WT-bcl2)、空载腺病毒+补肾健脾活血方含药血清组(NC-bcl2+ME,WT-bcl2+ ME)、腺病毒+空白血清组(sh-bcl2,Ad-bcl2)、腺病毒+补肾健脾活血方血清组(sh-bcl2+ ME,Ad-bcl2+ ME),用RT-qPCR检测Bcl2、OPG mRNA的变化、应用免疫印迹(Western Blot)检测Bcl2、OPG、BMP-2的变化.结果 ①荧光倒置显微镜观察包装腺病毒转染UMR-106细胞;②在正常培养基中,与NC-bcl2比较,sh-bcl2可以降低Bcl2、OPG、BMP-2蛋白的表达(P均＜0.05),与WT-bcl2比较,Ad-bcl2可以提高Bcl2、OPG、BMP-2蛋白的表达(P均＜0.05);③与NC-bcl2比较,RT-qPCR显示sh-bcl2可以降低Bcl2 mRNA的表达,但OPG mRNA无统计学意义;④在大鼠血清干预中,与空载腺病毒比较,补肾健脾活血方含药血清均可以增加BMP-2、OPG蛋白表达(P均＜0.05);在sh-bcl2干预的细胞中,补肾健脾活血方含药血清提高BMP-2、OPG蛋白的表达(P均＜0.05);在Ad-bcl2干预的细胞中,中药干预后,BMP-2、OPG未见明显变化.结论 Bcl2可以影响BMP-2、OPG蛋白的表达,补肾健脾活血方可能通过作用于Bcl2影响成骨细胞成骨相关蛋白的表达.
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年龄因素对大鼠骨髓间充质干细胞数量及组织中BMP2含量的影响
目的观察增龄对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stromal cells,MSCs)数量及组织中骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic proteins 2,BMP2)含量的影响,分析MSCs数量和BMP2含量变化与老年人骨量丢失及老年性骨质疏松症间的关系.方法取3种年龄层次的大鼠(1月龄、9月龄、24月龄),抽取骨髓进行体外培养,计算纤维细胞集落形成单位(colony forming units dfibroblastic,CFU-F)的数量;应用ELISA技术定量检测大鼠外周血以及股骨皮质骨中BMP2的含量.结果 MSCs数量随增龄显著减少.1月龄组皮质骨中以及血清中BMP2含量均明显高于其它两组,9月龄与24月龄大鼠间没有显著差异.结论骨髓中MSCs的数量随增龄而减少.外周血和皮质骨中BMP2的含量随增龄而减少.骨髓MSCs数量的减少及组织BMP2含量的降低可能是老年骨量丢失与老年性骨质疏松发病的重要原因.
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透明质酸水凝胶包封对携带BMP-2基因的腺病毒转染骨髓间充质干细胞增殖活性及其表达的影响
目的:探讨携带骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)基因的腺病毒转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后应用透明质酸水凝胶(hyaluronic acid hydrogel,HAH)包封对BMSCs增殖能力及其表达目标蛋白BMP-2的影响.方法:体外分离、提取、鉴定BMSCs,并将提前构建好的Ad-BMP-2转染BMSCs并使用HAH进行包封,激光共聚焦显微镜下观察Ad-BMP-2转染的BMSCs在HAH包封下的三维形态.实验分为4组(各组培养条件无差异):A组(未转染BMP-2的BMSCs);B组(HAH+未转染BMP-2的BMSCs);C组(转染BMP-2的BMSCs);D组(HAH+转染BMP-2的BMSCs).分别一周内不同时相点(1d、2d、3 d……7d)使用CCK-8法检测各组OD值来评价细胞增殖活性;ELISA法检测各组BMP-2的量(pg/ml)来评价目标蛋白的表达状况.结果:激光共聚焦显微镜三维重建可观察到BMSCs可在HAH中任意平面铺展,有充足的生长空间.BMSCs的增殖活性检测显示,随着培养时间延长,细胞增殖活性逐渐增强,A组、C组4d后的OD值较1d时明显增大(P＜0.05);B组和D组5d后的OD值较1d时明显增大(P＜0.05);至7d时,A组OD值为1.283±0.061,B组为1.844±0.075;C组为1.570±0.099;D组为1.976±0.142,包封HAH的B、D组OD值均优于没有包封HAH的A、C组(P＜0.05).BMP-2的表达在A、B组较弱,不同时间点间无显著性差异(P＞0.05);C、D组的BMP-2表达各时间点均明显高于A、B组(P＜0.05);从4d时起,C、D两组的BMP-2表达显著增加(与1d时比较P＜0.05),且D组明显优于C组,差异有显著性(P＜0.05).结论:三维环境下(即包封HAH后),Ad-BMP-2转染的BMSCs不仅有较强的增殖活性;而且对BMP-2的表达具有一定的促进作用.
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大鼠脊髓损伤后骨形态发生蛋白2表达变化的规律及意义
目的:观察大鼠脊髓损伤后损伤脊髓组织中骨形态发生蛋白2(BMF2)表达变化的时间及空间分布规律,探讨抑制BMP2增加的佳时间及部位.方法:成年SD大鼠40只,随机分为5组:假手术组,损伤后ld组、3d组、7d组、14d组,每组8只.将大鼠麻醉后以T10棘突为中心,打开椎板,暴露脊髓,各损伤组使用NYU impactor 打击器制作大鼠脊髓损伤模型,假手术组不做打击处理.分别于造模前后对各组大鼠进行运动功能BBB评分,于预定时间点处死动物,取损伤段(假手术组取相应节段)脊髓组织行HE染色和免疫组化染色,观察脊髓组织学改变并进行阳性细胞计数,采用方差分析进行组间比较.结果:造模前各组大鼠的BBB评分均为21分;造模后假手术组大鼠BBB评分高于各损伤组,且差异有显著性(P<0.01),各损伤组之间两两比较评分均无显著性差异(P>0.05).HE染色假手术组大鼠脊髓组织结构清晰,层次规整,条理性强,灰质中可见较多的神经元,白质中可见大量纤维性星形胶质细胞;损伤组大鼠损伤处脊髓组织结构紊乱,层次感消失,可见弥散的血细胞,早期增多较晚期明显,脊髓灰质与白质中都可见因大量组织细胞溶解而遗留的组织空洞.各组脊髓灰、白质中均有BMP2表达,假手术组灰质中平均阳性细胞数为1.53±0.38个/HP,白质中为0.77±0.14个/HP;损伤后1d组灰质中为13.70±4.81个/HP,白质中为7.23±3.14个/HP;损伤后3d组灰质中为9.37±3.61个/HP.白质中为5.63±2.23个/HP;损伤后7d组灰质中为6.17±1.81个/HP.白质中为4.17±1.24个/HP;损伤后14d组灰质中为4.36±1.60个/HP,白质中为1.87+1.13个/HP;损伤各组BMP2平均阳性细胞数与假手术组相比较均有明显差异(P<0.01),各组灰质区BMP2平均阳性细胞数的增加均较自质区更为显著(P<0.01).结论:脊髓损伤后损伤脊髓组织中BMP2的表达增加,损伤后1d高,主要集中在损伤区灰质区.针对BMP2进行特异性抑制好在损伤后第一天的脊髓灰质区实施.
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不同时间基因转染对兔下颌骨牵引区BMP-2表达的影响
目的 探讨于不同时间体内转染重组质粒人形态蛋白-2和人血管内皮生长因子-165真核细胞共表达载体(pIRES-hBMP2-VEGF165)对兔下颌骨牵引区骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)表达的影响.方法 48只新西兰大白兔随机分为A、B、C、D4组,均于双侧下颌骨截骨后置入内置式下颌骨牵引器,经过3d潜伏期后开始牵引,牵引速度0.8 mm/d,连续牵引10d进入固定期.A、B、C组动物分别于术后立即、术后3和14d,在双侧牵引区注射2μg(0.1 μg/μl)重组质粒pIRES-hVEGF165-hBMP2.D组不进行基因转染,4组动物均施加电穿孔刺激.各组动物分别于注射后固定l、2、4周处死,取材行免疫组化检测新生骨中BMP-2的表达情况,并应用CMIAS系列多功能真彩色病理图像分析系统定量分析.结果 BMP-2在牵引区肉芽组织中的炎性细胞如单核细胞、成纤维细胞,以及少量沿牵张方向排列的新生幼稚骨小梁表面的成骨细胞、骨细胞和骨周围结缔组织中表达.固定1和2周,B组阳性表达蛋白平均吸光度(MA)值和积分吸光度(IA)值,B组(0.58 ±0.03和0.34±0.02),与A组(0.42±0.02和0.31 ±0.01)、C组(0.32±0.01和0.30±0.01)、D组(0.27±0.01和0.23 ±0.02)比较,差异有统计学意义(P＜0.05);A组(0.42±0.02和0.31 ±0.01)、C组(0.32±0.01和0.30±0.01)与D组(0.27 ±0.01和0.23±0.02)比较,差异也有统计学意义(P＜0.05);固定4周时A、B、C、D各组BMP-2表达均减弱,组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在牵引开始时进行基因转染更能促进牵引过程中BMP-2的表达,从而刺激牵引区骨基质合成和诱导成纤维细胞、成骨细胞、血管内皮细胞、骨细胞等的增殖分化,更能有效地促进骨的生长和修复,提示牵引开始时转染可能是基因转染的佳时间.
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钛表面聚合物静电作用固定骨形态发生蛋白2的实验研究
目的 探索以纳米金颗粒结合静电吸附方法 及化学反应将骨形态发生蛋白2(BMP-2)固定于钛(Ti)种植体表面的技术,为钛表面改性提供新的生物处理技术.方法利用化学方法合成负电聚合物BPP[BA-Pasp(MEA-DDP)-Pasp(DAP-CA)].直径10 mm、厚度0.3 mm的钛箔随机分为3组,分别进行处理:(1)纯Ti抛光组;(2)Ti/BPP组,磁控溅射法在纯钛表面喷涂纳米金颗粒,并连接BPP聚合物;(3)Ti/BPP/BMP-2组,在Ti/BPP组基础上通过静电吸附连接BMP-2蛋白.扫描电镜(SEM)观察各组表面形貌,检测表面亲水性、粗糙度和表面电位.荧光标记观察BMP-2连接及分布情况,并比较异硫氰酸荧光素(FITC)-BMP-2与Ti/BPP连接前后荧光强度的变化.Elisa法测试Ti及Ti/BPP表面BMP-2的整合率.单因素方差分析及独立样本t检验对数据进行统计分析,Bonferroni法进行两两比较.结果 荧光标记和SEM结果均显示BMP-2可有效连接在纯钛表面,FITC-BMP-2与Ti/BPP连接前荧光强度为124.000±0.968,连接后荧光强度为84.060±0.495,差异具有统计学意义(F=37.727,P<0.001).以Ti组电势为0时,Ti/BPP组表面电势为-31.2 mV,连接BMP-2蛋白后表面电势明显上升至+9.3 mV.Ti/BPP表面连接BMP-2整合率[(14.883±0.916)%]高于纯Ti抛光表面[(5.990±0.306)%;F=6.000,P<0.001].Ti/BPP组与Ti/BPP/BMP-2组表面亲水性明显高于Ti组,而三组表面粗糙度无明显差异.结论 联合运用纳米金颗粒及负电聚合物可有效将BMP-2固定于纯钛表面.
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丝蛋白复合骨形态发生蛋白2在大鼠炎性牙髓愈合中的作用
目的：探讨将丝蛋白复合骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic protein 2， BMP-2）作为盖髓剂，治疗由脂多糖（lipopolysaccharide， LPS）引起的大鼠炎性牙髓的效果。方法：30只雄性Wistar大鼠，随机分为5组：（1）未手术正常对照组；（2）空白对照组（无盖髓剂）；（3）氢氧化钙组；（4）静电纺丝丝蛋白组（简称丝蛋白组）；（5）静电纺丝丝蛋白复合BMP-2组（简称丝蛋白复合BMP-2组）。将第2～5组双侧上颌第一磨牙开髓并放置LPS，不使用盖髓剂或使用相应盖髓剂，然后封闭开髓孔。所有组于术后第3、7、14天制作石蜡切片，行HE染色及CD14免疫组织化学染色，采用image-pro plus （ IPP）软件测量免疫组织化学染色的光密度（ D）值。结果：HE染色结果显示丝蛋白复合BMP-2组在各盖髓组中，术后7及14 d炎性细胞分级低，其次是氢氧化钙组及丝蛋白组，空白对照组高；修复性牙本质形成分级的高低顺序则相反。 CD14免疫组织化学染色结果显示术后3及7 d，使用盖髓剂的3个组之间D值差异无统计学意义，但均显著低于空白对照组；14 d时丝蛋白复合BMP-2组D值（0．145±0．011）显著低于空白对照（0．287±0．019）、氢氧化钙（0．170±0．017）、丝蛋白（0．175±0．018）3个组（P＜0．05）。结论：丝蛋白复合BMP-2应用于炎性牙髓的盖髓，能减轻炎症，诱导修复性牙本质的形成，提高对炎性牙髓的治疗效果。
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骨形态发生蛋白2缓释载体的研究进展
自体骨移植一直是骨修复的"金标准",但仍存在一些问题.异体骨移植同样存在着骨愈合缓慢及排斥反应等问题.随着组织工程学的发展,应用骨组织工程方法来修复骨缺损成为研究热点.骨组织工程主要包括支架材料、种子细胞、生长因子三个方面.骨形态发生蛋白2是目前强的促骨生长因子,其在体内半衰期很短,必须依靠缓释载体才能发挥其较长效的促骨生长作用.
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骨形态发生蛋白2基因治疗骨缺损研究进展
因创伤、肿瘤切除等原因造成的骨缺损的治疗一直是临床医师面临的一大难题.自体骨移植或异体骨移植治疗骨缺损仍然是临床上治疗骨缺损的金标准.目前应用骨形态发生蛋白2基因结合骨组织工程的方法治疗修复骨缺损是新的研究热点.骨形态发生蛋白2基因结合人工合成支架、生物可降解支架和自体组织移植是新的研究解决方法,并取得一定的骨缺损修复效果.
