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食品微生物检测中快速检测法的应用分析
沙门氏菌是肠杆菌科中的主要菌种,是革兰氏阴性菌,它主要分布于动物的肠道中,可以中毒致病.一般的动物性食品尤其是肉类制品可以引起人或动物的沙门氏菌食物中毒.一、沙门氏菌胶体金的染色沙门氏菌胶体金染色试验在试验中,选择大肠杆菌与沙门氏菌两种菌种,并取氯金酸、营养琼脂、沙门氏菌抗体、氯化钠、LB培养基等17种试验试剂备用.
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MTT在测定食品中细菌总数的应用研究
食品中细菌总数是反映食品卫生的基本指标,因此,在原材料、加工、保藏、运输、消费等各个环节进行卫生质量控制时经常需要检测,目前除标准检测方法外还有改进的传统方法,在营养琼脂中添加TTC(氯化三苯四氮唑)就是应用广泛的一种,尽管已证明该方法与标准方法检测结果存在一定差异[1],但细菌在该培养基上可生长成红色菌落,易于识别,许多实验室一直在使用.作者通过实验,以3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑盐(简称MTT)替代TTC检测了50份各类食品,与标准方法进行了对比,分析了存在差异的原因,MTT完全可以用于食品中细菌计数,现报告如下.
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从纯净水中检出铜绿假单胞菌
山东省卫生防疫站在常规检验过程中,发现某厂纯净水在菌落计数的营养琼脂平板上出现未曾见过的异常菌落,该菌落呈雪片状或花朵状,呈5~8个边不等的多边形,5 mm~7 mm大小,中心圆形,有与边数相等的轮状辐射线直达边缘中心,表面光滑湿润,灰色带有浅绿色荧光,闻之有僵蚕味,革兰氏染色为阴性短小杆菌,菌体中心染色稍浅.
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尖峰喷雾消毒剂和消毒湿巾消毒效果检测
尖峰喷雾消毒剂主要成分为氯羟二苯醚,含量为500 mg/L.尖峰消毒湿巾为浸有浓度500 mg/L氯羟二苯醚溶液的棉毛巾.在一16 m3办公室与一14 m3居室内,撤离人员,关闭门窗,按0.25 ml/m3用量喷雾该消毒剂原液(对照为蒸馏水)作用30 min.用含2.0%吐温80、0.07%卵磷脂与0.4%硫代硫酸钠(中和剂)的营养琼脂平板,于消毒前、后,分别在室内四角与中央离地面1 m高处沉降采样10 min.置37℃培养24 h,计数菌落与计算杀灭率.经5次试验平均,在室温为23.5~26.0℃,相对湿度为70%~75%的条件下,消毒前办公室与居室空气细菌总数分别为218cfu/m3与1028 cfu/m3,30 min后自然衰亡率分别为64.29%与58.75%,喷雾消毒杀灭率分别为86.12%与84.07%.
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PYA与营养琼脂培养基细菌计数比较
目的:验证细菌计数培养基(PYA)在微生物限度检查中的实用价值.方法:按<中国药典>2000年版微生物限度检查法细菌计数的规定,比较PYA和营养琼脂培养基在细菌数检查中的差异.结果:通过对丸剂、片剂、颗粒剂和胶囊四种剂型168批样品PYA和营养琼脂细菌数检查结果表明,有7批样品(4.2%)PYA有细菌生长,而营养琼脂无细菌生长,未发现相反的现象;PYA细菌计数高于营养琼脂21%以上的样品数为32批,远多于营养琼脂高于PYA的21批;此外,PYA比营养琼脂细菌数平均增加了11.5%.结论:PYA在药品细菌教检查中优于营养琼脂,可替代营养琼脂用于药品微生物限度检查.
关键词: 细菌计数培养基(PYA) 营养琼脂 -
洁世牌消毒液的皮肤杀菌试验
目的:为了更有效地控制医院感染的发生,严格把好消毒液的采购、检验、合理应用各项质量关.方法:我院在采购各种消毒药物之前,对其进行各种检测.近来我们对洁世牌消毒液的皮肤灭菌型进行的临床皮肤杀菌实验.洁世牌消毒液皮肤灭菌型属淡黄色透明液体,主要成份为有效氯,塑料桶装(5000ml/桶),检测批号为991211.中和剂采用0.5%Na2S2O3+0.03mol/L pH7.2 PBS,采样液使用无菌生理盐水+中和剂.试验分组采取随机选择门诊和住院若干科室的医生、护士、卫生员、患者共60人;受试者左侧手背或前臂皮肤为试验(浸泡消毒)部位,右侧相应部位作对照,每个部位各20人.参照厂家使用说明,用洁世牌皮肤灭菌型(JSP-2)消毒液,浸泡消毒10分钟,待干燥时(肉眼观无湿迹)采样.采样方法:用无菌棉签蘸取采样液在受试及对照部位均匀涂抹采样,面积16cm2,采样后棉签置于盛有5ml采样液的试管内,振荡80次.然后,取振荡液0.5ml接种平皿(2皿/样),倾注营养琼脂,37℃培养48h,计数菌落数.结果:对送检的洁世牌皮肤灭菌型(JSP-2)消毒液,对皮肤表面杂菌的杀灭率平均为99.625%.结论:在试验过程中,并未发现试验者皮肤有刺激感.
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紫外线对多药耐药鲍曼不动杆菌杀灭效果观察
目的 了解紫外线照射对多药耐药鲍曼不动杆菌的杀灭效果.方法 将“干燥”环境下和接种于营养琼脂培养基上的多药耐药鲍曼不动杆菌,分别置于紫外线灯下0.6m、1 m、2m,照射不同时间,观察杀灭效果.结果 在“干燥”环境条件下多药耐药鲍曼不动杆菌于紫外线灯下0.6m照射8 min,于紫外线灯下1 m、2 m照射120 min和30 min后,倾注营养琼脂,35℃培养48 h均无菌生长;细菌直接接种于营养琼脂培养基上,紫外线灯下0.6m照射49 min无菌生长;紫外线灯下1 m、2m照射30 min和120 min均有菌生长.结论 “干燥”环境下,常规的紫外线消毒方法可杀灭多药耐药鲍曼不动杆菌;高湿环境下,常规紫外线消毒方法不能完全杀灭多药耐药鲍曼不动杆菌,即使延长照射时间也不能达到理想的杀菌效果;只有缩短照射距离、延长紫外线照射时间才可以完全杀灭细菌.
关键词: 多药耐药鲍曼不动杆菌 干燥 营养琼脂 紫外线 杀菌 -
菌落总数的检验方法
菌落总数是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等)、所得1ml(g)检样中所含菌落的总数.本方法规定的培养条件下所得结果,只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数.
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拉萨市空气细菌学调查
西藏拉萨平均海拔3 658 m,日照时间长,紫外线强度高,空气稀薄且干燥,年平均温度低而昼夜温差大,为了解这些环境因素对空气细菌的影响程度,笔者对空气中细菌在不同时间的含量进行了检测分析.调查点为军区医院外较固定安静场所,分别在9时、13时和18时采集空气样本,用直径7cm营养琼脂平板自然沉降10 min,同时记录温度、湿度和紫外线强度.不同时间的空气样本分12次采集,每次采集3~4份,共123份.将采集的空气样本置37℃培养48 h.按<全国临床检验操作规程>和<诊断细菌学>进行鉴定.根据50000N/AT得出每立方米空气中的各种细菌含量.培养基及微量生化鉴定管购自杭州市天和微生物试剂有限公司.
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曲阜市计划生育服务站消毒质量状况调查
1998年~2002年对曲阜市的14个计划生育服务站手术室的消毒质量状况进行了调查.对使用中的碘酊、碘伏、乙醇等消毒液取1毫升加入9毫升相应中和剂的试管内,中和后检测污染细菌总数.对医护人员及物体表面用棉拭子涂抹采样,检测污染细菌总数,对手术室空气用9厘米直径普通应眼营养琼脂平板按布点方法在采样点暴露5分钟后送检培养,紫外线灯强度用标定后的强度计按标准方法测定.
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医院微机键盘细菌污染情况调查
2006年10月对我院普通临床科室部分医护工作站医护人员使用中的26台微机键盘进行了消毒前、消毒后的微生物监测.1 材料与方法1.1 采样、监测方法采样时用浸有无菌生理盐水的无菌洗脱液的棉拭子一只,在微机键盘上往返涂擦3次,并随之转动棉拭子,剪去手接触部分,将棉拭子投入装有10ml无菌生理盐水的试管内,将采样管用力振打80次,震荡洗下微生物,用无菌吸管吸取1.0毫升待检样品,接种于灭菌平皿,再加入已熔化的45℃-48℃的营养琼脂15-18ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝固置37℃温箱培养48h,记数菌落数,并分离致病菌.
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爱洁斯KJD静电灭菌型空气净化机应用效果观察
空气含菌量超标是引起各类院内感染的主要原因,如何有效解决室内空气灭菌消毒是众多医学专家十分关注的课题.我院手术室于1999年采用爱洁斯KJD-1200静电灭菌型空气净化机进行空气消毒,并与紫外线灭菌灯、三氧消毒机消毒效果进行比较,对连续手术中各时间段的空气消毒效果进行监测,现报告如下.1 材料与方法1.1 材料紫外线灭菌灯、三氧消毒机、KJD-1200静电灭菌型空气净化机、营养琼脂培养皿.1.2 方法取环境相同的手术室6间,室内面积不超过30 m2.将6间手术室随机分为3组,于消毒前、消毒后30 min、60 min、120 min、240 min在室内采用三点式放置营养琼脂培养皿,暴露10 min,样品置于37 ℃培养箱中培养72 h,观察菌落数并记录.A组:术前30 min开启KJD-1200空气净化机,手术状态下连续开机,术后2 h关机,共10 d.B组:术前采用紫外线灯灭菌照射30 min,术后紫外线灭菌灯照射2 h,连续10 d;C组:术前开启三氧消毒机30 min,停机后30 min开始手术,术后用三氧消毒机消毒2 h,连续10 d.
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甘肃省肃南西水鼠疫疫区首次从灰尾兔体内分离出鼠疫菌
1 材料与方法病原材料来源于鼠疫监测队收集的3只自毙灰尾兔.常规消毒后取样(肝、脾、骨髓)进行鼠疫细菌学检验.培养基采用上海市医学化验所试剂厂生产的营养琼脂,批号990101,加自制牛肉汤.噬菌体采用青海地方病防治研究所生产,批号2000-1.培养条件:28℃24h观察.2 结果对3只自毙灰尾兔进行鼠疫细菌学检验,28号内脏腐败,取骨髓培养,检出鼠疫菌1株.29号取肝、脾培养,从肝脏中分离出鼠疫菌1株.30号内脏腐败,取骨髓培养,未检出鼠疫菌.3 讨论与分析肃南西水属喜马拉雅旱獭鼠疫疫区,从自毙灰尾兔体内分离出鼠疫菌在该区尚属首次,结果说明今年鼠疫不但在该疫区主要宿主喜马拉雅旱獭中流行猛烈,且波及到野兔.提醒鼠疫防治人员从多方面扩大监测范围,并向群众做好宣传.
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培养基的不同储存条件对细菌检测结果的影响
营养琼脂培养基是日常工作中常用的细菌计数用培养基,按照国家标准[1],营养琼脂培养基配制后宜新鲜使用或保存于冰箱冷藏室48 h内使用,而在实际工作中较难做到.为此,我们用不同温度和时间来存放配制好的营养琼脂培养基,并观察各种存放条件对细菌检测效果的影响, 现将结果报道如下.
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冰冻保存营养琼脂的质量研究
目的:评价冰冻(-20℃)保存营养琼脂培养基的质量效果及有效期.方法:将预先制好并经灭菌后的营养琼脂培养基置于-20℃保存,在1月、3月、6月、1年、2年后取出,隔水加热浇制成平板,用金黄色葡萄球菌ATCC25923做质量控制.将预先制好并经灭菌后的营养琼脂培养基置于-20℃保存,1个月后取出,加热溶解浇制一部分平板后再冰冻2天,如此反复6次,每次均用金黄色葡萄球菌ATCC25923来鉴定其质量.结果:用金黄色葡萄球菌鉴定各期限冰冻保存的营养琼脂培养基的质量均与新鲜时一样,符合质量控制鉴定标准.用金黄色葡萄球菌鉴定反复冻溶6次以内的营养琼脂培养基的质量均与新鲜时一样,符合质量控制鉴定标准.结论:冰冻保存不影响营养琼脂培养基的质量,其有效期长达2年,且可反复冻溶6次,该保存法适用于基层医院,也适用于卫生防疫、血站等要求新鲜平板的单位,值得推广应用.
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一株干燥菌株的鉴定报告
近烟台市芝罘区卫生防疫站接上级质控菌种1株(99-01号),经过系统生化特性与生物学特性分析,鉴定为弧菌科、弧菌属、梅氏弧菌.1 材料与方法1.1 菌株来源质控干燥菌株系烟台市卫生防疫站检验科下发.1.2 培养基与试剂山东省卫生防疫站生产的半成品培养基、浙江省军区后勤部卫生防疫站检验所生产的细菌生化微量鉴定管及实验室自制培养基.1.3 菌株分离将干燥菌种经营养肉汤36℃18~24 h培育复苏并传代2次后,分离营养琼脂平板、SS平板、TCBS平板,经36℃18~24 h培养,革兰氏染色镜检,同时做氧化酶试验.
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一起霉菌引起实验室污染的原因调查
2002年7月,在一次例行的卫生微生物常规操作的检验时,发现在37℃及28℃作培养时,做菌落总数的营养琼脂平板及做霉菌计数的虎红琼脂平板上均有大面积的霉菌污染,其中包括所有对照.该霉菌经镜检、检验,属毛霉菌.
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从生乳中检出红色沙雷菌
2000年12月,我们对当地的生牛奶进行金黄色葡萄球菌的污染调查,从采集的50份样品在营养琼脂单板上发现一些样品中出现红色菌落,经鉴定为红色沙雷菌(Serratia,rubidaea).现报告如下:
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一起由副溶血弧菌和嗜水气单胞菌混合感染引起的食物中毒
2000年6月2日本市某宾馆发生一起食物中毒.首发病人出现在当天下午2时,凌晨1时发病达到高峰,次日12时结束,平均潜伏期6.5小时.中毒餐次推定为2日中餐,原因食物为糖醋熏鱼、盐水口条、肉未蒸蛋、青瓜炒草虾等.195人就餐,27人发病,发病率为13.8%.中毒症状以腹痛、腹泻、发热为主,伴有恶心、呕心,经流行病学和细菌学检测证实由副溶血弧菌和嗜水气单胞菌混合感染引起,现将结果报告如下.1 材料与方法1.1 标本来源从食物中毒现场采集到病人粪便21份,肛拭6份,剩余食物30份,共57标本.采集后,立即送实验室检测.1.2 培养基 SF、GN、SS、TCBS、EMB、营养琼脂、克氏双糖及微量生化管由中国腹泻病控制上海试剂供应研究中心、江苏兴万石培养基厂、杭州天和微生物试剂有限公司提供,其他培养基由本室参照文献方法自制,API鉴定条20NE、20E,由法国梅里埃公司提供,均在效期内使用.
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不同微生物干燥培养基的质量比对
干燥培养基因使用方便、易保存的优点而得到了推广应用.目前用于细菌培养的营养琼脂、用于霉菌与酵母菌检验的虎红培养基、供肠道致病菌分离用的弱选择性培养基伊红美蓝以及用于分离志贺菌与沙门菌的强选择性培养基SS琼脂是微生物实验室常用的培养基.为了保证检验结果的准确性,本中心实验室对这4种培养基的质量进行监控,通过比对试验比较了常用的2种品牌商品化干燥培养基的质量.