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创伤弧菌检测方法的研究进展
创伤弧菌是自然生存于河口和海洋环境中的一种可能致命的病原菌,建立灵敏、特异的检测方法对保护人类健康极为重要.本文详细描述了用于创伤弧菌检测的多种选择性培养基,并对传统生化方法、免疫学方法和DNA探针、PCR等基因检测方法进行了综述.
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幽门螺杆菌的培养与尿素酶试验的比较
采用细菌培养法和尿素酶法分别检测了102例消化道疾病患者幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)感染情况.标本经输送培养基运送、匀浆后,分别涂布于3种选择性培养基和非选择性培养基上,38℃微需氧环境(85%N2,10%CO2,5%O2)培养.标本同时采用尿素酶法进行检测.结果 表明,3种细菌培养法与尿素酶法检测阳性率接近,分别为43.1%,39.2%,43.1%和37.2%;非选择性培养基不适于H.pylori的培养检测.
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肠出血性大肠杆菌O157的实验室分离与鉴定方法
大肠杆菌O157是一种重要的食源性病原菌.对该菌进行分离鉴定,继而进行进一步分子水平的深入研究具有重要意义.本文就该菌的目前常用的实验室分离鉴定方法,如平板分离、免疫磁珠分离、聚合酶链式反应等进行了综述,并对各种分离鉴定的方法进行了比较.
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水产品中创伤弧菌检测方法建立与应用
目的 建立一种水产品中创伤弧菌检测方法,并对北京市市售水产品中创伤弧菌污染情况进行监测.方法 分别使用18株创伤弧菌菌株和水产品中常污染的背景杂菌,定量接种于检测创伤孤菌的选择性增菌液和4种选择性平板,优化出适合创伤弧菌检测的选择性培养基.采用聚合酶链式反应(PCR)法和增菌培养法分别检测样品中的创伤孤菌后进行方法对比,建立PCR和增菌培养法相结合的检测方法,并应用此方法研究北京市市售水产品中创伤弧菌污染状况.结果 改良后的选择性增菌液适用于创伤弧菌的检测.北京市市售水产品中创伤弧菌检出率为15.7% (18/115),其中贝类、蟹类、鱼类和虾类样品的检出率分别为23.4% (15/64)、8.3% (1/12)、5.3%(1/19)和5.0% (1/20).结论 PCR法与传统增菌培养法相结合,可有效提高创伤弧菌检测效率.北京市市售贝类等水产品中创伤弧菌污染率较高,需引起食品安全风险监测重点关注.
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霍乱弧菌混合感染1例
2004年我们发现1例特殊的疑难病:霍乱弧菌与嗜水气单胞菌混合感染,现报告如下.1病例报告患者,女,32岁,因进食海鲜于2004年8月23日出现发热、腹痛、腹泻症状,体温高达40℃,腹痛以脐周为重,稀水便,3~4/d,量不大,临床表现不像霍乱,疑似肠炎.查便常规:每低倍视野白细胞10~15,红细胞、吞噬细胞阴性,动力试验阳性,O1群霍乱血清及O139群霍乱血清制动阴性,但12 h后选择性培养基庆大霉素平皿菌落生长良好,为湿润的灰色菌落,挑取菌落与O1群霍乱血清发生凝集,与O139群霍乱血清及生理盐水不凝集,但暗视野显微镜下均不制动,仍不能确诊,再分纯菌落,单个菌落有深灰色边界毛糙的菌落及浅灰色边界光滑的菌落,查动力均阳性,氧化酶均阳性,前者与O1群霍乱血清发生凝集,制动阳性,后者O1群霍乱血清制动阴性.经Vitek-AMS60全自动细菌鉴定仪、生化反应及血清凝集试验诊断为O1群霍乱弧菌及嗜水气单胞菌的混合感染,药敏试验显示对喹诺酮类及头孢菌素类药物均敏感.该患者经积极补液及环丙沙星、黄连素抗感染治疗4 d,痊愈出院.
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经直肠超声引导前列腺穿刺活检患者中氟喹诺酮抵抗性大肠埃希菌的流行及意义
目的:评估经直肠超声引导前列腺穿刺活检患者中氟喹诺酮抵抗性大肠埃希菌的流行及意义并以此辨别高危人群.材料和方法:收集3个医疗机构从2009年1月至2010年3月期间136例行经直肠超声引导下前列腺穿刺活检的男性患者的直肠拭子检测结果.其中33例从未做过活检的患者作为对照组.受试者均于接受前列腺活检之前完成问卷调查及直肠拭子检测.选用选择性培养基以分离氟喹诺酮抵抗性大肠埃希菌并观测敏感性.受试者于活检后7天通过电话接受问卷调查.
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欧洲药典附录2.6.13非无菌产品的微生物限度检查之二(对特定微生物的检查)
在常规的方法中,建议使用特定的选择性培养基.对所有选择性培养基的一个共同特征是亚致死性损伤的微生物不能够被检出.由于亚致死性损伤的微生物与制品的质量相关,所以使用选择性培养基的检测程序中必须包含受损微生物的复苏过程.如果制品具有抗微生物活性,这种活性必须被充分中和.
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阪崎肠杆菌检测技术研究进展
阪崎肠杆菌与婴幼儿奶粉密切相关,主要引起婴幼儿脑膜炎、败血症、坏死性结肠炎.它的一个重要生长特征是具有α-D-葡萄糖苷酶活性,根据这个特点已经设计了多种阪崎肠杆菌选择培养基.PCR 技术已应用于阪崎肠杆菌的快速检测,目前已针对它的16S rDNA、外膜蛋白A 基因及某些操纵子设计引物,建立了PCR 和real-time PCR 检测方法,大大提高了检测效率.
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食品中沙门氏菌酶联免疫荧光分析(VIDAS Salmonella[SLM]Assay)筛选方法
本方法为AOAC公布的方法996.08,适用于所有食品中沙门氏菌的检测.可能会遇到一定百分率假阳性结果.所有阳性结果必须通过标准培养方法确证.按967.26B(见17.9.07)从增菌培养基和M肉汤划线于选择性培养基培养,对典型或可疑菌落按967.26C(见12.9.02),967.27(见17.9.03)和967.28(见17.9.07)对培养物加以确证.也可按978.24(见17.9.04),989.12(见17.9.05)和989.13(见17.9.06)使用商品化的生化检验盒对食源性沙门氏菌属鉴定.
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应用ANDERSEN-6级撞击式采样器检测病室肠杆菌气溶胶含量的研究
医院获得性呼吸系感染发病率和死亡率占我国医院感染的第一位,而且感染菌中肠杆菌科及假单胞菌在医院感染中居首位[1].所以,监测病房内的肠杆菌气溶胶含量对控制医院获得性呼吸系感染有重要意义.本研究采用国际标准ANDERSEN~6级撞击式空气样品采样器及选择性培养基麦康凯在神经内科病室进行监测.
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外科感染防治的进展与展望,问题与对策
感染始终是困扰外科医生并挥之不去的阴影.在新世纪开始之际,就外科感染问题回顾过去,认清现状,展望未来,是很有必要的.1 外科感染诊治的进展在诊断方面,除影像学(如CT引导下穿刺诊断胰腺坏死感染)、病理学(如组织活检诊断深部真菌感染)、毒素检测(如用酶联免疫吸附法检测粪便滤液中A毒素诊断难辨梭菌性肠炎)、免疫学(如检测血中或脑脊液中隐球菌或曲霉菌抗原诊断系统性真菌感染)等以外,更突出的是微生物学诊断的进步.厌氧菌培养技术的开发与普及极大地提高了人们对厌氧菌感染的认识和治疗水平.采用选择性培养基能显著提高某些可疑致病菌的检出率.微生物自动化分析仪能在数小时内根据微生物的代谢产物而不是细菌形态作出快速诊断.认识到各种原因造成的肠粘膜屏障损害能引起肠道细菌移位和肠源性感染是近年来的一大进步.这种状况很容易通过动物(尤其是啮齿类动物)模型重复出来,但在临床上,由于缺乏局部感染灶和血培养阳性率很低而往往难以证实.应用聚合酶链反应(PCR)技术能够根据血中存在细菌基因特定片段诊断全身性感染[1].一般培养只能检出活着的细菌,而PCR方法还能发现已被免疫细胞吞噬甚至已经碎裂的细菌,有很高的敏感性和特异性[2].在我们的一项火器多发伤动物实验中,外周血细菌常规培养阳性率为47%,而用PCR法的细菌检出率高达82%.
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幽门螺杆菌的培养与尿素酶试验的比较
采用细菌培养法和尿素酶法分别检测了102例消化道疾病患者幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染情况.标本经输送培养基运送、匀浆后,分别涂布于3种选择性培养基和非选择性培养基上,38℃微需氧环境(85%N2,10%CO2,5%O2)培养.标本同时采用尿素酶法进行检测.结果表明,3种细菌培养法与尿素酶法检测阳性率接近,分别为43.1%,39.2%,43.1%和37.2%;非选择性培养基不适于H.pylori的培养检测.
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淋病奈瑟菌改良选择性培养基的研制和应用
淋病是我国发病率高的性病,已成为重大公共卫生问题.防止淋病流行的关键是及时诊断和治疗.培养法一直是诊断淋病奈瑟菌感染的黄金标准,至今仍是用于常规测定的唯一方法.
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空肠弯曲菌、亲水气单胞菌和耶氏菌肠炎临床与实验研究
我院自1981年7月-1986年3月共收治空肠弯曲菌肠炎;116例,亲水气单胞菌肠炎29例和耶氏菌肠炎4例,均经粪便培养证实.116例空肠弯曲菌肠炎中9例呈混合感染.三种肠炎的临床表现相似,均呈急性胃肠炎或痢疾综合症表现,需依靠粪便的细菌培养而确诊.需采用选择性培养基和适当的温度(分别为43C、34C和25C).药敏检测显示三者对常用的氨基糖甙类抗生素、氯霉素、磷霉素和四环素等均敏感.治疗主要为补液及对症处理,抗菌治疗有助于缩短排菌时间和缓解病情.
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表皮癣菌性尿路感染15例报告
近年来,我们对75例患有肾炎或尿路感染患者的尿沉渣检查发现真菌的大分生孢子者15 例,经培养鉴定为絮状表皮癣菌,兹报告如下。临床资料 一、一般资料:15例病人,均为门诊及住院患者,男3例,女12例;年龄28~72岁,平均 44岁。原发病:肾病综合征1例,慢性肾炎、慢性肾盂肾炎、急性肾盂肾炎各3例;急性膀胱炎2例;原因不明的镜下血尿2例;长期不明原因水肿1例。 二、临床特点:均以原发病的临床表现就诊,在诊治过程中查尿常规,沉渣中发现真菌大分生孢子;15例中11例罹患有足癣史,2例有甲癣史,10例仍未愈;3例白带过多,伴有会阴部搔痒。 三、实验室检查:(1)尿沉渣检查:嘱被检者清洗生殖器部位,反复取每人10ml新鲜中段尿,3000r/min离心沉淀5分钟,余0.2ml沉渣,混匀后取出0.02ml 于载玻片上,用18mm×18mm盖玻片覆盖后镜检。在高倍镜下,15例病人均发现梭形、卵圆形或巨大棒状,一端有短柄、薄壁光滑,内有3~9个横分隔,大小(20~60 )μm×(4~13)μm的大分生孢子,并可见分枝分隔的菌丝。无小分生孢子。15例中还发现血尿6例,脓尿9例,白细胞管型2例。(2)培养特征:尿液标本经Mycol ine真菌选择性培养基(生物梅里埃公司产品),30℃培养48h~1W,结果显示有皮癣真菌生长。在沙氏(Sabouraud)琼脂培养基上,菌落初呈白色鹅毛绒样,以后变为黄绿色粉末状。且培养基常有皲裂,有的菌株早期无色,后期呈黄棕色。镜检可见卵圆形或杵状薄壁大分生孢子。陈旧培养物中可见有厚膜孢子及球拍状菌丝,无小分生孢子。鉴定为絮状表皮癣菌。
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淋病双球菌培养时间对结果的影响和耐药性变迁
淋病是常见的性传播疾病之一,分离培养是诊断淋病的金标准,而且部分淋病双球菌的生长非常缓慢.目前大多数实验室根据文献推荐的方法[1],用淋病双球菌选择性培养基培养24~48h再观察结果.
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用分值计算法对选择性培养基质量进行比较
肠道选择性培养基是分离、培养肠道致病菌首选培养基,其质量优劣直接影响肠道致病菌检出.目前各检验机构使用的肠道选择性培养基均从市场购入,因此,购买优质的培养基是保证检验质量的先决条件,本次实验从市场购买SS等6种培养基,采用分值计算法进行质量比较,现将结果报告如下.
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142株淋病奈瑟氏菌药物敏感性监测分析
淋病奈瑟菌是淋病的病原体.淋病是常见的性传播疾病之一,也是我国目前监测的8种主要性传播疾病中发病人数多的一种.通过对淋病奈瑟菌体外药物敏感性的监测,掌握其药物敏感谱变迁和发现其新的耐药菌株,对淋病的防治工作是十分重要的.我们收集了142例淋病奈瑟菌,并对其耐药性进行分析如下.1材料和方法1.1 菌株来源:142株淋病奈瑟菌来源于本院妇产科与福州市皮肤病院性病门诊送检的女性宫颈分泌物.1.2 细菌培养与菌种鉴定:淋病奈瑟菌选用生物-梅里埃生产的淋病奈瑟菌选择性培养基,烛缸35℃,孵育24~48小时.菌种鉴定采用杭州天和微生物试剂有限公司生产的奈瑟菌属细菌生化微量鉴定管.
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不同培养基分离嗜血杆菌的探讨
流感嗜血杆菌是苛养性细菌,原发感染多为b型所致,是引起呼吸道感染和脑膜炎的常见病原菌,有文献报导该菌还能引起化脓性关节炎和心包炎.流感嗜血杆菌生长需要X和V因子,而且受革兰阳性菌的抑制.我们的研究显示不加添加剂的5%羊血巧克力琼脂培养检出率很低为4.3%,且低于文献报导的8.6%.我们以普通琼脂为基础,分别用羊血和马血制成巧克力培养基,再向其中加入适量的万古霉素等构成选择性培养基,分离流感嗜血杆菌,阳性率明显提高,可达47.8%,为临床诊疗提供了依据.
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三种分离志贺氏菌属培养基单独和联合应用的效果比较
志贺氏菌属有多种选择性培养基,为提高志贺氏菌的检出率,我室于1999年对沙门氏菌属志贺氏菌属琼脂(SS),HeRtoen肠道菌琼脂(HE)和伊红美兰琼脂(EMB)三种培养基进行了临床应用效果的比较,现报告如下.1 标本来源和方法将门诊腹泻病人粪便标本210份分别同时接种于SS、HE和EMB培养基平板上,36℃过夜培养,从每个平板上挑取3~5个可疑菌落,分别转种克氏双糖,取可疑菌落做血清学鉴定.