首页 > 文献资料
-
树突状细胞在调节性T细胞产生中的作用
树突状细胞(Dendritic cells, DCs)是一类重要的专职抗原提呈细胞,虽在体内的数量较少,但具有超强的抗原提呈能力,而且能够活化初始T细胞(Naive T cells),在免疫应答的诱导中具有独特的地位.DCs既能诱导有效的免疫应答,同时在诱导免疫耐受中也十分重要.在中枢耐受中,胸腺内的DCs可以通过阴性选择清除自身反应性T细胞.近年来,越来越多的证据表明,DCs在外周耐受中也起着关键性的作用,可以通过诱导效应性CD4+T或者CD8+T细胞的无能,促进调节性T细胞(T regulatory cells,Treg)的分化来调控针对自身抗原的外周耐受.
-
αβT细胞TCR偏向取用与SLE的研究概况
系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)是一种以淋巴细胞异常、自身反应性T细胞活化、多种自身抗体产生、补体活化、免疫复合物沉积而导致多系统和多器官损伤为特征的自身免疫性疾病.SLE可能的发病机制包括基因、环境因素和免疫学因素.其中免疫学因素主要表现为免疫调节的异常,出现高度活化和功能异常的T、B细胞.T细胞通过TCR识别自身抗原,进而活化、增殖,并辅助B细胞产生自身抗体.而在感染、肿瘤、自身免疫和超敏反应等免疫应答过程中出现抗原特异性T细胞应答特征性的变化,即T细胞TCR偏向取用.因此,阐明T细胞TCR偏向及其CDR3区的结构和特征对研究SLE的致病机制是至关重要的.
-
CD4+CD25+调节性T细胞的生物学特性及功能
对自身抗原产生免疫耐受是防止发生自身免疫病的关键.自1995年日本学者Sakaguchi等首次报道CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞以来,越来越多的研究证明这群T细胞在自身耐受的维持中发挥着重要的作用.CD4+CD25+调节性T细胞具有以下特点:①自身免疫防御作用;②自然条件下是处于无能(Anergy)状态;③抑制其他CD4+T细胞和CD8+T细胞的生物活性;④抑制活性是抗原非特异性的;⑤抑制方法可能通过细胞与细胞间直接接触,或经分泌抑制性细胞因子发挥免疫抑制效应;⑥抑制作用与细胞表面CTLA-4和糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子家族相关基因(Glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor family-related gene GITR)的表达密切相关[1,2].然而CD4+CD25+调节性T细胞的产生、分化发育以及其作用的确切机制还在进一步发掘之中.
-
CD8+调节性T细胞在慢性阻塞性肺疾病中的研究进展
慢性阻塞性肺病( Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种可预防和可治疗的常见疾病,以持续存在的气流受限为特征,气流受限呈进行性发展,伴有气道和肺对有害气体或颗粒所致的慢性炎症反应增加[1]。目前有多种机制参与COPD的形成,如促炎-抗炎失衡、氧化-抗氧化失衡、蛋白酶-抗蛋白酶失衡和自主神经系统功能失衡等[2-5],其中促炎-抗炎失衡是导致COPD迁延不愈的重要原因。这种慢性炎症累及局部和全身[6],受累的抗原至少有三种可能来源:①微生物;②香烟烟雾成分及其衍生物;③自身抗原,包括来自细胞外基质降解产物的新生抗原[7,8]。近年越来越多的证据倾向于第三种可能:COPD患者和小鼠肺气肿模型的肺组织存在B细胞、CD4+和CD8+T细胞的寡克隆现象[9-11],表明自身免疫反应可能参与了COPD的发展;另有研究显示α1-抗胰蛋白酶不仅抑制蛋白酶,而且通过阻止细胞凋亡和调节炎症反应来缓解COPD的病程进展[4];研究人员还在稳定期COPD 患者外周血中发现异常水平的抗核抗体( ANA )和抗组织抗体(AT),并且AT与肺功能受损有关[12]。以上证据都支持COPD是一种自身免疫性疾病的假说。
-
肥大细胞在自身免疫性疾病中的研究进展
自身免疫性疾病是机体对自身抗原发生免疫反应产生特异性抗体或致敏淋巴细胞并导致自身组织器官损害的一类疾病,其病因和发病机制尚不清楚且目前尚无根治性药物。国内外学者一直致力于探究自身免疫性疾病的发病机理并积极寻求新的治疗靶点。肥大细胞( Mast cells,MCs)曾被视为人体的“哨兵”,在人体对外界的防御和过敏反应中发挥着重要作用。近年的研究发现, MCs与自身免疫性疾病的发生发展密切相关[1]。研究表明活化的MCs可通过其释放的生物活性物质直接或间接地参与自身免疫性疾病的病理过程,并有望成为自身免疫性疾病的治疗新靶点[2-4]。
-
吞噬自身抗原对骨髓来源树突状细胞体外分化发育及功能的影响
目的:观察小鼠骨髓来源树突状细胞吞噬自身抗原后体外分化发育及功能的变化,研究其对免疫状态的影响.方法:小鼠骨髓细胞经GM-CSF+IL-4诱导分化为DCs,采用荧光显微镜和流式细胞仪检测DCs的纯度;运用免疫组化法及透射电镜鉴定DCs能否吞噬自身抗原;流式细胞仪检测吞噬自身抗原后DCs的CD86、MHCⅡ的变化; MTT法检测吞噬自身抗原后DCs刺激同基因背景小鼠脾淋巴细胞增殖能力的改变;ELISA法检测脾淋巴细胞经DCs刺激后,分泌IL-4、IFN-γ量的改变.结果:所培养DCs的纯度为90.6%,DCs能够吞噬自身抗原,吞噬自身抗原后的DCs体外分化发育异常,抑制同基因背景小鼠脾淋巴细胞的增殖,刺激同基因背景小鼠脾淋巴细胞分泌IL-4增加,分泌IFN-γ减少.结论:DCs吞噬自身抗原后能够抑制自身成熟,促进淋巴细胞免疫耐受,促进体液免疫.
-
人谷氨酸脱羧酶DNA疫苗的构建与鉴定
Ⅰ型糖尿病是T细胞介导的自身免疫性疾病,迄今报告的胰岛候选自身抗原已逾20种,其中谷氨酸脱羧酶(GAD65)认为是重要的自身抗原,并极可能是Ⅰ型糖尿病的始动靶抗原[1-3].利用谷氨酸脱羧酶自身抗原诱导免疫耐受能有效预防Ⅰ型糖尿病.近年发展的将编码抗原的DNA质粒(DNA疫苗)直接注射动物并使其在体内表达的技术为Ⅰ型糖尿病的免疫预防开辟了新的途径.本研究试图构建人GAD65的DNA疫苗,为Ⅰ型糖尿病的免疫预防提供实验基础.
-
ICA512的表达及人抗ICA512抗体测定方法的建立
目的:从人胰脏β-细胞中对ICA512进行基因克隆和蛋白质表达,终应用于人自身抗体的测定.方法:应用逆转录技术从人胰脏RNA中合成出ICA512的cDNA.经DNA PCR扩增后,克隆到两种带有不同融合蛋白的表达质粒,然后转化至大肠杆菌中,表达出两种该重组蛋白.并利用该两种表达蛋白建立起抗ICA512抗体的ELISA测定法(双抗原夹心法).结果:用英国RSR ICA512测定试剂盒对表达蛋白进行免疫学分析对照,表明研究中表达的蛋白是具有免疫活性的ICA512.建立的ELISA和RSR放免法的测定结果基本吻合. 结论:研究中所表达的ICA512可用于人自身抗体测定进行1 型糖尿病(T1DM)诊断,在操作的简便性方面更是优于同类进口测定试剂盒.
-
自身抗原La融合蛋白在大肠杆菌中的表达及免疫学鉴定
系统性自身免疫病患者血清中有多种针对核蛋白复合物(RNP)的自身抗体,它们在发病机制中的作用尚不清楚.
-
类风湿性关节炎新型自身抗原视黄醇结合蛋白1类似蛋白相关分析研究
目的:类风湿性关节炎(RA)是一种全身性自身免疫性疾病,但其发病原因尚不清楚.因此,迫切需要找到诱发此病的相关抗原,但国内外鲜有关于新的自身抗原的报道,本课题组运用克隆技术发现新型自身抗原.方法:从滑膜细胞中提取mRNA,构建cDNA文库,取类风湿性关节炎患者关节滑膜液中的抗体作为探针,筛选cDNA基因库,得到阳性克隆后测序分析,寻找已知相似基因,进而分析蛋白质的构造和Northern印迹杂交(Northern blotting).结果:发现新型自身抗原cDNA克隆,其与视黄醇结合蛋白1(RBP1)有36.5%的氨基酸序列相同,并发现AT-rich interaction domain,chromo domain,A+T-hook以及TAF homology domain这些特殊的蛋白质构造.因此将其命名为视黄醇结合蛋白1类似蛋白(RBP1 like protein,Rbik).Rbik RNA不仅表达于滑膜,也表达于心脏、小肠、肌肉等多个器官组织中.结论:此自身抗原的发现可为类风湿性关节炎的实验诊断和治疗提供新的可能指标和靶点.
-
糖尿病周围神经病变IL-1β,TNF-α的介导作用
糖尿病随着病程的延长,常伴有周围神经损害,这是由于各种因素造成周围神经髓鞘脱失,自身抗原成份暴露而引起免疫病理反应.在这过程中,细胞因子被认为参与了其中的作用.为此我们检测了30例Ⅱ型糖尿病周围神经病变病人IL-1β、TNF-α,探讨其在病理过程中的作用,现报告如下.
-
表观遗传调控与自身免疫性疾病治疗
自身免疫性疾病( Autoimmune diseases, AIDs )是一类以机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害为特征的疾病。遗传和环境因素共同参与了AIDs的发病,但其确切的发病机制尚不十分明确,目前AIDs的治疗一般以对症治疗及控制病情进展为主。临床上针对这类疾病的药物主要为皮质类固醇激素和免疫抑制剂,而这些药物不能彻底治愈这类疾病,而且药物疗效及不良反应个体差异明显。因此,AIDs药物疗效及不良反应的生物标记物筛选与鉴定以及高效低毒的新药研发是目前亟待解决的
重要问题。 -
葡萄糖-6-磷酸异构酶在类风湿关节炎诊断和治疗中的临床意义
类风湿关节炎(RA)是一种以关节受累为主要表现的全身性自身免疫病.RA患者体内存在多种自身抗原及相应抗体,而葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)既是一种在糖酵解和糖异生中起重要作用的酶类,又具有多种免疫学活性,国内外多种文献报道GPI是RA的一种自身抗原,可作为诊断RA的一种新的指标[1,2].本研究旨在检测RA患者治疗前后血清中GPI含量变化,进一步探讨GPI与RA疾病活动度的关系.
-
自身抗原gp210融合蛋白的重组表达及其临床应用研究
目的 重组表达人核包膜蛋白自身抗原gp210融合蛋白,以用于原发性胆汁性肝硬化(PBC)的临床诊断和病情监测.方法 针对基因库中人gp210的cDNA序列设计引物,从正常人的淋巴细胞中提取RNA,通过反转录PCR方法扩增得到相应的基因片段,经测定序列验证后插入表达载体PET28a(+),构建重组表达载体PET28a(+)-gp:210,转化大肠杆菌BL21(DE3)后诱导表达蛋白质,并经SDS-PAGE、Western-blot鉴定重组表达的gp210融合蛋自,进一步经Ni2+亲合层析柱纯化.应用重组gp210融合蛋白建立间接ELISA,检测PBC患者血清中的抗gp210抗体.结果 经核苷酸序列测定和酶切鉴定结果表明,成功地构建了PET28a(+)-gp210重组质粒.经SDS-PAGE、Westem-blot鉴定,获得了具有免疫原性的重组gp210融合蛋白.经ELISA检测,PBC患者中抗gp210抗体的阳性率为40.5%,与疾病对照组及正常对照组比较有显著性差异(P<0.05).PBC患者临床资料分析表明,抗gp210阳性患者中IgM浓度显著高于抗gp210阴性患者;经UDCA治疗后,28位PBC患者中,3例抗gp210抗体由阳性转为阴性,9例抗gp210抗体持续阳性,1例抗gp210抗体由阴性转为阳性,16例抗gp210抗体持续阴性;其他临床症状与抗gp210抗体无显著相关.结论 应用重组gp210融合蛋白建立ELISA检测自身抗体,对PBC诊断具有较好的特异性,为PBC的临床诊断和病情监测提供了有力依据.
-
自身抗原OGDC-E2融合蛋白的克隆表达与鉴定
目的基因工程重组表达2-氧戊二酸脱氢酶复合体E2(OGDC-E2)融合蛋白.方法用PCR方法扩增得到OGDC-E2的基因片段,插入表达载体pET28a(+),构建重组表达载体pET28a(+)-OGDC-E2,测序正确后在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.结果获得OGDC-E2融合蛋白,经SDS-PAGE分析,相对分子质量与预期大小一致;经免疫学鉴定,重组抗原片段具有抗线粒体抗体二亚型(AMA-M2)的免疫原性.结论基因重组表达的融合蛋白将有利于原发性胆汁性肝硬化(PBC)的实验诊断.
-
抗线粒体抗体M2亚型与原发性胆汁性肝硬化
原发性胆汁性肝硬化(PBC)是一种慢性肝内胆汁淤积性疾病,在病理学上表现为进行性、非化脓性、破坏性小胆管炎,终发展成肝硬化,多累及中老年女性,约占我国肝脏疾病患者的1%~2%[1],血清抗线粒体抗体(AMA)滴度≥1:40有诊断价值[2],目前,发现线粒体膜上存在9种自身抗原(M1~M9),诊断PBC的特异性高的是M:亚型,现对PBC及AMA-M2关系概述如下.
-
谷氨酸脱羧酶抗体测定在糖尿病分型诊断中的应用
自1990年Beakeskov等首次证明谷氨酸脱羧酶(GAD)是1型糖尿病的自身抗原后,GAD抗体检测开始在临床上大量应用[1],对诊断1型糖尿病及糖尿病分型均具有重要的参考价值.本文探讨GAD抗体在糖尿病分型诊断中的应用价值.
-
多发性硬化的护理体会
多发性硬化(简称MS)是一种病因未明的以中枢神经系统炎性脱髓鞘为主要特征的脱髓鞘疾病.研究资料证实,MS起病大多由病毒感染引起,由于病毒感染激活了自身抗原,使自身免疫系统误识靶抗原,从而产生中枢神经系统广泛的炎性脱髓鞘改变[1],是一种预后较差的疾病.有效地预防复发,阻止病情进展是目前临床治疗的关键.我科1999年8月~2003年7月共收治MS患者50例,经积极治疗及全面护理,基本控制了病情,现将护理体会报告如下.
-
自身抗原在动脉粥样硬化形成中作用的研究进展
动脉粥样硬化(AS)是一种由免疫介导的、多因素参与的炎症性疾病。流行病学调查显示,在一些自身免疫性疾病中AS有所加剧,例如系统性红斑狼疮(SLE)和抗磷脂综合征。通过研究认为,几个潜在的自身抗原,如氧化低密度脂蛋白、热休克蛋白65/60和β2糖蛋白Ⅰ在AS的发生和发展中发挥着重要作用。这些新的认识,为人们找到了预防和治疗AS的新靶点。
关键词: 动脉粥样硬化 自身抗原 氧化低密度脂蛋白 热休克蛋白65/60 β2糖蛋白Ⅰ -
类风湿关节炎滑膜组织cDNA文库的构建及自身抗原的筛选和鉴定
目的 通过SEREX(serological analysis of recombinant cDNA expression library)技术对类风湿关节炎滑膜组织cDNA文库进行初步筛选,得到新的类风湿关节炎自身抗原.方法 利用SMART技术构建类风湿关节炎患者滑膜组织cDNA文库,并对该文库进行SEREX筛选,获得特异性结合阳性克隆,对阳性克隆同源性分析.然后进行酶联免疫吸附实验(ELISA)验证,分析该阳性克隆对于类风湿关节炎诊断临床敏感度和特异度.结果 构建cDNA文库滴度约为6.89×106 pfu/mL,筛选文库获得12个阳性克隆,同源性分析3个阳性克隆插入片段为已知蛋白,分别是:Filaggrin、SERPINE2和p68.进行血清学初步验证,抗-Filaggrin和抗-SERPINE2具有高敏感度和低特异度,而抗-p68具有高敏感度和高特异度.结论 抗-Filaggrin、抗-SERPINE2和抗-p68对于类风湿关节炎的诊断具有不同的敏感度和特异度.