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一项乙肝检测的新技术
乙肝抗原抗体测定是诊断乙肝常用的方法.酶联免疫测定由于操作简便,成本低廉,敏感性和特异性较好,80年代中期以来就成为乙肝抗原抗体检测主要的方法.但是本法只能定性,作为定量测定的方法就不够准确了.比如,不同乙肝感染者e抗原的浓度可相差100倍,表面抗原的浓度甚至相差800倍,统统用"阳性"来表示,实在太粗糙,很难满足临床的需要.为了弥补这个缺陷,进入90年代以来,国外先后推出第四代检测方法:化学发光法、电化学发光法.但是这两个方法需要昂贵的设备,试剂成本高,在我国难以普遍应用.在这种情况下,又能量化测定乙肝抗原抗体,又比较经济的诊断方法--时间分辨荧光免疫检测法逐渐吸引了人们的目光.
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昆明市2000年正常人群流感抗体水平分析
对不同年龄的人群进行流感病毒的抗体测定,不仅是为了解人群流感抗体水平,更主要是为预测、控制流感流行及制定免疫措施提供科学的依据.为此我们收集了昆明市不同季节、不同年龄正常人血清300份,用国家流感中心提供的2000年国内流感代表株进行抗体测定,现将结果报告如下.
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支原体抗体检测在呼吸系统感染中的临床应用
在呼吸系统的非细菌性感染中,肺炎支原体(MP)是常见的病原体,感染早期即可出现IgM升 高。为了解呼吸系统感染中肺炎支原体的感染现状及其临床特征,对我院1999年9月至2000 年2月门诊及住院患者234例进行了肺炎支原体IgM抗体测定,综合分析如下。1 资料与方法1.1 临床资料:受试者为我院呼吸科1999年9月至2000年2月的门诊及住院患者共234例, 其中男性126例,女性108例,年龄16~76岁。分别为上呼吸道感染43例,急性气管、支气管 炎67例,慢阻肺合并感染52例,发热待诊24例,肺炎34例,支气管哮喘9例,其他5例。[ JP2 1.2 检测方法及诊断标准:全部人员均为空腹肘静脉采血,离心后取血清冷藏3 d内检测 ;肺炎支原体IgM抗体测定采用酶联免疫法(EIA),药盒购自北京海奥万信生物技术有限公司 。根据药盒说明测定结果分为阴性(<770 kU/L)、弱阳性(770~950 kU/L)及阳性(>950 kU /L),而将有呼吸道急性感染的临床表现、肺炎支原体IgM阳性者视为肺炎支原体感染,弱阳 性视为可疑,建议1~2周后复查。
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780例肺结核病人就医、确诊和开始治疗时间分析
玉溪市红塔区防疫站自1989年接受全国结核病监测任务,结防科为玉溪市结核病监测登记、化疗管理中心.病例发现,依靠市辖区的综合医院、乡镇卫生院和村卫生所,结防科对已报告的可疑病例进行跟踪查访,通过痰结核菌检查、摄X线胸片、结核菌素试验、结核抗体测定等方法进行定诊.确诊病例严格按<云南省、自治区、直辖市、玉溪市监测区结核病例登记卡>进行填写.1990年1月至1999年12月依据<云南省、自治区、直辖市、玉溪市监测区结核病例登记卡>进行统计整理.
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儿童慢性咳嗽112例临床探讨
资料与方法2007年4月~2009年3月收治慢性咳嗽患儿112例,男72例,女40例,年龄1.5~14岁.均详细询问病史并进行仔细的体格检查,血常规检查、X线胸片检查,肺炎支原体、衣原体抗体测定,选择性行副鼻窦X线或CT检查、支气管激发或舒张试验、过敏原检测、大呼气流量(PEF)测定,部分病例做24小时食管pH测定、胃镜鼻咽镜检查.
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105例肾综合征出血热病人IgM、IgG抗体检测及血清学分型
肾综合征出血热(EHF)是危害人类比较严重的一种传染病,发病率和病死率都比较高.过去长春市为低发区,近几年,发病人数逐年增加.我市现已将肾综合征出血热列为重点防治疾病.为控制本病的发生与流行,我们于1999年7月~2000年5月采用IgM捕获ELISA法及间接ELISA法测定IgG对长春市不同地区临床病人血清进行IgM及IgG抗体测定,并将测得的IgM及IgG抗体阳性的病人血清用血凝抑制试验(HI)方法进行了血清学分型,现将结果报告如下:1 材料和方法1.1 试剂来源:IgM及IgG酶标试剂盒购于哈尔滨高新生物技术公司.分型抗原A-血凝素和R-血凝素,购于浙江省卫生防疫站.
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大同市291例接种狂犬病疫苗后抗体水平分析
狂犬病是由狂犬病毒引起的人兽共患疾病,由于其病死率高达100%,因而暴露后的预防接种显得至关重要.为了解大同市被犬、猫咬伤后人群注射狂犬病疫苗后的抗体产生情况,我们对2003年8月至2004年8月在大同市卫生局监督所门诊进行抗体测定的291例资料进行了汇总和分析,现将结果报道如下.
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呼伦贝尔市2001-2003年麻疹疑似病例M抗体测定结果分析
对内蒙古自治区呼伦贝尔市13个旗(市)2001-2003 年送检的麻疹疑似病例血清标本进行检测,对部分病例测定风疹IgM抗体.血清标本由呼伦贝尔市疾病预防控制中心检验中心实验室用ELISA法测定麻疹IgM和风疹IgM抗体.共检测麻疹IgM抗体325例,阳性165例,阳性率50.77%;检测风疹IgM抗体244例,风疹IgM抗体阳性率67.21%.对其中84例血清标本同时检测麻疹IgM抗体和风疹IgM抗体,结果显示,麻疹IgM抗体阳性14例,风疹IgM抗体阳性30例,全部阴性40例.按卫生部免疫程序接种麻疹疫苗(MV),为了提高MV接种率,在全市范围内对1.5~2 岁的儿童复种1针;因此325例分组统计基础免疫(<12月龄)和复种1针(1.5~2 岁)为一组,免疫间隙(2~6 岁)为一组,复种2针(7~14 岁)期,成人(>14 岁)期及不祥的各为一组.
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深圳市1998~1999年流行性感冒病毒监测
流行性感冒(流感)是一种具有严重危害的病毒性急性呼吸道传染病。为及时准确地监测流感病毒变异株,探索变异规律,将1998~1999年深圳市流感病毒监测结果报道如下。 1.材料与方法:每周分别从深圳市两家定点监测医院采集发热38℃以上的类流感患者咽拭子标本,按常规处理后,置-70℃冰箱保存待进行病毒分离。病毒分离采用鸡胚双腔法和MDCK传代细胞两个接种途径。凝集血球用1%人O型红细胞悬液。病毒鉴定用常量半加敏血凝抑制试验(HI)进行,抗体测定用微量半加敏血凝抑制试验进行,测定抗原为:A/京防/262/95(H1N1)、A/沪防/1/98(H3N2)、B/京防/184/93。 2.结果: (1)流感病毒分离概况:1998年检测标本2 300份,分离流感病毒40株,分离率为1.74%;1999年检测标本1 187份,分离流感病毒70株,分离率为5.90%。1998年与1999年分离率差异具有统计学意义(χ2=44.31,P<0.001)。
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ELISA测定中影响因素简析
ELISA方法被广泛用于各种抗原和抗体测定.但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在临床检验中如果处理不当,会出现一些错误结果(即假阳性或假阴性结果).引起ELISA测定错误结果的原因主要有:①标本因素;②操作因素;③试剂因素.本文主要就标本因素和操作因素对ELISA测定的影响做如下讨论.
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婴幼儿流行性感冒病毒抗体的检出率与新近感染分析
目的 了解流行性感冒(流感)病毒流行后婴幼儿获得新近感染的情况.方法 选择出生后3~4月龄、10~11月龄时两次暴露于流感病毒甲1(H1N1)亚型流行高峰的13月龄幼儿,和出生后5~6月龄时暴露于H1N1亚型流行高峰的8月龄婴儿的血清,测定流感病毒抗体.结果 两次暴露于流感病毒H1N1亚型流行高峰的13月龄组中,H1N1亚型流感病毒的抗体阳性率为31.47%;暴露1次H1N1亚型流行高峰的8月龄组,抗体阳性率为26.42%;差异无统计学意义(x2=1.207,P>0.05).结论 13月龄组的幼儿可能在≤4月龄的那次H1N1亚型的暴露中,由于胎传抗体的保护而很少被感染,而8月龄组的婴儿是≥5月龄时才暴露,比13月龄组≤4月龄时的那次暴露更易被流感病毒感染.
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广西北流市1996~1999年流动人口疟疾监测与管理
北流市地处桂东南的山丘地区,东邻广东信宜,南与广东高州、化州接壤。耕地面积38 173 km2,主产水稻,全市辖23个镇110万人口,境内河沟众多,年平均气温21.7℃。疟疾经过几十年的防治,连续10年无内源和继发性疟疾病例发生。1994年经上级考核达到消灭疟疾标准后,工作的重点转为开展流动人口疟疾监测与管理上,以防止输入性疟疾扩散和流行。1 监测和管理措施1.1 疟原虫检测 血检中心为市防疫站寄防科,各镇设监测站28个,镜检站25个,镜检人员31人,开展居民发热病人血检和流动人口疟疾监测,查找疟疾传染源。1.2 流动人口管理 健全三级灭疟网,各镇防保组和村医负责辖区外出人员的登记管理及采血镜检,发现阳性病人及时上报市站寄防科,采取综合性防治措施。1.3 病人处理和监测措施 对现症病人进行三疗程系统治疗和抗复发根治,病家周围人群进行居民血检和预防服药。对疟疾疫点、边远山区、流动人口频繁的村屯居民和周围学校15岁以下儿童进行疟疾荧光抗体测定。2 结果与分析2.1 流动人口发热病人血检 1996~1999年发热病人血检5 150人,疟原虫阳性6人,阳性率0.12%,全部为间日疟。其中,外出回归人员血检5 063人,疟原虫阳性5人,阳性率0.10%;外来人口血检87人,疟原虫阳性1人,阳性率1.15%。2.2 流动人口健康人群血检 1996~1999年共血检该人群7 783人,镜检全部阴性。2.3 病人治疗和病灶点处理 4年来查出的6例外源病人采用氯喹2.5 g加伯喹112.5 mg采用5 d 3疗程根治。病家周围人群预防服药4 546人次。1998年5月对外来发病人员工作住地30人进行血检,未发现阳性病人,全部人员给予预防服药。2.4 血清学监测 1996~1999年采滤纸血膜分别为:16 360人、13 098人、13 650人、645人,进行荧光抗体测定全部阴性。1996~1999年居民血检分别为:1 831人、1 965人、1 320人、573人,镜检全部阴性。
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检测肺炎衣原体血清IgM抗体ELISA的建立和应用
特异性抗体测定是目前诊断肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,C.pn)感染较敏感的方法.主要外膜蛋白(MOMP)是C.pn重要的抗原成分,具有良好的免疫原性,与C.pn的感染密切相关,其特异性抗体具有免疫保护作用[1].机体感染C.pn后体内可出现特异性的IgM抗体,检测该IgM抗体可作为判断C.pn感染的标志.本研究利用特异性的MOMP抗原,建立检测血清中C.pn特异性IgM抗体的ELISA[2],以351例病原学确诊的临床血清标本和11例其他病原体感染的肺炎患者血清标本为对照,对其灵敏度和特异性进行了评价,现报告如下.
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MICB基因的克隆表达及其在抗体测定中的初步应用
目的:构建可行的MICB ( major histocompatibility complex class Ⅰ chain-related gene B)基因原核表达系统及蛋白质纯化体系,利用表达纯化蛋白建立ELISA方法初步应用于肾移植患者中MICB抗体的检测。方法外周血RNA经RT-PCR和特异性引物扩增获得MICB基因cDNA, MICB cDNA和原核表达载体pET-28a分别双酶切后连接构建重组表达载体,转染宿主菌E. coli BL21 DE3,IPTG诱导表达。亲和层析的Ni-NTA Spin纯化蛋白质,并通过Western blot鉴定。利用纯化蛋白建立ELISA法检测肾移植患者中MICB抗体。结果构建3个MICB常见等位基因2、3外显子的pET-28a-MICB重组表达体系,经Ni-NTA Spin纯化获得重组的MICB蛋白,Western blot鉴定。利用3个不同MICB蛋白质成功构建了ELISA方法,初步检测24份肾移植患者标本MICB抗体,显示不同的重组蛋白敏感性存在差异。结论本研究建立MICB基因克隆与体外表达技术,鉴定并纯化具有生物活性的蛋白质,同时建立MICB抗体检测的ELISA方法,为进一步研究MICB与移植免疫的关系提供基础资料。
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抗线粒体抗体测定对诊断原发性胆汁性肝硬化的临床意义
目的:探讨抗线粒体抗体(AMA)测定对原发性胆汁性肝硬化(PBC)的临床意义.方法:41例PBC及51例非原发性胆汁性肝硬化(自身免疫性肝炎9例,乙型肝炎21例,丙型肝炎11例,戊型肝炎10例)患者,采用间接免疫荧光法检测抗线粒体抗体,并对结果进行回顾性分析.结果:原发性胆汁性肝硬化阳性率90.24%(37/41),自身免疫性肝炎阳性率44.44%(4/9),乙型肝炎阳性率23.81%(5/21),丙型肝炎阳性率27.27%(3/11),戊型肝炎阳性率80%(8/10),40例对照组3例阳性.PBC、戊型肝炎与正常组血清AMA检测比较有非常显著性差异(P<0.01);AIH与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05);乙型肝炎组、丙型肝炎组与正常对照组比较无显著性差异;乙型肝炎组、丙型肝炎组分别与戊型肝炎组比较均有显著性差异(P<0.01、P<0.05);乙型肝炎组与丙型肝炎组比较无显著性差异.PBC组与非PBC组血清AMA的阳性率分别为90.24%和39.22%,两组比较有非常显著性差异(P<0.01).结论:血清抗AMA抗体检测对诊断原发性胆汁性肝硬化患者有着重要临床意义.
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胸液癌胚抗原、细胞角蛋白19片断联合检测对良恶性胸液鉴别诊断
胸液常规生化检查难以区分良恶性病变,我们联合检测胸液癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片断(CYFRA21-1)浓度,探讨对良恶性胸液鉴别诊断价值。 临床资料 38例恶性胸液患者,男19例,女19例,年龄33~83岁,平均62岁。原发肿瘤部位均经各种检查确定,并经组织学或细胞学确诊为支气管肺癌,经胸膜活检,胸液找到肿瘤细胞确诊21例,阳性率55%。其中肺腺癌26例,鳞癌6例,不定形6例。41例良性胸液患者为结核性胸膜炎,男29例,女12例,年龄22~86岁,平均46岁。均为经胸片、PPD皮试、结核抗体测定、胸膜活检确诊或经抗结核治疗有效者。
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新生儿肝炎综合征与非细菌性感染
目的了解非细菌性(TORCH)感染与新生儿肝炎综合征的关系.方法采用ELISA方法,对42例新生儿肝炎综合征患儿及其母亲进行TORCH IgM及TORCH-IgG抗体的测定.结果42例新生儿肝炎综合征患儿中发生T0RCH感染的阳性率为40.5%,母婴同时发生TORCH感染的占感染者的29.4%.结论 TORCH感染是导致新生儿肝炎综合征的重要致病因素之一.对临床新生儿肝炎综合征的患儿常规进行血清TORCH-IgM抗体的检测,有助于早期诊断和治疗.
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围产期Rh溶血症62例报告
母子血型不合所致的同种免疫性溶血症是围产儿死亡及新生儿核黄疸的重要原因。在我国以ABO血型不合多见,但病情较轻;Rh血型不合者较少,但病情重,且大多数未能及早诊断、治疗,预后差。我院对62例有Rh抗体的孕妇及她们的胎婴儿进行监测及治疗,使胎婴儿的预后得到明显改善,现报道如下。 一、 资料和方法 1.资料来源:1979年1月~1998年12月共收治Rh血型不合溶血症62例。年龄24~38岁,共孕205次,产162次。来自北京市23例,外省市39例,全部为汉族。 2.诊断标准:经夫妇血型及孕妇血型抗体测定而确诊。其中孕妇Rh阴性56例,抗体包括抗D抗体52例,抗D+C抗体2例,抗D+E抗体1例,抗D+e抗体1例。Rh阳性6例,其中抗E抗体4例,抗C抗体1例,抗C+E抗体1例。丈夫均为Rh阳性。 3.治疗方法:孕期接受治疗共47例,其中(1)中药组29例,以养血、活血、健脾、养肝、益肾为原则,以当归、芍药散加减,隔日1次,并配以维生素C及维生素E治疗。(2)中药+血浆去除组9例。在第1组用药基础上,当抗
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妊娠期糖尿病的筛查、管理、抗谷氨酸脱羧酶抗体测定及妊娠结局
妊娠期糖尿病 (gestational diabetes mellitus, GDM)是指妊娠期间首次发生或发现的糖代谢异常,包括一部分妊娠前已患有糖尿病但未曾获得诊断、仅在此次孕期被发现的糖尿病患者.GDM多发生在妊娠晚期,大多数患者无任何症状和体征,且空腹血糖多正常.未经治疗的GDM的危害是巨大的,随着妊娠时间的增加,易发生先兆子NFDB4、羊水过多、巨大儿、早产或死胎及产伤等.GDM远期发生2型糖尿病几率明显增加.因此,重视GDM早期诊断并及时合理治疗将大大减少母婴并发症.我院于2001年5月开始常规对我院门诊产检及住院孕妇进行50 g葡萄糖负荷试验(glucose challenge test, GCT)筛查,对GDM进行前瞻性研究,现报道如下.
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小儿肺炎支原体感染的神经系统损害
近三十年,从流行病学和临床观察,采用敏感的诊断技术显示,城市人群中肺炎支原体感染很为常见.Hornsleth等人应用补体-固定抗体测定,6~11个月婴儿42%血清抗体阳性,1~9岁抗体阳性率为67%.Brunner等应用敏感的放射免疫沉淀试验检测血清抗体, 25~60个月婴幼儿67%阳性,97%的17岁及以上人群抗体阳性[1].