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高效毛细管电泳法同时测定板蓝根药材中7种核苷类成分的含量
目的 建立高效毛细管电泳法(HPCE)同时测定不同批次板蓝根药材中表告依春、尿嘧啶、胸腺嘧啶、腺苷、次黄嘌呤、鸟苷、尿苷7种核苷类成分含量的方法.方法 采用未涂渍标准熔融石英毛细管(75 μm×64.5 cm,有效长度56 cm)为分离通道,60mmol· L-1硼砂-15 mmol·L-1β环糊精(pH 9.6)为运行缓冲液,分离电压为20 kV,检测波长为254 nm,毛细管温度为25℃,压力进样为5 kPa×10 s.结果 7种核苷类成分的响应峰面积与其相应质量浓度的线性关系良好(r>0.999 4);加样回收率为97.15% ~ 100.40%.实验表明,不同批次板蓝根药材中7种核苷类成分的含量有所差异.结论 该方法简便、可靠,重复性较好,可用于板蓝根质量的评价和控制.
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HPLC-PDA测定小半夏汤中的核苷类成分
目的 建立同时对小半夏汤中的5种核苷类成分进行含量测定的方法.方法 采用Lichrospher C18柱(4.6 mm×250mm,5 μm),以乙腈-水(1:99)为流动相,体积流量1.0 mL·min-1,λ220~300 nm,柱温30℃.结果 小半夏汤中的尿嘧啶、黄嘌呤、尿嘧啶核苷、次黄嘌呤核苷、鸟嘌呤核苷等的线性范围和相关系数分别为6.88~110.08 mg·L-1(r=0.999 6),2.82~45.04 mg·L<-1(r=0.999 8),22.40~358.48 mg·L-1(r=0.999 9),1.96~31.32 mg·L-1 (r:0.999 9),16.54~264.72 mg·L-1(r=0.999 8);加样回收率分别为100.31%(RSD=1.36%),100.21%(RSD=1.22%),99.98%(RSD=1.30%),100.44%(RSD=1.62%)和100.27%(RSD=1.36%);方法精密度、重复性良好,RSD均小于2.0%.结论 本法操作简便、结果可靠、重现性好、检测快速、定量准确,可作为小半夏汤中核苷类成分的含量测定方法.
关键词: 高效液相色谱-光电二极管阵列法 小半夏汤 核苷 含量测定 -
蒲圻贝母中核苷类化学成分研究
目的 对蒲圻贝母(Fritillaria puqiensis G.D.Yu et.G.Y.Chen)进行化学成分研究.方法 采用各种色谱技术进行分离纯化,通过化合物理化性质及波谱数据进行结构鉴定.结果 从正丁醇部位分离得到3个核苷类化合物和3个碱基,分别鉴定为2'-O-甲基腺嘌呤核糖核苷(Ⅰ),尿嘧啶核糖核苷(Ⅱ),腺嘌呤核糖核苷(Ⅲ),尿嘧啶(Ⅳ),胸腺嘧啶(Ⅴ),腺嘌呤(Ⅵ).结论 首次对蒲圻贝母的核苷类成分进行了报道,化合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅳ~Ⅵ系首次从贝母属植物中分离得到;其中化合物Ⅰ为稀有甲基修饰核苷,其 13C-NMR数据为首次报道,并首次对其碳氢信号进行了全归属.
关键词: 蒲圻贝母 核苷 2'-O-甲基腺嘌呤核糖核苷 腺苷 -
青海玉树不同产地冬虫夏草中15种核苷类成分比较研究
目的 建立同时分析冬虫夏草中15种核苷类成分的高效液相色谱法(HPLC)方法,比较青海玉树州5县12个不同产地样品中该15种成分的组成和含量的差异.方法 采用Zorbax Bonus-RP(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,甲醇-0.04%冰乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,柱温35℃,流速1.0 mL· min-1,检测波长260 nm为分析条件,检测12个不同产地样品中15种核苷类成分,并对数据进行初步比较分析.结果 样品中15种核苷类成分分离良好,在各自相应的浓度内,相关系数r在0.999 1 ~0.999 8之间,具有良好的线性;15种核苷类成分平均加标回收率在92.3% ~ 101.7%之间,RSD均小于等于3.1%(n=6).不同产地冬虫夏草样品中15种核苷类成分在组成和含量上均存在差异.15种核苷类成分总含量分布在7.820 ~14.351 mg·g-1内;尿苷,鸟苷、肌苷、胸苷含量高于其余11种核苷类成分,其含量分别在2.244~4.997 mg· g-1、1.017 ~2.388 mg·g-1、0.810~3.105 mg·g-1、0.377~2.997 mg·g-1内.在同一样品中,尿苷、鸟苷、肌苷、胸苷4种核苷占15种核苷类成分总量的比例为58.169% ~ 90.724%.除治多县样品为0.095 mg·g-1外,其余11个不同产地样品中腺苷含量均高于现行中国药典要求的0.01%(0.10 mg·g-1)的限量标准,并且在同一样品中腺苷和虫草素的含量基本接近.结论 本实验建立的冬虫夏草中15种核苷检测方法简便、准确,重复性好,能够满足冬虫夏草中核苷类成分分析的要求.对青海玉树5县12个不同产地中15种核苷类成分的含量检测和比较数据能够为冬虫夏草质量控制方法的深入研究提供参考.
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拉米夫定致乙型肝炎病毒变异及其临床对策
拉米夫定为核苷类似物抗病毒药物,通过抑制HBV DNA复制,能迅速降低慢性乙肝患者的HBV DNA水平,促进ALT恢复正常,改善组织学活动指数,获得一定比率的HBeAg消失及血清转换.
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核苷类似物抗乙型肝炎病毒的研究进展
乙型病毒性肝炎由乙型肝炎病毒(HBV)引起,以肝脏炎性病变为主,并可引起多器官损害,已成为严重威胁人类健康的疾病.HBV主要侵犯儿童及青壮年,一些患者可转化为肝硬化或肝癌,我国是世界上HBV感染人数多的国家.目前慢性乙型肝炎(CHB)重要的治疗方法是抗病毒药的治疗,干扰素类和核苷(酸)类似物是目前公认的主要抗病毒药.核苷类似物是近年来抗HBV研究的热点,而且进展很快.
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人重组S100A8蛋白适配体的筛选和结构分析
目的:筛选人重组S100A8蛋白特异性的适配体.方法:采用配体指数级富集系统进化(systematic evolution of ligand by exponential enrichment,SELEX)技术,以人重组S100A8蛋白为靶蛋白,以微孔板为筛选介质,从体外合成的随机单链DNA文库中筛选其适配体.利用生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶系统检测每轮单链DNA文库与靶蛋白的亲和力直至亲和力的上升趋于饱和,将后一轮筛选产物克隆测序,并进行生物信息学分析.结果:经过11轮筛选,单链DNA文库与人重组S100A8蛋白的亲和力趋向稳定,将第11轮筛选产物克隆测序,对获得的30个适配体进行分析.一级结构分析显示30个适配体并无共同的保守序列,但有3对适配体序列完全一致.二级结构预测分析表明,茎环和口袋结构为主要的结构形式,提示其可能是适配体与人重组S100A8蛋白特异性结合的基础.根据茎环和口袋的相对比例可将30个适配体分为4组,其中第1组中35号适配体与人重组S100A8蛋白亲和力高.结论:获得了与人重组S100A8蛋白特异性结合的适配体群,为后续适配体的应用研究以及S100A8蛋白功能的研究奠定了基础.
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基于金花葵核苷类成分的质量表征关联分析研究
目的 建立同时测定金花葵药材中7种核苷类成分(尿嘧啶、胞苷、尿苷、腺嘌呤、鸟苷、腺苷、2'-脱氧腺苷)含量的高效液相色谱法(HPLC),并对金花葵药材进行质量关联分析与评价.方法 采用HPLC-光电二级管阵列(PDA)法测定金花葵药材中7种核苷类成分,基于7个指标性成分含量及指标性成分加和含量对11批金花葵进行质量表征,并对表征结果进行关联性分析.结果 7种核苷类成分线性关系良好,精密度、稳定性、重复性、加样回收率均符合方法学测定要求,并应用所建立的方法测定了11批金花葵药材中7种核苷类成分的含量;以批号1为基准药材,批号2、6、9、10、4各指标成分总体含量高于基准药材,批号6、9、8、4、3、11与基准药材关联性高,综合评价得出批号1、2、6、9、4优良度居前.结论 所建立的金花葵药材中核苷类成分的含量测定方法及质量表征关联分析模式能分析金花葵质量整体关联性与应用有效性,为金花葵药材的质量控制及评价提供了可靠依据.
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氨基葡萄糖苷类化合物的合成研究
目的 本文对氨基葡萄糖苷类化合物的反应进行了研究.方法 3,4,6-三-乙酰基-2-邻苯二甲酰胺基-1-苯基硫-β-氨基葡萄糖及3,4,-二苯甲酰基-6-乙酰基-2-邻苯二甲酰胺基-1-苯基硫-β-氨基葡萄糖在二氯甲烷中与硅醚化的胸腺嘧啶反应.结果 反应得到N-β-糖苷产物.结论 与硅醚化的胸腺嘧啶反应生成化合物3-N1-胸腺嘧啶糖苷产物、β-N3-胸腺嘧啶糖苷产物.
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乙型肝炎病毒基因自然变异耐药性研究进展
目前,核苷(酸)类似物抗乙型肝炎病毒(HBV)治疗的有效性、可行性、安全性已得到认可.但在治疗过程中所出现的耐药性已成为病毒学家和临床医师必须面对的问题[1].
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核苷(酸)类似物长期治疗对慢性乙型肝炎肝纤维化的影响
全世界约1/3的人群有既往或现症乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染的血清学证据,其中3.5亿人为慢性乙肝表面抗原(HBsAg)携带者,每年约有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)[1,2]。目前认为,HBV活跃复制是决定临床结局的HBV相关免疫事件的关键驱动因素[3]。因此,慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)治疗的总体目标是:大限度地长期抑制HBV,减轻肝细胞炎症坏死及肝纤维化,延缓和减少肝脏失代偿、肝硬化、HCC及其并发症的发生,从而改善生活质量和延长存活时间[4]。国内外已经应用于临床的核苷(酸)类似物包括:拉米夫定(lamivudine, LAM)、阿德福韦酯(adefovir dipivoxil, ADV)、恩替卡韦(entecavir, ETV)、替比夫定(telbivudine, LdT)和替诺福韦酯(teno-fovir disoproxil fumarate, TDF)。越来越多的证据表明,应用核苷(酸)类似物长期抗病毒治疗可以延缓甚至逆转肝纤维化、肝硬化,降低HCC发生,改善患者临床结局。
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核苷(酸)类似物在慢性乙型肝炎患者长期治疗中的安全性
2010版我国《慢性乙型肝炎防治指南》指出慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)的治疗关键是抗病毒治疗。临床上由于抗病毒药物的耐药性和停药后病毒反弹的风险,大部分患者需要长期甚至终身服药,以达到持久抑制病毒复制的目的。而长期用药则会带来药物相关不良反应。实现CHB患者的治疗目标需要对患者进行长期管理,包括疗效、耐药风险、患者依从性、安全性等,其中安全性是核苷(酸)类似物长期管理的关键因素之一。核苷(酸)类似物一般具有良好耐受性,但长期安全性仍有待证实。治疗中的安全性问题与患者群体特征及药物不良反应密切相关,关注高风险CHB患者长期应用核苷(酸)类似物治疗过程中的安全性应重视药物不良反应,特别是肾毒性方面的问题。本文将对核苷(酸)类似物引起的范可尼综合征进行重点介绍。
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核苷和核苷酸类药物治疗乙型肝炎肝硬化失代偿期患者的疗效观察
目的 观察核苷和核苷酸类药物治疗乙型肝炎肝硬化失代偿期患者的疗效.方法 随机抽取80例本院自2014年1月~2017年11月收治的乙型肝炎肝硬化失代偿期患者,根据随机信封法将其分为对照组和实验组,每组40例.对照组应用常规治疗,实验组在常规治疗基础上增加核苷和核苷酸类药物治疗,分析两组临床指标、HBeAg转阴率、治疗总有效率、并发症发生率.结果 临床指标对比:实验组优于对照组(P<0.05);HBeAg转阴率、治疗总有效率对比:实验组高于对照组(P<0.05);并发症发生率对比:实验组低于对照组(P<0.05).结论 在乙型肝炎肝硬化失代偿期患者临床治疗中,应用核苷和核苷酸类药物治疗,治疗效果显著,既可改善临床症状及体征,又可提高HBeAg转阴率、降低并发症发生率,值得临床推广应用.
关键词: 核苷 核苷酸 乙型肝炎肝硬化失代偿期 HBeAg转阴率 -
蛹虫草中4种核苷的含量分析
目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定蛹虫草中4种核苷类物质含量的方法,为蛹虫草的开发利用及其产品的指纹图谱提供依据。方法采用Agilent C18色谱柱;以甲醇-水为流动相,采用梯度洗脱,流速为0.8 ml/min,检测波长为260 nm,柱温为30℃。结果样品中尿苷、鸟苷、腺苷和虫草素的加标回收率分别为94.10%、92.23%、94.97%、103.23%,相对标准偏差(RSD)分别为3.75%、5.40%、1.09%、0.30%。结论该法能简单、快速、准确地测定酶解液中4种核苷的含量。
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核苷(酸)类似物类药物在慢性乙型肝炎治疗中的应用现状
口服核苷(酸)类似物类药物应用于慢性乙型肝炎的抗病毒治疗已近10年,研究表明,口服核苷(酸)类似物类药物与干扰素一起,使慢性乙型肝炎抗病毒治疗获得巨大进展.
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核苷(酸)类药物治疗慢性乙型肝炎耐药及其管理专家共识解读
耐药问题是核苷(酸)类药物用于慢性乙型肝炎(慢性乙肝)治疗时面临的大挑战之一.行之有效的耐药预防和管理是提高抗乙型肝炎病毒(简称乙肝病毒,HBV)疗效、缩短疗程、改善预后和减少医疗成本的重要措施.近年相继更新的欧洲、美国、亚太和我国慢性乙肝诊治指南都对核苷(酸)类药物耐药预防和管理提出了新的认识和建议.
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拉米夫定联合胸腺素治疗慢性乙型肝炎效果观察
拉米夫定(贺普丁)是新一代核苷类似物,据国外文献报道,有很强的抑制乙型肝炎病毒复制作用[1],与免疫调节药联合使用能提高抗病毒的效果.我院应用贺普丁联合胸腺素治疗慢性乙型肝炎82例,本文总结其抗病毒效果及近期疗效,报告如下.
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阿德福韦酯致范可尼综合征1例并文献复习
慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染严重威胁人类健康,每年约有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和肝细胞癌等,是构成全球疾病死亡的重要因素之一[1]。核苷(酸)类似物是有效抑制HBV复制、减轻肝脏炎症、延缓肝硬化进展及其并发症发生的重要药物。近年来有关阿德福韦酯导致肾损害的报道日渐增多,现报道阿德福韦酯致范可尼综合征(FS)1例并文献复习。
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核苷类似物治疗慢性乙肝临床应用与耐药预防
慢性乙型肝炎是一种难治性疾病,全球60亿人口中,至少有4亿人口感染了乙型肝炎病毒(HBV),仅中国就有1.2亿HBV携带者.而且在某些不利的因素下,慢性乙肝病毒感染者中的5%~10%终将发展为肝癌(HCC),30%发展为肝硬化,而肝硬化患者中的23%会在5年内发生肝功能衰竭.因此,这种疾病已经成为一个全球性的健康问题,备受关注.
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第011例乙肝肝硬化核苷(酸)类似物相关多重耐药突变1例分析
1病例资料患者,女性,58岁.1980年查体发现乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阳性,肝功正常,未进一步诊疗和复查.于1986年出现肝功反复异常[丙氨酸氨基转移酶(ALT)57~106 U/L],间断保肝治疗,效果欠佳.于2004年5月B超检查提示:肝硬化、脾大,给予拉米夫定(LAM)100 mg/d抗病毒治疗,此时ALT 69 U/L,HBsAg、乙型肝炎e抗原(HBeAg)和抗.