首页 > 文献资料
-
大鼠皮肤创伤愈合瘢痕的三维重建和体积定量
目的 对大鼠皮肤创伤愈合形成的瘢痕进行三维重建和体积定量,探索其在创伤愈合实验研究瘢痕评价中的应用.方法 Wistar大鼠8只,麻醉下制背部直径8 mm的圆形全层皮肤缺损.术后1个月取愈合区皮肤常规固定,制备等距连续石蜡切片(切片间距为200 μm),HE染色.光镜下采集组织学照片,依据瘢痕的形态学特征圈定瘢痕图像.利用Imaging-Sur3D专用计算机软件对瘢痕进行三维重建和体积计算.结果 每份标本获得含瘢痕组织的等距连续切片15~20张,经三维重建得到愈合组织中瘢痕的立体形态,似呈残存树桩样,中央较大,周边呈不规则根状伸入正常真皮.瘢痕平均体积为4.292±1.009 mm 3.结论 三维重建技术重现了皮肤创伤愈合中瘢痕的真实形态,获得的体积参数可作为创伤愈合实验研究中瘢痕评价的定量指标.
-
大鼠皮肤创面愈合过程中IGF-1的定量学研究
目的:研究胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-1)对大鼠皮肤创面愈合过程的影响.方法:以大鼠为动物模型,在伤后1d、4d、7d、11d、14d、和1 7d取材,利用免疫组织化学和图像分析技术,研究皮肤创伤愈合过程中创面内源性IGF-1、增殖细胞核内抗原(PCNA)及Ⅰ、Ⅲ型胶原的动态变化,以及与创面愈合相关因素成纤维细胞之间的关系.结果:在皮肤创伤愈合过程中,内源性IGF-1表达量的变化与成纤维细胞活动、PCNA表达及Ⅰ型胶原的变化基本相符,与Ⅲ型胶原的变化关系不密切.结论:IGF-1与成纤维细胞增殖、活跃程度密切相关,是影响创面愈合的重要因子之一.
-
皮肤创伤修复过程中TGF-β1及胶原表达变化的定量研究
目的 探讨皮肤创伤修复过程中TGF-β1的表达、成纤维细胞增殖、凋亡和胶原表达的动态变化及其意义.方法 清洁成年雄性C57小鼠30只随机分为对照组和模型组,在小鼠的背部造成直径为0.4 cm的圆形全层皮肤缺损创面.于伤后1、4、7、14 d,取创面及周边的组织,常规制片HE染色,采用免疫组化染色观察创面及边缘TGF-β1和PCNA的表达,采用TUNEL法检测细胞凋亡及用天狼猩红染色方法显示胶原表达变化情况.结果 ①TGF-β1的表达于伤后1d组创缘处表皮细胞呈阳性,阳性率为19.87%±1.16%,成纤维细胞中表达较弱;伤后4d组成纤维细胞中呈较强阳性,阳性率为37.15%±3.15%,伤后7d组成纤维细胞阳性率达47.66%±3.71%;14 d组成纤维细胞呈弱阳性,阳性率为10,08%±0.12%.②PCNA于伤后1d组阳性率为12.1%±1.12%;伤后4d组阳性率为34.3%±2.31%,以成纤维细胞增殖为主;伤后7d组成纤维细胞增殖显著,阳性率达58.5%±4.73%;创后14 d组细胞增殖明显减弱,阳性率为6.9%±0.12%.③细胞凋亡检测示伤后1d组皮肤创面及边缘细胞凋亡率为36.15±2.47%;伤后4d凋亡率为27.15±2.30%,伤后7d细胞凋亡率为11.71±0.98%,伤后14d凋亡率达47.38%±2.16.④伤后1d组胶原纤维的表达强度基本同对照组,伤后4d胶原表达开始增高,7d显著增高,于14 d胶原表达基本同对照组.结论 在皮肤缺损创面修复过程中,TGF-β1的表达与成纤维细胞增殖及胶原合成呈正相关.
-
1例艾-唐综合征患者皮下静脉穿刺后右上肢巨大肌间隙血肿
艾-唐综合征(Ehlers-Danlos syndrome)是一组遗传性结缔组织疾病,它们的共同特征是皮肤和关节的高伸展性、易挫伤,组织的易碎性及创伤愈合差.根据临床特征、遗传性、生物特性,本综合征分10型.威胁生命的并发症为自发性动脉撕裂、胃肠穿孔,尤其易发生于瘀斑型(Ⅳ型)[1].本文报道1例艾-唐综合征的患者,静脉穿刺采血后上肢肌间隙血肿的临床观察及护理经过.
-
结缔组织生长因子与骨重建
结缔组织生长因子(CTGF)是即刻早期基因(CCN)家族的成员之一,早由Bradham等[1]在1991年用亲和色谱法从人脐静脉内皮细胞条件培养基中发现,研究表明,CTGF mRNA及其蛋白产物可在内皮细胞、成纤维细胞、软骨细胞、血管平滑肌细胞和成骨细胞等多种细胞中表达,在机体多种生物学过程,如胚胎发育、瘢痕组织、恶性肿瘤、软骨发生和诱导成骨细胞的分化、创伤愈合及促进多种细胞的黏附和运动等方面发挥着重要作用.
-
免疫肠内营养的临床应用及评价
肠内营养因其更符合生理,并能改善患者免疫状态,保护肠黏膜屏障以及应用方便、价格低廉等优点而被临床广泛应用[1-4].近年研究表明,在营养配方中添加特殊营养素,如谷氨酰胺、精氨酸、ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 poly-unsaturated fatty acid,ω-3 PUFA)、膳食纤维或核苷酸等,组成具有免疫药理作用的营养制剂,在提供能量的同时可调控机体免疫反应,避免有害或过度的炎症反应、保护肠屏障功能、促进创伤愈合,此称为免疫营养[5-6].
-
胃肠道肌纤维母细胞
0引言肌纤维母细胞由纤维母细胞分化而来,首先在肉芽组织中发现.目前认为胃肠道黏膜下肌纤维母细胞(gastrointestinaisubepithelial myofibroblast cells ISEMFs)和Cajal间质细胞(ICC)是胃肠道肌纤维母细胞的两种类型.肌纤维母细胞在胃肠道的器官发生、创伤愈合、控制肠道运动以及一些肠道炎症性疾病和肿瘤性疾病的发生、发展中起重要作用,通过分泌炎症因子、抗炎因子、化学增活素、生长因子、细胞外基质蛋白以及蛋白酶影响器官发生、细胞分化、炎症反应、组织器官的创伤修复以及纤维化形成过程.
-
内皮祖细胞生物学特性及其在心血管系统中的作用
血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是指具有特异性归巢于血管新生组织并能分化增殖为成熟内皮细胞的一群干/祖细胞,是中胚层卵黄囊血岛原血干细胞(hemangioblast)向内皮细胞分化过程中的一个过渡阶段.该细胞在出生后的新生血管发生/生成中起重要作用.实验证实成人外周血存在能分化为血管内皮细胞的EPCs[1],并且由此生成的内皮细胞还在缺血性疾病和创伤愈合中发挥重要作用[2].
-
血管内皮祖细胞的研究进展
Asahara等[1]1997年首次在Science杂志提出血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)以来,有关EPC的研究日益增多.EPC是血管内皮细胞的前体细胞,又称为血管母细胞(angioblast),不仅参与胚胎血管生成,而且近几年研究发现,EPC也参与出生后的血管发生过程,提示它在缺血性疾病、防止血管再狭窄、血管创伤愈合等过程中的重要治疗作用和广阔的临床应用前景.本文就目前有关EPC的来源、发育分化、动员与归巢及其应用研究作一综述.
-
小鼠全层皮肤创伤愈合过程中基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4基因表达的研究
目的:研究小鼠全层皮肤创伤愈合过程中创面基质细胞衍生因子-1(stroma-cell derived factor-1,SDF-1)及其受体CXCR4的基因表达情况.方法:建立小鼠背部皮肤正中近颈侧1.5 cm×1.5 cm的正方形皮肤全层缺损模型,分别于伤后1、2、3,4,5、7、10和14 d获取创缘组织,应用半定量逆转录一聚合酶链反应检测损伤后各时间点创面SDF-1及CXCR4的mRNA表达,并观察组织病理学变化.结果:伤后1~3 d创面有大量炎症细胞浸润,4 d时有肉芽组织形成,5 d可见上皮细胞覆盖创面,7 d时创面周围明显上皮化,14 d创面基本完全愈合.SDF-1及CXCR4在创面愈合过程均呈双峰表达,SDF-1基因表达于伤后1 d明显增高(P<0.01),随后下降,于伤后3 d达低,随后再次升高,于伤后5 d达峰值(P<0.01),然后下降,14 d时接近伤前值.CXCR4基因表达于伤后1 d升高,然后继续升高,至伤后5 d达峰值,随后下降,于伤后10 d表达少(P<0.01),伤后14 d表达再次增加(P<0.01).结论:SDF-1/CXCR4轴参与了创伤愈合的炎症反应期和增殖期的愈合过程,在皮肤组织创伤愈合过程中起着重要作用.
-
不同照射方式对放射复合伤大鼠伤口愈合的影响
目的:建立放射复合伤伤口愈合模型,观察不同照射方式对放射复合伤伤口愈合的影响.方法:清洁级Wistar大鼠90只,按体重随机分为单纯创伤(单伤组)、全身照射+创伤(照伤组)和创伤+伤口局部照射(伤照组)3组.照射采用60Co γ-源单次全身照射5 Gy(照伤组)或单次伤口局部照射25 Gy(伤照组).血细胞计数仪观察外周血像的变化;麦格-姬姆萨(MGG)方法检测外周血淋巴细胞凋亡指数;图像分析仪测量伤口愈合面积;病理学观察各组大鼠伤口愈合的动态变化.结果:与单伤组比较,照射后两组体重明显下降,照射后3~28 d差异均有显著性,而伤照组体重于照射后3~28 d较单伤组和照伤组均明显降低;照射后不同时间两照射组伤口均较单伤组愈合延迟,伤照组于照后3、7、10和15 d与单伤组比较差异有显著性,且照射后15和21 d伤口面积明显大于照伤组.与单伤组比较,两照射组动物外周淋巴细胞凋亡指数在照射后3 d即明显升高,两组均于照射后15 d升至高,分别约为单伤组的1.49和1.62倍(P<0.01);而WBC计数结果表明,照射后1~28 d两个照射组WBC均显著低于单伤组(P<0.01).病理学观察表明,照射后早期伤口出血坏死较为明显;中期伤口区肉芽组织生机不良,毛细血管较少;晚期伤口愈合较慢,伤照组较照伤组愈合延迟4 d,较单伤组延迟1周左右.结论:全身照射和伤口局部照射均可使伤口愈合明显延迟,创伤后再局部照射伤口愈合延迟更为明显,约较单伤组延迟1周左右.
-
基质金属蛋白酶及其抑制因子在增生性瘢痕中的表达特征及意义
目的:研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制因子(TIMP-2)在增生性瘢痕和正常皮肤中的表达特征.方法:用免疫组化技术检测这三种蛋白酶在12例增生性瘢痕和6例正常皮肤中的表达变化规律.结果:在正常皮肤中,MMP-2、MMP-9和TIMP-2的阳性率分别为(2.13±2.36)%、(16.25±18.72)%、(25.38±12.47)%.在增生性瘢痕中,三种蛋白的阳性细胞率明显升高(P<0.01),其中MMP-2和MMP-9主要定位于表皮细胞和成纤维细胞上,含有TIMP-2蛋白的阳性细胞也主要为表皮细胞和成纤维细胞.结论:MMP-2、MMP-9和TIMP-2可能对皮肤的发生、结构功能的维持以及创伤后修复起重要作用.
关键词: 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制因子 增生性瘢痕 创伤愈合 皮肤 -
创伤早期伤口液作用真皮多能干细胞差异表达cDNA文库的构建
目的:研究创伤早期伤口液作用前后真皮多能干细胞基因表达的变化,探讨真皮多能干细胞参与创伤修复启动的分子机制.方法:取伤后1d伤口液作为创伤修复启动微环境,刺激真皮多能干细胞,24h后提取总RNA为实验方(tester),未予刺激的真皮多能干细胞总RNA为驱动方(driver).实验方、驱动方总RNA由SMART cDNA方法合成cDNA,然后用抑制消减杂交(SSH)方法获得消减杂交产物.消减杂交产物克隆到T载体构建消减文库.对部分克隆进行杂交筛选及序列比对.结果:消减杂交文库挑取615个克隆进行PCR扩增,阳性率约为97%.取其中48个克隆进行反向Northern杂交,获得5个差异表达基因.经Genebank检索,这些差异表达基因与已知序列有较高同源性,其中大多为与创伤修复相关的基因.结论:我们成功构建了创伤早期伤口液刺激前后大鼠真皮多能干细胞差异表达cDNA文库,并筛选、克隆出部分与真皮多能干细胞参与创伤修复相关的差异表达基因.
-
间充质干细胞用于慢性创面治疗的作用途径及其相关机制
间充质干细胞(MSCs)是一类存在于大多数成体器官中的类成纤维细胞群,在特定条件下能够向不同的谱系细胞分化。Falanga等[1]将 MSCs 与造血细胞共同培养,发现 MSCs可以促进造血干细胞的增殖,提示 MSCs 具有分泌生物活性因子并调节其他细胞功能的能力。MSCs 在进入创面或是其他损伤组织时会被激活,起到促进创伤愈合和改善局部缺血的作用。目前 MSCs 作用于创面的机制尚未完全清楚,但MSCs在调节免疫应答和免疫排斥反应方面的功能,以及在促进创面愈合和减少瘢痕形成等方面的重要作用均已得到证实。本文就MSCs治疗皮肤慢性难愈性创面的常用方法及其在细胞及分子水平上可能涉及的作用机制综述如下。
-
表皮干细胞及其信号通路的研究进展
1 表皮干细胞特点及其在创伤愈合中的作用皮肤是人体大的器官,表皮位于皮肤外层,具有自我更新能力的组织(约每个月更新1次)[1].近年来,人们逐渐认识到存在于上皮组织的成体干细胞ESCs与皮肤的发生、修复、改建以及与上皮源肿瘤、皮肤免疫性疾病有着密切关系.在正常成人表皮基层主要含有三种细胞亚群维持着其新陈代谢:①表皮干细胞;②表皮干细胞的子代细胞-短暂扩充细胞(TA,类似定向祖细胞);③有丝分裂后分化细胞(Postmitotic differentiating cells, PM-D Cells),表皮脚及毛囊隆突部表皮干细胞向表皮迁移分化为表皮祖细胞,为表皮新陈代谢提供细胞源;向下迁移,为毛囊循环周期提供细胞源.
-
深Ⅱ度烫伤大鼠创面血管内皮细胞增殖与凋亡变化的初步研究
目的:观察大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中创基微小血管内皮细胞增殖与凋亡的变化特征,探讨血管的形成与退缩在创伤修复中的作用.方法:利用大鼠5%深Ⅱ度烫伤模型,将72只Wistar大鼠随机分为正常对照和单纯烫伤两组.于伤后0.5d、1d、3d、7d、14d和21d采取创面皮肤标本,HE病理学染色和免疫组织化学技术检测创面组织真皮内血管内皮细胞PCNA和TUNEL的表达变化规律.结果:深Ⅱ度烫伤的大鼠伤后3d,创面出现少量的肉芽组织,7d时肉芽组织已充满创面,再上皮化速率为30%,14d的再上皮化率达70%,至21d,创面完全闭合,真皮内小血管的数量减少.大鼠烫伤后3d,创面基底的真皮组织内出现PCNA阳性的血管内皮细胞,随后阳性表达逐渐增多,14d时达到高峰.至伤后21d,PCNA的阳性表达略有下降.而创伤愈合初期罕见TUNEL阳性的细胞,21d时,TUNEL标记阳性的细胞显著增多.结论:烫伤大鼠创面中血管内皮细胞的增殖与凋亡活动与创面的愈合进程有密切的关系.血管形成与退缩在时程上协调变化是组织正常修复的重要步骤.
-
血管抑素、bFGF与骨肉瘤血管形成
血管生成是微血管内皮细胞的一系列连续过程.生理性血管的生成对于胚胎发育、创伤愈合和月经周期是必需的,在时间性和空间性上都受到严密调控.而肿瘤血管生成则是持续性、不受控制和无序的.
-
碱性成纤维细胞生长因子与脊髓损伤
脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是临床上常见的疾病,且致瘫率高,严重地危及人类健康.脊髓损伤与很多生长因子有关.研究表明,碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的生物学作用极其广泛,它在胚胎发育、血管生成、促进创伤愈合与组织修复、促进组织再生及神经系统生长发育等许多方面发挥着重要的生物学调节作用[1].现有关bFGF 的研究不断深入,并取得令人鼓舞的成果.本文就bFGF在脊髓中的表达及bFGF对脊髓损伤的作用等方面的研究近况作一综述.
-
胶原与胶原酶
在烧伤、创伤或溃疡的愈合过程中,必然有结缔组织参与,而其中的主要成份即为胶原纤维;胶原的分解又需胶原酶的存在,其分解程度常用胶原酶的活性来表示.因此,对胶原和胶原酶的研究,有利于了解创伤愈合中的瘢痕增殖程度.
-
碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与创伤愈合
创伤愈合是一复杂生物学过程,通常认为是由进入伤口的成纤维细胞增殖、分化和合成分泌,细胞外基质的纤维化,新生血管长入伤口的血管化和表皮细胞增生覆盖创面的再上皮化等综合作用的结果,而在愈合过程中产生的生长因子,包括bFGF,大多对皮肤伤口的纤维化、血管和再上皮化有介导和调控作用,可促进愈合.现将bFGF与创伤愈合的关系简要介绍如下: