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下唇硬化性汗腺导管癌一例
患者女,72岁.5年前无明确诱因发现右下唇有一肿物,无痛痒不适,未做任何处理.近1年来肿物逐渐长大,遂于2002年3月25日来我院就诊.体检:右下唇可见1个2.5 cm×3.0 cm肿物,质硬,不活动,与表面皮肤粘连,无压痛,表面皮肤正常.实验室检查未见异常,胸部X光检查未见异常.临床诊断:右下唇皮脂腺囊肿.病理检查:皮肤标本1.5 cm×1.0 cm×1.2 cm,真皮明显增厚0.5~0.7 cm,未见囊腔.
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外源性bFGF对深Ⅱ度烫伤大鼠创面MMP-2、MMP-7和TIMP-2的影响
目的:观察大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-7与金属蛋白酶组织抑制因子-2(tissueinhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2)的变化以及创面外用bFGF对两者的影响,认识基质金属蛋白酶与抑制因子对创面愈合的作用.方法:78只Wistar大鼠随机分为正常对照、单纯烫伤和bFGF治疗三组.利用大鼠30%深Ⅱ度烫伤模型,于伤后3h、6h、1d、3d、7d和14d采取创面皮肤标本,用免疫组织化学染色检测创面组织真皮内成纤维细胞MMP-2、MMP-7和TIMP-2的表达变化情况.结果:烫伤大鼠创面中细胞外基质活动影响皮肤的胶原沉积.伤后1d MMP-2/MMP-7表达增多,随后略有下降,7d时再次达到高峰.伤后TIMP-2的表达与前者的表达一致.局部外用bFGF后,创伤初期(3h~6h)组织中MMP-2/MMP-7的表达无显著变化,1d~14d,MMP-2/MMP-7和TIMP-2阳性表达强于对照组.结论:MMPs和TIMPs的表达变化是组织修复的重要步骤,bFGF加速创面愈合的过程与MMP-2/MMP-7和TIMP2的表达密切相关.
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深Ⅱ度烫伤大鼠创面血管内皮细胞增殖与凋亡变化的初步研究
目的:观察大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中创基微小血管内皮细胞增殖与凋亡的变化特征,探讨血管的形成与退缩在创伤修复中的作用.方法:利用大鼠5%深Ⅱ度烫伤模型,将72只Wistar大鼠随机分为正常对照和单纯烫伤两组.于伤后0.5d、1d、3d、7d、14d和21d采取创面皮肤标本,HE病理学染色和免疫组织化学技术检测创面组织真皮内血管内皮细胞PCNA和TUNEL的表达变化规律.结果:深Ⅱ度烫伤的大鼠伤后3d,创面出现少量的肉芽组织,7d时肉芽组织已充满创面,再上皮化速率为30%,14d的再上皮化率达70%,至21d,创面完全闭合,真皮内小血管的数量减少.大鼠烫伤后3d,创面基底的真皮组织内出现PCNA阳性的血管内皮细胞,随后阳性表达逐渐增多,14d时达到高峰.至伤后21d,PCNA的阳性表达略有下降.而创伤愈合初期罕见TUNEL阳性的细胞,21d时,TUNEL标记阳性的细胞显著增多.结论:烫伤大鼠创面中血管内皮细胞的增殖与凋亡活动与创面的愈合进程有密切的关系.血管形成与退缩在时程上协调变化是组织正常修复的重要步骤.
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毛囊不同发育阶段表皮干细胞NK-1受体表达特征的实验研究
目的:通过观察不同阶段表皮干细胞表面感觉神经肽SP的受体NK1的表达特征与鼠毛囊发育间的相关性,研究表皮干细胞分化发育为毛囊时感觉神经肽的作用,为研究通过神经调控诱导表皮干细胞向毛囊分化奠定基础.方法:实验取胎龄12.5~13.5d胎鼠、1~2d新生鼠、成鼠三组皮肤标本,以β1整合素及K19双标阳性表达定位表皮干细胞,免疫组化方法定性、半定量分析NK1受体表达.结果:不同发育阶段鼠表皮干细胞表面均有NK1受体表达,其阳性表达率与ESC双标阳性表达率无明显差异;胎鼠及新生鼠NK1受体表达率同成鼠之间存在明显差异,提示鼠毛囊发生期前ESC的NK1受体表达明显高于毛囊静止期.结论:感觉神经肽在由ESC分化发育为毛囊过程中具有重要启动及调控作用.
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皮肤磨削术前后组织中KGF mRNA的表达
皮肤磨削术在临床上有着较广泛的应用,但是其创面修复的机理至今尚未完全阐明。角质形成细胞生长因子(KGF)由Rubin等在1989年分离鉴定[1],它特异性地作用于上皮细胞,促进其生长增殖和分化,因而探讨其在术后创面上皮再生过程中的作用很有意义。我们抽提了12例患者手术前后皮肤组织中的总RNA进行RNA印迹法(Northern blot),结果如下。 一、对象和方法 1.对象:为我科住院病人,供皮区为选磨削术野中较大面积的瘢痕区域,3个月内未患任何皮肤疾患;年龄21~34岁,均为男性;痤疮瘢痕9例,水痘瘢痕2例,外伤性瘢痕1例;病程5~12年。取材方法:标本为全层皮肤,分别在术前和术后24、72、120 h 以切口为中心取全层皮肤,标本离体后立即置液氮中保存,实验前去除缝线用电子天平计重。 2.方法:①试剂:Trizol: Gibco公司产品; Agarose, Prime -α-Gene Labeling System:Promega公司产品。②人KGFcDNA探针的制备:人KGFcDNA片段由中国人民解放军烧伤中心实验室惠赠,含有人KGFcDNA全长585bp中的345bp。③方法:所有标本按文献[2]进行总RNA抽提,吸取l0 μg总RNA(约4.5 μl),加入2.0 μl 5X甲醛凝胶电泳缓冲液、3.5 μl 37 %甲醛和10.0 μl甲酰胺,在65℃温育15 min,进行甲醛变性凝胶电泳,在20XSSC中经真空转移0.5 h至尼龙膜上,尼龙膜晾干后在80℃烘烤0.5~2h固定,用6XSSC、2XDenhardt和1 %SDS在68℃预杂交1~2 h后,将用α-32P-dATP标记的人KGFcDNA探针加入杂交管在杂交炉中68℃杂交16~24 h,用1XSSC、0.1 %SDS洗膜,再用0.1XSSC、0.1 %SDS洗膜后用X光片放射自显影,于-70℃曝光6 h~2 w。显影后用密度扫描仪分析结果。内参照探针选用甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)。 3.统计学分析:实验结果采用方差分析,再行Newman-Keuls检验。 二、结果 1.12例正常皮肤标本和术后皮肤标本的总RNA经变性凝胶电泳后显示清晰的5S、28S和18S条带(图1)。 2.每份标本约10 ug总RNA用于RNA印迹法,为1例患者术前和术后1、3、5 d皮肤组织中KGF cDNA探针杂交后曝光2 w的显影,1泳道为术前组织杂交显影,2泳道为术后1 d皮肤组织杂交显影,3泳道为术后3 d皮肤组织杂交显影,4泳道为术后5 d皮肤组织杂交显影,术后3 d皮肤组织的KGF杂交条带辉度明显强于术前和术后1 d、5 d的皮肤标本(图2)。
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CK15、CD29阳性细胞在不同类型皮肤的分布
目的 研究皮肤干细胞相对特异性标记物CK15、CD29阳性细胞在人体不同类型皮肤的分布特点及干细胞的分布规律,探讨其临床意义.方法 收集人体正常的头皮、包皮及躯体、脚掌的皮肤标本各6例,依次设为A、B、C、D四组.分别行石蜡切片后做HE染色和CK15、CD29免疫组化染色观察,统计CK15、CD29染色阳性细胞的PU值并行统计学处理.结果 CK15、CD29阳性细胞的含量:头皮的毛囊隆突部和包皮的表皮基底层含量多,躯体皮肤的表皮基底层其次,脚掌的表皮基底层几乎没有;D组与A、B、C组比较,其差异有统计学意义(P<0.01).CK15、CD29阳性细胞的分布特点:在头皮主要位于毛囊隆突部,在包皮和脚掌皮肤主要位于表皮基底层,在躯体皮肤主要位于表皮基底层钉突部.结论 CK15、CD29标记的皮肤干细胞在不同类型皮肤的分布和数量均明显不同.此分布特点可能为临床上治疗创面愈合提供实验依据.
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皮肤老化的研究:看得见的科学
皮肤老化的主要特征是皮肤脆弱和容颜衰老.皮肤脆弱可导致许多老年人在日常生活中出现莫名的皮肤划伤和淤青等[1];容颜衰老所产生的皮肤皱纹和松弛不仅是美观问题,也影响到了自信及心理健康.一般的化妆品仅起到皮肤保湿和遮盖皱纹的作用,而现代皮肤老化的研究是采用基础医学和制药的方法,其终目的是发明安全有效的方法和药物化妆品,预防和治疗皮肤结构和功能的下降.皮肤是易活体取材的组织,而皮肤老化的程度可以被肉眼直接观察,因此皮肤老化的基础研究和治疗手段的研发是紧密结合皮肤标本和临床观察,是转化医学研究的典型范例.
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寻常型银屑病患者CD1a+树突状细胞的定量定位研究
CD1a+树突状细胞(CD1a+dendriticcell,CD1a+DC)是表皮中至关重要的抗原递呈细胞,具有独特的免疫表型和运动特点,在银屑病的不同时期CD1a+DC的表达数量可能不一样。我们研究了银屑病进行期、静止期、消退期皮损和非皮损区中的CD1a+DC表达的意义。一、资料和方法(一)一般资料:2例正常人皮肤标本取自外科手术上肢相同部位皮肤;6例寻常型银屑病患者标本取自于门诊志愿患者(发病半个月内,未进行任何治疗,实验期间用安慰剂治疗),分别在进行期、静止期和消退期取皮肤标本,取材部位同正常对照皮肤。用无菌环形皮钻取皮,离体30min内OCT包埋冷冻。患者均为男性,年龄25~52岁,平均38.5岁,均为上肢皮肤。SABC免疫组化染色试剂盒购自武汉博士德生物公司,CD1a鼠单抗为Pharmingen公司产品,HLA-DR鼠单抗为MaximBiotech产品。
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erbB4和PTEN在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达
目的 观察并探讨erbB4和FFEN在皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的蛋白表达及其临床意义.方法 采用免疫组化Elivision法,检测52例皮肤鳞癌(其中11例伴有淋巴结转移,41例无转移)、10例正常人皮肤标本中erbB4和VIEN蛋白表达.结果 皮肤鳞癌组中39例erbB4蛋白呈阳性表达,阳性率为75%;对照组中仅1例阳性表达,两组阳性率比较,x2=12.77,P<0.01;皮肤鳞癌患者中在有淋巴结转移组erbB4蛋白阳性表达率(100%)明显高于无淋巴结转移组(68.29%),两组阳性率比较,P<0.05.PTEN蛋白在皮肤鳞癌组中25例阳性表达,阳性率为48.08%,对照组10例均为阳性表达,两组阳性率比较,x2=9.20,P<0.01;在鳞癌高分化组及中低分化组中的阳性率分别为78.57%、36.84%,两组差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移组PTEN阳性率(9.09%)明显低于无转移组(58.54%)(P<0.01).皮肤鳞癌erbB4蛋白与PTEN蛋白表达呈负相关(r=-0.42,P<0.01).结论 erbB4与PTEN可能参与了皮肤鳞癌的发生、恶性进展及转移.