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Ox-LDL增加人脐静脉内皮细胞分泌白三烯C4
氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)重要的危险因素之一.它可以直接损伤内皮细胞,也可刺激内皮细胞表达大量的黏附分子、趋化因子,促使单核细胞黏附于内皮细胞、趋化单核细胞进入内膜和促进泡沫细胞形成,从而导致AS的发生.
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猿猴病毒40T抗原转化的人脐静脉内皮细胞系PUMC-HUVEC-T1的建立
目的 建立猿猴病毒40(SV40)T抗原转化的人脐静脉内皮细胞(HVUEC)模型,为内皮研究提供可利用资源.方法 分离人脐静脉内皮细胞,原代培养.感染含有SV40大T、小T抗原的慢病毒,连续传代培养.对感染后的HUVEC,RT-PCR检测大T的表达,免疫细胞化学检测vWF、CD31、CD34的表达及结合凝集素能力,透射电镜观察内皮细胞的超微结构,Matrigel检测管状成型,进行染色体核型分析,皮下接种BABL/c-nu裸鼠检测致瘤性,PCR法进行种属鉴定及支原体检测,短串联重复序列(STR)检测鉴定细胞身份.结果 转化后的人脐静脉内皮细胞命名为PUMC-HUVEC-T1,扁平多角状,汇合时典型铺路石排列,体外传代40代以上(1:3~4);细胞中有SV40LT mRNA的表达;vWF、CD31、CD34表达均阳性,可结合荆豆凝集素-1(UEA-1);电镜可见WP小体;不同代数细胞核型正常稳定,裸鼠体内接种不成瘤.PUMC-HUVEC-T1种属鉴定为人源性,STR结果与原代HUVEC一致,无支原体的污染,国家实验细胞资源共享平台收藏.结论 建立了易获得、背景清楚、质量可靠的SV40 T抗原转化的HUVEC细胞系PUMC-HUVEC-T1.
关键词: 人脐静脉内皮 SV40 反转录-聚合酶链反应 免疫组织化学 透射电镜 -
结缔组织生长因子与骨重建
结缔组织生长因子(CTGF)是即刻早期基因(CCN)家族的成员之一,早由Bradham等[1]在1991年用亲和色谱法从人脐静脉内皮细胞条件培养基中发现,研究表明,CTGF mRNA及其蛋白产物可在内皮细胞、成纤维细胞、软骨细胞、血管平滑肌细胞和成骨细胞等多种细胞中表达,在机体多种生物学过程,如胚胎发育、瘢痕组织、恶性肿瘤、软骨发生和诱导成骨细胞的分化、创伤愈合及促进多种细胞的黏附和运动等方面发挥着重要作用.
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糖基化终产物对人脐静脉内皮细胞信号转导物DAG的影响
近年来,有关细胞内信号转导与细胞功能的研究越来越引起人们的关注,二酰基甘油是细胞内重要的信号转导系统[1].本研究采用薄层层析、放射自显影和放射标记方法检测糖基化终产物(AGEs)对人脐静脉内皮细胞信号转导物DAG含量影响以及抗氧化剂VitE的干预保护作用,以期揭示糖尿病病人发生微血管病变的分子机制和预防措施.
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罗非昔布对氧化低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶-1表达的影响
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高迁移率族蛋白1对人脐静脉内皮细胞骨架蛋白及通透性的影响
高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1 protein,HMGBl)是一种重要的晚期炎症因子[1],参与急性胰腺炎的全身炎症反应[2],而急性胰腺炎患者血管内皮通透性增加是导致全身毛细血管渗漏、液体正平衡的直接原因.
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Ephs/ephrins的结构功能与恶性脑胶质瘤
受体酪氨酸激酶 (receptor tyrosine kinases, RTK)家族成员 Ephs及其配体ephrins在胚胎发育尤其是中枢神经系统的发育中的作用是目前的研究热点之一.近年来,学者们对Ephs 和 ephrins诱导恶性肿瘤的发生发展过程产生了极大的兴趣.早在1990年,筛选上皮细胞cDNA文库时EphA2首次被发现,同年,ephrinA1作为一种新型肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-a,TNF-α)被发现,可诱导人脐静脉内皮细胞基因产物产生[1].但后来才发现ephrinA1是EphA2的配体.自此,EphA2 和 ephrinA1在恶性肿瘤的发病机制中经常同时出现共同发挥作用,具体机制复杂,至今还没有完全阐明.本文重点综述了Ephs及其配体ephrins的结构、生理功能及在恶性脑胶质瘤中的作用,Ephs-ephrins系统有望成为恶性肿瘤诊断和特异靶向治疗的新靶点.
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银杏叶提取物GBE50及其主成分总黄酮对缺氧致人脐静脉内皮细胞凋亡及活性氧自由基生成的作用\银杏叶提取物GBE50对抗缺氧致内皮功能障碍的影响及部分机制探讨
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NF-κB decoy对人脐静脉内皮细胞组织因子表达及凝血因子Ⅶ激活抑制作用研究
用decoy策略调控核因子κB(NF-κB)调节组织因子(TF)表达及相应的因子Ⅶ(FⅦ)活化,探讨冠心病新的防治方法.
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氧化LDL和抗氧化剂对人脐静脉内皮细胞信号转导物DAG的影响
低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)发生氧化修饰形成氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, OX-LDL)是LDL致动脉粥样硬化(arteriosclerosis,AS)的关键步骤.
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糖基化终产物促进培养的人脐静脉内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白-1
目的:糖尿病血管并发症如动脉粥样硬化(Atherosclerosis, AS)等是糖尿病主要的致死致残原因.高血糖状态下非酶糖基化可使蛋白质终形成不可逆的糖基化终产物(advanced glycosylation end products, AGEs).
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复方丹参滴丸对过氧化氢损伤的血管内皮细胞的保护作用与机制
目的:观察复方丹参滴丸对过氧化氢(H2O2)损伤人脐静脉内皮细(HUVEC)损伤的保护作用,探讨其对心脑血管疾病治疗的机制,以及在防治心脑血管疾病中的意义.方法:用0.1 mmol/LH2O2制造HUVEC损伤模型,按分组分别把不同浓度的丹参滴丸(0.5g/L、0.25g/L、0.1g/L)于损伤前、损伤后加入,分别测定细胞活力(MTT法)即观察滴丸对H2O2损伤内皮细胞活性的影响;硫代巴比妥酸法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA),硝酸酶还原法测定细胞培养液中一氧化氮含量;免疫细胞化学法观察内皮细胞NOS2 NOS3,NF-κB的表达情况.
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复方丹参滴丸对人血管内皮细胞功能的保护作用
目的:观察复方丹参滴丸对细菌内毒素(LPS)所致人血管内皮细胞损伤的影响,以探讨其对心脑血管疾病治疗的机制.方法:人脐静脉内皮细胞培养,建立脂多糖损伤模型(以10 mg/L的LPS培养液作为损伤浓度培养细胞12 h),按分组分别把不同浓度的丹参滴丸(1g/L、0.5g/L、0.25g/L、0.1g/L)于损伤前、损伤后加入,分别进行细胞活力、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、内皮素(ET-1)、细胞内钙的测定及形态学指标观察.
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血管内皮细胞在切应力刺激后Toll基因的表达变化
目的:本室先前的实验观察到原代培养的贴壁融合脐静脉内皮细胞层流刺激后,IL-8 mRNA的增强表达和NF-κB的活化.本文探讨Toll蛋白在切应力诱导血管内皮细胞表达趋化细胞IL-8基因表达中的可能作用.方法:从正常对照和层流刺激后的原代培养的人脐静脉内皮细胞提取总RNA,根据TLR-2和TLR-4cDNA序列设计特异引物,应用RT-PCR技术扩增其cDNA片段,并经DNA序列测定于以证实.RT-PCR产物经凝胶电泳后,在凝胶成像分析仪上进行电泳条带的灰度半定量分析.