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1例早幼粒细胞白血病硬脊膜外血肿致双下肢瘫痪的护理
急性早幼粒细胞白血病(APL)导致硬脊膜外血肿(Spinalexlradural hema)双下肢瘫痪较为罕见.我科于1997年3月收治1例APL合并硬脊膜外血肿致双下肢瘫痪患者,经维甲酸,砷剂促分化诱导凋亡治疗30天后,病人双下肢逐渐恢复知觉,由瘫痪转为能扶着站立行走而出院,现将护理体会报告如下.
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心脏传导系统的发生与调节机制的研究进展
心脏传导系统(CCS)是由窦房结、房室结、希氏束、左右束支及其分支组成,它担负着心脏起搏和传导冲动的功能,保证心房心室协同收缩.因此心脏传导阻滞,特别是完全性房室传导阻滞成为先天性心脏病患者术后严重的并发症之一,目前除了安装人工起搏器外没有更好的治疗方法.随着组织工程技术的日益发展及临床患者的迫切需要,CCS损伤修复的研究也逐步铺展开来.组织工程技术包括种子细胞、材料以及构建方法三个方面,然而对于组织工程构建CCS为重要也为棘手的是种子细胞的来源和获取.由于CCS在人体中为心脏特有,终极分化,无扩增能力,体内含量稀少,获取也困难,故无法利用自身CCS细胞来构建组织工程传导束.所以选择替代的种子细胞是至关重要的.针对这一难点,学者们展开了大量深入的研究.众所周知,利用干细胞或者前体细胞,通过一定的方法诱导分化到需要的成熟细胞,是目前组织工程获取种子细胞的重要手段和研究热点.我们要想通过干细胞来分化诱导到传导细胞,首先必须了解CCS细胞的胚胎起源、发育与调节机制.本文就目前为止相关CCS细胞的研究和进展作简要综述.
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全反式维甲酸对Walker-256肝癌细胞分化及凋亡的诱导作用
目的: 观察ATRA对Walker-256肝癌细胞的分化诱导及促进凋亡作用,探讨其作用机制.方法: 在肝癌细胞Walker-256细胞株中加入不同浓度的ATRA(100、10、5、1 μmol/L),培养2 d,荧光倒置显微镜观察细胞形态学变化;MTT比色法检测Walker-256细胞的增殖抑制;流式细胞术分析不同DNA含量的细胞分布,计算细胞凋亡百分率;RT-PCR检测凋亡相关基因Fas、bcl-2 mRNA的表达;Western blot检测Caspase 3、8蛋白的表达.结果: 随着ATRA浓度的递增,Walker-256细胞表现出细胞分化及凋亡的形态学上的改变.ATRA可明显抑制细胞增殖,5和10 μmol/LATRA对细胞增殖抑制为明显,24、48、72 h的增殖抑制率分别为21.86%、57.39%、68.17%和27.23%、80.09%、92.15%,呈浓度及时间依赖性.5和10 μmol/L ATRA对细胞的凋亡诱导率与对照组相比,差异有统计学意义(t=9.61,11.38,P<0.05,0.01).ATRA作用Walker-256细胞后上调Fas表达,下调bc1-2的表达,10 μmol/L ATRA对Fas及bc1-2的调节与对照组相比,差异有统计学意义(t=12.33,10.78.均P<0.05).与对照组相比,10 μmol/LATRA作用48 h后对Caspase 3及Caspase 8酶原剪切活化明显(t=9.76,10.21,均P<0.05).结论: ATRA对Walker-256肝癌细胞具有分化诱导及促进其凋亡的作用.
关键词: 全反式维甲酸 Walker-256肝癌细胞 分化诱导 凋亡 -
细胞分化与食管鳞状细胞癌
食管鳞状细胞癌是一种分化缺陷性疾病,细胞分化在食管鳞癌的发生、发展及治疗中的作用成为肿瘤领域的研究热点.细胞分化异常导致上皮细胞发生恶性转化,是食管鳞癌发生的重要机制之一.目前对于食管鳞癌分化的主要判定方法有形态学指标、细胞周期动力学测定及基因型变化的测定等,细胞分化方面能否取得巨大进展在一定程度上取决于分化标准的认识.随着细胞分子肿瘤学的发展,近来研究方向主要集中在食管鳞癌分化相关基因的筛选验证、基因表达调控机制的探讨以及分化诱导的体外研究等方面.本文从细胞分化角度,对食管鳞癌的研究现状、新进展和前景展望等作综合阐述.
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SOCS3在复发性流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达及意义
复发性流产( RSA)是指连续两次或两次以上的自然流产,发病率占妊娠人群的1%~5%[1],其发病机制非常复杂,包括遗传、内分泌、免疫、解剖、感染等因素[2].辅助性T淋巴(Th)细胞在RSA中作用的研究已经较为广泛,Th1/Th2型细胞因子平衡是调节母胎界面免疫耐受的关键,正常母胎界面以Th2型细胞因子占优势,若Th1/Th2型细胞因子平衡向Th1偏移可导致不良妊娠[ 3].细胞因子信号转导负调控因子3(SOCS3)是一种可被多种细胞因子诱导产生的蛋白分子,已有研究表明,SOCS3对细胞因子信号通路产生负反馈调节,参与T淋巴细胞的分化和免疫调控,是Th2型细胞因子分化诱导者[4].为了解SOCS3是否通过调控Th1/Th2型细胞因子的平衡进而对RSA发挥作用,本研究检测了SOCS3在RSA患者和健康妊娠妇女绒毛及蜕膜组织中的表达,旨在评价SOCS3在维持正常母胎免疫耐受中的作用.
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维甲类化合物R8607对人急性早幼粒白血病NB4细胞的分化及其作用机理
目的研究维甲类化合物R8607对人急性早幼粒白血病NB4细胞的分化诱导作用及其作用机理.方法采用NBT还原能力和细胞形态的方法观察R8607对NB4细胞功能和形态的分化作用,采用竞争性结合的方法测定R8607和维甲酸受体的结合能力并用流式细胞术观察其对细胞周期移行的影响.结果 R8607有抑制NB4细胞的生长并能使细胞的功能和形态发生分化的作用; 对维甲酸受体的3个亚型α,β,γ均有结合作用并将NB4细胞周期移行阻断在G1期.结论 R8607通过维甲酸受体的调节通路将NB4细胞阻断在G1期并诱导细胞发生功能和形态的分化.
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白血病细胞获得性耐药的干预对策研究
白血病耐药性是白血病治疗中的难点,也是目前白血病治疗研究领域的热点之一.本研究项目以人白血病多药耐药细胞K562/ADM细胞为模型,通过系列系统研究工作,提出和建立了白血病细胞获得性耐药的逆转、分化诱导、促凋亡和预防的综合干预策略,取得了如下主要成果.
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金龙胶囊(JLC)对肿瘤细胞诱导分化作用的研究
目的:观察鲜动物药金龙胶囊(JLC)对肿瘤细胞的诱导分化作用.方法:利用体外细胞培养、MTT、NBT染色及吞噬功能测定等方法,观察在不同浓度金龙胶囊作用下人早幼粒白血病细胞系(HL-60)的细胞形态和功能的变化.以维甲酸(RA)作阳性对照.结果:在1×10-6mg/ml浓度以下金龙胶囊在细胞培养中对细胞的存活没有影响.HL60细胞在1×10.和10-9mg/ml作用3或5天后,早幼粒细胞比例减少,中、晚幼粒细胞比例显著增高,与维甲酸的作用相似.金龙胶囊作用后HL-60细胞的NBT还原能力和吞噬功能也有明显升高,与维甲酸作用相似.结论:金龙胶囊可明显促进HL-60细胞形态和功能上分化、成熟,说明金龙胶囊对HL-60细胞具有明显诱导分化作用.
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环氧化酶-2抑制因子在结肠癌预防中的应用
1 非甾体类抗炎药/环氧合酶链有充分的流行病学证据表明非甾体类抗炎药,特别是阿司匹林的预防作用对于腺瘤的进展及结肠癌的发病率及死亡率有一定效果.一些相关报道表明其可将大肠癌的死亡率降低40~50%.对于非甾体类抗炎药的预防机制有多种假设,包括增强免疫监视及/或药物对促有丝分裂的"转换"作用,以及分化诱导与细胞凋亡.然而在目前还没有证据支持上述任何一种假设,许多资料表明存在于前列腺素及花生四烯酸其他代谢产物的合成过程中的环氧合酶抑制因子是非甾体类抗炎药作用的首要环节.
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人羊膜间充质细胞的分离培养及其生物学特性探讨
目的:对人羊膜间充质细胞(hAMC)的分离培养及其生物学特性进行探讨。方法:取38~40周孕妇剖腹产术后羊膜,用多种酶消化分离提纯hAMC ,观察其体外生长的特征和形态学;用免疫细胞化学方法检测hAMC的神经及肝脏发生相关蛋白的表达;同时探讨其致瘤性。结果:从羊膜中分离出高纯度hAMC ,并摸索出其适合的培养条件;细胞成细长梭形或星形,胞质丰富,细胞核呈圆形,1~3个核仁,易贴壁,生长繁殖快,在体外可连续培养10代以上。免疫细胞化学结果显示:神经发生相关蛋白(Musashi‐1、Nestin、Vimentin)阳性以及肝脏发生相关蛋白[Flt‐1、In‐tegrinβ1、HNF(3β、4α、1α)、C/EBPα、Albumin、AAT ]等阳性;主要组织相容性复合体Ⅱ(Human M HC Class Ⅱ)阴性,主要组织相容性复合体Ⅰ(Human M HC Class Ⅰ)弱阳性;癌化实验显示hAMC无致瘤性。结论:羊膜中分离提纯的hAMC为一种具备多分化潜能的干细胞,至少可分化为神经及肝脏细胞。hAMC具有低免疫源性、无致瘤性等特点,为再生医学研究提供新的细胞来源。
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巴豆水提液对HL-60细胞的诱导分化作用
白血病细胞可由不同化合物诱导分化为具有正常功能的巨噬细胞、粒细胞或红细胞.一些诱导分化剂还可延长接种过白血病细胞的动物生存期,对骨髓增生异常综合征也有一定疗效[1].分化诱导作为一种潜在的治疗方法也逐渐引起临床医生及科学家的兴趣.本文应用巴豆水提液和HL-60细胞进行了诱导分化研究,现总结报道如下.
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人胚胎干细胞向内皮细胞的分化诱导
背景:人胚胎干细胞是一类特殊的细胞,具有自我更新及多向分化潜力,在一定诱导条件下能够分化为内皮细胞。
目的:探讨人胚胎干细胞向内皮细胞分化的条件,研究血管内皮生长因子诱导人胚胎干细胞诱导分化为内皮细胞的效果。
方法:取40代H9细胞进行复苏,采用悬浮培养法制备胚体,培养5 d后转入贴壁培养阶段,分化为拟胚体,添加含50μg/L血管内皮生长因子的胚胎干细胞培养基进行诱导培养。取诱导分化第2代细胞,进行DiI-Ac-LDL摄取实验;取诱导分化第15代细胞,进行免疫组织化学染色。
结果与结论:①培养1 d时,可见条索或多角形的单层细胞在拟胚体细胞周围呈芽样放射状生长,细胞生长相对迅速,能够与周围集落的细胞相互融合;培养二三天后,悬浮细胞数得到进一步增加,但中心小圆形细胞开始死亡;培养5 d后,拟胚体细胞开始传代,细胞聚集呈现出典型铺路石样外观;②经过诱导分化后,部分人胚胎干细胞能够主动摄取荧光标记 LDL,且细胞呈现为红色荧光颗粒;③免疫组化染色显示,诱导分化的第15代人胚胎干细胞呈CD31和FLK-1阳性;④结果表明:人胚胎干细胞在血管内皮生长因子诱导下可分化为内皮细胞。 -
自体骨髓干细胞移植治疗脊髓损伤的护理40例
脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后由于神经元再生能力有限,临床治疗常难以取得满意效果.自20世纪70年代以来,移植治疗SCI的研究进入了一个全新阶段.由于骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)可在体内、外定向诱导分化为神经干细胞,填充SCI缺损[1],所以,采集自体MSCs植入损伤部位,在特定的诱导条件下分化成神经干细胞,即可达到使患者完全或部分恢复运动和感觉功能,提高生存质量的目的.2003年3月-2004年3月,我科共实施自体MSCs定向分化诱导脊髓内移植手术40例,取得了较好的效果,现报道如下.
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小柴胡汤含药血清诱导SSMC-7721人肝癌细胞株分化研究
目的:观察小柴胡汤含药血清对SMMC-7721人肝癌细胞是否具有分化诱导作用,并探讨其分化诱导的作用机制.方法:经药物作用后,观察细胞形态、MTT抑制率、乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞周期的情况.结果:小柴胡汤含药血清使SSMC-7721细胞株有向成熟细胞形态分化的趋势;MTT抑制作用增强;细胞内LDH活性降低、SDH活性上升;流式测定S期细胞数减少,细胞周期阻滞于G0/G1期其中以低剂量组效果为显著(P<0.05).结论:小柴胡汤含药血清可诱导SSMC-7721细胞株向成熟细胞分化,其作用机制可能与降低细胞内LDH活性、升高SDH活性,并且将细胞阻滞于G0/G1期有关.
关键词: 小柴胡汤 SMMC-7721人肝癌细胞株 分化诱导 含药血清 -
168.胚胎干细胞
胚胎干细胞(ES细胞:embryonic stem cell)是具有全能分化潜能的未分化细胞.通过同源基因重组技术有可能破坏小鼠胚胎干细胞的任意靶基因,可以制作成靶基因小鼠.另外,人类胚胎干细胞经分化诱导,也可能用于细胞移植治疗,因而它作为再生医学领域细胞移植疗法的关键而受到极大的关注.
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肝硬化的基因导入疗法
一、利用自身再生能力的疗法近年成为新热点课题的是使胚胎干细胞(embryome stem cell:ES细胞)、造血干细胞和骨髓细胞等多功能性干细胞作形形色色的分化诱导,以进行各种脏器再建、脏器再生的尝试,现已取得了惊人的进步,且其未来发展更是大可期待的.作者等开展的肝硬化基因疗法即属于目前的这种基本医疗,即维持自身潜在组织再生能力以促使脏器再生这一思路的延伸方法之一.
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六亚甲基双乙酰胺与紫杉醇合用对人骨肉瘤OS-9901细胞的抑制作用
目的:研究六亚甲基双乙酰胺(HMBA)与紫杉醇合用对人骨肉瘤OS-9901细胞的抑制作用. 方法:用MTT法检测HMBA、紫杉醇单用或二者合用对体外培养的人骨肉瘤OS-9901细胞增殖变化的影响. 结果:在单用紫杉醇处理组中,不同药物浓度均未使增殖细胞抑制达到生长半数.在先用1.0 μg/ml紫杉醇处理6 h后再加用1 mmol/L HMBA组中,抑制率由18%增至59%.0.1 μg/ml紫杉醇先处理24 h组中,抑制率由23%增至67%.HMBA明显增强了紫杉醇的抗癌作用. 结论:HMBA与紫杉醇联合应用对骨肉瘤保肢术后的治疗可能有一定的价值.
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华蟾素对喉癌细胞株的诱导分化研究
目的研究华蟾素(Cinobutacini,CIN)对喉癌细胞的诱导分化作用.方法体外培养喉癌细胞(Hep-2)放射性同位素掺入法检测CIN对Hep-2的生长抑制作用,原位杂交方法检测c-myc(细胞核内癌基因)的表达变化.结果CIN低浓度在24小时内有促进Hep-2细胞分裂、增殖并诱导细胞分化作用;高浓度作用72小时则抑制Hep-2细胞生长.3H-脱氧胸苷(3H-TdR)掺入量检测提示,CIN短时间作用的Hep-2细胞cpm(每分钟脉冲数)值增高,而长时间作用组则cpm值下降.CIN作用48小时后,Hep-2细胞内c-myc蛋白表达较对照组低,但较平阳霉素组高.结论中药华蟾素在低浓度和时间相对较短时对人喉癌Hep-2细胞具有诱导分化作用,当作用时间超过72小时,则表现为抑制肿瘤细胞生长作用.
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小剂量长春新碱对小鼠M1细胞的分化诱导作用研究
目的利用培养小鼠髓性白血病(M1细胞)来检测小剂量长春新碱(VCR)对小鼠M1细胞分化诱导功能.方法分观察组对照组,观察组使用VCR 1次5 ug后进行吞噬功能实验,及对细胞形态的观察与空白对照组比较.结果发现使用小剂量长春新碱后小鼠M1细胞诱变细胞增多、吞噬功能增强.结论说明小剂量长春新碱对培养小鼠M1细胞有一定诱导功能,诱导其向粒细胞,吞噬细胞方向转化,在临床上对白血病的治疗有一定的作用.
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肉桂酸对人肺腺癌A549细胞相关基因表达的影响
目的 探讨肉桂酸(CINN)诱导肺癌A549细胞分化的能力及其分子机制.方法 采用原位杂交和完整细胞原位斑点印迹等技术,研究CINN对人肺腺癌A549细胞分化相关蛋白质分子CD15,相关基因c-myc、EGFR、wtp53、wtp16等表达的影响.结果 CINN可上调wtp53、wtp16基因,抑制CD15、c-myc、EGFR基因表达.结论 CINN的上述作用可能是其诱导肺癌A549细胞分化的机制之一.