首页 > 文献资料
-
DNA依赖的蛋白激酶复合物研究进展
DNA依赖的蛋白激酶复合物(DNA-PK)是重组修复系统中重要的组成部分,主要修复由电离辐射所引起的DNA双链断裂(DSBs),并且可以通过磷酸化多种蛋白质底物,广泛参与转录及细胞凋亡等过程.
-
电离辐射对食管癌细胞系(ECA109和TE13)r-H2AX表达的影响
维持一个完整的基因组对于细胞的稳定性是至关重要的,由电离辐射和类辐射药物产生的DNA双链损伤是主要的细胞毒损伤,如果不能修复这种损伤就会导致基因组不稳定和肿瘤的形成或其他年龄相关疾病[1].体内外的研究都证明H2AX的修饰在调节各种细胞应答DNA双链断裂中起着中心作用[2-4].Giunta等的实验为rH2AX作为DNA双链断裂的标志提供了证据[5].而食管癌ECA109为高分化鳞状细胞癌,TE13细胞为低分化鳞状细胞癌,他们的生物学特征不同,研究r-H2AX在不同食管癌株系的动力学特点将有助于了解DNA双链断裂——这一细胞内致命的损伤的特点与食管癌放疗敏感性之间的关系.
-
点杂交法检测诊断超声引起的人绒毛细胞DNA链的损伤
目的:探讨诊断超声经腹照射子宫内胚胎是否引起人早孕绒毛细胞的DNA链的损伤及评价检测DNA单、双链断裂的方法.方法:60例早孕妇女随机分为照射宫内孕囊10分钟组和未照射组(各30例),取绒毛组织后,以32P标记Alu探针打点杂交法定量检测绒毛细胞单、双链DNA.结果:照射组与对照组比较,绒毛细胞单、双链DNA的量、百分含量的差异均无显著性(P>0.05);该方法只能与人DNA杂交,可检测2.5×103个绒毛细胞分离的DNA、0.45ng的人白细胞DNA.结论:该实验用诊断超声照射宫内孕囊10分钟,未引起绒毛细胞DNA单、双链断裂;所用点杂交法的特异性、敏感性与准确性高.
-
早期G2期检查点与细胞低剂量放射超敏感性或增强的放射抗性现象相关性研究进展
低剂量放射超敏感性或增强的放射抗性(low-dose hyperradiosensitivity/increased radioresistance,HRS/IRR)现象自发现以来,以其巨大潜在临床应用价值,一直是国际上研究热点.国内外主要从细胞凋亡、细胞周期检查点调控、DAN损伤识别和修复等几个方面进行了大量研究来阐明HRS/IRR现象的分子机制.目前研究支持低剂量放射下早期G2期检查点阻滞缺失导致DNA双链断裂(double strandbreaks,DSB)修复效率降低是细胞发生HRS/IRR现象的主要机制.笔者着重讨论人毛细血管扩张性共济失调突变基因( ataxia-telangiectasia mutation,ATM)依赖性的早期G2期检查点在细胞HRS/IRR现象中的作用.
-
DNA双链断裂-集簇性损伤的诱导及其修复特点研究进展
近年来研究表明,高LET射线诱发的DNA集簇性损伤,特别是双链断裂( double-stand break, DSB)-集簇性损伤比低LET射线诱发的单一位点DSB损伤的修复更为困难甚至不能修复,更易造成染色体畸变、细胞死亡和癌变的严重后果。 DNA损伤应答( DNA damage response, DDR)机制,包括损伤信号的监测和传递、启动修复系统、激活细胞周期检验点和诱导细胞凋亡等多条信号传导通路,通过以此构成的复杂而精确的调控网络来应对这些损伤,在维持基因组稳定性中具有非常重要的意义。然而,DSB-集簇性损伤诱导细胞DDR的精确机制目前尚不清楚[1]。本文主要就当前DSB-集簇性损伤的诱导与电离辐射的品质、DSB-集簇性损伤修复及其修复动力学特点的研究进展做一综述。
-
DNA同源重组修复的分子机制
电离辐射直接造成生物靶分子细胞DNA的损伤,DNA的损伤类型很多,其中以DNA双链断裂(double strand break,DSB)为严重.DNA DSB的修复较其他类型的DNA损伤更加困难,不修复则可能导致染色体断裂和细胞死亡,而修复不当则可能导致染色体缺失、重排、转位和倒置等,从而易于形成肿瘤等疾病[1].DNA损伤的不完全修复可导致基因组不稳定,机体细胞为了对抗损伤,发展出多个修复系统来保证基因组的完整性,同源重组修复(homologous recombination repair,HRR)是DNA DSB损伤修复的主要方式,对于保持哺乳动物细胞的基因组完整性十分重要[2].
-
细胞辐射敏感性与DNA双链断裂及修复相关性研究
细胞的辐射敏感性一般由辐照后细胞的存活情况来衡量.细胞的辐射敏感性存在差异,不同个体不同组织来源的细胞对于同种辐射的反应不同,而同种细胞对不同的辐射的反应也存在明显差异.
-
PARP抑制剂3-AB的辐射致敏作用及其机制
多聚(ADP-核糖)聚合酶[poly (ADP-ribose) polymerase,PARP]是广泛存在于细胞内的一种具有蛋白修饰和核苷酸聚合作用的聚合酶,在多种有害因素造成细胞DNA断裂损伤修复过程中发挥重要作用.3-氨基苯甲酰胺(3-aminobenzamide,3-AB)是一种PARP特异性抑制剂,有报道证实,通过3-AB对PARP的抑制作用可以改变细胞对辐射引起的双链断裂的修复,引起一系列生理生化改变[1],而细胞对于电离辐射的敏感性也可由于PARP的活性而被改变[2,3].笔者拟就PARP抑制剂3-AB的辐射致敏作用及其机制进行初步探讨.
-
曲伐沙星和阿拉曲沙星的不良反应
新药,具有强大的抗G+和G-及厌氧菌的作用,曲伐沙星导致不良反应的机制基于拓扑异构酶的结构,后者诱导DNA双链断裂可能诱发药物不良反应的发生.与曲伐沙星相关的不良反应包括肝毒性、胃肠道不适、中枢神经系统(CNS)性不良反应、光毒性、肾毒性等.8-卤代物可能与光毒性相关,有研究发现能钝化DNA拓扑异构酶的叠氮化物具有减少紫外线和非紫外线诱导产生的光毒性[1];曲伐沙星的药代动力学(如在大脑的吸收分布),γ-氨基丁酸(GABA)和兴奋性氨基酸(EAA)的神经传递以及与其它药物合用等均是产生CNS不良反应的原因,如合用非甾体类抗炎药有增加癫痫的可能性,年轻女性对CNS不良反应比较敏感.发生不良反应的易感因素还与年龄、肾病变、血透和肾移植等相关[2].近年来,有关曲伐沙星和阿拉曲沙星(alatrofloxac_in,曲伐沙星的前药)的不良反应报道比较多,本文就有关曲伐沙星和阿拉曲沙星的不良反应综述如下.
-
NHEJ途径修复DSB的研究进展
一个活细胞的基因组时常受到来自内源性和外源性因素的损伤,包括活性氧和电离辐射损伤的风险.为维护基因组的完整性和预防癌症的发生,迅速和适当的修复受损DNA是必不可少的.DNA双链断裂(DSB)是有害的DNA损伤类型,并且是由一些化疗药物、电离辐射、紫外线辐射、微束激光、重离子辐照诱导[1].未受到保护的DSB周围遗传信息常导致细胞内核溶解活性缺失的风险,而DSB立即早期的反应对于准确的DSB修复和基因组维护是至关重要的.因此,为了及时和准确的维修,细胞必须迅速回应DNA双链断裂.NHEJ主要是在哺乳动物细胞中的DNA双链断裂的修复过程.故本综述以下主要介绍NHEJ途径及其核心因素的研究进展.
-
利用CRISPR/Cas9技术实现快速、经济的大鼠条件基因敲除技术
在2014年第1期的Cell Research杂志上发表了一篇利用CRISPR/Cas9技术进行大鼠条件基因敲除技术的技术性论文(Ma,et al.,Generating rats with conditional alleles using CRISPR/Cas9, Cell Research (2014)24:122-125.),这篇论文利用CRISPR/Cas9在靶基因的特定外显子产生DNA双链断裂,同时提供一个环形质粒模板,该质粒包含两端被loxP位点标记的、且与被打断外显子相同的DNA片段。在受精卵内同源重组修复系统( homologous recombination repair pathway )的作用下,可实现高效率的靶基因loxP位点标记,从而用于大鼠的条件性基因敲除。论文中利用该技术实现了三个甲基化酶基因(Dnmt1, Dnmt3a, Dnmt3b)loxP位点标记,效率高达30%,使得制备一个含loxP位点标记大鼠的周期仅2~3个月,成为目前为止经济、快速的大鼠条件基因敲除技术。
-
DNA依赖蛋白激酶在DNA损伤修复中的研究进展
各种损伤因素如紫外线、天然的或者人造的各种致突变化合物、离子辐射及其体内生物代谢过程产生的活性氧自由基等,均有可能引发染色体和线粒体基因组DNA多种类型的结构损伤(单、双链断裂,碱基修饰,DNA分子链间或DNA-蛋白质分子间化学交联等),基因组拷贝数改变,或表达调控障碍.DNA舣链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)是真核基凶组后果严重的损伤类型之一.
-
髓系白血病细胞DNA非同源末端连接能力的检测
DNA双链断裂(double-strand break,DSB)是致命的DNA损伤,在人类DSB主要的修复方式是非同源末端连接(non-homologous end joining,NHEJ)[1].大部分DNA损伤都能修复,不能修复或不恰当的修复会造成基因变异、肿瘤发生和细胞死亡.
-
辐射诱导DNA双链断裂的保护作用:对DNA复制和核蛋白的影响
-
114 温度和二甲亚砜对放射诱导哺乳动物DNA双链断裂的影响
-
遗传不稳定性在细胞衰老中的作用
遗传不稳定性是一个概括性术语.它是许多物种细胞衰老的重要成分[1,2].它导致去调节基因表达,因而导致细胞生理年龄障碍,细胞生长停止和终导致细胞死亡或它的母细胞转化.基因组依赖年龄不稳定性在细胞的生活中可以具有积极的意义.同时控制障碍可以导致肿瘤形成、突变积累或衰老表现的病理学.它可能的原因有:DNA双链断裂,端粒缩短,DNA修复功能效率降低和易位遗传成分的激活.
-
散发性结直肠癌中p53与γ-组蛋白2A变异体的表达及意义
结直肠癌的发病率呈逐年上升趋势,位于全部恶性肿瘤第3位[1],结直肠癌中90%为散发性结直肠癌(sporadic colorectal cancer,SCC),其发生主要是由于基因的不稳定性,涉及癌基因(如K-ras)的激活和抑癌基因(如p53、APC)的失活.另外,DNA的损伤也是恶性肿瘤发生的重要原因之一.DNA损伤中严重的一种是DNA双链断裂(double strand break,DSB),而γ-组蛋白2A变异体(H2AX)(γ-histone family 2A variant)为DNA双链断裂修复蛋白.本文采用免疫组织化学方法检测SCC中p53和γ-H2AX的表达情况,探讨它们在SCC的发生发展中的作用.
-
单细胞凝胶电泳在放射医学中的应用进展
单细胞凝胶电泳技术(Single Cell Gel Electrophoresis Assay,SCGE),又称彗星试验(Comet Assay)或微凝胶电泳(Microgel Electrophoresis,MGE),它是在核酸沉淀法(Nucleoid Sedimentation)和晕圈分析(Holo Assay)及弱碱性条件下的单细胞凝胶电泳等检测技术基础上逐步发展起来的一种在单细胞水平检测哺乳类有核细胞DNA断裂的新技术.它主要包括Olive等(1984)建立的测定DNA双链断裂(dsb)的中性微凝胶电泳技术和Singh等(1988)建立的测定DNA单链断裂(ssb)的碱性微胶电泳技术.
-
非同源末端连接基因多态性与肿瘤相关性研究进展
非同源末端连接为DNA双链断裂损伤的主要修复途径,通路相关基因在双链断裂的修复过程中的作用已经阐明.非同源末端连接基因的变异会影响其修复能力,导致基因组的不稳定进而引起肿瘤的发生,国内外已有大量关于此方面的病例研究和报道.此文主要就非同源末端连接基因多态性在肿瘤中的研究进展作一综述.
-
醋酸铅对小鼠骨髓细胞DNA的损伤作用
铅是普遍存在环境中的有毒重金属,随着现代工业的迅猛发展,铅污染问题日益严重.现认为铅对人体各系统有着广泛的毒性.铅可致染色体断裂、姐妹染色单体交换(SCE),DNA单链或双链断裂,DNA片段缺失等[1].