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影响结果正确判读的HBV-ELISA检测案例分析
酶联免疫吸附试验(EusA)因方法学成熟,灵敏度高,特异性好,经济安全等特点在临床及科研中被广泛应用,但由于其自身方法学的限制以及操作步骤较多(包括试剂准备.样本收集,加样,温育,洗涤,显色,比色,结果判定等),对检测结果的影响也较多.
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丁二酮肟-硫氨脲法测定游泳池水中尿素含量
游泳池水中尿素含量的测定,目前常用二乙酰一肟-安替比林比色法[1],此法有线性范围窄,煮沸时间长,显色不稳定等缺点. 2000年12月参阅有关文献[2,3],经过反复探讨,提出用丁二酮肟-硫氨脲法测定游泳池水中尿素含量,具有操作简便、方法可靠、便于基层实验室日常检测分析等优点.
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食品添加剂中乙基麦芽酚测定方法的研究
乙基麦芽酚是一种食用香精调制剂,食品、饮料、酿酒等产品的香味、甜味增效剂、矫味剂.我们经反复实验探索,建立了乙基麦芽酚薄层定性分离、三氯化铁显色及紫外分光光度定量测定食品添加剂中乙基麦芽酚的方法.该法所用试剂、仪器简单易得,易于推广,并有较好的特异性和较高的回收率.
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血液游离血红蛋白含量测定方法的探讨
血红蛋白测定多采用氰化高铁法、邻联苯胺法[1]等,均为通过血红蛋白显色、比色测定,操作繁琐、重复,稳定性较差,同时在测定含有血浆的样品时,由于血浆的吸收而产生误差.
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不同生产厂家维C银翘片中马来酸氯苯那敏的含量分析
维C银翘片由金银花、连翘、马来酸氯苯那敏等13味中西药加工而成.具有辛凉解表、清热解毒功效,临床常用于流行性感冒引起的发热头痛、咽喉疼痛等.在工作中发现原标准仅收马来酸氯苯那敏薄层鉴别方法,该法对含量低的产品,采用碘蒸气显色,难判断结果,不能有效控制产品质量,本文选用紫外分光光度法对不同厂家样品中马来酸氯苯那敏含量进行了测定,结果发现样品中马来酸氯苯那敏含量相差较大,为保证用药安全有效,建议增加含量测定方法.
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HPLC法测定硫酸软骨素含量
硫酸软骨素为动物的软骨骨腱、韧带、血管壁等软体组织经皂化并除去蛋白质后制得.本品对神经痛、关节痛、偏头痛及使用链霉素所引起的听觉障碍,有显著的临床效果.其主要成份硫酸软骨素,现行标准规定用紫外分光光度法测定其含量.实验中发现,因该法需水解、显色,实验时间长,过程复杂,结果不够理想,故研究用高效液相色谱法测定其含量,实验结果表明,本法更能准确反映硫酸软骨素含量,具有快速、简便、重现性好等特点.
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高效液相色谱法测定欣舒的含量
硝酸异山梨酯为治疗和预防冠心病、心绞痛的常用药物,其制剂有片剂、乳膏和气雾剂.欣舒是硝酸异山梨酯气雾剂的商品名,其现行质量标准为卫生部部颁试行标准,含量测定方法采用苯酚二磺酸试液显色后,分光光度法测定.本文用高效液相色谱法测定硝酸异山梨酯的含量,方法准确,结果可靠.
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食物中总磷测定
目前,测定磷的含量多利用磷钼蓝法[1~5].它是采用硫酸肼、二氟化锡、抗坏血酸、米吐尔等较温和的还原剂将磷钼黄还原为磷钼蓝.此方法中磷钼蓝形成速度较慢,一般要求加热溶液显色才会稳定.本文参照文献[3~5],利用对苯二酚和亚硫酸钠做还原剂,并在反应体系中加入少量锑,不必加热,其溶液反应30min显色就会稳定,且使方法灵敏度有所提高.通过正交试验方法取得佳实验条件,并对标准曲线、方法的灵敏度、检测限、方法可靠性、样品消化方法和实际样品进行了测定.
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一阶导数分光光度法测血红蛋白含量
血红蛋白测定多采用氰化高铁法、邻苯联苯法等,均为通过血红蛋白显色、比色测定,操作繁琐,稳定性、重复性较差;同时在测定含有血浆的样品时,由于血浆的吸收而产生误差.一阶导数分光光度法测定血红蛋白含量可消除血浆的干扰,回收率达102%,测定无血浆成分的样品时与氰化高铁法无显著差异,且简便快速,稳定性好.现报告如下.
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影响临床酶联免疫吸附试验质量的常见问题及对策
酶联免疫吸附试验(ELISA)灵敏度较高、特异性较好,在临床上应用广泛.但是操作中的各个环节对试验的检测结果影响较大,不注意排除干扰因素有可能导致显色不全、花板等现象.现将临床实际操作中各个环节容易出现的问题及对策报告如下.
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痰涂片抗酸染色二次脱色提高检出率的经验
痰涂片在检查结核杆菌 ,常规采用抗酸染色法.但在厚涂片标本中刷于痰液对感性美蓝的亲和作用常使用涂片的染色背景呈蓝黑色而掩盖了菌体颜色,如果染色时间不足,则无显色背景,这些均影响了结果的可靠性.
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影响酶联免疫吸附试验结果的常见因素及控制方法
酶联免疫吸附(ELISA)试验是免疫酶技术中固相酶免疫测定的一种技术. ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但是操作中的各个环节对试验的检测结果影响较大,如不注意排除干扰因素,有可能导致显色不全、花板等现象.现将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量.
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肠出血性大肠杆菌(EHEC O157:H7)分离培养基的研究
[目的]通过研制一种新的分离培养基(M-WS培养基),克服传统的EHECO 157:H7分离培养基(SMAC培养基)的鉴别能力和抑制杂菌能力较弱的缺陷.[方法]利用已知菌种生长评价实验和现场标本实验室评价实验,对出血性大肠杆菌O157:H7分离培养基的抑菌系统和显色系统进行筛选.[结果]研制出一种新的分离培养基M-WS培养基,其特点在于具有较强的鉴别能力和抑制杂菌的能力,且有效地将大肠杆菌O157:H7与其它大肠杆菌、沙门菌、志贺菌和变形杆菌等通过菌落颜色反应分离开来.[结论]M-WS培养基完全可以替代传统的SMAC培养基,而成为分离EHECO157:H7的理想鉴别培养基.适于在流行病学调查中广泛应用.
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品红-亚硫酸比色法测定酒中甲醇的方法改进
品红-亚硫酸比色法测定酒中甲醇含量是国标食品卫生检验方法(理化部份)中所规定的方法.目前有条件的单位在测定酒中甲醇含量时都采用气相色谱法测定,而大多数基层防疫部门实验室不具备这样的条件,仍然采用国标法测定酒中甲醇.在测定过程中,常遇到显色不稳定,工作曲线重现性差和回收率试验不理想等问题.因此,根据工作实践的经验,我们对标准方法从两方面作了改进:a.标准系列先加水后补加60%无甲醇乙醇;b.标准系列和样品于20℃以上热水浴中静置显色.
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用双波长法消除浊度对六价铬测定的影响
在用二苯碳酰二肼分光光度法(简称DPC法)[1]测定水中六价铬过程中,常遇到这样的现象:水样管显色明显低于标准系列的某一管,或根本不显色,但用分光光度计测得的吸光度值却远远高于这一标准管的吸光度值,这就是浊度的影响,若直接以测得的吸光度值计算结果,显然误差较大.如何排出浊度的这一干扰?有资料[2]己提出用磷酸三丁酯萃取法.离子树脂交换法、以水样空白作参比法等.笔者经过反复试验,发现用双波长差值法[3]也能很好地消除浊度的干扰,且试剂简单,操作简便.
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2种弧菌显色检测平板性能比较研究
目的 研究国产弧菌显色平板性能,用于临床弧菌检测的可行性评估.方法 将霍乱弧菌、创伤弧菌、副溶血性弧菌、溶藻弧菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和粪肠球菌等标准菌株以及来自郑州七里河的24份水样和来自郑州红旗路农贸市场的108份水产品样本,分别接种科玛嘉弧菌显色平板和安图弧菌显色平板,比较目的菌的生长和显色差异以及杂菌的生长和显色的差异等.结果 2种显色平板检测弧菌的性能完全一致,但在对粪肠球菌的抑制性能方面,安图弧菌显色平板优于科玛嘉.24份水样样本中,2种显色平板均未检出弧菌,但108份水产品样本中科玛嘉显色平板出现一份副溶血性弧菌假阳性,2种显色平板对临床样本中副溶血弧菌的鉴别差异具有统计学意义(P<0.05).结论 安图弧菌显色平板作为国产试剂,整体性能优于科玛嘉,结合到成本优势,有较大的临床应用价值.
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荧光光度法直接测定车间空气中的酚
车间空气中酚含量的测定,是为正确评价作业场所劳动卫生条件和空气质量以及作业人员接触毒物程度的重要内容.目前测定车间空气的方法有:分光光度法和气相色谱法.此法需用有毒溶剂显色或解吸,操作繁琐,耗时长.荧光光度法直接测定车间空气中酚尚未见有文献报道.本文研究所建立的方法快速,不需有机溶剂显色或解吸.通过控制溶剂pH进行测定,干扰物少,方法简便,精度高.
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ESBL显色培养基的显色评价
上个世纪八十年代.欧洲首例报道产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的耐药菌株.随后,由于第三代头孢菌素在临床的应用,美国也发现了超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的耐药菌株.如今,这一耐药问题全球蔓延,产ESBL的肠杆菌已成为公认的院内获得性感染的重要问题之一.筛查ESBL携带者,尽早有效隔离,可获得治疗效果及经济学的大收益.
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一起自来水出厂水加入漂白粉后变为棕色的原因分析
1999年7月份,我们收到昆山乡自来水厂送检的一份自来水出厂水样,该水样在加入一定量漂白粉进行消毒时,颜色变为棕色,为此,我们怀疑是一些低价态离子被氧化为高价态离子而显色所引起的.
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CHROMagar显色培养检测沙门菌的方法探讨
沙门菌(Salmonella)是一种能引起人伤寒或副伤寒的常见肠道致病菌,主要通过食物、饮水经口感染,引发食源性疾患.国标检验方法是利用沙门菌不能分解乳糖,而肠杆菌科中绝大部分非致病菌能分解乳糖产酸使中性红指示剂变红的原理,通过挑选SS琼脂平板上无色的沙门菌菌落进行筛选、分离与鉴定.该法存在操作繁琐、检测特异性低等缺点.现采用CHROMagar显色培养技术对沙门菌进行鉴定,很大程度上克服了上述方法的缺陷,取得了较为满意的结果.