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细胞色素氧化酶与琥珀酸脱氢酶双重染色在线粒体肌病诊断中的应用
细胞色素氧化酶( cytochrome oxidase, COX)与琥珀酸脱氢酶( succinate dehydrogenase, SDH)均为细胞有氧代谢的重要酶,二者均定位于线粒体内膜,是线粒体的标志酶。文献记载有Seligman、Moog、Butcher等多种方法显示组织切片的COX,我们选用Seligman的二氨基联苯胺法( DAB)法检测COX[1],并做一定的配方改良,阳性结果呈棕黄色;常用Nachlas法或Pearson法显示SDH,我们采用Nachlas硝基盐四唑法显示SDH[2],阳性结果呈紫蓝色颗粒。我们将两种显示不同酶的方法在同一张切片上进行染色,对于临床诊断倾向线粒体肌病的病例有着非常重要的意义。阳性的染色结果色彩对比鲜明、定位准确,便于观察与诊断,值得推广应用。
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单克隆抗体法与联苯胺法检测粪便隐血的对比
目的 单克隆抗体一步法与联苯胺法测定粪便隐血的方法学比较.方法 分别用一步法和联苯胺法测定5种浓度的人血红蛋白液及不同动物的血红蛋白液和1031例病人的粪便隐血,对结果进行比较.结果 一步法可测定出0.2μg/ml的微量血红蛋白,动物血试验为阴性,检测1031例患者的阳性率为41%.结论 一步法的特异性、敏感性及准确性均比联苯胺法要高,对粪便中微量血红蛋白的检出具有十分重要的意义.
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溶血性贫血一般检查
1 血浆游离血红蛋白测定(邻一甲联苯胺法) 1.1实验原理 邻-甲联苯胺在酸性溶液中和过氧化氢与血红蛋白共同作用生成氧化型联苯胺,产生绿色→蓝色→紫色,其颜色的深浅与血浆游离血红蛋白的含量呈正相关.
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粪便隐血试验三种方法的比较
目的 对粪便隐血(OB)试验进行方法学上的筛选,帮助临床医生正确评价OB试验结果.方法 分别用免疫胶体金法,隐血试纸法及联苯胺法对120例门诊怀疑有消化道出血的患者粪便及40例确诊消化道出血的柏油样便进行检测.结果 120例门诊患者胶体金法阳性79例,联苯胺法87例阳性,隐血试纸法53例阳性,胶体金法79例阳性中联苯胺法77例阳性,隐血试纸法74例阳性,40例确诊消化道出血患者,联苯胺法阳性40例,隐血试纸法阳性40例,胶体金法阳性39例,其中标本未稀释的阳性26例,标本稀释后测得阳性13例.结论 免疫胶体金法敏感性好,可靠性高,但易出现假阴性,联苯胺法敏感性较好,但易受饮食存物影响而出现假阳性,隐血试纸法敏感性稍差,也易受饮食、药物影响而出现假阳性.
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胶体金法与联苯胺法检测便隐血的效果比较
粪便中血红蛋白的检测可作为判断消化道出血的重要指标.传统的联苯胺法干扰因素多,灵敏性与特异性较差;而这几年开展的三明治夹心免疫检测方法,采用单克隆抗体法,不受饮食干扰,准确快捷.笔者将这2种检测方法作了比较,现将实验结果报道如下.
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两种粪便潜血试验方法的比较
目前,粪便潜血试验已被视为消化道出血的重要筛选指标.其试验方法主要分为以联苯胺为代表的化学法和单克隆抗体一步法为代表的免疫法常见.由于单克隆抗体一步法解决了潜血试验的特异性且不受食物干扰,现已有应用单克隆抗体一步法的趋势.为此,笔者对两种方法进行了临床和方法学的评价试验,现报告如下.
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胶体金法和联苯胺法在检测粪便隐血中的应用
粪便隐血在临床上的作用非常重要,不仅关系到筛查消化道出血的病例,错误的报告还会导致误诊涉及到医疗事故.现阶段粪便隐血检测方法主要分为化学法、免疫法.化学法隐血试验易受多种因素影响而呈假阳性反应[1].近年来,免疫法在临床上得到普遍使用,免疫法与传统的化学法相比,灵敏度和特异性多有极大提高,且不受相关食物和药物的影响[2].也有很多报道呼吁化学法和免疫法相结合[3],本试验将进一步分析,找出一套两种方法有效结合的隐血试验检测方法.
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胃呕吐物隐血金标法检测假阴性原因浅析
隐血实验在经历了几代灵敏度低、特异性差的化学方法后,推广使用灵敏度高、特异性高的金标(酶法)已为检验医学界达成共识.几年来我院在选用北京万华普曼生物工程有限公司生产的消保康便隐血胶体金检测试纸作便隐血时,深感其快捷方便高效可靠.同时也发现在做胃呕吐物隐血时出现假阴性(镜检有大量红细胞,用尿分析仪试纸条做+,联苯胺法+)经翻阅有关资料,现对其产生原因浅析如下.
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联苯胺法与胶体金试纸法测定便潜血结果的比较
便潜血试验对慢性消化道出血及消化道恶性肿瘤的筛选均有重要价值,且方法简便[1],临床多采用联苯胺法,近几年随着分子生物学的发展,逐渐被胶体金试纸法所取代,我们对两种方法进行了比较.
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三种便潜血试验测定方法的比较
便潜血试验是诊断各种原因引起的消化道出血及筛选诊断胃肠道肿瘤的重要手段[1,2].目前在临床上应用的便潜血的方法基本上分为免疫法和化学法,每种方法各有其优缺点.本文以胶体金试纸条法和联苯胺法及隐血试纸带法临床应用的效果进行了比较.
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免疫胶体金法测定呕吐物隐血假阴性原因分析
近年来,随着大便隐血胶体金法的普及,检验科普遍淘汰了联苯胺法、匹拉米酮法等其他检测隐血的方法.呕吐物中即使出现肉眼可见的血液,临床医生尤其是临床经验不足的医生也会申请做呕吐物隐血检测以排除食物颜色的干扰.而检验科通常采用大便隐血胶体金试纸进行检测.
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亚甲蓝还原法测定微量硒的实验条件研究
微量硒的测定,荧光分光光度法、原子吸收光谱法(1)具有很高的灵敏度,但受设备条件的限制,在基层不能开展;二氨基联苯胺法(2)灵敏度太低,不能满足卫生检测要求.亚甲蓝还原法测定微量硒方法简单、灵敏,基层可广泛开展,但反应速度对实验影响很大.反应过快,斜率抬高,反应过缓方法则灵敏度降低.为掌握该法的反应温度,控制反应速度,我们对该法进行了实验探讨,现将结果报告如下.
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一步快速胶体金法与联苯胺法粪隐血试验的对比
粪便隐血试验是消化道出血、肿瘤的主要筛选指标.即往粪便隐血试验多采用化学法为主,但受到灵敏度低、特异性差、干扰因素多、有致癌性等缺点的影响逐渐被淘汰.一步快速胶体金法运用单克隆和多克隆的双抗体夹心胶体金显色技术,具有方便快捷、灵敏度高、抗干扰能力强的优点.本文对一步快速胶体金法、联苯胺法检测粪隐血的灵敏度、特异性、抗干扰能力进行了比较,并进行了临床验证,证明该方法明显优于联本胺法,有广泛的应用前景.
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金标试纸法隐血试验的有效性评价
近年来免疫法由于其特异性、敏感性好而受到临床的关注,为了解免疫金标试纸法隐血试验的有效性,笔者用免疫金标试纸法隐血试验对各种标本进行了检测,并与联苯胺法进行比较,现报道如下.材料和方法1.材料免疫金标试纸条为美国万华牌"速而准"一步法隐血试验试纸条,联苯胺试剂由1%联苯胺和3%双氧水配制.各种血红蛋白(Hb)溶液分别由人、猪、羊、鸡、鸭的全血经1%盐酸处理后制成,其中人的Hb溶液浓度为150g/L.临床标本104份,分别为本院职工体检正常者的粪标本60份;临床确诊为上消化道出血患者的粪标本20份、胃液标本8份和呕吐物标本4份;非消化道出血性疾病住院患者的胃液标本6份和呕吐物标本6份.
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用ELISA试剂盒的剩余A、B液作游离Hb测定
全国临床检验操作规程推荐用邻-甲联苯胺法测定血浆、体液及血液制品中的游离血红蛋白含量[1],该法较过去的联苯胺法简捷、敏感,且试剂无致癌作用,环境污染少.
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两种粪便隐血检测方法比较
目的通过免疫化学法与联苯胺法的粪便隐血试验,比较两种方法特异性.方法采取免疫化学法与联苯胺法,对随机抽取100份患者(粪便均为我院门诊或住院患者)以及猪、鸡、鸭血各10份进行隐血检测.结果联苯胺法阳性率大于免疫化学法阳性率,而免疫化学法只与人的血红蛋白呈阳性反应,而与其它动物血红蛋白抗原不结合.结论免疫化学法对人粪便隐血检测具有明显特异性,具有临床应用价值.
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血液游离血红蛋白含量测定方法的探讨
血红蛋白测定多采用氰化高铁法、邻联苯胺法[1]等,均为通过血红蛋白显色、比色测定,操作繁琐、重复,稳定性较差,同时在测定含有血浆的样品时,由于血浆的吸收而产生误差.
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粪便潜血胶体金试纸法与联苯胺法的对比试验
目的对胶体金法、联苯胺法检测粪便潜血的敏感性和特异性进行比较,并进行临床分析.方法90例粪便标本均来自本院门诊、住院患者送检粪便潜血的随机标本.结果联苯胺法粪潜血实验阳性占34%,在联苯胺法阴性标本中加5种动物血红蛋白和肌红蛋白,则均为(+/-~+).胶体金法粪便潜血实验阳性占19%,在胶体金法阴性标本中加5种动物血红蛋白和肌红蛋白,则均为阴性.结论胶体金免疫法对粪便潜血实验有不可比拟的特异性、灵敏度和准确率,是一种实用且临床上值得推广应用的粪便潜血方法.
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维生素C对3种粪便隐血试验检测方法的影响
[目的]探讨不同浓度维生素C(VitC)对3种粪便隐血试验(FOBT)检测方法的影响.[方法]以蒸馏水为对照,分别用联苯胺法、匹拉米洞法和胶体金法检测含有不同浓度VitC的粪便隐血阴性、阳性标本.[结果]体外试验显示,当VitC浓度分别为5、75、100、125、250 mg/ml时,对3种方法检测FOBT阴性标本均不造成假阳性[结果].VitC浓度为5、125、250 mg/ml时,分别对联苯胺法、匹拉米洞法检测血红蛋白含量0.2~10、50~75、125 mg/ml的阳性标本造成假阴性影响,且含血红蛋白量越多,VitC越不容易造成假阴性的影响;而对胶体金法无影响.[结论]体外实验显示不同浓度VitC,对联苯胺法、匹拉米洞法检测粪便隐血阴性标本不产生假阳性影响,对阳性标本会造成假阴性影响;对胶体金法无影响.
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匹拉米洞法潜血试验的结果观察
潜血试验是消化道出血等的主要指标,其试验方法主要分为化学法和免疫法两类.化学法主要是联苯胺法,近年来为解决潜血试验的特异性,匹拉米洞法和免疫法已广泛应用,我们使用新一代匹拉米洞(Pyramidon)改良方法与联苯胺法进行了比较,结果报告如下: