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快速显色凝集试验检测生殖道念珠菌的实验室评价
生殖道念珠菌病是一种由念珠菌引起的常见皮肤粘膜感染性疾病.在育龄妇女中发病率较高,典型临床表现为外阴瘙痒和阴道分泌物增多或异常,分泌物粘稠如奶酪样或豆渣样白色凝块.传统的实验室检查方法是分泌物直接镜检,有条件的实验室常作霉菌培养,二者均可诊断念珠菌的感染.但直接镜检阳性率较低[1],培养法费时又耗材,宁波市宁海县疾病预防控制中心协同数家医院用快速显色凝集试验法检查了162例拟诊阴道念珠菌感染的患者,并与直接镜检和培养法比较来评价快速显色凝集试验法的优缺点,现报告如下.
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狂犬病抗体的两种检测方法比较
狂犬抗体的检测方法很多,一般采用间接免疫荧光法(IFAT),也有用酶联免疫法(ELISA)来检测.过去我们常用这两种方法中的一种,没有进行比较,但总觉得ELISA法显色很浅,判断结果比较困难.为了搞清哪种方法检测狂犬抗体比较合适,我们于2002年12月对这两种方法进行比较,现将结果报告如下.
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中草药总黄酮的提取和含量测定
大多数中草药中含有黄酮类物质(如芦丁、登皮甙、儿茶素、香叶木甙、华青素等),由于黄酮的成分复杂,且其具体功效作用还未确定,因此测定总黄酮非常必要,但目前缺乏一个统一的测试方法.本文首先将总黄酮从中草药中提取出来,利用黄酮类分子中的酚羟基可与Al3+在碱性溶液中显色的原理测定其含量.其方法方便、准确,对中草药中总黄酮测定结果令人满意.现将结果报告如下.
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微波消解-磷钼蓝分光光度法测食品中磷酸盐
磷是人体内的重要营养元素之一,对人体生命活动有着十分重要的作用,因此检测食品中磷酸盐含量至关重要.《食品中磷的测定》的第三法是食品中磷酸盐的测定[1],但此法灵敏度低,前处理麻烦,所用还原剂对苯二酚还是剧毒物质,对操作人员和环境有一定危害[2].本实验采用微波消解和水样中测定磷酸盐的磷钼蓝方法测定食品中磷酸盐,改变了还原剂,提高了灵敏度,缩短显色反应时间,结果满意,现将实验报告如下.
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改良显色增菌液在食品微生物检测中的应用
在食品微生物检测中,常采用增菌的手段来放大病原菌,提高检出率.常规的增菌后,增菌管内的菌量靠浊度来判断,但因浊度会受到多种因素干扰,影响增菌效果的判断.当病原菌的数量很少时,往往在增菌后增菌液仍呈透明清澈或某些样品加到增菌液中变得混浊就很难判断增菌的效果如何.我们通过改良增菌液,在增菌液中加入适量的2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)和琼脂粉,制成改良显色增菌液,可以直观增菌液中细菌含量,推测样品中的原始细菌数量,这在国内各文献中没有报道过.
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复方黄连素片中盐酸小檗碱的含量测定
复方黄连素片由盐酸小檗碱、木香、白芍、吴茱萸等组成.卫生部药品标准采用索氏提取器提取后,经柱色谱分离,显色后再用分光光度法测定盐酸小檗碱的含量,较繁琐.本文以酸性染料比色法对复方黄连素片进行含量测定,方法简便可靠.
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氨气敏电极测定尿素乳膏的含量
尿素乳膏[1]常用于治疗鱼鳞病、手足皲裂等疾息,是用量较大的一种医院制剂.但在较长的时间里,多种药品标准均未给出该制剂的定量方法.<中国医院制剂规范>是在95年版中采用经显色后的分光光度法.
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几种免疫组化显色系统的选用与比较
目的:比较不同显色系统对免疫组织化学结果的影响.方法:免疫组化SP法,显色剂分别为3-氨基-9-乙基咔唑(3-amino-9-ethy1-carbazole,AEC)、二氨基联苯氨(Diaminobenzidin,DAB)和四氯萘酚(4-Choro-Naphthol,4-CN);复染剂分别为苏木素(hematoxylin)、甲基绿(methy green)和核快红(nuclear fast red).结果:在抗体浓度、孵育时间等条件完全相同的情况下,AEC+苏木素和4-CN+核快红显色系统灵敏度高、背景清晰,DAB+苏木素系统背景有非特异性着色,效果差.结论:在常规免疫组化DAB显色系统难以显示抗原或背景干扰严重时,应考虑选用AEC、4-CN系统中的一种.
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两种显色方法在免疫组化和原位杂交技术中应用
免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)和原位杂交(in situ hybridization, ISH)技术是科研和临床病理诊断工作中经常同时采用的两种技术.在国内这两种方法均是通过二氨基联苯氨(diaminobenzidin, DAB)进行后显色,其阳性信号均显示为棕黄色颗粒.两种方法中IHC显示的是蛋白水平,而ISH显示的是分子水平,若仅根据阳性信号的颜色进行区别,宜混淆.为了进行有效的区别,本组实验分别采用了国内通用的DAB显色方法和国外应用广泛的3-氨-9-乙基咔唑(3-amino-9-ethyl- car bazole,AEC)显色方法对上述两种方法进行显色,效果满意,有效区分IHC和ISH的阳性信号,现报道如下.
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采用新的显色原位杂交法检测尿磷酸盐沉积性间叶瘤中的 FGF23 mRNA
混合性结缔组织型尿磷酸盐沉积性间叶瘤( PMT)是发生在骨与软组织的一种罕见肿瘤。
大多数 PMT 患者因继发于成纤维细胞生长因子23(FGF23)激素产生,该激素能抑制肾近端小管对磷酸盐的重吸收导致患者发生持久性骨软化症。既往PMT患者 FGF23 mRNA检测多采用RT-PCR法,但其特异性低,且存在内在的非肿瘤组织污染风险限制了临床应用。该文作者介绍一种新的半定量原位FGF23 mRNA检测诊断PMT的方法,25例出现肿瘤性骨软化症( TiO)的PMTs患者中位年龄52岁(范围5~73岁),肿瘤位于不同骨骼及软组织,肿瘤直径平均3.9 cm(1.4~12 cm)。96%(22/23)的PMTs患者FGF23 mRNA表达:16例评为(-);5例评为(-);1例评为(+)。这些病例中3例伴转移的恶性PMTs 亦检出FGF23 mRNA表达。对照组40例包括4例动脉瘤样骨囊肿、8例软骨黏液样纤维瘤、8例高级别骨肉瘤和瘤样钙质沉着症,以及其他各种软骨或骨形成肿瘤及软组织肿瘤 FGF23 mRNA 均阴性。 -
ELISA法中出现非特异性显色原因分析
酶联免疫吸附试验(ELISA)自1971年问世以来,以敏感性高,特异性强、操作简便、安全等特点被广泛应用于临床诊断.但作为一种免疫诊断方法,常常会出现非特异性问题,本文就非特异性显色的原因控制措施进行分析.
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乳胶管中防老化剂对血清丙氨酸氨基转移酶测定的影响
乳胶管有良好的弹性,所以常被人们用作连接管,实验室中也常用它做为定量加液器与加液头之间的连接.然而若把它用在存放测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)基质液的定量加液器的连接管上,将会出现下述情况:存留在乳胶管中的基层,经过一段时间后,将导致ALT测定的不显色或显色不完全.
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食管小细胞癌临床病理分析
病例报告一、临床资料 患者男性,63岁,因进食梗咽感1月余入院.患者一月来出现进食后梗咽感,伴呕吐,偶有胸骨后疼痛,呈持续性针刺样疼痛.查胃镜示:食道中段距门齿25~27 cm处可见不规则隆起型病灶,组织脆,活检易出血.手术标本常规10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,3~4 μm厚切片,采用EnVision两步法,所有抗体均为工作液,购自北京中杉金桥公司, 染色过程按说明书进行, 用D A B 显色.
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微波技术在免疫组化中的应用
免疫组织化学(简称免疫组化)自1974年用于病理诊断以来,已成为病理科一种常用手段。但目前进行的常规石蜡切片标本,一般用甲醛固定,其免疫组化标记敏感性明显降低,造成显色困难。因此在染色时,有些抗原须先进行修复或暴露。笔者采用本科总结的微波修复技术先对病变组织进行修复。然后再观察病变组织中激素受体的表达。并与对照组进行比较。
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手工酶比色法检测高浓度血糖的一点改进
血液中葡萄糖的准确测定,对糖尿病的诊断及治疗效果判定具有重要意义.日常工作中,常遇到高浓度的血糖血样,特别是在检测病人餐后血糖时,样品的吸光度值往往大于0.8甚至1.0,通常是估计读数,造成结果的不准确,或者用半定量法重做测定,既浪费试剂又要再等一段时间才能得到结果.为此我们在检测高浓度血糖血样时,对显色深的样本改用0.5 cm厚度的比色杯取代通常用的1 cm厚度的比色杯进行比色,比色的结果乘以2,其结果与半定量法、全自动生化仪法相比非常近似,差异无显著意义.实验方法是:
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一种改良的布鲁氏菌病抗体微量凝集检测方法的建立与评价
目的 建立一种微量的布鲁氏菌病抗体凝集检测方法,用于布鲁氏菌病高通量检测.方法 依据我国《布鲁氏菌病诊断标准》(WS269-2007)规定的病人诊断标准,用试管凝集试验做诊断标准.通过优化微量凝集试验抗原浓度,对142份疑似病人血清同时做试管凝集和微量凝集试验,进行效果评价.结果 优的微量凝集抗原浓度为1∶10,建立微量凝集法具有较高的敏感度和特异度,分别为98.9%和92.3%;和常规试管凝集法相比,两种方法符合率为96.5%.常规试管凝集检测得到21份阴性样本,22份可疑样本(1∶50),99份阳性样本(>1∶100).微量凝集检测得到30份阴性样本、17份可疑样本(1∶ 50)、95份阳性样本(>1∶100).两种试验方法,结果相同的占70.4%(100/142),经统计学检验差异无统计学意义(x2=0.8,P>0.05).结论 建立一种可显色的布鲁氏菌病抗体微量凝集检测方法,可以在96孔V型板上同时检测24份标本,且结果易判读,更适宜基层防疫人员现场检测,终为疫情处置提供强有力的技术支持.
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快速显色凝集试验检测生殖道念珠菌的实验室评价
生殖道念珠菌病是一种由念珠菌引起的常见的皮肤粘膜感染性疾病.在育龄妇女中发病率较高,典型临床表现为外阴瘙痒和阴道分泌物增多或异常,分泌物粘稠如奶酪样或豆渣样白色凝块.传统的实验室检查方法是分泌物直接镜检,有条件的实验室常作霉菌培养,二者均可诊断念珠菌的感染.但直接镜检阳性率较低,培养法费时又耗材,宁波市宁海县疾病预防控制中心协同数家医院用快速显色凝集试验法检查了162例拟诊阴道念珠菌感染的患者,并与直接镜检和培养法比较来评价快速显色凝集试验法的优缺点,现报告如下:
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精液果糖浓度测定
大量的临床研究表明,精液果糖测定可作为男性生殖系统疾患及睾丸内分泌功能的指标之一[1].我们根据实验室的具体条件,对Polakotk等[2]报道的间苯二酚显色方法进行有效的改进,使本试验操作简便稳定,结果可靠,试用后效果满意,现报告如下.
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胶体金免疫层析法复查HBsAg阳性的临床分析
胶体金免疫层析法(GICA)测定乙型肝炎表面抗原(HBgAg)简便快速,特异性强,可作单人份和急诊检查且无需仪器设备,现发现根据其阳性反应速度和显色程度可直接判定乙型肝炎病毒复制和传染性的重要标志物HBeAg[1],受到临床检验人员(特别是基层)的重视和广泛应用.
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显色半固体培养基检测细菌动力的临床应用
目的研究革兰阴性杆菌,特别是粘液型菌落动力检测的简便可靠方法.方法采用传统半固体培养基及显色半固体培养基,对临床分离的128株革兰阴性杆菌的动力进行检测.结果对于发酵革兰阴性杆菌,两种培养基检测结果基本一致.而对绿脓杆菌的粘液菌落,显色半固体通过显色,全部能检测到动力.结论显色半固体培养基检测细菌动力,而显色半固体培养通过显色减少了细菌本身因素对试验结果的影响,具有结果明显,检出率高的优点,是取代传统半固体培养基检测细菌动力的有效方法.