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四种细胞毒性试验测定柴油机尾气颗粒物提取物急性毒性的比较
目的 比较四种体外细胞毒性试验检测柴油机尾气颗粒物(DEP)提取物急性毒性的能力.方法 用浓度分别为5、10、20、40、80和160μg/ml的DEP提取物作用于16HBE细胞,于12、24及48h后,通过MTT法、中性红法、乳酸脱氢酶(LDH)法及蛋白测定法测细胞存活率.结果 MTT法在检测急性毒性方面与其它三种方法相比,染毒12h时就表现出了很高的敏感性.随着染毒时间的增加,MTT法与中性红法的敏感性逐渐提高,染毒24h后与对照组相比,各剂量组细胞存活率明显降低(P<0.05).LDH法测定DEP提取物染毒24h后细胞存活率有所降低,但继续增加染毒时间,存活率不再发生变化.蛋白法测定染毒12h和24h的细胞存活率,仅高剂量组显著降低,染毒48h后,各剂量组细胞存活率均显著降低.结论 四种不同的细胞毒性试验测定结果存在差异,MTT法和中性红法比蛋白法和LDH法更为敏感.结合各试验检测的毒性指标可以看出,DEP提取物主要影响16HBE细胞内各细胞器的功能,如线粒体、溶酶体;对于细胞贴壁的影响和细胞膜损伤程度的影响较弱.
关键词: 柴油机尾气颗粒物提取物 MTT 中性红 乳酸脱氢酶 细胞毒性 -
利用体外3T3细胞中性红摄取试验检测化学物质光毒性作用
目的建立体外Balb/c3T3细胞中性红摄取法作为检测化学物光毒性的试验方法,初步探讨体外BaLb/c3T3细胞中性红摄取法作为豚鼠光毒性试验的一种替代方法.方法采用体外培养的BaLb/c3T3细胞建立反应的佳条件.结果中性红浓度、孵育时间、pH值、性别浓度等是影响试验结果的因素.结论体外BaLb/c3T3细胞中性红摄取试验可作为动物光毒性试验的替代方法.
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苯乙醇苷类化合物与ctDNA的相互作用
以中性红为分子探针研究2种苯乙醇苷类化合物(PhGs)毛蕊花糖苷和连翘酯苷B在生理条件下与小牛胸腺DNA(ctDNA)之间的相互作用.荧光光谱、紫外光谱、黏度、DNA热变性实验和分子对接结果表明:这2种PhGs主要采用氢键作用以沟区方式结合到ctDNA双螺旋小沟中,毛蕊花糖苷与DNA结合作用更强.
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中性红比色法检测大鼠小脑神经瘤活细胞
目的探讨中性红比色法测定细胞活性的有效性,优化实验参数,并初步探讨该方法测定细胞活性的机制.方法采用中性红比色法、MTT比色法及台盼蓝拒染法测定大鼠小脑神经瘤细胞(R2细胞)的活性.结果①中性红浓度为100 mg*L-1,孵育时间4 h,溶解液的pH值为2~4,细胞密度在每毫升(0.5~24)×105范围内,吸光度值(A530 nm)与活细胞数呈正相关,是较为合适的实验参数;②低温(4℃)明显抑制R2细胞对中性红的胞吞作用,使A530 nm值降低.结论中性红比色法灵敏准确,结果稳定,操作简便,可以用于细胞活性和毒性的评价.中性红进入细胞内的过程可能与细胞的胞吞功能有关.
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简易快速血尿来源定位检验诊断
尿沉渣红细胞形态分型已广泛应用于鉴别血尿来源.本文应用曙红(C20H6O5Br4Na2批号710312)、甲基绿、甲基紫、台酚蓝、灿烂甲酚蓝、伊红(C20H6O5Br4Na2批号630713)、中性红、联苯胺8种染色法,在光学显微镜下分别对正常人及血尿病人红细胞形态及管型进行分型研究,以优选出一种简易快速而可靠的染色法,报告如下.
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染色及单克隆标记法检测尿沉渣的临床应用研究
为了评估无创伤性检查结果对不同肾脏疾病的实验诊断价值,用阿利新蓝-中性红染色法和标记抗体(直接、间接)法对尿沉渣进行了对比观察,现报道如下.
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空气中氧化氮的溴酸钾氧化中性红催化光度测定法
提出了用催化光度法测定空气中氧化氮的新方法.在盐酸介质中,溴酸钾氧化中性红的褪色反应因受NO-2的催化而加快.本法NO-2的测定线性范围在25 ml 体系中为1~10 μg,直线回归方程为y=0.021 63 x+0.000 12,检出限为0.04 μg/ml.该方法灵敏,简便,可用于空气中氧化氮的测定.
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水中痕量硫离子催化动力学光度法间接测定
目前,测定硫离子的常用方法是亚甲基蓝光度法[1],但该法灵敏度较低.动力学分析法由于灵敏度高,仪器设备简单,在金属离子的测定中应用较多,但用于硫离子的测定报道较少[2-5].因此,研究灵敏度高和选择性好的动力学分析法测定痕量硫离子具有一定意义.研究发现,在磷酸盐缓冲介质中,硫离子对痕量铬(Ⅵ)催化过氧化氢氧化中性红有明显的阻抑作用,且催化反应降低的速度在一定范围内与硫离子的浓度成正比.本文研究了硫离子阻抑催化反应的适宜条件,建立了阻抑催化光度法间接测定硫离子的方法,该方法操作简单,灵敏度高,选择性好,可用于实际样品中硫离子的测定.
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雀鹰舌肌的神经支配
鸟类的鸣叫发自气管与支气管交界处的特殊装置一鸣管。但需要舌的配合才能发出变化多样的鸣声。本文研究雀鹰(Accipiter nisus)舌肌的神经支配。1 材料和方法 用成年雀鹰5只,体重170~250克,雌雄不拘。经25%乌拉坦腹腔麻醉(1 g/kg),将CB-HRP溶液(中国医学科学院提供)0.5 μl分别注入一侧舌尖或舌体,动物存活48 h,麻醉后经颈动脉相继灌注;(1)生理盐水200 ml;(2)固定液(1%多聚甲醛,1.25%戊二醛,0.1 mol/L磷酸缓冲液)200~250 ml;(3)10%蔗糖磷酸缓冲液200 ml。立即取脑和舌,置入30%蔗糖磷酸缓冲液中过夜(4℃)。脑作冰冻冠状连续切片,舌作矢状或冠状切片,片厚均为40μm,TMB呈色反应,中性红复染,明视野观察。2 结果 雀鹰核团的划分和命名,参照家鸽脑定位图谱和作者以往的工作,其舌下神经核位于延髓上腹部,内侧纵束的外侧,核团呈椭圆形或不规则形。
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精密肺切片方法学的建立及中性红比色法检测肺切片活力的有效性
目的建立精密肺切片方法学,探讨中性红比色法检测肺切片活力的有效性.方法 1%低熔琼脂糖充盈肺组织,振荡切片机切片,厚度分别为400、500、600、700 μm, 培养液pH分别为6.8、7.0、7.2、7.4,预培养1 h,于24孔培养板持续浸润培养0、2、4、6 h,以中性红比色法,MTT比色法,乳酸脱氢酶漏出率,超氧化物歧化酶活力为检测手段确定肺切片适制备培养条件.结果肺切片厚600 μm,培养液pH 7.0时,活力保持佳,可稳定维持6 h;不同厚度肺切片中性红摄取率与MTT还原量呈正相关(r1 = 0.91,P< 0.05),不同pH培养液培养的肺切片中性红摄取率与MTT还原量呈正相关(r2=0.98,P<0.01).结论精密肺切片是简便可行、有待发展的新型体外模型,中性红比色法操作简便,结果稳定,灵敏准确,可作为肺切片活力判定指标.
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染色法鉴别旋毛形线虫成虫死活的实验观察
目的:探讨快速鉴别旋毛形线虫成虫死活的染色方法.方法:分别以0.5%番红、1.0%中性红和0.5%甲基蓝3种染液,对死或活旋毛形线虫成虫进行染色.结果:0.5%番红、1.0%中性红染液能使死亡旋毛形线虫成虫着色;旋毛形线虫活成虫对3种染液均不着色.结论:0.5%番红、1.0%中性红染液染色均可快速鉴别旋毛形线虫成虫死活.
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叶下珠提取物对小鼠脾细胞活性的影响
目的 考察叶下珠各种提取物对小鼠全脾细胞的影响,筛选出有效成分.方法 测定叶下珠提取物不同浓度作用下小鼠全脾细胞中性红染色值,Griees法测定全脾细胞分泌的一氧化氮(NO)含量.结果 中性红染色值测定表明:得到一种叶下珠提取物浓度较小时对全脾细胞活化有较大影响,叶下珠提取物对小鼠脾细胞分泌NO有抑制作用.结论 叶下珠提取物在适当浓度时能增进脾细胞组分对中性红的吞噬作用,抑制小鼠脾细胞分泌NO.
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改良中性红清除法应用于大鼠胃粘膜血流测定
目的为了探索一种大鼠胃粘膜血流测定方法.方法就中性红清除法进行改良并应用于门静脉高压大鼠胃粘膜血流测定.结果改良中性红清除法成功地应用于门静脉高压大鼠胃粘膜血流的研究.结果显示改良法免除了测试前抽血对动物的刺激、减少了胃液标本的需用量并由此大大缩短了测试过程,使测试时间可按实验需要而随意安排.结论改良中性红清除法应用于大鼠胃粘膜血流测定更简单易行.
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小麦粉中吊白块检测方法的研究
目的 研究催化动力学光度法测定小麦粉中吊白块的方法.方法 在硫酸介质中,甲醛可灵敏地催化溴酸钾氧化中性红的退色反应.选择研究了该催化反应中多项测定条伴,参照建立了催化动力学光度法测定痕量甲醛的方法,又对产生假阳性问题的多个干扰因素进行了研究.结果 甲醛含量的检测范围为(0.20~1.0) μg/25 ml;该方法的检出限为0.0400 μg/25 ml,标准偏差4.45 %,加标回收率为91.3 %.结论 催化动力学光度法测定小麦粉中痕量甲醛的方法是可行的.
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活化催化动力学光度法测定柠檬酸
目的:建立一种新的测定柠檬酸的动力学光度法.方法:在酸性介质中,柠檬酸对溴酸钾、中性红、钒(V)催化体系具有强烈的活化作用,建立了测定柠檬酸的新方法.结果:在大吸收波长530 nm及佳实验条件下,测定柠檬酸的线性范围为0.4~52 mg/25 ml,方法的检出限为2.6×10-8g/L.结论:该方法直接用于柠檬、饮品中柠檬酸的测定,结果满意.
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双波长双指示剂催化光度法测定痕量银的研究
目的:建立用双波长双指示剂催化动力学光度法测定痕量银的新方法.方法:在pH 4.5的HAc~NaAc缓冲介质中,有活化剂2,2'-联吡啶存在下,利用痕量Ag(I)催化过硫酸钾氧化次甲基绿和中性红褪色的指示反应,通过测量440 nm和660 nm下,催化体系和非催化体系吸光度的变化,用双波长双指示剂催化动力学光度法测定痕量银.结果:测定Ag(I)的线性范围为0.0050~0.050μg/ml,检出限为1.4×10-10g/ml.结论:该方法操作简便,灵敏度高,准确度好,可用于废水中痕量银的测定.
关键词: 银 催化光度法 双破长:双指示剂:次甲基绿 中性红 -
中性红-H2O2体系催化动力学光度法测定痕量铝
[目的]探讨研究一种新的痕量铝测定方法.[方法]基于pH3.6的乙酸-乙酸钠缓冲介质中Al3+对过氧化氢氧化中性红(NR)褪色反应的催化作用,应用了催化动力学光度法测定痕量铝.[结果]该法的适宜反应条件,方法的线性范围为0-100ng/ml,检出限为1.2ng/ml.[结论]方法用于样品中痕量铝的测定,结果满意.
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中性红作指示剂原子荧光法测定牛奶中铅
现代社会的人类活动使环境受到了广泛的铅污染,八十年代我国对北京、上海、南京、济南、西安、杭州、保定各城市食品铅监测,发现几乎所有食品都含有可检出的铅.铅主要损害人的神经系统、造血系统及肾脏,尤其儿童铅中毒近更引起广泛的关注.
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CHROMagar显色培养检测沙门菌的方法探讨
沙门菌(Salmonella)是一种能引起人伤寒或副伤寒的常见肠道致病菌,主要通过食物、饮水经口感染,引发食源性疾患.国标检验方法是利用沙门菌不能分解乳糖,而肠杆菌科中绝大部分非致病菌能分解乳糖产酸使中性红指示剂变红的原理,通过挑选SS琼脂平板上无色的沙门菌菌落进行筛选、分离与鉴定.该法存在操作繁琐、检测特异性低等缺点.现采用CHROMagar显色培养技术对沙门菌进行鉴定,很大程度上克服了上述方法的缺陷,取得了较为满意的结果.
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竞争光度法研究β-环糊精及其衍生物对左氧氟沙星和氧氟沙星的识别和含量测定
目的:以中性红(NR)作为光谱探针,竞争光度法研究β-环糊精(β-CD)、羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)、甲基-β-环糊精(DM-β-CD),在pH 7.6的缓冲液中,对左氧氟沙星(LVFX)、氧氟沙星(OFLX)客体分子的识别和LVFX的含量测定.方法:光谱探针竞争光度法.结果:测定了β-环糊精及其衍生物与LVFX和OFLX的包合常数;在λ=446 nm处,LVFX的甲基-β-环糊精溶液在0.14~2.12 g·L-1浓度范围内与吸收度呈良好的线性关系,r=~0.995 2(n=5);平均回收率为(98.4±2.3)%.结论:β-环糊精及其衍生物与LVFX和OFLX具有较强的手性识别能力,并且该法可用于LVFX含量的测定.